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应用RAPD和AFLP分析波尔山羊和江苏本地山羊的遗传多样性及其与生长发育和繁殖的关系

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应用RAPD和AFLP分析波尔山羊和江苏本地山羊的遗传多样性及其与生...

作者：曹少先南京农业大学

学位级别：硕士

为了充分发挥波尔山羊优秀的肉用性能和江苏本地山羊耐粗放、适应性强的优点，加快我国肉用山羊新品系的培育，本研究应用AFLP和RAPD技术通过分析共116只波尔山羊、徐淮山羊和海门山羊的遗传多样性，以及RAPD标记与波尔山羊公羊生长 ... 详细信息

为了充分发挥波尔山羊优秀的肉用性能和江苏本地山羊耐粗放、适应性强的优点，加快我国肉用山羊新品系的培育，本研究应用AFLP和RAPD技术通过分析共116只波尔山羊、徐淮山羊和海门山羊的遗传多样性，以及RAPD标记与波尔山羊公羊生长发育、繁殖的关系，旨在：①与RAPD技术对比，探讨AFLP技术在山羊遗传多样性研究方面的优越性;②寻找与波尔山羊体重、体尺相关的RAPD标记，以及与波尔山羊公羊繁殖力相关的RAPD标记，为山羊育种的标记辅助选择和基因定位及作图的研究提供科学依据，实现经济性状的早期选择，加快我国肉用山羊新品系培育进程。③为更好地利用和保护江苏本地山羊种质资源提供理论依据。 1．应用AFLP和RAPD分析波尔山羊、徐淮山羊和海门山羊的遗传多样性实验山羊共105只，采自三个品种，其中60只波尔山羊（采血样20个，组织样40 个，公母羊各半）;30只徐淮山羊（每羊采血样1个，公母羊各半）;15个海门山羊（每羊采血样1个，公羊7个，母羊8个）。分别提取DNA，按品种构建池DNA。应用36 个选择性引物组合对波尔山羊、徐淮山羊和海门山羊种间AFLP多样性进行研究，其中 29个引物组台表现出多态性。29个引物组合共扩增出3253个标记，其中可变标记92 个，平均每个引物组合3.17个，多态频率2.8％。可变标记数较多的引物组合为： E00+ACG/M00+CAC（13个）、E00+ACG/M00+CAG（10个）、E00+AAC/M00+CAC （8个）、E00+AAC/M00+ACT（7个）。从93个随机引物中筛选出品种间多态性较强、重复性好的引物22个。22个引物对三个品种池DNA进行随机扩增，共扩增出183个标记，其中可变标记60个，平均每个引物2.73个，多态频率32.8％。统计表明，两种方法得到一致结果：徐淮山羊与海门山羊遗传距离最近，徐淮山羊与波尔山羊次之，海门山羊与波尔山羊遗传距离最远;按UPGMA法将海门山羊与徐淮山羊聚为一类，其次为波尔山羊。两种方法均能较好地反映三个山羊品种的遗传差异，但AFLP方法可变标记数更多，因而比RAPD方法更高效。 ***标记与波尔山羊体重体尺的关系应用19个波尔山羊个体间多态性较强、重复性好的随机引物对20个5-6月龄的波尔山羊公羊组织样DNA进行扩增，共得到156个标记，其中可变标记47个。t检验表明，OPH07.4、OPH13.6、OPH13.8、OPH15.6、OPE17.4、OPE18.8对断奶重、哺乳期平均日增重有显著影响;OPH05.1、OPH13.6、OPH13.8、OPE18.2对多个体尺性状有显著影响。 ***标记与波尔山羊公羊繁殖性能的关系应用10个波尔山羊个体间多态性较强、重复性好的随机引物对11个波尔山羊公羊精液样DNA进行随机扩增，共得到113个标记，其中可变标记31个。t检验表明， OPN14.3、OPK09.5对平均每次采精量有显著影响;OPK09.5对总采精量有显著影响;应用WD和AFLP分析波尔山羊和江苏本地山羊的邀传多样性及其与生长发育和繁殖的关系 OPH．5对冻后活力有显著影响。

