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灯盏花素通过PXR及CAR对CYP3A4及CYP2C19的影响及其作用机制研究

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灯盏花素通过PXR及CAR对CYP3A4及CYP2C19的影响及其作用机制研究

作者：曹昌娥大理大学

学位级别：硕士

目的:研究灯盏花素对药物代谢酶CYP3A4、CYP2C19及上游调控因子PXR、CAR的转录调节作用,探讨灯盏花素对CYP3A4及CYP2C19的影响及其作用机制。方法:1.采用MTT法检测灯盏花素对Chang liver,Hep G2及Caco-2的细胞毒作用。2.采用RT-q PCR及W... 详细信息

目的:研究灯盏花素对药物代谢酶CYP3A4、CYP2C19及上游调控因子PXR、CAR的转录调节作用,探讨灯盏花素对CYP3A4及CYP2C19的影响及其作用机制。方法:1.采用MTT法检测灯盏花素对Chang liver,Hep G2及Caco-2的细胞毒作用。2.采用RT-q PCR及Western-blot法检测灯盏花素对Chang liver细胞中核受体PXR、CAR及药物代谢酶CYP3A4、CYP2C19 m RNA及蛋白的表达影响。3.采用瞬时转染双荧光报告基因实验检测不同浓度灯盏花素通过PXR、CAR介导CYP3A4及CYP2C19的转录调节作用。结果:***结果表明不同浓度的灯盏花素处理Chang liver细胞24 h、48 h、72 h后对Chang liver细胞的抑制作用呈浓度时间依赖性,随着浓度的增大,抑制效果越明显。其24 h、48 h、72 h的IC50值分别为9768.8、1372.8、1422.8μmol/L;对Hep G2细胞呈高浓度抑制作用,其24 h、48 h、72 h的IC50值分别为:24320.5、30667.7、15586.1μmol/L;对Caco-2细胞的抑制作用呈浓度依赖性,其24 h、48h、72 h的IC50值分别为:11417.0、832.2、1369.2μmol/L。***-q PCR结果表明灯盏花素浓度为160、320μmol/L时对CYP3A4 m RNA的表达呈促进作用,浓度为10、20、40、80μmol/L时对CYP3A4 m RNA的表达呈抑制作用。与对照组相比,给药24 h后,浓度为10、20、40、80μmol/L时CYP3A4m RNA的相对表达量分别降低了0.24(P0.05),0.54(P0.05)、0.61(P0.05)倍;浓度为160、320μmol/L时CYP3A4 m RNA的相对表达量分别增加了0.41、0.19(P>0.05)倍;给药72 h后,浓度为10、20、40、80μmol/L时CYP3A4 m RNA的相对表达量分别降低了0.12(P>0.05)、0.57(P0.05)、0.32(P>0.05)倍;浓度为160、320μmol/L时CYP3A4m RNA的相对表达量分别增加了1.39(P0.05)倍;灯盏花素浓度为160、320μmol/L时对PXR m RNA的表达呈促进作用,浓度为10、20、40、80μmol/L时对PXR m RNA的表达呈抑制作用。给药24 h后,与对照组相比,浓度为10、20、40、80μmol/L时PXR m RNA的相对表达量降低了0.45(P0.05)、0.60(P0.05)倍;给药48 h后,浓度为10、20、40μmol/L时PXR m RNA的相对表达量降低了0.91(P0.05)、1.56(P0.05)倍,浓度为80、160、320μmol/L时PXR m RNA的相对表达量升高了0.46、0.29、0.17(P>0.05)倍;对CYP2C19 m RNA的表达呈不同程度的促进作用。与对照组相比,浓度为10、20、40、80、160、320μmol/L的灯盏花素给药24 h后CYP2C19 m RNA的相对表达量分别升高了0.97、0.75、1.07、0.64、1.65、1.02(P0.05),1.05、2.08、1.91(P<0.01)倍;给药72 h后CYP2C19 m RNA的相对表达量分别升高了2.25、1.47、2.10、2.77、2.24、4.40(P<0.01)倍,表现

