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草鱼Isthmin-1基因序列分析及转录水平的营养调控

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水生生物学报 2023年第8期47卷 1278-1283页

作者：杨露露赵伟芳徐歆歆张玉茹曹香林聂国兴卢荣华河南师范大学水产学院新乡453007

为探讨Isthmin-1(Ism-1)在草鱼糖和脂类代谢中的作用,研究采用RT-PCR技术克隆草鱼Ism-1的开放阅读框(ORF),生物信息学分析Ism-1及其编码的氨基酸序列,RT-qPCR技术检测Ism-1在草鱼各组织中的分布特点,并在细胞和活体水平上分析不同营养... 详细信息

为探讨Isthmin-1(Ism-1)在草鱼糖和脂类代谢中的作用,研究采用RT-PCR技术克隆草鱼Ism-1的开放阅读框(ORF),生物信息学分析Ism-1及其编码的氨基酸序列,RT-qPCR技术检测Ism-1在草鱼各组织中的分布特点,并在细胞和活体水平上分析不同营养条件下Ism-1 mRNA的表达变化。结果显示,成功克隆草鱼Ism-1的ORF区。序列分析表明,草鱼Ism-1基因开放读码框为1380 bp,编码459个氨基酸,预测该蛋白相对分子量为50.96 kD。氨基酸多序列比对和系统进化树分析显示,草鱼Ism-1与黑头软口鲦(Pimephales promelas)的进化关系最近(氨基酸相似度为96.51%)。Ism-1在草鱼各组织中均有表达,在红肌中表达量最高,其次是鳃、脑和白肌等组织。饥饿再投喂实验结果表明,饥饿14d后肝胰脏中Ism-1的表达量显著上调(P<0.05),恢复投喂后表达量降低,但仍显著高于对照组(P<0.05),白肌中Ism-1的表达量在饥饿和再投喂后均显著增加(P<0.05)。腹腔注射不同浓度的胰高血糖素显著下调草鱼肝胰脏中Ism-1的mRNA水平(P<0.05),油酸孵育草鱼原代肝细胞24h时,Ism-1的表达量显著减少(P<0.001)。结果提示,草鱼Ism-1可能参与机体糖和脂类的代谢过程调控,这为后续研究Ism-1的功能提供了基础数据。

关键词： Isthmin-1 序列分析组织表达糖脂代谢草鱼

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4种昆虫蛋白粉对草鱼生长和免疫功能的影响

饲料工业 2023年第2期44卷 81-88页

作者：余维鹏陈延娜张玉茹林梦君徐歆歆曹香林卢荣华河南师范大学水产学院河南新乡453007

研究草鱼配合饲料中添加4种昆虫蛋白粉部分替代豆粕对其生长和免疫功能的影响。试验采用蚕蛹粉(Silkworm chrysalis meal, SC50)、黑水虻幼虫粉(Black soldier fly larvae meal,BSFLM50)、黄粉虫粉(Tenebrio molitor meal, TM30)和蝇蛆... 详细信息

