检索结果-南通市图书馆

大黄素治疗类风湿关节炎的作用机制:基于网络药理学方法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2022年第6期42卷 913-921页

作者：曹春浩曾丽荣晓凤重庆医科大学附属第一医院中西医结合科重庆400016

目的基于网络药理学方法,运用在线数据库研究大黄素治疗类风湿关节炎的作用机制,并在成纤维样滑膜细胞细胞系中进行验证。方法通过Targetnet、SwissTargetPrediction、Genecards、DisGeNET和OMIM数据库,分别获得大黄素作用靶点及类风湿... 详细信息

目的基于网络药理学方法,运用在线数据库研究大黄素治疗类风湿关节炎的作用机制,并在成纤维样滑膜细胞细胞系中进行验证。方法通过Targetnet、SwissTargetPrediction、Genecards、DisGeNET和OMIM数据库,分别获得大黄素作用靶点及类风湿关节炎相关基因,并构建靶点蛋白质相互作用网络(PPI),对交集基因进行Gene Ontology与KEGG通路富集分析。运用AutoDock4.2.6软件模拟分子对接。将大黄素与经TNF-α诱导的MH7A细胞共同培养,培养分组情况:空白对照组、模型组(TNF-α组,10 ng/mL)、药物干预组(TNF-α10 ng/mL+Emodin20、40、60、80、100μmol/L)。采用CCK-8法、细胞划痕实验及流式细胞周期实验探究大黄素对MH7A细胞增殖的抑制作用。通过Western blot观察其NF-κB通路蛋白表达情况,通过Rt-PCR实验分析CAPS3、PTGS2(COX2)、MAPK14基因的表达。结果获得大黄素和类风湿关节炎交集基因32个,其中心节点为CAPS3、ESR1、MAPK14等,主要涉及NF-κB信号通路等。分子对接提示大黄素与核心靶点能较好的结合。实验结果显示,大黄素能明显抑制MH7A细胞过度增殖(P<0.05)。Western blot结果显示,TNF-α诱导的MH7A细胞NF-κB蛋白表达水平升高(P<0.01),而予以大黄素80μmol/L干预后IκBα、p-NF-κB表达水平均有所降低(P<0.01)。Rt-PCR结果显示,TNF-a组COX2、P38MAPK(MAPK14)核心基因的表达量明显上调,而大黄素(80μmol/L)处理后各组COX2、P38MAPK14的mRNA表达下降mRNA的表达下降(P<0.01),凋亡相关基因CASP3上调。结论大黄素通过调控细胞增殖凋亡,调节NF-κB等信号通路等发挥治疗类风湿关节炎作用。

关键词：网路药理大黄素类风湿关节炎 NF-κB通路

基于网络药理学探讨大黄素治疗类风湿性关节炎作用机制及实验验证

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于网络药理学探讨大黄素治疗类风湿性关节炎作用机制及实验验证

作者：曹春浩重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:基于网络药理学方法,运用在线数据库分析大黄素治疗类风湿性关节炎的作用机制并在MH7A细胞系中验证。方法:（1）在 TCMSP、OMIM、Genecards、DisGeNET 等数据库中查找,分别获得大黄素作用靶点及类风湿性关节炎相关基因后,构建靶点... 详细信息