关键词：灯盏花素药物代谢酶CYP3A4/CYP2C19 核受体PXR/CAR 作用机制

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云南野生抚育粗茎秦艽药材的品质评价

中国实验方剂学杂志 2013年第21期19卷 82-86页

作者：段宝忠黄林芳尚飞能曹昌娥郑司浩中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 大理学院药学院云南大理671000

目的:研究野生抚育粗茎秦艽药材的有效成分和化学指纹图谱,以期评价其质量,为粗茎秦艽药材的GAP种植提供科学依据。方法:采用Zorbax SB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相甲醇-水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长238 nm,柱温为2... 详细信息

目的:研究野生抚育粗茎秦艽药材的有效成分和化学指纹图谱,以期评价其质量,为粗茎秦艽药材的GAP种植提供科学依据。方法:采用Zorbax SB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相甲醇-水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长238 nm,柱温为25℃。利用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004 A版软件,对15批3年生野生抚育粗茎秦艽药材进行指纹图谱分析。结果:15批粗茎秦艽药材环烯醚萜苷类有效成分及浸出物含量符合2010年版《中华人民共和国药典》要求,各样地药材化学指纹色谱相似度>0.981,质量均一性好。结论:方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,可用于粗茎秦艽药材的质量综合评价。野生抚育模式药材可作为粗茎秦艽主要种植发展模式,对云南建设"云药之乡"和发展道地药材具有重要的现实意义。

关键词：粗茎秦艽野生抚育高效液相色谱指纹图谱品质评价

航速对水下回转体首部流场脉动特征影响的数值分析

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中国造船 2024年第2期65卷 205-215页

作者：孟欣欣周福昌曹留帅万德成上海交通大学船海计算水动力学研究中心(CMHL) 船舶海洋与建筑工程学院上海200240 武汉第二船舶设计研究所武汉430205

针对水下回转体近壁面流动和脉动压力开展研究。首先综述了水下回转体近壁面数值模拟方法的研究现状,然后采用壁面模化大涡模拟方法模拟不同来流速度下水下回转体近壁面的湍流特性和壁面脉动压力,对涡结构、轴向速度和脉动压力等进行分... 详细信息

针对水下回转体近壁面流动和脉动压力开展研究。首先综述了水下回转体近壁面数值模拟方法的研究现状,然后采用壁面模化大涡模拟方法模拟不同来流速度下水下回转体近壁面的湍流特性和壁面脉动压力,对涡结构、轴向速度和脉动压力等进行分析比较,并研究回转体首部湍流特性,最后探究不同入流条件对首部边界层内流动影响的机理。

关键词：水下回转体壁面模化大涡模拟湍流动能壁面脉动压力

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思南历史价值与文化特色的发掘研究

城市发展研究 2024年第1期31卷 26-29页

作者：常光宇胡燕曹昌智山西工程科技职业大学建筑设计学院中国城市科学研究会历史文化名城委员会

保护传承历史文化，只有发掘研究它的价值特色,把握本质内涵，才能获得清晰认知，坚持价值导向，激发保护传承的内在动力。通过对思南县历史文脉耙梳，研读史料文献，揭示厚重的历史文化，彰显重要历史价值和地域民族文化，以期唤起保... 详细信息

保护传承历史文化，只有发掘研究它的价值特色,把握本质内涵，才能获得清晰认知，坚持价值导向，激发保护传承的内在动力。通过对思南县历史文脉耙梳，研读史料文献，揭示厚重的历史文化，彰显重要历史价值和地域民族文化，以期唤起保护传承历史文化的社会意识与热情。

关键词：思南价值特色乌江盐运改土归流多民族文化

常见中药组分对孕烷X受体介导的CYP3A4转录调节机制的研究进展

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中国医院药学杂志 2016年第7期36卷 594-598页