研究草鱼配合饲料中添加4种昆虫蛋白粉部分替代豆粕对其生长和免疫功能的影响。试验采用蚕蛹粉(Silkworm chrysalis meal, SC50)、黑水虻幼虫粉(Black soldier fly larvae meal,BSFLM50)、黄粉虫粉(Tenebrio molitor meal, TM30)和蝇蛆粉(House fly maggot meal, HF25)分别替代草鱼基础饲料中的豆粕(Soybean meal, SM),配制成5种等氮(粗蛋白水平为32.0%)、等脂(脂肪水平为4.9%)的饲料,饲喂草鱼[初始体质量(7.85±0.27)g]8周后,评估其生长性能、体成分、血清生化指标、肌肉氨基酸和脂肪酸的含量以及脂多糖(LPS)和聚肌胞苷酸(poly I:C)处理肝细胞24 h后免疫相关基因的表达变化。结果显示,与SM组相比,不同昆虫粉饲喂的草鱼末重和特定生长率的变化均不显著(P>0.05),血清中总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量也未发生显著变化(P>0.05),但BSFLM50、SC50和HF25组的葡萄糖(GLU)显著升高(P<0.05);HF25组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著高于SM组(P<0.05)。与SM组相比,除TM30组外,BSFLM50、SC50和HF25组肌肉中∑n-3 PUFA(Polyunsaturated fatty acid, PUFA)的含量均显著升高(P<0.05),∑n-3/n-∑6 PUFA也显著增加(P<0.05);SC50组的苯丙氨酸和TM30组的亮氨酸均显著低于SM组(P<0.05)。与对照组相比,饲喂SC50昆虫粉的草鱼肝细胞中TGF-β1的表达量仅LPS处理后显著升高(P<0.05),而促炎因子NF-κB在饲喂BSFM50、TM30和HF25的草鱼肝细胞经LPS处理后均显著下调(P<0.05)。综上所述,4种昆虫粉替代豆粕后均不会影响草鱼生长,且25%的蝇蛆粉替代豆粕可提高草鱼血清中HDL-C及肌肉中谷氨酸的含量,并抑制NF-κB的表达。

关键词：草鱼昆虫蛋白粉豆粕生长性能体成分免疫

新乡市城市污水对泥鳅的生理毒性与遗传毒性研究

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环境污染与防治 2008年第11期30卷 31-34页

作者：陈建军曹香林杜启艳南平秦丽常重杰河南师范大学生命科学学院河南新乡453007

采用鱼体外周血细胞微核技术研究新乡市城市污水对泥鳅的遗传毒性,实验各组(A组、B组、C组、D组)中微核率明显高于对照组(P<0.01)。以黄嘌呤氧化酶法检测泥鳅肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)酶活力变化,以赖氏法检测肝组织和血清中的谷... 详细信息

采用鱼体外周血细胞微核技术研究新乡市城市污水对泥鳅的遗传毒性,实验各组(A组、B组、C组、D组)中微核率明显高于对照组(P<0.01)。以黄嘌呤氧化酶法检测泥鳅肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)酶活力变化,以赖氏法检测肝组织和血清中的谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)酶活力变化,研究该污水对泥鳅的生理毒性。结果表明,实验各组肝组织中SOD、GOT和GPT酶活力均低于对照组,且随城市污水浓度升高而减小;血清中的SOD、GOT和GPT酶活力均高于对照组,且随城市污水浓度升高而增强。由此可知,直接排放的城市污水对泥鳅有显著的遗传毒性与生理毒性,水样中有致突变酶活力物质存在。

关键词：微核毒性 GOT GPT SOD

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脱毒怀地黄块茎梓醇及营养成分量的分析

中草药 2009年第8期40卷 1311-1313页

作者：张楠张晓丽曹香林李萍李明军河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南省高校道地中药材保育及利用工程技术研究中心河南新乡453007

目的对怀地黄脱毒后品质进行评价。方法以怀地黄"85-5"脱毒试管苗和未脱毒试管苗的块茎为材料,对其梓醇及营养成分的量进行分析。结果脱毒试管苗块茎的梓醇量高于未脱毒试管苗块茎,但不同的脱毒株系间梓醇量存在较大差异,其中梓醇量最... 详细信息

目的对怀地黄脱毒后品质进行评价。方法以怀地黄"85-5"脱毒试管苗和未脱毒试管苗的块茎为材料,对其梓醇及营养成分的量进行分析。结果脱毒试管苗块茎的梓醇量高于未脱毒试管苗块茎,但不同的脱毒株系间梓醇量存在较大差异,其中梓醇量最高的株系可达6.43%,较对照增加33.13%;脱毒试管苗块茎中,粗脂肪、粗蛋白质的量均得到提高。结论怀地黄脱毒后品质得到显著改善。

