检索结果-南通市图书馆

作者：曹碧月江苏大学

学位级别：硕士

研究背景及目的:环状RNA(circular RNA)是新发现的一种非编码RNA,成闭合环状,在许多癌症的发生发展过程中有着重要作用。由于RNA测序技术的发展,研究者们可以获得纯度更高的环状RNA以便后续研究。环状RNA在肿瘤发生发展中的作用越来越... 详细信息

研究背景及目的:环状RNA(circular RNA)是新发现的一种非编码RNA,成闭合环状,在许多癌症的发生发展过程中有着重要作用。由于RNA测序技术的发展,研究者们可以获得纯度更高的环状RNA以便后续研究。环状RNA在肿瘤发生发展中的作用越来越受到重视。肺癌是一种世界上第二大最常见的恶性肿瘤,在男性和女性癌症发病率和死亡率的主要原因之一,而肺腺癌是肺癌最常见的病理类型,因此研究肺腺癌的发生发展机制,寻找其有效的诊断和治疗靶点是非常重要的。然而,circ RNAs在肺腺癌细胞中的潜在机制还尚不清楚,在本研究中,我们挑选了一个新的circ RNA hsa＿circ＿0016600,旨在探讨其在肺腺癌细胞发生发展中的分子机制及临床价值,为以后肺腺癌的诊断和治疗提供新的思路。研究方法:(1)采集2020年1月到2021年9月期间在江苏大学附属人民医院(镇江市第一人民医院)胸外科住院实施肺切除手术的肺癌患者组织标本,按照研究要求筛出80对,保存于液氮里。另外,收集其中20例患者术前及术后第二天的外周血液标本5 m L。(2)通过高通量测序技术检测5对肺腺癌组织及其相应的癌旁组织中含量具有明显差异的相关环状基因,病理诊断符合各分期的肿瘤-淋巴结转移分级方案(2017年国际癌症控制联盟,UICC)和LAC的组织病理学分级(WHO 2015)。筛选出环状RNA hsa＿circ＿0016600作为研究对象。通过PCR、琼脂糖凝胶电泳、Sanger测序以及放线菌素D试验等方法验证hsa＿circ＿0016600是否是环状结构,并且明确其成环位点。(3)采取qRT-PCR法检测hsa＿circ＿0016600在肺腺癌组织、癌旁组织、人永生化正常支气管黏膜上皮细胞株(BEAS-2B)、肺腺癌细胞株(A549、PC9、H1299)、术前术后外周血血清中的含量以及分析肺癌患者hsa＿circ＿0016600的含量与患者临床特点的关系。用小干扰RNA敲减hsa＿circ＿0016600后,采用细胞平板克隆形成试验、划痕试验及Transwell侵袭试验检测hsa＿circ＿0016600对肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。(4)通过miRanda和Targrtscan数据库预测与hsa＿circ＿0016600有结合位点的micro RNA miR-1298,以及miR-1298下游的m RNA TGFA;后续采取双荧光素酶报告基因试验进一步验证的它们是否有特异性结合位点。敲减hsa＿circ＿0016600后,通过qRT-PCR分析人肺腺癌细胞中miR‐1298表达水平;过表达miR-1298后,用蛋白印迹法和qRT-PCR分析人肺腺癌细胞中TGFA的表达水平。(5)用qRT-PCR分析miR-1298在BEAS-2B以及肺腺癌细胞株(A549、PC9、H1299)中表达水平。分别选择表达水平最高的和表达水平最低的肺腺癌细胞株进行后续试验探究。应用Si-circ＿0016600(Si-circ)转染肺腺癌细胞株敲减hsa＿circ＿0016600的含量,或共同转染Si-circ与miR-1298-inhibitor(miR-inh)后,采用平板克隆形成试验、划痕试验及Transwell侵袭试验探究hsa＿circ＿0016600对肺腺癌细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力的影响;再次用qRT-PCR分析miR‐1298在细胞中的表达情况。(6)将人肺腺癌细胞分为两组,一组单独转染miR-1298模拟物(miR-mimics),另外一组则将miR-mimics与TGFA过表达质粒共转染,通过平板克隆形成试验、划痕试验及Transwell侵袭试验分析其对人肺腺癌细胞侵袭能力、迁移能力及增殖能力的影响,采用蛋白印迹实验分析TGFA在A549及PC9细胞中表达情况。(7)将人肺腺癌A549细胞悬液注射入裸鼠皮下,分析敲减hsa＿circ＿0016600对裸鼠体内异种种植瘤生长的影响。采用蛋白免疫印迹实验检测TGFA表达情况。研究结果(1)采用Sanger测序、琼脂糖凝胶电泳、RNAse R鉴定以及放线菌素D试验结果显示hsa＿circ＿0016600是闭合环状结构并有高度稳定性。(2)与癌旁组织相比,肺腺癌组织中hsa＿circ＿0016600的含量显著增高(****P<0.0001)。与肺癌切除术前相比较,肺腺癌患者术后血液中hsa＿circ＿0016600的表达水平显著减少(***P<0.001)。肺腺癌患者hsa＿circ＿0016600的表达水平与淋巴结转移(P=0.0111)以及肿瘤分化程度(P=0.0281)也有一定相关性。(3)与人肺支气管上皮细胞相比,hsa＿circ＿0016600在人肺腺癌细胞株A549、PC9及H1299中的表达水平均升高(**P<0.01,***P<0.001,****P<0.0001),其中hsa＿circ＿001

