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紫花前胡苷调控EMT对宫颈癌细胞侵袭迁移的影响及其作用机制

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解放军医学杂志 2022年第5期47卷 451-457页

作者：任璐曹芹雪杨少琴河南大学淮河医院妇产科河南开封475000

目的探讨紫花前胡苷(NDK)通过调控上皮-间质转化(EMT)影响宫颈癌细胞侵袭迁移的可能机制,并分析其对miR-324-3P/WNT3a轴的影响。方法取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,分为4组:空白组(于37℃、5%CO_(2)、饱和湿度培养箱中培养)、miR-324-3P... 详细信息

目的探讨紫花前胡苷(NDK)通过调控上皮-间质转化(EMT)影响宫颈癌细胞侵袭迁移的可能机制,并分析其对miR-324-3P/WNT3a轴的影响。方法取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,分为4组:空白组(于37℃、5%CO_(2)、饱和湿度培养箱中培养)、miR-324-3P inhibitor组(转染hsa-miR-324-3p inhibitor)、NDK组(加入20 mmol/L浓度的NDK培养)、miR-324-3P inhibitor+NDK组(转染miR-324-3P inhibitor后加入20 mmol/L浓度的NDK培养),均处理48 h。采用Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力;qRT-PCR检测各组细胞中miR-324-3P、WNT3a mRNA表达水平;Western blotting检测各组EMT相关标志蛋白E-钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、WNT3a、β-catenin蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-324-3P与WNT3a基因的靶向关系。结果与空白组比较,miR-324-3P inhibitor组HeLa细胞的穿膜细胞数增多,划痕愈合率增高,miR-324-3P mRNA表达水平下降,WNT3a mRNA表达水平升高,E-cadherin蛋白相对表达量降低,波形蛋白、N-cadherin、WNT3a和β-catenin蛋白相对表达量升高(P0.05)。结论NDK可通过调控EMT抑制宫颈癌细胞的侵袭及迁移,其作用机制可能与调节miR-324-3P/WNT3a轴有关。

关键词：紫花前胡苷宫颈癌细胞侵袭细胞迁移上皮-间质转化 miR-324-3P/WNT3a轴

叉头框蛋白A2对肿瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化的影响

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中华实验外科杂志 2023年第4期40卷 712-715页

作者：任璐曹芹雪王宁河南大学淮河医院妇瘤科开封475004

目的探讨叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化的影响。方法选取河南大学淮河医院2019年6月至2021年10月收治的64例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用蛋白质免疫印迹分析肿瘤和癌旁组织中FOXA2蛋白表达水平... 详细信息

目的探讨叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化的影响。方法选取河南大学淮河医院2019年6月至2021年10月收治的64例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用蛋白质免疫印迹分析肿瘤和癌旁组织中FOXA2蛋白表达水平。采用转染试剂转染对照质粒和FOXA2过表达质粒至人卵巢癌细胞SKOV3,分别为对照组和观察组。采用划痕实验、Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)分析对照组和观察组细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化能力。采用体外移植瘤实验分析两组细胞的迁移能力。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析FOXA2靶基因表达。组间数据比较采用t检验。结果癌旁组织FOXA2蛋白表达水平(1.13±0.24)明显高于卵巢癌组织FOXA2蛋白表达水平(0.47±0.14),差异有统计学意义(t=18.640,P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(83.67±9.95)%]明显高于观察组细胞划痕愈合率[(56.60±7.06)%],差异有统计学意义(t=5.452,P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(150.83±18.35)个]明显高于观察组细胞划痕愈合率[(84.50±8.89)个],差异有统计学意义(t=7.970,P<0.05)。对照组细胞上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平(0.74±0.12)明显低于观察组细胞(1.03±0.16),差异有统计学意义(t=3.626,P<0.05)。对照组细胞间质标志物Snail和N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平(1.16±0.12、1.30±0.11)明显高于观察组细胞(0.66±0.08、0.76±0.06),差异有统计学意义(t=8.305、10.300,P<0.05)。对照组细胞淋巴结转移数量[(9.38±1.69)个]明显高于观察组细胞淋巴结转移数量[(3.13±1.46)个],差异有统计学意义(t=7.934,P<0.05)。对照组细胞β-连环蛋白(β-catenin)和c-Myc mRNA表达水平(1.10±0.12、1.23±0.11)明显高于观察组细胞β-catenin和c-Myc mRNA表达水平(0.79±0.08、0.82±0.08),差异有统计学意义(t=5.398、7.305,P<0.05)。结论FOXA2在卵巢癌中呈低表达,通过调节β-catenin和c-Myc表达,参与卵巢癌细胞的迁移、侵袭和上皮-间充质转化的能力。