关键词：怀地黄脱毒苗块茎梓醇营养成分

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混菌固态发酵麸皮条件优化及离体消化研究

中国畜牧兽医 2014年第4期41卷 123-127页

作者：曹香林陈建军河南师范大学水产学院河南新乡453002 河南师范大学生命科学学院河南新乡453002

试验选用不同比例组合的枯草芽孢杆菌、酵母菌及乳酸菌(Lactobacillus B和Lactobacillus W),经固态发酵筛选发酵麸皮的最优条件,并通过提取草鱼肠道不同部位的消化酶液对最优发酵麸皮进行离体消化研究。以未发酵麸皮作为对照组,依据接... 详细信息

试验选用不同比例组合的枯草芽孢杆菌、酵母菌及乳酸菌(Lactobacillus B和Lactobacillus W),经固态发酵筛选发酵麸皮的最优条件,并通过提取草鱼肠道不同部位的消化酶液对最优发酵麸皮进行离体消化研究。以未发酵麸皮作为对照组,依据接种菌种及其比例设6个试验组,每组3个重复进行固态发酵,测定发酵麸皮的酸度、菌落数及粗蛋白质含量,筛选出最优发酵组;利用草鱼肠道提取消化酶液,对未发酵麸皮和最优发酵麸皮进行离体消化,测定干物质、粗蛋白质的消化率及氨基酸的含量。结果表明,试验3组发酵麸皮的粗蛋白质含量最高,为23.67%,与未发酵组相比提高了56.56%;且菌落数在96h达到7.8×108 CFU/g,明显高于其他试验组,而酸度呈先下降后上升的变化趋势,故筛选出试验3组为最优发酵组。未发酵麸皮组和最优发酵麸皮组的粗蛋白质、干物质消化率及氨基酸含量均以前肠最高,中肠次之,后肠最低,且最优发酵麸皮组体外消化率均显著高于未发酵麸皮组(P<0.05)。经营养成分分析和离体消化研究发现,发酵麸皮具有较高的营养价值和消化率,可部分替代蛋白饲料。

关键词：麸皮混菌发酵酶解体外消化率

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黄孢原毛平革菌漆酶基因lac1680的克隆、表达及产酶研究

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生物技术通报 2018年第4期34卷 214-220页

作者：陈建军刘梁涛曹香林河南师范大学生命科学学院新乡453007 河南师范大学水产学院新乡453007

以先前筛选到的高产漆酶黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)为模板,利用同源克隆技术合成一个全长为1 680 bp的漆酶基因,核苷酸及氨基酸序列比对显示该基因与真菌漆酶基因有较高的同源性,将其命名为lac1680,将该基因连接到构... 详细信息

以先前筛选到的高产漆酶黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)为模板,利用同源克隆技术合成一个全长为1 680 bp的漆酶基因,核苷酸及氨基酸序列比对显示该基因与真菌漆酶基因有较高的同源性,将其命名为lac1680,将该基因连接到构建好的p ET24a载体上,并转入表达菌株BL21 Escherichia coli(DE3)中,经对重组菌预表达的全菌裂解物进行SDS-PAGE检测,获得75 k D目的条带,表明诱导表达成功。随后利用NI-NTA层析柱对洗脱下来的lac1680蛋白进行纯化,纯化回收后,漆酶纯度可达98%以上。通过对比基因工程菌和黄孢原毛平革菌野生菌株不同培养时间产酶活力,结果表明构建好的工程菌活力比原菌酶活力有明显的提高,提高了近39%。

关键词：黄孢原毛平革菌漆酶基因异源表达蛋白纯化酶活力

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高效木质素降解菌的筛选及产漆酶条件的研究

甘肃农业大学学报 2018年第4期53卷 130-136页

作者：陈建军刘梁涛曹香林河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南师范大学水产学院河南新乡453007

【目的】为了获得高产漆酶的菌株用于降解木质素.【方法】从新乡周边腐木堆积处、秸秆堆积处和造纸厂废水这些木质素含量丰富的地方取样,以木质素为唯一碳源,初筛出对木质素具有降解能力的菌株.【结果】采用愈创木酚平板法对产漆酶的菌... 详细信息