关键词：环状RNA hsa＿circ＿0016600 miR-1298 TGFA 肺腺癌

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Hsa_circ_0000128通过miR-623/EIF4A1轴促进人胃腺癌细胞增殖和迁移的机制研究

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医学研究生学报 2022年第10期35卷 1022-1029页

作者：王亚东曹碧月高生宝王雪君步雪峰江苏大学附属人民医院普外科镇江212000 江苏大学附属人民医院呼吸内科

目的目前对于hsa_circ_0000128是否通过miR-623/EIF4A1轴通路参与胃腺癌的发生过程尚不清楚。文中旨在研究环状RNA hsa_circ_0000128(Circ_01607)在胃腺癌组织、细胞株的表达以及对胃癌细胞的增殖、迁移、凋亡的影响。方法收集2019年9月... 详细信息

目的目前对于hsa_circ_0000128是否通过miR-623/EIF4A1轴通路参与胃腺癌的发生过程尚不清楚。文中旨在研究环状RNA hsa_circ_0000128(Circ_01607)在胃腺癌组织、细胞株的表达以及对胃癌细胞的增殖、迁移、凋亡的影响。方法收集2019年9月至2020年8月江苏大学附属人民医院病理科的40份胃腺癌及癌旁组织标本。进行高通量测序筛选出表达明显提高的环状RNA hsa_circ_0000128;通过circBank、TargetScan等数据库预测下游miR-623。采用RT-PCR对40例临床胃腺癌组织、癌旁组织、胃癌细胞株(MGC-803,HGC-27,BGC-823)以及正常人胃粘膜上皮细胞株GES-1中hsa_circ_0000128的表达进行测定及验证结果。挑选出表达量差异最大的两组进行后续实验。将HGC-27、MGC-803细胞株分别接种于两块细胞培养板中,培养板中设置相应的circRNA组别:Si-NC组(Si-NC转染胃腺癌细胞)、Si-circ组(si-hsa_circ_0000128转染胃腺癌细胞)、Si-EIF4A1组(Si-EIF4A1转染胃腺癌细胞)、miR-NC组(miR-623-NC转染胃腺癌细胞)、miR-mimics组(miR-623-mimics转染胃腺癌细胞)、miR-inh组(miR-623-inhibitors转染胃腺癌细胞)、Si-circ+miR-NC组(Si-circ、miR-NC转染胃腺癌细胞)、Si-circ+miR-inh组(Si-circ、miR-inh转染胃腺癌细胞)。采用克隆形成实验测定各组细胞增殖能力;使用Transwell实验测定各组胃癌细胞的迁移能力;蛋白免疫印迹实验测定凋亡相关蛋白Cleaved-caspase-3、bcl-2和Bax的表达水平验证细胞凋亡情况。验证miR-623在组织及细胞中的表达情况,通过荧光素酶实验验证结合靶点信息,加入miRNA对应干扰并将其分组,通过细胞功能学实验,蛋白印迹实验比较胃癌细胞株各组细胞功能的变化。通过PCR及蛋白免疫印迹实验验证各组真核翻译起始因子4A1(EIF4A1)的相关表达水平与miR-623含量的关系。结果hsa_circ_0000128在胃癌组织及细胞株中较癌旁组织及正常胃黏膜上皮细胞中呈高表达状态。SI-circ组hsa_circ_0000128的相对表达量明显低于SI-NC组(P<0.05)。SI-circ+miR-inh组miR-623含量较SI-circ+miR-NC组下降(P<0.05)。SI-circ组Cleaved-caspase-3、Bax相对表达量较SI-NC组增加(P<0.05),Bcl-2相对表达量下降(P<0.05)。HGC-27和MGC-803细胞中Si-circ组的克隆形成率[(11.57±1.724)%、(12.47±2.401)%]明显低于Si-NC组[(32.53±3.250)%、(25.07±1.557)%],差异有统计学意义(P<0.05)。加入miR-623 inhibitor后可逆转抑制现象,SI-circ+miR-NC组克隆形成率[(10.43±1.305)%、(12.50±1.400)%]明显低于Si-circ+miR-inh组[(25.03±1.665)%、(19.63±1.955)%],差异具有统计学意义(P<0.01)。Transwell实验表明,SI-circ组较SI-NC组迁移明显降低(P<0.05)。EIF4A1在40对胃癌组织及胃癌细胞株HGC-27、MGC-803表达较癌旁组织、正常胃黏膜上皮细胞GES-1中呈高表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。蛋白免疫印迹实验显示当敲减hsa_circ_0000128时,EIF4A1的含量下降;当加入miR-623 inhibitor逆转敲减circRNA情况时,EIF4A1的表达含量上升(P<0.01)。结论hsa_circ_0000128在胃癌细胞株、组织中呈高表达,hsa_circ_0000128作为miR-623的海绵上调EIF4A1促进胃癌细胞的生物学功能;含量下调后可显著抑制胃癌细胞增殖、迁移并诱导其凋亡。