关键词：叉头框蛋白A2 卵巢癌迁移侵袭上皮-间充质转化

茯苓酸调节NF-κB途径诱导宫颈癌细胞凋亡和细胞周期停滞

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中药材 2023年第12期46卷 3109-3113页

作者：孙桂霞张冬丽曹芹雪王宁田君河南大学淮河医院妇科河南开封475000

目的:探讨茯苓酸能否通过调节NF-κB途径诱导宫颈癌细胞HeLa凋亡和细胞周期停滞。方法:HeLa细胞分为空白对照组、二硫氨基甲酸酞吡咯烷(100.0μmoL/L)组及茯苓酸低(5.0μmoL/L)、中(10.0μmoL/L)、高(20.0μmoL/L)浓度组,相应培养液培养... 详细信息

目的:探讨茯苓酸能否通过调节NF-κB途径诱导宫颈癌细胞HeLa凋亡和细胞周期停滞。方法:HeLa细胞分为空白对照组、二硫氨基甲酸酞吡咯烷(100.0μmoL/L)组及茯苓酸低(5.0μmoL/L)、中(10.0μmoL/L)、高(20.0μmoL/L)浓度组,相应培养液培养48 h后,CCK-8法检测细胞活力;Hoechst 33258染色检查凋亡细胞核形态;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;免疫荧光染色检测NF-κB P65表达与定位;Western Blot检测CyclinD1、CDK4、cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达及p-IKKβ/IKKβ、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB P65/NF-κB P65水平。结果:与空白对照组比较,各给药组HeLa细胞活力、S期比例、G_(2)/M期比例及CyclinD1、CDK4、Bcl-2蛋白表达和p-IKKβ/IKKβ、p-IκBα/IκBα、p-NFκB P65/NFκB P65水平显著降低,细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期比例及cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),同时细胞萎缩、核碎裂、染色质浓缩逐渐明显,细胞核NF-κB P65逐渐向细胞质分布。茯苓酸的作用呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:茯苓酸可诱导宫颈癌HeLa细胞G_(0)/G_(1)期停滞和细胞凋亡,其作用机制可能与抑制NF-κB途径激活有关。

关键词：茯苓酸核转录因子-κB 宫颈癌细胞凋亡细胞周期停滞

胜红清热片联合青霉素钠治疗慢性盆腔炎的临床研究

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现代药物与临床 2022年第2期37卷 350-353页

作者：任璐曹芹雪王宁张冬丽河南大学淮河医院妇产科河南开封475004

目的探讨胜红清热片联合青霉素钠治疗慢性盆腔炎的临床疗效。方法选择2020年5月—2021年5月在河南大学淮河医院治疗96例慢性盆腔炎患者,根据用药的差别分为对照组和治疗组,每组各48例。对照组静脉滴注注射用青霉素钠,800万U/次,2次/d;... 详细信息

目的探讨胜红清热片联合青霉素钠治疗慢性盆腔炎的临床疗效。方法选择2020年5月—2021年5月在河南大学淮河医院治疗96例慢性盆腔炎患者,根据用药的差别分为对照组和治疗组,每组各48例。对照组静脉滴注注射用青霉素钠,800万U/次,2次/d;治疗组在对照组基础上口服胜红清热片,4片/次,3次/d。两组患者经2周治疗。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组证候改善时间,血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-26(IL-26)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和降钙素原(PCT)水平,及子宫动脉血流动力参数血管搏动指数(PI)和血管阻力指数(RI)和收缩期峰流速度(Vs)。结果经治疗,对照组和治疗组患者总有效率分别为83.33%和97.92%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经治疗,治疗组证候改善时间明显短于对照组(P<0.05)。经治疗,两组血清IL-1β、IL-26、MCP-1、GM-CSF和PCT水平均明显下降(P<0.05),且治疗组降低更明显(P<0.05)。经治疗,两组患者子宫动脉血流动力参数PI、RI、Vs明显升高(P<0.05),且治疗组显著高于对照组(P<0.05)。结论胜红清热片联合青霉素钠治疗慢性盆腔炎在改善临床症状的同时还具有降低机体促炎因子水平和促进子宫动脉血流动力学改善的作用。

