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两种遗传工程小鼠的检测、鉴定与种质保存方法的研究

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两种遗传工程小鼠的检测、鉴定与种质保存方法的研究

作者：曲玉秀南京农业大学

学位级别：硕士

本文针对上海转基因研究中心现存的Neo转基因小鼠与人源化IgM抗体五特征小鼠各自的特点分别进行了相应的检测、鉴定保种研究;并进行了普通小鼠不同阶段胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究。一、纯合子Neo转基因小鼠的品系建立及鉴定 ... 详细信息

本文针对上海转基因研究中心现存的Neo转基因小鼠与人源化IgM抗体五特征小鼠各自的特点分别进行了相应的检测、鉴定保种研究;并进行了普通小鼠不同阶段胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究。一、纯合子Neo转基因小鼠的品系建立及鉴定通过胚胎移植的生物净化方法获得10只清洁级F小鼠，经检测其中5只为整合阳性。采用全同胞交配方式对转基因小鼠进行繁育，经PCR、Southern blot杂交和交配实验检测相结合的方法，选育出4只纯合子，并建系。验证了由该杂合转基因小鼠胎儿制备的成纤维细胞具有G418抗性，可作为ES细胞培养中的饲养层细胞。由上述研究说明，通过遗传学和微生物学上对Neo转基因小鼠的质量控制，使Neo转基因小鼠达到了清洁级，并以纯合子状态保存。二、人源化IgM抗体五特征小鼠的生物学特征研究对由英国Babraham实验室引进的人源化IgM五特征小鼠分别从繁育学和免疫学方面进行了生物学特性的研究。结果表明，繁殖性能：五特征小鼠的初怀周龄为6-8周;窝产仔数、离乳数，雄性比例在不同窝间的差异显著，平均分别为5.6只、5.0只、56.0％;繁育母鼠的产仔数、离乳数在头4胎均随胎次增加而提高，4胎以后繁育能力下降;平均胎间距在不同胎次间的差异并不显著，平均为29.1天。生长发育状况：通过对29只雌鼠，34只雄鼠自出生起至9周龄，每周在同一时间进行体重称量，得出同一周龄的五特征小鼠在3周龄断奶后雄鼠生长的比雌鼠快，且差异极显著。免疫学方面的研究：对五特征小鼠血清中的IgM进行了定性和定量检测，结果表明，血清中含有人源IgM且人源IgM含量高于鼠源IgM;通过对同窝的4只雄鼠的6-11周龄血清中人源IgM含量进行测定，得出同一周龄的不同个体间的血清中人源IgM含量存在显著差异，并随鼠龄的增加而提高;经血管内皮生长因子(VEGF)抗原免疫后，五特征小鼠血清中的人源IgM含量增加，且随免疫次数增加，含量提高。三、小鼠不同阶段胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究采用玻璃化冷冻法对ICR、C57BL／6、DBA*C57BL／6杂交F1代三种品系小鼠的不同阶段胚胎进行冷冻保存，比较胚胎解冻后形态良好率、体外发育率和移植后的出生率，结果表明解冻后各品系小鼠胚胎从2细胞到桑椹胚形态良好率在75％以上，其中8细胞胚胎形态良好率在83％以上，而囊胚的形态良好率仅在40％左右。解冻后胚胎体外培养的发育率随胚胎发育阶段的提高而提高，桑椹胚的发育达93％以上。体外受精2细胞冷冻胚与体内受精2细胞冷冻胚比较，二者形态良好率差异无显著意义(74％：两种遗传工程小鼠的检测、鉴定与种质保存方法的研究 75％)，但体内受精冷冻胚的发育率显著高子体外受精冷冻胚门纷：40儿 p功．01);胚胎经过三次反复冻融后形态良好率无显著差异;冷冻2细胞胚移植后的受孕率与仔鼠出生率分别达64％和40％，但均低于新鲜2细胞胚胎。

关键词： Neor转基因小鼠人源化五特征小鼠检测、鉴定小鼠胚胎玻璃化冷冻保存

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小鼠不同阶段胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究