关键词： hsa_circ_0000128 胃腺癌 miR-623 真核翻译起始因子4A1 细胞凋亡

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2023届高考备考:材料作文“青春·奋斗”主题导写

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教学考试 2023年第1期 48-50页

作者：曹海月谢碧泉湖南省耒阳市第一中学

【原创预测作文题】阅读下面的材料,根据要求写作。材料一:中华民族是历史悠久、饱经沧桑的古老民族,更是自强不息、朝气蓬勃的青春民族。在5000多年源远流长的文明历史中,中华民族始终有着“自古英雄出少年”的传统,始终有着“长江后... 详细信息

【原创预测作文题】阅读下面的材料,根据要求写作。材料一:中华民族是历史悠久、饱经沧桑的古老民族,更是自强不息、朝气蓬勃的青春民族。在5000多年源远流长的文明历史中,中华民族始终有着“自古英雄出少年”的传统,始终有着“长江后浪推前浪”的情怀,始终有着“少年强则国强,少年进步则国进步”的信念,始终有着“希望寄托在你们身上”的期待。

关键词：材料作文高考备考英雄出少年导写自强不息作文题朝气蓬勃青春

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circBMPR2竞争性结合miR-6814-5p抑制肺腺癌细胞的作用机制

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医学研究生学报 2022年第7期35卷 694-700页

作者：王慧敏邹晓莉曹碧月王雪君王亚东严玉兰江苏大学附属人民医院呼吸科镇江212002 江苏大学医学院镇江212013

目的环状RNA(circRNA)参与肺腺癌的发生发展过程,然而作用机制有待进一步研究。文章旨在探究circBMPR2对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响及调控机制。方法收集30对肺腺癌组织和癌旁组织,其中5对标本进行高通量测序,根据高通量测... 详细信息

