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小麦基因枪遗传转化技术体系的建立及叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT的转化

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小麦基因枪遗传转化技术体系的建立及叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT...

作者：曹团武西北农林科技大学

学位级别：硕士

在农业上,利用优良品种提高植物产量是经济可行的措施。目前,我国生产上种植的一些小麦品种(品系)和育种上用的一些材料,叶片过早衰老是一个不容忽视的问题,严重的制约着品种产量潜力的发挥和新品种的选育。细胞分裂素具有延缓植物细胞... 详细信息

在农业上,利用优良品种提高植物产量是经济可行的措施。目前,我国生产上种植的一些小麦品种(品系)和育种上用的一些材料,叶片过早衰老是一个不容忽视的问题,严重的制约着品种产量潜力的发挥和新品种的选育。细胞分裂素具有延缓植物细胞和组织衰老的特性。运用先进的分子生物学手段---植物遗传转化即转基因技术进行小麦分子育种,为作物品种早衰特性的改良提供了一个新途径。Gan 和Amasino 构建的叶片衰老抑制基因P-IPT 导入烟草和水稻后,明显的延缓叶片衰老并提高作物产量。本试验利用基因枪法和花粉管通道法两种植物遗传转化技术,将叶片衰老抑制基因P-IPT 导入有早衰现象的小麦品系9848,获得转基因植株。通过对基因枪法转化受体系统的建立和两种转化法的深入研究,初步建立起了一套完整的小麦转基因技术体系。主要研究结果如下: 1.普通小麦基因转化中良好受体系统的建立对影响小麦幼胚愈伤组织高频率再分化的条件进行了研究。结果表明,暗培养条件下诱导的小麦幼胚愈伤组织的再分化频率明显高于散光和2000Lx 光照条件,大田生长的小麦比温室盆栽小麦的幼胚脱分化和再分化频率高;小麦主茎穗部的幼胚组织脱分化和再分化特性显著高于小麦分蘖茎穗部的幼胚组织;不同年份、不同胚龄幼胚组织的脱分化和再分化特性有一定差异。在最适的胚龄条件下,基因型对小麦幼胚出愈率影响不大,而主要影响胚性愈伤组织的发生频率;KT 能显著促进小麦幼胚胚性愈伤组织的高频诱导及再生,在KT 为0.5mg/L 时胚性愈伤组织诱导率最高,而在KT 为0.3mg/L 时胚性愈伤组织再生率最高;在附加KT 1.5mg/L 和NAA 0.5mg/L 的MS 培养基上,胚性愈伤组织再生率最高。 2. 基因枪转化的影响因素研究用PDS-1000/He 型基因枪将抑制叶片衰老基因PSAG12-IPT 转入小麦幼胚和愈伤组织中,通过对报告基因GUS 瞬时表达的检测,研究了金粉用量、质粒DNA 用量及轰击次数对转化率的影响。结果表明:金粉用量对幼胚和愈伤组织瞬时表达率影响不大,但随金粉用量的增加,细胞瞬时表达率明显提高;质粒DNA 用量以每枪2.0ug 为最佳;轰击两枪幼胚和细胞瞬时表达率明显高于轰击一枪。随着愈伤组织培养时间的延长,GUS基因瞬时表达明显下降趋势,在第28 天以后农趋于稳定。GUS 基因瞬时表达检测应在24 小时内,GUS 基因稳定表达应在28 天后。首次对经GUS 染色后的幼胚和愈伤组织

关键词：小麦 PSAG12-IPT 基因枪法花粉管通道法转基因植株

利福霉素类抗生素-Cu(Ⅱ)-核酸体系的RRS光谱研究

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化学学报 2008年第19期66卷 2131-2137页

作者：杨季冬曹团武刘绍璞西南大学化学化工学院重庆400715 长江师范学院化学系重庆408003

在Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中,利福霉素类药物与ctDNA反应的适宜的pH范围是1.9～2.1.此类药物本身有微弱RRS峰,它们具有相似的光谱特征,其散射峰均在290和370nm附近;而ctDNA的RRS峰在310nm处.两者反应形成结合产物后其RRS明显增强... 详细信息

在Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中,利福霉素类药物与ctDNA反应的适宜的pH范围是1.9～2.1.此类药物本身有微弱RRS峰,它们具有相似的光谱特征,其散射峰均在290和370nm附近;而ctDNA的RRS峰在310nm处.两者反应形成结合产物后其RRS明显增强,并在375nm左右出现最大散射峰,且有不同程度的红移和散射增强,说明两者结合成新的产物;加入Cu2+离子后,Cu2+与利福霉素抗生素及DNA形成三元复合物,此时将导致RRS进一步剧增,而且RRS光谱增强值与DNA浓度呈正比,因而可用于DNA测定具有较高的灵敏度,实验对ctDNA的检出限为9.7ng/mL(RFSV-Cu2+-ctDNA体系).文中研究了三元配合物反应的适宜条件和影响因素,基于此反应发展了一种用RRS技术测定DNA的新方法.

关键词：共振Rayleigh散射核酸利福霉素类药物氯化铜

微波促进I2催化吲哚3-硒氰酸化制备3-硒氰酸吲哚衍生物

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有机化学 2020年第5期40卷 1384-1387页

作者：吴燕田仙芝张海玲陈睿曹团武长江师范学院化学化工学院无机特种材料重庆市重点实验室涪陵408000

3-硒氰酸吲哚衍生物由于良好的生物活性,在药物研究方面具有潜在的应用价值.目前,关于3-硒氰酸吲哚的制备方法存在一定的不足,如反应条件苛刻、产率较低、底物适用性较差等.采用微波促进I2催化吲哚与硒氰酸钾的反应,制备了一系列3-硒氰... 详细信息

3-硒氰酸吲哚衍生物由于良好的生物活性,在药物研究方面具有潜在的应用价值.目前,关于3-硒氰酸吲哚的制备方法存在一定的不足,如反应条件苛刻、产率较低、底物适用性较差等.采用微波促进I2催化吲哚与硒氰酸钾的反应,制备了一系列3-硒氰酸吲哚衍生物.与已有方法相比,本方法具有反应速率快、产率高、原子经济性好等优点,为3-硒氰酸吲哚衍生物的制备提供高效的路径.

关键词：微波辅助反应碘催化硒氰酸化 3-硒氰酸吲哚吲哚衍生物硒氰酸钾

光谱法和分子对接研究哈巴俄苷与牛血清白蛋白的相互作用机制

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中国中药杂志 2018年第5期43卷 993-1000页

作者：曹团武黄文兵时建伟贺薇长江师范学院化学化工学院武陵山天然药物研究与开发实验室

综合利用二维和三维荧光光谱、同步荧光光谱、紫外光谱以及分子模拟等方法，研究了哈巴俄苷（harpagoside，HAR）与牛血清白蛋白（bovineselallnalbumin，BSA）的相互作用机制。结果表明，HAR有规律的使BSA内源荧光猝灭，猝灭机制属于... 详细信息

综合利用二维和三维荧光光谱、同步荧光光谱、紫外光谱以及分子模拟等方法，研究了哈巴俄苷（harpagoside，HAR）与牛血清白蛋白（bovineselallnalbumin，BSA）的相互作用机制。结果表明，HAR有规律的使BSA内源荧光猝灭，猝灭机制属于静态猝灭；两者结合常数巧均大于1×10^5L·mol^-1，结合位点数n接近于1．由HAR与BSA相互作用的热力学参数AG，△H和S均小于0可知，两者结合过程是自发进行的，结合的主要作用力是氢键和范德华力。根据Ftirster非辐射转移理论，计算了不同条件下HAR与BSA的结合距离r为2．80nm，说明两者结合过程发生了非辐射能量转移。同步荧光光谱和三维荧光光谱表明，HAR使BSA的色氨酸和酪氨酸残基所处的微环境极性增强、疏水性减弱，并导致BSA二级结构发生了改变。分子模拟结果显示，HAR更倾向于于BSA和HSA的亚结构域ⅡA（SiteⅠ位点）结合。

关键词：哈巴俄苷牛血清白蛋白荧光光谱结合反应分子模拟

中药金钱草种质资源的ISSR遗传多样性研究

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中国药学杂志 2015年第15期50卷 1277-1281页