作者：曹昌娥赖泳杜一民大理大学药学与化学学院药理学教研室云南大理671000 大理大学药学与化学学院药理学教研室云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000

目的:近年来中药在临床上的应用日益广泛,但其成分复杂,易导致药物相互作用和不良反应的发生。细胞色素P-450单氧酶3A4(CYP3A4)是细胞色素P450(CYP450)家族成员中一种重要的同工酶,负责体内外很多化合物的氧化代谢,孕烷X受体(PXR)作为CY... 详细信息

目的:近年来中药在临床上的应用日益广泛,但其成分复杂,易导致药物相互作用和不良反应的发生。细胞色素P-450单氧酶3A4(CYP3A4)是细胞色素P450(CYP450)家族成员中一种重要的同工酶,负责体内外很多化合物的氧化代谢,孕烷X受体(PXR)作为CYP3A4的关键转录调节因子,可以调节CYP3A4的活性和表达,CYP3A4的改变被认为是药物发生相互作用和毒性反应的关键,本文将阐述常见中药组分通过PXR介导CYP3A4转录调节的分子机制。

关键词：中药组分 PXR CYP3A4

灯盏花素对肝癌细胞HepG2和结肠癌细胞Caco2的体外抗肿瘤活性筛选

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中国现代医学杂志 2017年第10期27卷 1-5页

作者：曹昌娥赖泳杜一民大理大学药学与化学学院药理学教研室云南大理671000

目的观察灯盏花素对人肝癌细胞(HepG2)和人结肠癌细胞(Caco2)的体外增殖抑制影响。方法以不同浓度的灯盏花素分别处理HepG2和Caco2细胞24、48和72 h后采用MTT法检测灯盏花素对2种细胞活力的影响,以半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI)作... 详细信息

目的观察灯盏花素对人肝癌细胞(HepG2)和人结肠癌细胞(Caco2)的体外增殖抑制影响。方法以不同浓度的灯盏花素分别处理HepG2和Caco2细胞24、48和72 h后采用MTT法检测灯盏花素对2种细胞活力的影响,以半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI)作为评价其抗肿瘤活性及安全性指标。结果灯盏花素对HepG2表现高浓度抑制作用,浓度为20 000μmol/L时,对HepG2细胞24、48和72 h的抑制率分别为37%、63%和69%;对Caco2细胞呈浓度依赖性,浓度为5 000μmol/L时,对Caco2细胞24、48和72 h的抑制率分别为72%、95%和92%。灯盏花素对HepG2 24h的IC50值为24320.5μmol/L;48h的IC50值为30 667.7μmol/L;72 h的IC50值为15 586.1μmol/L。对Caco2细胞24 h的IC50值为11 417.0μmol/L;48 h的IC50值为832.2μmol/L;72 h的IC50值为1 369.2μmol/L。结论灯盏花素对HepG2和Caco2细胞均有不同程度的抑制作用,对Caco2的抑制效果更明显。

关键词：灯盏花素 HepG2细胞 Caco2细胞 MTT法抗肿瘤活性

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生殖医患会话中身份建构的人际语用研究

现代语言学 2024年第7期12卷 187-192页

作者：纪昌娥湖北医药学院卫生管理与卫生事业发展研究中心湖北十堰

本研究以生殖医患会话为语料,从人际语用学的角度探讨会话交际中的身份建构特点。研究发现:医患会话中零称谓语现象超过半数以上,医生和患者在沟通初始就直接进入正题,构建专业的信息提供者和接收者的关系;为了达到追根溯源的目的,患者... 详细信息

本研究以生殖医患会话为语料,从人际语用学的角度探讨会话交际中的身份建构特点。研究发现:医患会话中零称谓语现象超过半数以上,医生和患者在沟通初始就直接进入正题,构建专业的信息提供者和接收者的关系;为了达到追根溯源的目的,患者有时候会对医生的结论表达异议,寻求与医生建立平等合作的关系;医患通过各自的叙事手段达到交际的目的,共同完成人际关系的构建和维护。