目的环状RNA(circRNA)参与肺腺癌的发生发展过程,然而作用机制有待进一步研究。文章旨在探究circBMPR2对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响及调控机制。方法收集30对肺腺癌组织和癌旁组织,其中5对标本进行高通量测序,根据高通量测序结果选取显著差异性表达的circBMPR2。利用qRT-PCR检测25对肺腺癌组织及癌旁组织、肺腺癌细胞系(A549、H1975、PC9)和正常支气管黏膜上皮细胞(BEAS-2B)中circBMPR2的表达水平。过表达质粒转染PC9细胞;小干扰RNA转染A549细胞,共分为两组对照,分别是PC9细胞OE-circ及对照组circ-NC,A549细胞si-circ及对照组si-NC。利用平板克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。用蛋白质印迹法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达水平。通过双荧光素酶实验及qRT-PCR验证circBMPR2与miR-6814-5p的靶向关系。通过蛋白质印迹法验证ARID1A是miR-6814-5p靶基因。结果circBMPR2在肺腺癌组织(0.30±0.10)中的表达水平较癌旁组织(1.00±0.29)低(P<0.05)。与正常支气管黏膜上皮细胞相比,3株肺腺癌细胞株中的circBMPR2相对表达水平均低(P<0.05)。与circ-NC组相比,OE-circ组PC9细胞克隆形成率、细胞迁移率、侵袭细胞数下降且N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量低(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-circ组A549细胞细胞克隆形成率、细胞迁移率、侵袭细胞数上升且N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量高(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量低(P<0.05)。qRT-PCR实验表明,PC9细胞中OE-circ组miR-6814-5p相对表达水平(0.47±0.04)较circ-NC组(1.00±0.16)降低(P<0.05);A549细胞中si-circ组miR-6814-5p相对表达水平(2.51±0.60)较si-NC组(1.00±0.12)明显升高(P<0.05)。结论circBMPR2通过竞争性结合miR-6814-5p促进ARID1A的表达,抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肺腺癌细胞的上皮间质转化,有望成为肺腺癌治疗的潜在治疗靶点。

关键词：肺腺癌 circBMPR2 miR-6814-5p ARID1A 细胞生物学行为

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Hsa_circ_0016600/miR-1298/TGFA轴促进人肺腺癌细胞增殖和迁移的作用机制

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医学研究生学报 2022年第9期35卷 950-958页

作者：曹碧月王慧敏王亚东邹晓莉王雪君严玉兰江苏大学医学院镇江212013 江苏大学附属人民医院呼吸科镇江212000

目的目前对于Hsa_circ_0016600是否通过miR-1298/TGFA轴通路参与肺腺癌的发生过程尚不清楚。文中旨在探讨Hsa_circ_0016600对肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对miR-1298/TGFA通路的调控作用。方法通过高通量测序技术对5对肺癌... 详细信息

目的目前对于Hsa_circ_0016600是否通过miR-1298/TGFA轴通路参与肺腺癌的发生过程尚不清楚。文中旨在探讨Hsa_circ_0016600对肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对miR-1298/TGFA通路的调控作用。方法通过高通量测序技术对5对肺癌组织及癌旁组织进行检测,筛选出具差异性的环状RNA Hsa_circ_0016600,利用mirTarbase和TargetScan数据库预测、荧光素报告酶实验验证Hsa_circ_0016600与miR-1298、miR-1298与TGFA的相互作用;利用qRT-PCR技术检测Hsa_circ_0016600在肺腺癌组织及细胞系中的表达情况。根据转染肺腺癌细胞不同分为:Si-NC组(Si-NC转染肺腺癌细胞)、Si-circ组(Si-hsa_circ_0016600转染肺腺癌细胞)、Si-TGFA组(Si-TGFA转染肺腺癌细胞)、miR-NC组(miR-1298-NC转染肺腺癌细胞)、miR-mimics组(miR-1298-mimics转染肺腺癌细胞)、miR-inh组(miR-1298-inhibitors转染肺腺癌细胞)、Si-circ+miR-NC组(Si-circ、miR-NC转染肺腺癌细胞)、Si-circ+miR-inh组(Si-circ、miR-inh转染肺腺癌细胞)、si-NC+miR-NC组(si-NC、miR-NC转染肺腺癌细胞)、miR-NC+pcDNA3.1组(miR-1298-NC、pcDNA3.1转染肺腺癌细胞)、miR-mimics+TGFA组(miR-mimics、TGFA转染肺腺癌细胞)和miR-mimics+pcDNA3.1组(miR-mimics、pcDNA3.1转染肺腺癌细胞)。应用克隆形成实验、划痕实验及Transwell侵袭实验检测上述干预对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过蛋白免疫印迹法检测经上述分组干预后对目的蛋白TGFA表达的影响。结果高通量测序筛选出在肺腺癌组织中高表达的环状RNA hsa_circ_0016600。克隆形成实验显示,A549和PC9中Si-circ组的克隆形成率[(2.07±0.40)、(2.90±0.40)]明显低于Si-NC组[(5.33±0.35)、(7.30±0.36)],差异有统计学意义(P<0.05);细胞划痕实验表明,A549和PC9细胞中Si-circ组的迁移率较Si-NC组明显降低(P<0.05);Transwell侵袭实验显示,A549和PC9细胞中Si-circ组的侵袭细胞数明显低于Si-NC组(P<0.05)。A549和PC9中Si-TGFA组的克隆形成率、侵袭细胞数、迁移率明显低于Si-NC组(P<0.05)。与Si-circ+miR-NC组比较,Si-circ+miR-inh组细胞克隆形成率在A549细胞及PC9细胞中明显升高(P<0.01);划痕实验显示,Si-circ+miR-inh组A549及PC9的迁移率较Si-circ+miR-NC组增高(P<0.01);侵袭实验表明,Si-circ+miR-inh组A549及PC9侵袭细胞数较Si-circ+miR-NC组明显增多(P<0.01)。miR-mimics+TGFA组TGFA的表达、侵袭细胞数、细胞迁移率较miR-mimics+pcDNA3.1组增加(P<0.01)。结论 Hsa_circ_0016600/miR-1298/TGFA轴促进人肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,为肺腺癌的治疗提供新的理论依据。