作者：任风鸣金江群焦雁翔刘燕琴刘杰刘艳李娜曹团武胡开治重庆市药物种植研究所重庆408435 长江师范学院重庆408100

目的采用ISSR分子标记对来自36个不同产地金钱草种质资源的遗传多样性进行分析。方法从45条ISSR引物中筛选出10条进行PCR扩增，扩增产物经1．5％琼脂糖凝胶电泳检测，扩增结果采用POPGENE32软件进行遗传参数统计分析，采用NTSYS2．10软... 详细信息

目的采用ISSR分子标记对来自36个不同产地金钱草种质资源的遗传多样性进行分析。方法从45条ISSR引物中筛选出10条进行PCR扩增，扩增产物经1．5％琼脂糖凝胶电泳检测，扩增结果采用POPGENE32软件进行遗传参数统计分析，采用NTSYS2．10软件UPGMA法进行亲缘关系聚类分析，构建聚类图。结果10条引物共扩增出91个位点，其中80个为多态性位点，总多态位点百分率（PBB）87．91％；观测等位基因数（Na）1．8791，有效等位基因数（Ne）1．3817；Nei’S遗传多样性指数（He）0．2390，Shannon信息指数（I）0．3745。36份供试材料遗传相似系数变化范围为0．69—0．97。在相似系数为0．76时可将36份样品分为6类。聚类结果显示，较小地理范围内的样品亲缘关系较近，在聚类图上聚为一类；而通过聚类分析不能严格的将来自不同产地的样品区分开。结论金钱草种质资源具有较为丰富的遗传多样性，基于ISSR划分的组群与地理分布没有明显相关性。

关键词：金钱草 ISSR 种质资源遗传多样性

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卡马西平与牛血清白蛋白的相互作用

华西药学杂志 2008年第4期23卷 419-421页

作者：曹团武杨季冬蔡思彬长江师范学院化学及环境科学系重庆408003

目的研究卡马西平(CBZ)与牛血清白蛋白(BSA)在缓冲溶液中、不同温度下的相互作用。方法采用荧光光谱法和紫外光谱法。结果运用荧光猝灭双倒数图计算在不同条件下二者的结合常数KA;根据F rster非辐射能量转移理论,求出37℃时给体(BSA)和... 详细信息

目的研究卡马西平(CBZ)与牛血清白蛋白(BSA)在缓冲溶液中、不同温度下的相互作用。方法采用荧光光谱法和紫外光谱法。结果运用荧光猝灭双倒数图计算在不同条件下二者的结合常数KA;根据F rster非辐射能量转移理论,求出37℃时给体(BSA)和受体(CBZ)之间能量转移的效率和结合距离;并根据热力学参数确定了CBZ和BSA之间的作用力类型。结论CBZ和BSA之间有较强的相互作用,以疏水作用力为主。同步荧光技术表明,CBZ对BSA的构象有影响。

关键词：卡马西平牛血清白蛋白荧光法相互作用

丽江獐牙菜化学成分及抗乙肝病毒活性研究(英文)

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中国中药杂志 2015年第5期40卷 897-902页

作者：曹团武耿长安马云保何康周宁家周俊张雪梅陈纪军中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源可持续利用国家重点实验室云南昆明650204

利用各种色谱方法对丽江獐牙菜Swertia delavayi全草的化学成分进行提取、分离和纯化,得到15个单体化合物,通过波谱数据分析（MS,1H,13C-NMR）对其结构进行鉴定,分别为红白金花内酯（erythrocentaurin,1）、红白金花内酯缩二甲醇（eryth... 详细信息