关键词：波尔山羊徐淮山羊海门山羊 AFLP RAPD

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影响基因疫苗免疫效果的因素

中国免疫学杂志 2004年第5期20卷 360-362,366页

作者：茆达干杨利国曹少先南京农业大学动物繁育研究所南京210095

基因免疫,即把外源目的基因克隆到真核表达载体,然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体的免疫系统,引发免疫反应.Wolff等(1990年)发现小鼠的骨骼肌细胞能捕获含外源基因的质粒并表达外源基... 详细信息

基因免疫,即把外源目的基因克隆到真核表达载体,然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体的免疫系统,引发免疫反应.Wolff等(1990年)发现小鼠的骨骼肌细胞能捕获含外源基因的质粒并表达外源基因,首次提出了基因免疫的概念[1].……

关键词：影响因素基因疫苗免疫效果类型抗体抗原

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卵泡抑制素与乙肝表面抗原融合基因表达质粒的构建及表达

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中国免疫学杂志 2003年第11期19卷 775-778页

作者：茆达干杨利国曹少先张志杰何晓红南京农业大学动物繁育研究所南京210095

目的 :构建高免疫原性的抑制素真核表达载体。方法 :通过PCR扩增pCMV S基因中的S基因片段 ,然后将抑制素α(1 32 )片段与S的融合基因克隆到真核表达质粒pcDNA13.1( ) :酶切、测序鉴定后 ,采用脂质体包裹法将重组质粒转染Hela细胞 ,用SDS... 详细信息

目的 :构建高免疫原性的抑制素真核表达载体。方法 :通过PCR扩增pCMV S基因中的S基因片段 ,然后将抑制素α(1 32 )片段与S的融合基因克隆到真核表达质粒pcDNA13.1( ) :酶切、测序鉴定后 ,采用脂质体包裹法将重组质粒转染Hela细胞 ,用SDS PAGE和ELISA对其表达产物进行检测。用抑制素融合表达质粒免疫大白鼠 ,ELISA检测血中抗抑制素抗体水平。结果 :酶切鉴定和序列分析表明 ,融合基因的表达质粒pClS构建成功。表达质粒在HeLa细胞中获得了表达 ,融合蛋白的分子量约为 2 9kD ,融合蛋白具有抑制素免疫原性。重组质粒免疫使大白鼠产生了抗抑制素抗体。结论 :高免疫原性的抑制素表达质粒的构建为利用抑制素基因免疫技术诱导单胎动物生多胎奠定了基础。

关键词：卵泡抑制素乙肝表面抗原基因克隆基因表达表达质粒真核表达载体

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杜湖杂交羊与湖羊肉用和皮用性能的比较

江苏农业科学 2016年第10期44卷 291-292,297页

作者：曹少先孟春花苏磊陈玲刘铁铮江苏省农业科学院畜牧研究所江苏南京210014 江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室江苏南京210014 江苏省苏州市种羊场江苏苏州215000

为了较全面地了解杜泊绵羊（♂）与湖羊（♀）杂交的效果,对杜湖杂一代羊和湖羊的肉用、皮用性能指标进行比较。结果表明,杜湖杂一代羊4月龄体质量、2-4月龄内日增质量均显著高于湖羊,分别提高了26.86%、27.07%;杜湖杂交一代羊宰前活质... 详细信息

为了较全面地了解杜泊绵羊（♂）与湖羊（♀）杂交的效果,对杜湖杂一代羊和湖羊的肉用、皮用性能指标进行比较。结果表明,杜湖杂一代羊4月龄体质量、2-4月龄内日增质量均显著高于湖羊,分别提高了26.86%、27.07%;杜湖杂交一代羊宰前活质量、胴体质量、屠宰率、净肉质量、净肉率均显著高于湖羊;杜湖杂交一代羊颈部、腹部和腿部真皮层厚度亦显著高于湖羊,分别提高了54.55%、53.23%、105.71%;杜湖杂交一代皮肤毛囊密度和每一囊群内毛囊数均低于湖羊。杜湖杂交一代羊生长速度、屠宰性能、板皮质量较湖羊均有显著提高,而毛皮质量有所下降。

关键词：杜湖杂交羊湖羊生长屠宰性能板皮厚度毛囊密度肉用性能皮用性能

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