关键词： Hsa_circ_0016600 miR-1298 TGFA 肺腺癌

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Hsa_circ_0003449在人胃癌中表达及对胃癌细胞增殖和迁移作用

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2022年第3期43卷 60-66页

作者：蔡烨伟王灵霞袁海涛曹碧月周晓东张垚步雪峰江苏大学医学院江苏镇江212000 江苏大学附属人民医院普外科江苏镇江212000 南京市第二医院结核科南京210009

环状RNA是一种特殊的非编码RNA,在肿瘤发生发展中起着重要作用。通过高通量测序技术对5对确认为癌组织及癌旁正常组织进行检测,分析筛选出差异性环状RNA hsa_circ_0003449,通过qRT-PCR进行验证后,使用siRNA进行基因敲减,利用细胞克隆试... 详细信息

环状RNA是一种特殊的非编码RNA,在肿瘤发生发展中起着重要作用。通过高通量测序技术对5对确认为癌组织及癌旁正常组织进行检测,分析筛选出差异性环状RNA hsa_circ_0003449,通过qRT-PCR进行验证后,使用siRNA进行基因敲减,利用细胞克隆试验、平板划痕试验及transwell试验等检测胃癌细胞功能的改变,通过生物信息网站预测基因靶点TP73蛋白,敲减hsa_circ_0003449后检测蛋白质水平上的改变。结果表明:在人胃癌组织中,hsa_circ_0003449表达水平明显高于癌旁正常组织;在胃癌患者血清中,hsa_circ_0003449表达水平也高于健康体检者血清中表达水平;在胃癌细胞株(SGC-7901、BGC-823、HGC-27、MGC-803)中,hsa_circ_0003449表达水平均高于正常人胃黏膜上皮细胞株(GES-1)。在人胃癌细胞株中通过siRNA对hsa_circ_0003449的敲减引起肿瘤增殖及迁移能力下降。同时胃癌细胞株中hsa_circ_0003449的敲减会引起靶点TP73蛋白的表达水平下降。这一研究成功验证了hsa_circ_0003449在胃癌中高表达,且敲减hsa_circ_0003449后可抑制人胃癌细胞增殖、迁移等能力,为进一步探究hsa_circ_0003449成为胃癌早期诊断标志物和治疗靶点提供了理论基础。

关键词：胃癌环状RNA 细胞增殖细胞迁移 TP73

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城市群内企业创新投资联动效应研究——来自国家级城市群的证据

城市群内企业创新投资联动效应研究——来自国家级城市群的证据

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作者：曹碧倖山西财经大学

学位级别：硕士

党的十九届五中全会提出要注重区域发展,坚持区域协调发展战略等,从根本上推动经济水平提高。创新是从根本上打开经济增长的钥匙。城市群依托自身的自然禀赋、交通发达及信息传播快速等条件,集聚了人口、产业及资金,是城市发展到成熟阶... 详细信息

