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本研究发现一个在干旱胁迫下高表达的基因NtDUF868-E5,它属于未知功能结构域（Domian of unknown function,DUF）868蛋白家族成员。烟草中的DUF868基因家族尚未被分析。因此,首先从中国烟草基因组数据库中搜索并下载普通烟草栽培品种‘红花大金元’、林烟草和绒毛状烟草DUF868家族成员序列,对DUF868家族的系统发育关系、基因结构、保守结构域、染色体定位、基因重复性、启动子顺式作用元件、mi RNA靶基因、蛋白质三维结构、时空表达模式及生物与非生物胁迫下的表达模式进行了详细分析。发现NtDUF868-E5在干旱及其他生物和非生物胁迫中均被强烈诱导。在此基础上,构建了NtDUF868-E5基因的过表达和基因编辑载体,通过叶盘法转化烟草,成功获得了转基因阳性植株,并对阳性植株的表型、色素含量、角质层和叶片厚度以及抗旱性进行了深入分析,结合多组学,包括转录组、代谢组和蜡质组联合分析,明确了NtDUF868-E5基因在调控耐旱性方面的功能及其调控网络。主要研究结果如下:1.烟草DUF868家族基因的鉴定与分析:分别从普通烟草栽培品种‘红花大金元’、林烟草和绒毛状烟草基因组中鉴定出25、12和11个DUF868家族成员。基于系统发育关系,将DUF868家族成员分为五个组（A-E）,并根据分组名称对该家族成员命名。基因结构分析发现,除3个DUF868基因外,其余45个（93.75%）烟草DUF868基因均不含内含子。motif分析表明,相同分组的DUF868蛋白具有类似的motif基序,motif 1和motif 7在所有分组中都存在,而有些motif仅在特定分组中存在,这表明功能的重要性。染色体定位结果表明,‘红花大金元’的1号、3号和8号染色体上含2个NtDUF868基因,2、7、9、10、11、12、14、21和24号染色体上仅定位到1个NtDUF868基因,其余10个在scaffolds上;基因重复分析结果显示,烟草NtDUF868家族基因有2个串联重复基因对,24个片段重复基因对,在进化过程中片段重复是烟草DUF868家族扩张的主要原因;NtDUF868家族基因的启动子中含有多种与光反应、激素和非生物胁迫响应以及植物生长发育相关的顺式作用元件;进一步采用芯片数据、RNA-seq以及实时荧光定量PCR分析表明,NtDUF868家族基因在不同生育时期和部位具有组织和时空表达特异性,并对激素（ABA、IAA、Me JA和GA）、非生物胁迫（干旱、盐、高温和冷）和生物胁迫（黑胫病和青枯病）处理以及不同光照强度(50、100和200μmol m-2 s-1)有不同的响应。***868-E5基因的过表达与敲除的创制及生理生化指标分析:采用in-fusion和CRISPR/Cas9基因编辑方法分别构建了NtDUF868-E5基因的过表达和基因编辑载体,通过农杆菌介导法转化烟草,经抗性筛选、PCR阳性鉴定以及对敲除株系进行测序鉴定,成功获得了过表达（OE）和敲除（CAS）NtDUF868-E5基因的转基因阳性植株。与野生型和敲除株系相比,过表达NtDUF868-E5基因的烟草长势较好,叶片角质层相对较厚,色素含量等显著升高。***868-E5基因的抗旱功能验证:为了验证NtDUF868-E5基因的抗旱功能,首先将NtDUF868-E5在酵母中异源表达,发现该基因提高了酵母在干旱条件下的存活力。随后,对生长至6片真叶的野生型烟草品种、过表达和敲除NtDUF868-E5基因的烟草植株进行了自然干旱处理2周。结果显示,干旱处理后,过表达NtDUF868-E5基因的株系萎蔫程度较低、叶片相对含水量降低较少,根系发育相对较好;叶片光合能力较强,叶绿素含量、净光合速率、抗氧化酶活性和游离脯氨酸显著高于野生型和敲除株系;而相对电导率、丙二醛（MDA）、H2O2和O2·-的含量显著低于野生型和敲除株系。过表达NtDUF868-E5基因的烟草植株通过降低叶面温度、气孔导度、蒸腾速率、气孔开放率和气孔孔径,降低了叶片的失水能力;这些结果表明,过表达NtDUF868-E5基因可以提高烟草植株对干旱胁迫的抵抗能力,而敲除该基因烟草抗旱性降低。4.干旱处理后的烟草叶片多组学分析:转录组分析结果表明,在OE vs CAS、CAS vs WT和OE vs WT比较组分别有4583个、2632个和3128个差异表达基因（DEGs）,与Ca2+和ABA信号途径相关DEGs,例如钙依赖性蛋白激酶（CDPK）、钙调蛋白B样蛋白（CBL）、钙结合蛋白（CBP）、CBL相互作用蛋白激酶（CIPK）、类钙调蛋白（CML）、谷氨酸受体（GLR）和呼吸爆发氧化酶同源蛋白（Rboh）等在不同株系中呈现差异表达。与光合作用相关的