实验生物学报 2003年第4期36卷 279-282页

作者：连安曲玉秀黄裕香马炜炜汤家铭成国祥上海转基因研究中心上海201203

采用玻璃化冷冻法对ICR、C57BL/6、DBA*C57BL/6杂交F1代三种品系小鼠的不同阶段胚胎进行冷冻保存,比较胚胎解冻后形态良好率、体外发育率和移植后的出生率,结果表明解冻后各品系小鼠胚胎从2细胞到桑椹胚形态良好率在75%以上,其中8细胞... 详细信息

采用玻璃化冷冻法对ICR、C57BL/6、DBA*C57BL/6杂交F1代三种品系小鼠的不同阶段胚胎进行冷冻保存,比较胚胎解冻后形态良好率、体外发育率和移植后的出生率,结果表明解冻后各品系小鼠胚胎从2细胞到桑椹胚形态良好率在75%以上,其中8细胞胚胎形态良好率在83%以上,而囊胚的形态良好率仅在40%左右.解冻后胚胎体外培养的发育率随胚胎发育阶段的提高而提高,桑椹胚的发育达93%以上.体外受精2细胞冷冻胚与体内受精2细胞冷冻胚比较,二者形态良好率差异无显著意义(74%:75%),但体内受精冷冻胚的发育率明显高于体外受精冷冻胚(76%:40%,p＜0.01);胚胎经过三次反复冻融后形态良好率无显著差别;冷冻2细胞胚移植后的受孕率与仔鼠出生率分别达64%和40%,但均低于新鲜2细胞胚.

关键词：小鼠胚胎玻璃化冷冻保存体外受精胚胎移植

新形势下发挥高校党外代表人士民主监督作用研究

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新校园（上旬刊） 2015年第1期 129-130页

作者：曲秀玉鲁东大学党委统战部

党的十八大报告提出：“健全权力运行制约和监督体系。坚持用制度管权管事管人，保障人民知情权、参与权、表达权、监督权……加强党内监督、民主监督、法律监督、舆论监督，让人民监督权力，让权力在阳光下运行。”“完善基层民主制度... 详细信息

党的十八大报告提出：“健全权力运行制约和监督体系。坚持用制度管权管事管人，保障人民知情权、参与权、表达权、监督权……加强党内监督、民主监督、法律监督、舆论监督，让人民监督权力，让权力在阳光下运行。”“完善基层民主制度……保障职工参与管理和监督的民主权利。”高校是党外知识分子相对集中的地方，汇聚着一批党外各方面代表人士，他们是学校改革发展和促进社会经济文化建设的一支重要力量。发挥好党外代表人士的民主监督作用，是高校实现管理民主化的一项重要举措，是基层民主政治建设的重要体现。

关键词：民主监督作用党外代表人士高校基层民主政治建设基层民主制度权力运行职工参与管理党外知识分子

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北京瑞宝利:为中国建筑节能道路劈荆斩棘

城市住宅 2009年第9期16卷 104-105页

作者：曲玉秀北京瑞宝利公司

观点能源是人类社会赖以生存和发展的重要物质基础。2006年以来，全国上下加强了节能减排工作，国务院发布了加强节能工作的各项决定，制定了促进节能减排的一系列政策措施。但是，我国节能减排目标面临的形势依然十分严峻。

关键词：建筑节能道路中国瑞宝北京物质基础人类社会节能工作

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对学生评教的思考

北京教育（高教） 2005年第12期 44-45页

作者：曲秀玉烟台师范学院教务处

学生评教作为高校教学质量评价的重要组成部分,在学校整个教学质量监控中发挥着积极的作用.本文仅从学生评教的必要性、影响学生评教的因素和改进学生评教的措施方面谈几点看法.