关键词：胜红清热片注射用青霉素钠慢性盆腔炎单核细胞趋化蛋白1 降钙素原血流动力学

门诊健康体检妇女人乳头瘤病毒宫颈感染状况及持续性感染影响因素

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中华医院感染学杂志 2022年第10期32卷 1560-1563页

作者：任璐曹芹雪杨少琴张冬丽王宁河南大学淮河医院妇产科河南开封475004

目的探讨门诊健康体检妇女人乳头瘤病毒(HPV)宫颈感染状况及持续性感染影响因素。方法选择2019年1-12月于河南大学淮河医院门诊进行健康体检妇女为研究对象,收集体检妇女的流行病学调查问卷、宫颈液基薄层细胞检测(TCT)、宫颈上皮脱... 详细信息

目的探讨门诊健康体检妇女人乳头瘤病毒(HPV)宫颈感染状况及持续性感染影响因素。方法选择2019年1-12月于河南大学淮河医院门诊进行健康体检妇女为研究对象,收集体检妇女的流行病学调查问卷、宫颈液基薄层细胞检测(TCT)、宫颈上皮脱落细胞HPV分型检测。采用单因素及多因素Logistic分析高危型人乳头瘤病毒宫颈持续性感染影响因素。结果 10 472份HPV分型检查样本中阳性率为25.6%(2 685/10 472)。人乳头瘤病毒初筛阳性2 685例,随访2次后发现持续感染530例,持续感染率为19.7%,检出高危型人乳头瘤病毒阳性患者2 208例,其中持续性感染479例,持续感染率为21.7%。单因素分析结果,不同年龄、不同初次性生活年龄、不同避孕方式、不同性交频率、吸烟史、阴道宫颈炎症、性交后清洗是高危型人乳头瘤病毒宫颈持续性感染的影响因素(P50岁、非避孕套避孕是高危型人乳头瘤病毒宫颈持续性感染的独立危险因素。结论河南大学淮河医院门诊健康体检妇女人乳头瘤病毒感染最为常见的亚型为HPV16、HPV58、HPV52,年龄>50岁、非避孕套避孕是高危型人乳头瘤病毒宫颈持续性感染的独立危险因素。

关键词：健康体检人乳头瘤病毒宫颈感染持续性感染影响因素

QCR2调控p53泛素化对SiHa细胞株的周期阻滞作用

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安徽医科大学学报 2022年第1期57卷 65-69页

作者：程海玲王宁曹芹雪霍会蚕王琛河南大学淮河医院妇产科开封475000

目的研究泛醇-细胞色素C还原酶亚基2(QCR2)对宫颈癌SiHa细胞株周期阻滞的影响,并探讨相关机制。方法取对数期SiHa细胞,脂质体转染法将QCR2 siRNA、control siRNA转染至SiHa细胞,设为QCR2 siRNA组、control siRNA组,未经处理细胞设空白... 详细信息

目的研究泛醇-细胞色素C还原酶亚基2(QCR2)对宫颈癌SiHa细胞株周期阻滞的影响,并探讨相关机制。方法取对数期SiHa细胞,脂质体转染法将QCR2 siRNA、control siRNA转染至SiHa细胞,设为QCR2 siRNA组、control siRNA组,未经处理细胞设空白组。采用qRT-PCR、Western blot检测QCR2、p53 mRNA与蛋白相对表达量;碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期。取QCR2 siRNA组细胞,以终浓度50 nmol/L泛素-蛋白酶体抑制剂PS341干预,设为QCR2 siRNA+PS341组,另取QCR2 siRNA组细胞以等量生理盐水(NS)干预,设为QCR2 siRNA+NS组。Western blot检测p53蛋白相对表达量;免疫共沉淀实验检测p53泛素化水平。结果荧光显微镜下观察,QCR2 siRNA组、control siRNA组转染效率均大于80%;与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组QCR2 mRNA与蛋白相对表达量均降低(P<0.05),G_(0)/G_(1)占比升高(P<0.05),S、G_(2)/M占比降低(P<0.05);p53 mRNA相对表达量组间比较,差异无统计学意义;与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组p53蛋白相对表达量升高(P<0.05);与空白组、QCR2 siRNA+PS341组比较,QCR2 siRNA组、QCR2 siRNA+NS组p53蛋白相对表达量升高(P<0.05);与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组p53泛素化程度降低(P<0.05)。结论沉默QCR2可将SiHa细胞阻滞在G_(0)/G_(1)期,其机制可能与抑制p53泛素化,提高其蛋白表达有关。

