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东北农业大学学报 2016年第11期47卷 59-65,84页

作者：丛霞李华涛陈健伟张东君曹荣峰田文儒青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 肥城市畜牧兽医局山东肥城271600

灯盏乙素(Scu)为灯盏花中提取的单一黄酮类化合物,具有清热解毒和保护细胞免受热应激损伤的作用。试验将不同浓度Suc培养的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)在42℃下热应激1 h,采用RNA干扰法沉默细胞HSP72基因表达,荧光定量PCR和Western blot... 详细信息

灯盏乙素(Scu)为灯盏花中提取的单一黄酮类化合物,具有清热解毒和保护细胞免受热应激损伤的作用。试验将不同浓度Suc培养的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)在42℃下热应激1 h,采用RNA干扰法沉默细胞HSP72基因表达,荧光定量PCR和Western blot检测细胞热休克蛋白(HSP)70、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt-c)和caspase-3裂解。结果表明,Scu显著增加细胞Bcl-2蛋白和HSP70蛋白水平,增加Bcl-2/Bax比值,抑制Cyt-c的释放及pro-caspase-3裂解和caspase-3表达;但沉默HSP70后,细胞Cyt-c释放和caspase-3表达均显著增加。由此可知,Scu抑制LLC-PK1凋亡,保护细胞免受热应激损伤。

关键词：灯盏乙素 LLC—PK1 凋亡热应激 HSP70

热休克对小鼠胚胎成纤维细胞CaM mRNA和HSF活性的影响

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东北农业大学学报 2011年第6期42卷 71-74页

作者：李金波张霞田文儒曹荣峰高善颂张桂林青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109

试验分别以38、40和42℃对原代培养的小鼠胚胎成纤维细胞进行热休克处理,采用半定量PCR方法和凝胶迁移阻滞(EMSA)对CaM mRNA和HSF活性进行检测,并与对照组(37℃)比较,以确定热休克对小鼠胚胎成纤维细胞CaM mRNA和HSF活性的影响。结果表... 详细信息

试验分别以38、40和42℃对原代培养的小鼠胚胎成纤维细胞进行热休克处理,采用半定量PCR方法和凝胶迁移阻滞(EMSA)对CaM mRNA和HSF活性进行检测,并与对照组(37℃)比较,以确定热休克对小鼠胚胎成纤维细胞CaM mRNA和HSF活性的影响。结果表明,38℃热休克处理组小鼠胚胎成纤维细胞的CaMmRNA表达量显著高于对照组(P<0.05);40和42℃处理组细胞的CaM mRNA表达量极显著高于37℃组(P<0.01),但与40℃处理组相比,42℃处理组细胞的CaM mRNA表达量略有下降。通过凝胶阻滞分析检测HSF与DNA的结合活性,发现与对照组相比,38、40和42℃热休克处理明显增加了HSF活性。

关键词：热休克 Ca2+ CaM HSF

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围产期小尾寒羊生理指标的监测

畜牧兽医杂志 2007年第3期26卷 14-16页

作者：丛霞曹荣峰姜忠玲莱阳农学院动物科技学院山东青岛266109

用常规方法监测了11只围产期小尾寒羊的体温、脉搏、呼吸、红细胞、血红蛋白、白细胞和白细胞分类各项数值。结果表明,分娩前后体温和中性分叶细胞呈“M”形变化,分娩时增高,产后第5 d时降低,产后第12 d又升高。血红蛋白和红细胞数则从... 详细信息

用常规方法监测了11只围产期小尾寒羊的体温、脉搏、呼吸、红细胞、血红蛋白、白细胞和白细胞分类各项数值。结果表明,分娩前后体温和中性分叶细胞呈“M”形变化,分娩时增高,产后第5 d时降低,产后第12 d又升高。血红蛋白和红细胞数则从产前到产后5 d期间都处于低水平,产后12 d恢复至正常水平。呼吸数、脉搏数及白细胞数在分娩时均升高。

关键词：小尾寒羊生理指标围产期

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牛乳铁蛋白提纯方法的建立与电泳分析

上海畜牧兽医通讯 2010年第1期 41-42页

作者：谭炳海梁靖坤张桂林曹荣峰青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109

乳铁蛋白(Lactoferrin, Lf)又称'乳转铁蛋白',是一种广泛存在于人和大多数哺乳动物乳中,具有广谱抗菌性、抗病毒、增强免疫、抗氧化、促进铁的传递和吸收、平衡肠道菌群等作用[1].1938年Sorensen和Sorensen首次从牛乳中分离出来的[2].1... 详细信息