关键词：人际语用研究生殖医患会话身份建构

灯盏花素对张氏肝细胞中CYP3A4和CYP2C19的影响和机制

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中国医院药学杂志 2017年第16期37卷 1557-1562页

作者：杨娇曹昌娥赖泳杜一民高洋洋董榆大理大学药学与化学学院药理学教研室云南大理671000 大理大学附属医院心内科云南大理671000

目的:观察灯盏花素对人张氏肝细胞中孕烷X受体(PXR)及细胞色素P450 3A4(CYP3A4)和细胞色素P450 2C19(CYP2C19)mRNA和蛋白表达的影响,初步探讨灯盏花素对CYP3A4和CYP2C19的影响及其作用机制。方法:MTT法检测不同浓度的灯盏花素对张氏肝... 详细信息

目的:观察灯盏花素对人张氏肝细胞中孕烷X受体(PXR)及细胞色素P450 3A4(CYP3A4)和细胞色素P450 2C19(CYP2C19)mRNA和蛋白表达的影响,初步探讨灯盏花素对CYP3A4和CYP2C19的影响及其作用机制。方法:MTT法检测不同浓度的灯盏花素对张氏肝细胞活力的影响;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同浓度灯盏花素对张氏肝细胞中PXR、CYP3A4及CYP2C19 mRNA的表达;采用Western-blot检测不同浓度的灯盏花素对CYP3A4和CYP2C19蛋白的表达影响。结果:MTT结果表明不同浓度的灯盏花素处理张氏肝细胞24 h、48 h后的IC50分别为9 768.8、1 372.8μmol·L^(-1),IC10分别为2 689.2、154.4μmol·L^(-1);RT-qPCR结果表明灯盏花素对CYP3A4和PXR mRNA的影响呈抑制作用,对CYP2C19 mRNA的影响呈不同程度的促进作用;Western-blot结果表明灯盏花素对CYP3A4蛋白的影响呈抑制作用,对CYP2C19蛋白的影响呈促进作用。结论:灯盏花素对CYP3A4的抑制作用可能通过抑制PXR途径;对CYP2C19的促进作用可能不经PXR通路。

关键词：灯盏花素孕烷X受体 CYP3A4 CYP2C19

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凉血平痤膏质量标准研究

亚太传统医药 2023年第9期19卷 73-77页

作者：杨靖符开俊曹昌娥邓祎鲍云惠吕锁忠李梦莹曲靖市中医医院制剂室云南曲靖655000 江苏食品药品职业技术学院江苏淮安223023

目的:建立中药制剂凉血平痤膏的质量标准。方法:采用薄层色谱法对凉血平痤膏中栀子进行定性研究。采用高效液相色谱法测定凉血平痤膏中栀子苷的含量,色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-0.2%磷酸水溶液(10∶90)为流动相,流速... 详细信息

目的:建立中药制剂凉血平痤膏的质量标准。方法:采用薄层色谱法对凉血平痤膏中栀子进行定性研究。采用高效液相色谱法测定凉血平痤膏中栀子苷的含量,色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-0.2%磷酸水溶液(10∶90)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温:40℃,检测波长238 nm,进样量10μL。结果:薄层色谱结果显示,样品和对照品在相同位置显示相同颜色的斑点,斑点清晰,分离效果好且无阴性干扰。凉血平痤膏中栀子苷在20.14825~322.372μg/mL范围内具有良好线性关系,精密度、稳定性(24 h)、重复性试验RSD均小于3.0%,加样回收率为98.20%~101.08%,平均回收率为99.93%,RSD=1.28%。结论:建立了凉血平痤膏中栀子苷的薄层鉴别方法和含量测定方法,该方法简便、准确、重现性好,可为凉血平痤膏的质量控制提供实验依据。

关键词：凉血平痤膏栀子苷薄层色谱法高效液相色谱法质量标准