党的十九届五中全会提出要注重区域发展,坚持区域协调发展战略等,从根本上推动经济水平提高。创新是从根本上打开经济增长的钥匙。城市群依托自身的自然禀赋、交通发达及信息传播快速等条件,集聚了人口、产业及资金,是城市发展到成熟阶段的最高空间组织形式,体现了生产力的布局形式的创新,它的发展离不开创新的赋能。截至2019年2月18日,国务院共先后批复了十个国家级城市群,分布在我国各个地区,致力于提高我国整体经济的发展水平,促进区域的发展平衡,最终实现共同富裕。因而,立足于国家级城市群,进行有关于创新的探究意义深刻。企业作为我国重要的市场主体,对经济发展有着巨大的推动力。那么,作为最具创新活力的板块,城市群内不同企业之间的创新投资是否具有联动性呢?考虑到在我国区域协同发展中京津冀城市群的作用不可或缺,除已批复的10个国家级城市群外,也将其纳入本文的研究范围。故本文以“现象→动因→后果”为逻辑主线,把2008年—2019年11个国家级城市群中沪深A股上市的制造业和信息技术业企业作为样本进行研究,通过组合分组面板回归等实证方法得出,城市群内不同行业的企业创新投资存在明显的联动性,且城市群中的核心城市(主导行业)对其他城市(其他行业)具有正向的拉动辐射作用。而高管社会网络关系作为企业获取研发信息的重要来源,是城市群内不同行业企业创新联动性产生的一个关键动因。此外,这种城市群不同行业企业的联动性会进一步造成创新产出的联动,尤其是发明专利申请数的联动,还会缩小城市群内发展差距,成为协调区域发展的强大引擎。且通过进一步研究发现,当政商关系越“亲、清”,城市群内企业创新投资的联动效应越明显;当企业信息环境越透明,城市群内企业创新投资的联动性更强。本文的创新之处在于:(1)突破了目前已有个体创新决策的研究,探究区域层面企业创新投资的联动性,扩展了企业创新的探究范畴;(2)立足于城市群大环境下研究企业创新投入的联动性,联结了宏观区域协调和微观个体企业发展,为宏观区域的研究找到微观证据;(3)目前已有文献多从外部因素解释投资联动性,本文从信息内生交互角度,基于高管社会网络的信息传递机制打开创新投资联动背后的“黑箱”,为投资联动性的出现提供了新的解释视角。

关键词：城市群创新投资联动效应高管社会网络

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hsa_circ_0026782对肺腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡作用

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医学研究生学报 2021年第12期34卷 1244-1251页

作者：邹晓莉王慧敏曹碧月谷文露袁海涛严玉兰江苏大学医学院镇江212013 江苏大学附属人民医院呼吸内科镇江212002

目的环状RNA(circRNA)可调节肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,而影响肿瘤患者预后,而环状RNA(circRNA)在肺腺癌中作用的机制尚不清楚。文章探讨环状RNA hsa_circ_0026782在肺腺癌患者中的差异表达及对肺腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡的影响。... 详细信息