目的:基于网络药理学方法,运用在线数据库分析大黄素治疗类风湿性关节炎的作用机制并在MH7A细胞系中验证。方法:（1）在 TCMSP、OMIM、Genecards、DisGeNET 等数据库中查找,分别获得大黄素作用靶点及类风湿性关节炎相关基因后,构建靶点蛋白质相互作用网络（PPI）,同时对交集基因进行基因本体论（GO）与京都基因百科全书（KEGG通路）富集分析。（2）运用AutoDock vina软件模拟分子对接,进一步确认核心靶点。（3）预实验中以20μM为梯度,分别给予80、60、40、20、80μM浓度大黄素与细胞共同培养。采用Cell Counting Kit-8细胞计数法（CCK8）及MTT法筛选大黄素作用的最佳浓度。其中MTT实验还设置了一组加入TNF-α的组别作为对照。（4）随后将购买的人类风湿成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）MH7A细胞分为对照组、TNF-α组、大黄素组。除对照组外,TNF-α组和大黄素组给予TNF-α 10ng/ml诱导,而大黄素组据预实验筛选的最佳浓度进行实验。各组进行细胞划痕实验、流式细胞周期实验和RT-PCR、WB实验,观察MH7A细胞的增殖情况及核心靶点、NF-κB通路蛋白表达水平。（5）对TNF-α诱导并经大黄素处理的类风湿样大鼠成纤维滑膜细胞进行RNA测序分析。结果:（1）通过网络药理分析,获得大黄素和类风湿性关节炎交集基因32个,其核心关键靶点为CAPS3、ESR1、MAPK14等,分子对接提示大黄素与核心靶点能较好的结合并且大黄素主要参与NF-κB信号通路等调控。（2）CCK-8及MTT法检测显示,20、40、60、80μmol/L不同浓度大黄素组MH7A细胞存活率均显著下降（P＜0.05）,其抑制作用随浓度增高逐渐加强（P＜0.05）。（3）细胞划痕实验显示,与对照组比较,TNF-α组细胞间距缩小（P＜0.05）,与TNF-α组比较,大黄素组细胞间距明显增宽（P＜0.05）。流式细胞周期实验显示,较对照组,TNF-α组G0/G1期细胞比例降低（P＜0.05）,大黄素组G0/G1期细胞比例增多（P＜0.05）。（4）ELISA检测显示,与对照组比较,TNF-α组IL-6及IL-1β明显升高（P＜0.05）,与TNF-α组比较,80μmol/L大黄素组IL-6及IL-1β水平明显下降（P＜0.05）。（5）RT-PCR法显示,与对照组比较,TNF-α组PTGS2、p38MAPK的mRNA表达上调,而CASP3表达水平降低（P＜0.05）。与TNF-α组比较,80μmol/L大黄素组PTGS2、p38MAPK表达明显下降（P＜0.05）,CASP3表达水平明显升高（P＜0.05）。（6）WB法显示,与对照组比较,TNF-α组NF-kB蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,与TNF-α组比较,80μmol/L大黄素组明显降低（P＜0.05）。（7）高通量RNA测序分析显示,大黄素主要通过细胞因子、趋化因子受体等途径调控经TNF-α诱导的大鼠FLS细胞。结论:TNF-α诱导MH7A细胞增殖,而大黄素能明显抑制细胞增殖和IL-6、IL-1β等炎症因子,并下调PTGS2、p38MAPK和上调CASP3表达水平,调节NF-κB信号通路,其作用为治疗类风湿性关节炎的可能机制,为后续进一步研究提供思路和借鉴。

关键词：网络药理大黄素类风湿关节炎 NF-κB通路

大黄素对胶原诱导性关节炎大鼠的骨保护作用:基于抑制铁死亡和降解基质金属蛋白酶

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2023年第10期43卷 1776-1781页

作者：周思聪杨威曾丽曹春浩袁速荣晓凤重庆医科大学附属第一医院中西医结合科重庆400016

目的探讨大黄素对类风湿关节炎(RA)铁死亡相关信号通路介导的骨保护作用机制。方法除正常组外,使用200μL不完全弗氏佐剂乳化的牛二型胶原构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的类风湿关节炎模型。21 d后分为正常组(Normal)、模型组(Model)... 详细信息

目的探讨大黄素对类风湿关节炎(RA)铁死亡相关信号通路介导的骨保护作用机制。方法除正常组外,使用200μL不完全弗氏佐剂乳化的牛二型胶原构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的类风湿关节炎模型。21 d后分为正常组(Normal)、模型组(Model)、甲氨蝶呤组(MTX,0.2 mg/kg,3次/周)、大黄素(Emo)高(80 mg·kg^(-1)·d^(-1))、低(40 mg·kg^(-1)·d^(-1))剂量组,10只/组。记录大鼠造模之后的关节炎评分和足趾体积;使用丙二醛(MDA)试剂盒检测组织MDA含量;用番红固绿染色法、苏木精-伊红染色法对踝关节石蜡切片进行染色,光镜下观察大鼠踝关节组织形态学改变;用免疫组织化学法对踝关节切片的基质金属蛋白酶(MMP)3、13进行染色,光镜下观察大鼠踝关节MMPs的表达;Western blot法检测大鼠踝关节组织中长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)的蛋白质含量。结果与正常组相比,模型组大鼠的关节炎评分指数、足趾肿胀度增高(P<0.05);软骨表面粗糙,软骨细胞丢失、排列杂乱稀疏;MDA含量和ACSL4的蛋白质含量升高,SLC7A11、GPX4、FTH1的含量降低(P<0.05);踝关节MMP3和MMP13的表达量升高;与模型组相比,MTX组和大黄素(40 mg/kg、80 mg/kg)组的关节炎评分指数、足趾肿胀度降低(P<0.05),软骨表面相对光滑平整,软骨细胞排列整齐,MDA含量升高(P<0.05);MTX组和大黄素高剂量组ACSL4的蛋白质含量降低,SLC7A11、GPX4、FTH1的含量升高(P<0.05)。结论大黄素能有效控制CIA大鼠关节炎症、改善关节骨侵蚀。调节铁死亡相关信号通路ACSL4、SLC7A11、GPX4、FTH1的含量,降低MMP3和MMP13的表达,可能是其抑制RA骨破坏的重要机制和途径之一。