关键词：烟草 NtDUF868-E5 生物信息学基因表达模式抗旱性蜡质

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歌剧《费加罗的婚礼》中阿尔玛维瓦伯爵角色塑造和演唱分析

歌剧《费加罗的婚礼》中阿尔玛维瓦伯爵角色塑造和演唱分析

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作者：曹子俊河北大学

学位级别：硕士

莫扎特创作了诸多经典歌剧,歌剧《费加罗的婚礼》便是其中之一。歌剧描绘了十八世纪欧洲社会封建专制的真实景象,是第三阶级平民百姓担纲主角的首次尝试。歌剧脚本改编自法国启蒙运动时期戏剧作家博马舍同名小说,内容虽为反对封建的严... 详细信息

莫扎特创作了诸多经典歌剧,歌剧《费加罗的婚礼》便是其中之一。歌剧描绘了十八世纪欧洲社会封建专制的真实景象,是第三阶级平民百姓担纲主角的首次尝试。歌剧脚本改编自法国启蒙运动时期戏剧作家博马舍同名小说,内容虽为反对封建的严肃主题,却极富强烈张力的喜剧效果。本文以追溯、探求歌剧《费加罗的婚礼》中阿尔玛维瓦的角色塑造和演唱分析为研究目的,将全文划分成三个部分。其中,第一部分主要从创作背景的角度,对戏剧剧本和歌剧脚本进行分析,并概述《费加罗的婚礼》的剧情;第二部分针对歌剧人物阿尔玛维瓦伯爵的音乐形象和戏剧形象展开分析,从戏剧文本发展的角度看伯爵人物性格的嬗变,从整部歌剧宏观的角度总结伯爵角色塑造;第三部分对伯爵音乐唱段进行演唱分析,总结戏剧男中音的演唱技巧、风格,将人物角色塑造置于演唱实践中,以提高舞台演绎与角色塑造能力。通过研究,笔者深刻体会到只有对歌剧中的角色进行全方位分析,才能在演唱中投入感情、融入角色,进而游刃有余地演唱作品,也希望为更多演唱者提供一定的借鉴和参考。

关键词：费加罗的婚礼阿尔玛维瓦伯爵音乐形象演唱分析

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基于有限元法的涡流检测数值仿真

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无损检测 2002年第6期24卷 231-233,243页

作者：游凤荷曹令俊陈铁群武汉理工大学武汉430070

用有限单元法数值仿真涡流信号 ,并采用现代科学可视化技术中常用的彩色云图法来显示有限元计算结果。利用该方法对渗碳试件表面硬化截面分布进行了简洁。

关键词：涡流检验有限元法仿真彩色云图法可视化技术

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两倍的青藏高原蒸散发增长速率

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Science Bulletin 2024年第12期69卷 1980-1990页

作者：陈学龙袁令马耀明陈德亮 Bob Su 曹殿斌 Land-Atmosphere Interaction and Its Climatic Effects Group State Key Laboratory of Tibetan Plateau Earth SystemEnvironment and Resources(TPESER)Institute of Tibetan Plateau ResearchChinese Academy of SciencesBeijing 100101China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China College of Atmospheric Science Lanzhou UniversityLanzhou 730000China National Observation and Research Station for Qomolongma Special Atmospheric Processes and Environmental Changes Dingri 858200China Kathmandu Center of Research and Education Chinese Academy of SciencesBeijing 100101China China-Pakistan Joint Research Center on Earth Sciences Chinese Academy of SciencesIslamabad 45320Pakistan Regional Climate Group Department of Earth ScienceUniversity of GothenburgGothenburg 40530Sweden Faculty of Geo-Information Science and Earth Observation University of TwenteEnschede 7500AEthe Netherlands School of Environmental Science and Engineering Chang’an UniversityXi’an 710064China

Estimation of evapotranspiration(ET_(a))change on the Tibetan Plateau(TP)is essential to address the water requirement of billions of people surrounding the *** studies have shown that ET_(a)estimations on the TP have a very large *** this article,we discuss how to more accurately quantify ET_(a)amount and explain its change on the ***_(a)change on the TP can be quantified and explained based on an ensemble mean product from climate model simulations,reanalysis,as well as ground-based and satellite ***_(a)on the TP experienced a significant increasing trend of around 8.4±2.2 mm(10 a)^(-1)(mean±one standard deviation)during 1982–2018,approximately twice the rate of the global land ET_(a)(4.3±2.1 mm(10 a)^(-1)).Numerical attribution analysis revealed that a 53.8%TP area with the increased ET_(a)was caused by increased temperature and 23.1%part was due to soil moisture rising,because of the warming,melting cryosphere,and increased *** projected future increase in ET_(a)is expected to cause a continued acceleration of the water cycle until 2100.

关键词： Evapotranspiration Global warming Water cycle Tibetan Plateau

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