目的环状RNA(circRNA)可调节肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,而影响肿瘤患者预后,而环状RNA(circRNA)在肺腺癌中作用的机制尚不清楚。文章探讨环状RNA hsa_circ_0026782在肺腺癌患者中的差异表达及对肺腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡的影响。方法通过高通量测序检测肺腺癌组织及癌旁组织中有显著差异的环状RNA hsa_circ_0026782;通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术检测肺腺癌组织与癌旁组织、肺癌患者血清、术后血清与健康体检人、肺腺癌细胞系(PC9,A549,H1975)及正常细胞系(BEAS-2B)之间hsa_circ_0026782的表达水平。选择下调最为显著的肺腺癌A549细胞进行过表达质粒转染(circ_0026782),选择下调相对较少的PC9细胞进行siRNA敲减(si-circ_0026782),使用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术检测过表达组(circ_0026782)与空质粒组(Empty-vector)、敲减组(si-circ_0026782)与对照组(si-NC)效率;通过对肺腺癌细胞进行平板细胞克隆形成实验、CCK-8(Cell-Counting Kit-8)实验检测hsa_circ_0026782对肺腺癌细胞的增殖作用的影响;通过划痕实验和Transwell迁移实验检测hsa_circ_0026782对肺腺癌细胞迁移的作用;通过qRT-PCR检测CMTM4 mRNA表达水平,通过蛋白免疫印迹实验(Western-Blot)检测增殖相关标志物、凋亡相关标志物及目的蛋白CMTM4表达水平。结果相对于空载体组(1.19±0.52),转染过表达质粒组(534.2±39.12)能明显提高hsa_circ_002678的表达;相对于对照组(si-NC)(1.06±0.13),用小干扰RNA敲减hsa_circ_0026782(si-circ_0026782)(0.052±0.004)能明显减少hsa_circ_0026782的表达。平板克隆实验、CCK-8实验及Western blot实验结果均表明,hsa_circ_0026782的表达上调可明显抑制肺腺癌细胞增殖,敲减hsa_circ_0026782的表达下调可明显促进肺腺癌细胞的增殖D过表达hsa_drc_0026782(circ_0026782)可促进肺腺癌细胞凋亡,敲减hsa_drc_0026782(si-circ_0026782)可抑制肺腺癌细胞凋亡。细胞划痕实验表明,在A549细胞中,过表达hsa_circ_0026782(circ_0026782)组较空载体(Empty-vector)组可抑制细胞迁移;PC9细胞中,siRNA敲减hsa_circ_0026782组(si-cire_0026782)组较阴性对照组(si-NC)组促进细胞迁移,Transwel]实验表明,在A549细胞中,过表达hsa_circ_0026782(circ_0026782)组较空载体(Empty-vector)组的细胞迁移数明显下降;siRNA敲减hsa_circ_0026782(si-circ_0026782)组较阴性对照组(si-NC)细胞迁移数明显增多。过表达hsa_circ_0026782(circ_0026782)组(4.877±0.769)较空载体(Empty-vector)(0.948±0.229)组CMTM4 niHNA表达量增加;siRNA敲减hsa-ccirc_0026782(si-circ_0026782)组(0.167±0.07423)较阴性对照组(si-NC)组(1.166±0.311)CMT M4 mRNA表达量下降。Western Wot实验结果表明,过表达hsa_circ_0026782(circ_0026782)组较空载体(Empty-vector)组CMTM4蛋白表达量增加,敲减hsa_circ_0026782(Si-Circ_0026782)组较阴性对照组(si-NC)CMTM4蛋白表达量下降:结论。hsa_circ_0026782可通过CMTM4抑制肺腺癌的发生发展,有望成为肺腺癌诊断及干预治疗的靶点。

关键词：肺腺癌 hsa_circ_0026782 细胞增殖细胞迁移

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古代中医生育图像研究

古代中医生育图像研究

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作者：曹碧晏南京中医药大学

学位级别：硕士

人类历史上,图像的存在比文字更为久远,远古先民在创造文字以前,已经开始用图像记录生活。在当今“读图时代”的背景下,图像也日益成为史学研究的重要资料。图像作为历史的证据,有着文字资料所不能替代的形象直观性和细节表现力,对图像... 详细信息