【目的】为了获得高产漆酶的菌株用于降解木质素.【方法】从新乡周边腐木堆积处、秸秆堆积处和造纸厂废水这些木质素含量丰富的地方取样,以木质素为唯一碳源,初筛出对木质素具有降解能力的菌株.【结果】采用愈创木酚平板法对产漆酶的菌株进行复筛得到4株产漆酶能力较强的菌株,通过生理生化及18S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,通过液态发酵培养以2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)(简称ABTS)法对漆酶活性和木质素降解能力进行研究.结果表明,黄孢原毛平革菌在培养6d后,漆酶活力达到最高,为233.33U/L.利用液态发酵研究了碳源、氮源、金属离子、pH、温度对其发酵产漆酶的影响,确定了该菌株的最优碳源为乳糖,最优氮源为酵母粉,最适铜离子浓度为0.6mmol/L,最适温度为30℃,最适pH为4,在此条件下木质素去除率达到了84.7%.【结论】试验筛选出的黄孢原毛平革菌具有良好的降解木质素的能力,为研究漆酶基因的克隆表达和酶学研究奠定了基础.

关键词：漆酶筛选黄孢原毛平革菌酶活

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喹胺醇饲料添加剂对肉鸡生长的影响

安徽农业科学 2006年第19期34卷 4951-4952,4958页

作者：曹香林陈建军张力梁剑平河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃兰州730070

将160只安卡红羽肉鸡随机分为4组,分别添加不同剂量的喹胺醇,测定试鸡血浆中总蛋白、白蛋白以及肌肉中RNA、DNA的含量;于28日龄时进行消化代谢试验。结果表明:喹胺醇有促进肉鸡生长,增强蛋白同化的作用,有利于氮的利用;在基础日粮中以添... 详细信息

将160只安卡红羽肉鸡随机分为4组,分别添加不同剂量的喹胺醇,测定试鸡血浆中总蛋白、白蛋白以及肌肉中RNA、DNA的含量;于28日龄时进行消化代谢试验。结果表明:喹胺醇有促进肉鸡生长,增强蛋白同化的作用,有利于氮的利用;在基础日粮中以添加50 mg/kg喹胺醇效果最佳。

关键词：喹胺醇肉鸡生产性能促生长机理

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脂多糖对鲤肠上皮细胞转录组模式的调控分析

生物技术通报 2021年第8期37卷 213-220页

作者：陈建军赵怡迪曹香林河南师范大学生命科学学院新乡453007 河南师范大学水产学院新乡453007

旨为探究脂多糖对鲤肠上皮细胞相关基因及功能的影响。本研究以鲤肠上皮细胞为试验对象,正常处理为对照组,脂多糖处理为实验组,对处理24 h的两组鲤肠上皮细胞进行转录组测序。转录组测序结果共获得44.77G高质量数据,其中,近81.83%的数... 详细信息

旨为探究脂多糖对鲤肠上皮细胞相关基因及功能的影响。本研究以鲤肠上皮细胞为试验对象,正常处理为对照组,脂多糖处理为实验组,对处理24 h的两组鲤肠上皮细胞进行转录组测序。转录组测序结果共获得44.77G高质量数据,其中,近81.83%的数据能够比对到鲤基因组。利用DESeq软件分析,与对照组相比,脂多糖处理可诱导产生差异表达基因(differentially expressed genes,DEG)590个,其中303个表达上调,287个表达下调。Gene Ontology(GO)功能富集分析发现,DEG在细胞过程、单有机体过程、代谢过程、细胞、细胞组分、细胞器、结合和催化活性功能亚类中所占比例最高。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路途径分析发现,DEG显著富集于细胞周期、自噬、凋亡途径。并利用实时荧光定量PCR对随机挑选的10个差异基因进行验证,结果表明转录组数据可靠。该研究通过转录组测序技术,全面、快速地获取脂多糖暴露于鲤肠上皮细胞过程中的所有转录本信息,系统地证明脂多糖阻滞了鲤肠上皮细胞周期,诱导自噬,引起细胞凋亡,为脂多糖调控鲤肠上皮细胞分子机制提供了重要的理论依据。

关键词：脂多糖鲤肠上皮细胞转录组测序实时荧光定量PCR