利用各种色谱方法对丽江獐牙菜Swertia delavayi全草的化学成分进行提取、分离和纯化,得到15个单体化合物,通过波谱数据分析（MS,1H,13C-NMR）对其结构进行鉴定,分别为红白金花内酯（erythrocentaurin,1）、红白金花内酯缩二甲醇（erythrocentaurin dimethylacetal,2）、獐牙菜苷（sweroside,3）、獐牙菜苦苷（swertiamarin,4）、龙胆苦苷（gentiopicroside,5）、贵州獐牙菜苷A（swertiakoside A,6）、2＇-O-乙酰基獐牙菜（2＇-O-acetylswertiamarin,7）、4＇-O-[（Z）-对香豆酰基]獐牙菜苦苷（4＇-O-[（Z）-coumaroyl]-swertiamarin,8）、1,5,8-三羟基-3-甲氧基酮（1,5,8-trihydroxy-3-methoxyxanthone,9）、8-O-β-D-吡喃葡萄糖-1-羟基-2,3,5-三甲基酮（8-O-β-D-glucopyranosyl-1-hydroxy-2,3,5-trimethoxyxanthone,10）、8-O-[β-D-吡喃木糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖]-1羟基-2,3,5-三甲氧基酮（8-O-[β-D-xylopyranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranosyl]-1-hydroxy-2,3,5-methoxyxanthone,11）、异牡荆素（isovitexin,12）、齐墩果酸（oleanolic acid,13）、β-谷甾醇（β-sitosterol,14）和胡萝卜苷（daucosterol,15）,其中化合物1~4,7~11,13是首次从丽江獐牙菜中分离得到。在体外利用Hep G 2.2.15细胞系对得到的单体化合物进行了抗乙肝病毒活性测试,其中化合物1,2,6,7,9和12具有明显的抑制HBV DNV的复制活性,其IC50值为0.05~1.46 mmol·L-1。

关键词：龙胆科丽江獐牙菜化学成分抗乙肝病毒活性

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辣椒黄酮苷A的化学结构

中国中药杂志 2013年第12期38卷 1934-1937页

作者：陈慧鑫耿长安曹团武张雪梅马云保黄晓燕陈纪军中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室云南昆明650201 中国科学院大学北京100039

该文对辣椒Capsicum annuum果实进行化学成分研究,采用多种色谱技术(硅胶,Sephadex LH-20,MCI GELCHP-20P,HPLC等)分离纯化,根据波谱学数据(UV,IR,MS,1D-和2D-NMR)进行结构鉴定。从辣椒果实中分离得到5个化合物,结构分别鉴定为辣椒黄酮... 详细信息

该文对辣椒Capsicum annuum果实进行化学成分研究,采用多种色谱技术(硅胶,Sephadex LH-20,MCI GELCHP-20P,HPLC等)分离纯化,根据波谱学数据(UV,IR,MS,1D-和2D-NMR)进行结构鉴定。从辣椒果实中分离得到5个化合物,结构分别鉴定为辣椒黄酮苷A(1),尿苷(2),腺苷(3),7-羟基-6-甲氧基桂皮酸乙酯(4)和7-羟基桂皮酸乙酯(5)。其中,化合物1为新化合物,其化学结构为木犀草素-7-O-[2″-O-(5'''-O-芥子酰基)-β-D-芹糖]-β-D-葡萄糖苷,命名为辣椒黄酮苷A。化合物2～5为首次从该植物中分离得到。

关键词：辣椒黄酮苷A 黄酮苷辣椒果实茄科

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芦荟试管微克隆繁育中芽增殖体系的建立

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2002年第6期30卷 107-109页

作者：宋运贤陈耀锋傅建熙郭东伟任惠莉曹团武高蓝西北农林科技大学农学院细胞工程实验室陕西杨陵712100 西北农林科技大学生命科学学院陕西杨陵712100

　研究了库拉索芦荟茎尖组织、叶盘组织和茎盘组织的离体培养特性,发现芦荟茎尖组织芽增殖效率较低,叶盘组织无再生能力,而茎盘组织是芦荟试管克隆芽增殖系建立的最佳外植体。利用茎盘组织建立微克隆增殖系与茎盘组织在茎段上的位置有关... 详细信息

　研究了库拉索芦荟茎尖组织、叶盘组织和茎盘组织的离体培养特性,发现芦荟茎尖组织芽增殖效率较低,叶盘组织无再生能力,而茎盘组织是芦荟试管克隆芽增殖系建立的最佳外植体。利用茎盘组织建立微克隆增殖系与茎盘组织在茎段上的位置有关,库拉索短宿茎的中部茎段不定芽形成能力最强。细胞分裂素是诱导库拉索芦荟芽增殖的主要激素,但质量浓度过高,不定芽生长弱,玻璃化现象严重。1.0mg/L6-BA,1.5mg/LKT和0.5mg/LNAA组合的MB培养基(该培养基由MS培养基大量元素、微量元素、铁盐,B5培养基的有机物质构成)是库拉索芦荟试管苗增殖的最佳培养基。

关键词：芦荟试管微克隆繁育芽增殖体系组织培养