关键词：宫颈癌泛醇-细胞色素C还原酶亚基2 p53 泛素化细胞周期阻滞

灵芝多糖通过调控ICOS/ICOSL对宫颈癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制及对免疫逃逸的解除作用研究

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中国免疫学杂志 2022年第7期38卷 833-837页

作者：曹芹雪任璐田君王宁张冬丽李艳云河南大学淮河医院妇产科开封475000

目的:观察灵芝多糖(GLP)对宫颈癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制及免疫逃逸的解除作用,并探究其机制。方法:60只小鼠随机抽取10只设为正常组,其余皮下接种宫颈癌U14细胞诱导小鼠宫颈癌模型,随机分为荷瘤组、GLP组、抑制剂组、GLP+抑制剂组,各10只。... 详细信息

目的:观察灵芝多糖(GLP)对宫颈癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制及免疫逃逸的解除作用,并探究其机制。方法:60只小鼠随机抽取10只设为正常组,其余皮下接种宫颈癌U14细胞诱导小鼠宫颈癌模型,随机分为荷瘤组、GLP组、抑制剂组、GLP+抑制剂组,各10只。GLP组GLP 200 mg/kg灌胃;抑制剂组诱导性共刺激分子(ICOS)mAb 100μg/kg腹腔注射;GLP+抑制剂组药物用法及用量同GLP组、抑制剂组;正常组与荷瘤组灌胃、腹腔注射等量生理盐水。1次/d,连续干预14 d。游标卡尺测定肿瘤体积;流式细胞仪测定外周血髓源抑制性细胞(MDSCs)水平,CD4+、CD8+T淋巴细胞水平;测定胸腺、脾脏指数;Western blot测定肿瘤组织ICOS、诱导性共刺激分子配体(ICOSL)蛋白相对表达量。结果:第10、12、14天抑制剂组、荷瘤组、GLP+抑制剂组、GLP组肿瘤体积依次缩小(P<0.05);抑制剂组、荷瘤组、GLP+抑制剂组、GLP组、正常组胸腺指数、脾脏指数CD4+T淋巴细胞占比、CD4+/CD8+,肿瘤组织ICOS、ICOSL蛋白相对表达量依次升高,外周血MDSCs占比、CD8+T淋巴细胞占比依次降低(P<0.05)。结论:GLP抑制宫颈癌荷瘤小鼠肿瘤生长,抑制免疫逃逸,可能与激活ICOS/ICOSL通路有关。

关键词：宫颈癌灵芝多糖肿瘤抑制免疫逃逸

艾迪注射液联合化疗治疗晚期卵巢癌的临床研究

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中药药理与临床 2016年第1期32卷 184-186页

作者：曹芹雪河南大学淮河医院开封475000

目的：研究分析艾迪注射液联合化疗治疗晚期卵巢癌的临床疗效。方法：回顾分析2013年6月~2015年6月期间我院接诊的70例晚期卵巢癌患者临床资料,根据住院时间将其分为对照组和治疗组,每组35例患者。对照组患者给予化疗治疗,治疗组患者在... 详细信息