关键词：类风湿关节炎胶原诱导性关节炎大鼠铁死亡基质金属蛋白酶骨破坏

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

地球与宇宙领域:以《四季变化》为例

中国教师 2018年第1期 64-66页

作者：刘娜曹春浩北京市通州区张家湾镇中心小学北京市通州区教师研修中心

2017年2月,《义务教育小学科学课程标准》颁布,科学课由原来的3~6年级调整为现在的1~6年级,即学生从入学起就开始学习科学课程。广大教师纷纷探索研究针对低年级学生如何有效开展科学课教学。本文以二年级《四季变化》一课为例,谈一谈... 详细信息

2017年2月,《义务教育小学科学课程标准》颁布,科学课由原来的3~6年级调整为现在的1~6年级,即学生从入学起就开始学习科学课程。广大教师纷纷探索研究针对低年级学生如何有效开展科学课教学。本文以二年级《四季变化》一课为例,谈一谈如何在地球与宇宙领域进行科学教学。一、研读课标,分析教学内容《四季变化》属于地球与宇宙领域“地球有周期性的自转和公转运动”这一部分内容。

关键词：地球宇宙小学科学课程标准低年级学生教学内容科学课教学义务教育科学教学

小学科学“动思同行”教学策略研究——以湘科版科学三年级上册《气体的热胀冷缩》一课为例

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新课程评论 2022年第12期 28-34页

作者：曹春浩沈文炎北京市通州区教师研修中心

本文以湘科版科学三年级上册《气体的热胀冷缩》一课为例,针对当下科学课堂学生“只动手不动脑”的现象提出了“动思同行”的教学策略,从“辨析情境,提取实验经验”“类比迁移,构思实验方案”和“解释应用,拓展实验思路”三个方面,结合... 详细信息

本文以湘科版科学三年级上册《气体的热胀冷缩》一课为例,针对当下科学课堂学生“只动手不动脑”的现象提出了“动思同行”的教学策略,从“辨析情境,提取实验经验”“类比迁移,构思实验方案”和“解释应用,拓展实验思路”三个方面,结合具体事例阐释教学中实施“动思同行”的路径,引导学生把新问题与原有经验进行匹配,找到它们在结构上的相似点,并把原有经验中的“要素”提取出来,用这些要素作为解决新问题的出发点,设计解决问题的思路与具体途径。这个过程有助于将课堂上的学习成果运用于实际生活中,从而提升学生解决问题的能力,达到培养学生科学核心素养的目的。

关键词：动思同行辨析情境类比迁移解释应用

一年级《科学》教材介绍与教学建议(上)——以湘版教材为例

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖北教育（科学课） 2017年第5期 62-65页

作者：彭香曹春浩北京教育科学研究院 100191 北京市通州区教师研修中心 101100

湘版一年级《科学》上册教材是整套教材的起始册。本册教材从儿童的已有经验、生活实际和周围环境要素出发，在卡通人“指南车”的引导下，以认识周围常见现象、事物的特征或性质及学习认识事物的方法为线索，设计了33个丰富有趣的探究... 详细信息

湘版一年级《科学》上册教材是整套教材的起始册。本册教材从儿童的已有经验、生活实际和周围环境要素出发，在卡通人“指南车”的引导下，以认识周围常见现象、事物的特征或性质及学习认识事物的方法为线索，设计了33个丰富有趣的探究活动。教师要引导学生在观察的基础上，通过比较、分类、小制作、小实验等多种形式的探索，学习有关的科学知识，发展观察、描述、比较、分类等认知能力，激发学生的探究兴趣，引导他们关注人与自然的关系，感悟什么是科学，体会技术对生活的影响。

关键词：《科学》一年级教材教学建议人与自然的关系生活实际环境要素探究活动