乳铁蛋白(Lactoferrin, Lf)又称'乳转铁蛋白',是一种广泛存在于人和大多数哺乳动物乳中,具有广谱抗菌性、抗病毒、增强免疫、抗氧化、促进铁的传递和吸收、平衡肠道菌群等作用[1].1938年Sorensen和Sorensen首次从牛乳中分离出来的[2].1960年Johansson和Montreuil等从人乳中首次分离出Lf[3].目前关于提纯 Lf 的报道较多,方法各异,结果有较大差异.本试验旨在建立用饱和(NH4)2SO4粗提,Sephadex-100纯化牛乳中 Lf 的方法.

关键词：牛乳铁蛋白电泳分析提纯方法转铁蛋白哺乳动物增强免疫肠道菌群抗菌性

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饲喂巧克力对犬临床指标的影响

黑龙江畜牧兽医 2020年第8期 66-69页

作者：李玉芹陈浩杨研逄宾宾冯超杨艳斌曹荣峰青岛农业大学动物医学院/动物生殖障碍性疾病研究所山东青岛266109

为了了解犬在饲喂巧克力后临床指标的变化,给临床上犬巧克力中毒提供有诊断意义的临床指标,试验选取健康比格犬3只,每只饲喂巧克力80 g,在喂前1小时和喂后第2,4,6,12小时检测血常规指标,以及血液中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和... 详细信息

为了了解犬在饲喂巧克力后临床指标的变化,给临床上犬巧克力中毒提供有诊断意义的临床指标,试验选取健康比格犬3只,每只饲喂巧克力80 g,在喂前1小时和喂后第2,4,6,12小时检测血常规指标,以及血液中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和血糖(GLU)、环磷酸腺苷(cAMP)、钙调磷酸酶(CaN)含量,并记录心率、P(心房除极波)时限、PR(房室传导)间期、QRS(心室除极波)时限、QT(心室除极到复极)间期指标并分析。结果表明:犬饲喂80 g巧克力后,与喂前1小时比,心率在喂后第2,4小时显著加快(P0.05);血液生化指标CK活性在喂后第2小时显著升高(P0.05)。说明犬饲喂一定量的巧克力后心率明显加快,PR间期缩短,QRS时限延长,MCHC、CK活性及MCH、cAMP含量明显升高。

关键词：比格犬巧克力中毒肌酸激酶环磷酸腺苷心电图

丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4和TNF-α基因表达的影响

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中国畜牧杂志 2014年第21期50卷 58-62页

作者：付开强陶爽吕晓珮李伟诗田文儒曹荣峰青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 信阳市浉河区畜牧局河南信阳464000

试验旨在研究丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因表达的影响,揭示丹参酮ⅡA抗炎的作用机制。在细胞体外培养的条件下,采用MTT法筛选丹参酮ⅡA对牛肾细胞的安全剂量和LPS诱导牛肾细胞炎症的最佳条件。在LPS刺激牛... 详细信息

试验旨在研究丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因表达的影响,揭示丹参酮ⅡA抗炎的作用机制。在细胞体外培养的条件下,采用MTT法筛选丹参酮ⅡA对牛肾细胞的安全剂量和LPS诱导牛肾细胞炎症的最佳条件。在LPS刺激牛肾细胞24 h后,再加入丹参酮ⅡA作用24 h,用MTT法检测细胞的活性,用RT-PCR法检测β-防御素、TLR4、TNF-α mRNA的表达。结果表明:LPS处理牛肾细胞24 h后,TLR4和TNF-α的mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05);丹参酮ⅡA干预牛肾细胞炎症模型24 h后,牛肾细胞的活性与炎症组相比极显著上升(P<0.01),且β-防御素、TLR4、TNF-α mRNA表达水平与炎症组相比均有显著(P<0.05)极显著下降(P<0.01)。本试验得出,丹参酮ⅡA可抑制由LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因的表达,对体外培养的牛肾细胞起抗炎作用。

关键词：丹参酮ⅡA 脂多糖 TLR4 细胞因子 β-防御素牛肾细胞

脂多糖诱导奶牛乳腺上皮细胞中炎性因子和核转录子-κB的表达

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中国兽医杂志 2016年第5期52卷 14-17,I0001页