关键词：学生评教高校教学质量教学评价影响因素教学管理

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瑞宝利的原生污水源热泵空调系统

城市住宅 2010年第8期17卷 68-71页

作者：曲玉秀北京瑞宝利热能科技有限公司

北京瑞宝利热能科技有限公司拥有自主创新、国际领先、独立知识产权的原生污水源热泵空调系统成套技术。该成套技术包括六项国家专利技术与产品,成功地解决了原生污水对换热设备的堵塞与污染这个世界性难题,使大规模应用原生污水作为热... 详细信息

北京瑞宝利热能科技有限公司拥有自主创新、国际领先、独立知识产权的原生污水源热泵空调系统成套技术。该成套技术包括六项国家专利技术与产品,成功地解决了原生污水对换热设备的堵塞与污染这个世界性难题,使大规模应用原生污水作为热泵冷热源成为现实,把节能环保和水资源循环利用技术提升到了一个新的高度。

关键词：热泵空调系统污水源瑞宝循环利用技术自主创新国际领先成套技术知识产权

纯合子NEO^r转基因小鼠品系的建立及鉴定

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中国实验动物学报 2004年第2期12卷 76-80页

作者：曲玉秀汤家铭连安刘铁铮成国祥上海转基因研究中心上海201203 江苏省农业科学院南京210014

目的　建立清洁级Neor 转基因小鼠纯合子品系。方法　通过胚胎移植生物净化方法获得 1 0只清洁级NeorF1 小鼠 ,按孟德尔遗传法则交配 ,用PCR、Southernblot杂交和交配实验检测相结合的方法筛选纯合子。结果　选育出 4只纯合子 ,并建系... 详细信息

目的　建立清洁级Neor 转基因小鼠纯合子品系。方法　通过胚胎移植生物净化方法获得 1 0只清洁级NeorF1 小鼠 ,按孟德尔遗传法则交配 ,用PCR、Southernblot杂交和交配实验检测相结合的方法筛选纯合子。结果　选育出 4只纯合子 ,并建系。该纯合转基因小鼠与野生型小鼠交配制备的胎儿成纤维细胞具有G4 1 8抗性 ,可作为ES细胞基因打靶培养中的饲养层细胞。结论　通过微生物学和遗传学上对Neor 转基因小鼠进行质量控制 ,使Neor 转基因小鼠达到了清洁级 ,并建立纯合子品系。

关键词：纯合子 Neo^r 转基因小鼠品系生物净化聚合酶链反应

试析1958年以来美国高等教育立法及其启示

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北京教育（高教） 2007年第5期 62-64页

作者：曲秀玉山东师范大学

作为世界高等教育发展的强国以及西方法律制度较完备的国家——美国，其高等教育的发展时时刻刻都在依靠着一种法治化的力量。美国高等教育的发展经历时间较短，但后来居上，成为举世瞩目的世界高等教育强国，究其原因，可以看到法律在... 详细信息

作为世界高等教育发展的强国以及西方法律制度较完备的国家——美国，其高等教育的发展时时刻刻都在依靠着一种法治化的力量。美国高等教育的发展经历时间较短，但后来居上，成为举世瞩目的世界高等教育强国，究其原因，可以看到法律在美国高等教育发展过程中所发挥的重要力量。本文从1958年以来的美国高等教育立法进行简要分析，揭示当今美国高等教育发达的历史原因，从而有利于我们借鉴美国高等教育立法的历史经验来完善我国的高等教育立法。

关键词：美国高等教育高等教育立法高等教育发展法律制度历史经验发展经历教育强国法治化

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运河棹歌如梦来

中国交通建设监理 2013年第5期 60-63页

作者：陈克锋刘幼如(通讯员) 曲秀玉(通讯员) 《中国交通建设监理》编辑部

近百年来，受各种因素制约，京杭大运河逐渐萧条，个别河段业已荒废。这条世界上开凿最早、距离最长的人工河道，在新世纪迎来了又一轮发展的契机。近日，本刊记者走访了京杭大运河部分河段，零距离体验这项与万里长城并称为“中国古代... 详细信息

近百年来，受各种因素制约，京杭大运河逐渐萧条，个别河段业已荒废。这条世界上开凿最早、距离最长的人工河道，在新世纪迎来了又一轮发展的契机。近日，本刊记者走访了京杭大运河部分河段，零距离体验这项与万里长城并称为“中国古代两大工程”的水上通道。

关键词：京杭大运河人工河道万里长城河段