人类历史上,图像的存在比文字更为久远,远古先民在创造文字以前,已经开始用图像记录生活。在当今“读图时代”的背景下,图像也日益成为史学研究的重要资料。图像作为历史的证据,有着文字资料所不能替代的形象直观性和细节表现力,对图像史料的研究,能帮助我们找到更多的历史细节。古代中医生育图像,是中医生育文献的重要组成部分,在中医生育的学术传承中起着不可或缺的作用。本文分古代中医生育学说概述、古代中医生育图像整理与分类、古代中医生育图像的图像学研究、古代中医生育图像的“语-图”互文研究、古代中医生育图像的特点与价值5个部分对古代中医生育图像进行了探讨。第一部分,概述古代中医生育学说的历史沿革和理论建构。古代中医生育学说经历了从简单到复杂,从幼稚到成熟的发展过程。在经过先秦经验积累,秦汉理论构建,魏晋南北朝理论阐发,唐宋发展高潮,明清积累沉淀之后,中医生育学说最终形成了一个相对完整的理论体系,涵盖求嗣、妊娠、临产及产后四个阶段。第二部分,对中医古籍中的生育图像进行筛选、整理和分类。共收集到75种中医古籍中的生育图像330幅,包括理论图181幅、诊疗图51幅、方术图93幅、药物图5幅。其中,理论图又分生理结构图、种子图、胎形图、养胎图4个小类,诊疗图又分疾病图、诊断图、治疗图3个小类,方术图又分占卜图、产图、符咒图3个小类。第三部分,借鉴图像学方法,对古代中医生育图像进行多角度解读,探讨其与古代中医生育学说的内在联系。生理结构图反映了中医对男女生殖系统解剖结构的认识。种子图结合中医学理论和易学知识,从阴阳、太极、八卦等角度解释人体生成规律。胎形图描绘了胎儿在母腹内生长发育的情况,可分为中国传统十月胎形图和西方传入的胚胎发育图两类。养胎图表现了妊娠期间孕妇的饮食起居等胎养内容,与中医生育学说的“内象成子”理论相呼应。诊疗图对男、女、新生儿等不同人群的生育相关疾病本身或其诊断、治疗方法进行了描绘。方术图通过产图和符咒图对生育实践进行指导,祈祷妊娠和分娩顺利,并借用占卜图预测新生儿命运。药物图展示了由生育相关的人体组织或分泌物制成的药物的制作过程,其图像背后蕴含着古代中医对生育产物入药既笃信又避忌的矛盾心理。第四部分,从图像与配图文字、图像内部图形与文字两个方面探讨古代中医生育图像的“语-图”互文关系。图像与配图文字之间的“语-图”互文关系可总结为图文分离、图文相合、图文互补、图文映衬、图文隐喻5种,其中前三种较为基础,解读时从图文表达的内容和形式入手即可,后两种较为复杂,在解读中需要一定的演绎推理。图像内部的图文关系又可细分为图像与构图文字、图像与图注文字、图像与图名的关系。第五部分,总结古代中医生育图像的特点与价值,凸显其在中医生育学术传承中的特殊作用。古代中医生育图像,在特点上具备时代特征明显、版本存在差异、融合临床各科3个特点,在价值上存在学术价值、文献价值、应用价值、文化价值4个方面的价值。本文通过以上五个部分的讨论,深入挖掘古代中医生育图像的丰富内涵,从图像角度探讨古代中医生育学术的发展与传承,厘清了古代中医生育图像在中医生育学术史上的地位与价值,为中医生育史的研究增添了史料佐证。

关键词：中医古籍生育史图像 “语-图”互文

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CircRNA_23113抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移

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基础医学与临床 2022年第1期42卷 82-88页

作者：王灵霞严玉兰袁海涛蔡烨伟刘德慧谷文露曹碧月江苏大学附属人民医院呼吸内科江苏镇江212002 江苏大学附属人民医院普外科江苏镇江212002 上海市松江区中心医院呼吸内科上海201600

目的探究circRNA_23113在肺腺癌中的表达及对肺腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法通过高通量测序技术测序5例临床肺腺癌、癌旁组织标本,筛选出差异性表达的circRNA_23113。实时荧光定量PCR检测肺腺癌组织、血清和细胞中circRNA_23113的表... 详细信息

目的探究circRNA_23113在肺腺癌中的表达及对肺腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法通过高通量测序技术测序5例临床肺腺癌、癌旁组织标本,筛选出差异性表达的circRNA_23113。实时荧光定量PCR检测肺腺癌组织、血清和细胞中circRNA_23113的表达;构建circRNA_23113的过表达质粒,用CCK-8法、克隆形成实验、细胞划痕和Transwell小室法分析其对细胞增殖和迁移的影响;用Western blot检测β-catenin、cyclin D1以及c-myc蛋白水平的表达。结果CircRNA_23113在肺腺癌患者组织、血清和细胞中显著低表达(P<0.05);过表达circRNA_23113后抑制A549和H1299细胞增殖和迁移(P<0.05);CircRNA_23113抑制β-catenin、cyclin D1以及c-myc表达(P<0.05)。结论CircRNA_23113在肺腺癌中低表达,且过表达能抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移。

关键词： circRNA_23113 肺腺癌增殖迁移

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