目的：研究分析艾迪注射液联合化疗治疗晚期卵巢癌的临床疗效。方法：回顾分析2013年6月~2015年6月期间我院接诊的70例晚期卵巢癌患者临床资料,根据住院时间将其分为对照组和治疗组,每组35例患者。对照组患者给予化疗治疗,治疗组患者在对照组化疗的基础上给予艾迪注射液治疗,治疗2个周期（1个周期21d）,2组均于1疗程结束时评定临床疗效。结果：1个周期结束后治疗组近期疗效总有效率68.57%,与对照组近期疗效总有效率37.14%对比,差异具有统计学意义;治疗组进展率31.42%,与对照组进展率62.85%对比,差异具有统计学意义;治疗组临床症状改善率明显高于对照组,差异具有统计学意义;治疗组患者生活质量提高率为71.42%,与对照组患者生活质量提高率28.57%对比,差异具有统计学意义,治疗组患者生活质量降低率为11.42%,与对照组患者生活质量降低率40.0%对比,差异具有统计学意义;治疗组毒副作用发生率明显低于对照组,差异具有统计学意义;治疗结束后两组患者体重指数增加,治疗组体重指数提高明显高于对照组,差异具有统计学意义;生存随访以化疗开始至患者死亡或末次随访时间为生存期,按月记录。治疗组患者平均生存期显著提高,与对照组患者对比差异具有统计学意义;治疗结束后两组患者外周白细胞数均有下降,差异具有统计学意义,治疗组患者外周白细胞数下降明显高于对照组,差异具有统计学意义。结论：艾迪注射液联合化疗治疗晚期卵巢癌,与单纯化疗治疗对比疗效良好,显著改善患者生活质量,提高患者体重,减轻不良反应,效果较为显著。

关键词：艾迪注射液化疗晚期卵巢癌

微小RNA-149调控肿瘤细胞增殖和转移的分子机制

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中华实验外科杂志 2023年第9期40卷 1816-1819页

作者：孙桂霞张冬丽杨少琴曹芹雪田君河南大学淮河医院妇瘤科开封475000

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-149调控卵巢癌细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法选取2019年1月至2021年1月河南大学淮河医院手术切除的47例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织... 详细信息

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-149调控卵巢癌细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法选取2019年1月至2021年1月河南大学淮河医院手术切除的47例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织中miR-149水平。并采用荧光定量PCR分析人卵巢上皮细胞HOSEpiC、卵巢癌细胞SW620和skov3中miR-149水平;采用miRNA和miR-149慢病毒感染SW620细胞,命名为miRNA组和miR-149组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞的增殖能力;采用流式细胞术分析两组细胞凋亡和周期变化;采用Transwell分析两组细胞的迁移能力;生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-149的靶基因;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-149靶蛋白表达、增殖、凋亡、周期和迁移相关蛋白表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织miR-149表达水平(1.07±0.15)明显高于卵巢癌组织(0.73±0.09),差异有统计学意义(t=13.490,P<0.05)。人卵巢上皮细胞HOSEpiC miR-149表达水平(1.27±0.10)明显高于卵巢癌细胞SW620和skov3(0.80±0.08、0.70±0.08),差异有统计学意义(t=8.859、10.740,P<0.05)。miRNA对照组细胞48 h吸光度值(1.91±0.08)明显高于miR-149组(1.23±0.18),差异有统计学意义(t=8.655,P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡比例[(3.69±1.06)%]明显低于miR-149组[(18.90±2.35)%],差异有统计学意义(t=14.470,P<0.05)。miRNA对照组细胞G0/G1期比例[(39.91±2.86)%]明显高于miR-149组[(31.33±2.42)%],差异有统计学意义(t=5.616,P<0.05)。miRNA对照组细胞S期比例[(16.73±1.51)%]明显低于miR-149组[(20.48±2.04)%],差异有统计学意义(t=3.619,P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡比例[(127.67±21.69)个]明显高于miR-149组[(99.50±10.21)个],差异有统计学意义(t=2.887,P<0.05)。miRNA对照组细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)和黏着斑激酶(FAK)蛋白表达水平(0.94±0.06、0.91±0.05)明显高于miR-149组(0.73±0.06、0.59±0.08),差异有统计学意义(t=8.655、8.488,P<0.05)。RGS17是miR-149的靶基因。癌旁组织中RGS17蛋白表达水平(0.97±0.02)明显低于卵巢癌细胞RGS17蛋白表达水平(2.17±0.11),差异有统计学意义(t=15.620,P<0.05)。miRNA对照组细胞FAK蛋白表达水平(1.24±0.09)明显高于miR-149组(0.73±0.08),差异有统计学意义(t=10.200,P<0.05)。结论miR-149在卵巢癌组织和细胞呈低表达,miR-149过表达显著抑制卵巢癌细胞的增殖、周期和迁移,诱导细胞凋亡。

关键词：微小RNA 卵巢癌增殖细胞周期凋亡转移