作者：朱丽萍杨文浩任婷婷丛霞李华涛曹荣峰刘楚君田文儒青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109

试验预探索脂多糖（LPS）刺激奶牛乳腺上皮细胞炎性因子产生时间、浓度以及其对NF-κB信号通路的激活情况。用酶消化法培养奶牛乳腺上皮细胞（b MEC）;CCK-8法筛选LPS最佳刺激浓度（IR≤10%）,并用其处理对数期生长的b MEC。ELISA试剂... 详细信息

试验预探索脂多糖（LPS）刺激奶牛乳腺上皮细胞炎性因子产生时间、浓度以及其对NF-κB信号通路的激活情况。用酶消化法培养奶牛乳腺上皮细胞（b MEC）;CCK-8法筛选LPS最佳刺激浓度（IR≤10%）,并用其处理对数期生长的b MEC。ELISA试剂盒检测0-24 h不同处理时间细胞培养液上清中TNF-α和IL-1β表达变化,以确定炎症模型是否建立成功;用Western-Blot检测核转录因子NF-κB（p-p65和p65）及其抑制蛋白（p-IκBα和IκBα）的表达。结果显示,用酶消化法成功培养原代b MEC;CCK-8法筛选LPS的最佳致炎浓度为1μg/m L;LPS处理后3-24 h可极显著增加奶牛乳腺上皮细胞中TNF-α和IL-1β表达,并在处理后15 min极显著提高b MEC中p-p65和p-IκBα的表达。上述结果说明,LPS能够在3-24 h内有效诱导b MEC炎症模型的建立,并能在15 min时活化奶牛乳腺上皮细胞中的NF-κB信号通路。

关键词：奶牛乳腺上皮细胞脂多糖 TNF-α IL-1β NF-κB

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犬产后惊厥的诊断和治疗

中国畜牧兽医 2008年第2期35卷 120-121页

作者：曹荣峰丛霞田文儒青岛农业大学动物科技学院青岛266109

犬产后惊厥是小动物临床经常发生的产科疾病。该病表现为体温升高、呼吸急促、全身痉挛,容易误诊,治疗不及时甚至造成死亡。在小动物临床上要注意该病的诊断、治疗和预防。

关键词：犬产后惊厥诊断治疗

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黄芩苷抗热应激小鼠输卵管氧化损伤的研究

华北农学报 2017年第6期32卷 147-153页

作者：王雪姜忠玲王新姜爱民丛霞曹荣峰李华涛田文儒青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109

为降低热应激引起的动物机体活性氧(ROS)增加,减少组织氧化损伤和细胞过度凋亡。利用小鼠模型研究热应激对输卵管组织和细胞的损伤作用以及黄芩苷(Bai)对损伤的保护作用。将小鼠分为对照(Ⅰ)组;Bai(Ⅱ)组;热应激(Ⅲ)组和热应激加Bai(Ⅳ... 详细信息

为降低热应激引起的动物机体活性氧(ROS)增加,减少组织氧化损伤和细胞过度凋亡。利用小鼠模型研究热应激对输卵管组织和细胞的损伤作用以及黄芩苷(Bai)对损伤的保护作用。将小鼠分为对照(Ⅰ)组;Bai(Ⅱ)组;热应激(Ⅲ)组和热应激加Bai(Ⅳ)组。用试剂盒检测组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活力;用Western Blot检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、苯醌氧化还原酶(NQO1)和血红素氧合酶-l(HO-1)蛋白表达;用免疫组化方法检测凋亡因子Apaf-1和Caspase-9蛋白表达。结果显示,与对照组相比热应激后小鼠输卵管组织MDA含量显著增加(P<0.05),CAT和GSH-Px活力显著降低;同时,Nrf2、Keap1蛋白表达量显著升高(P<0.05),凋亡因子Apaf-1和Caspase-9蛋白表达明显增加。注射黄芩苷后可显著(P<0.05)降低小鼠输卵管组织MDA含量和Nrf2和Keap1蛋白表达量,降低凋亡因子Apaf-1和Caspase-9蛋白表达,并且显著增加(P<0.05)SOD、CAT和GSH-Px活力。结果表明,黄芩苷能降低热应激小鼠输卵管组织的氧化损伤和细胞凋亡,其机制可能与激活抗氧化信号通路Keap1-Nrf2/ARE有关。

关键词：黄芩苷热应激输卵管氧化损伤细胞凋亡