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特应性皮炎中西医发病机制的比较与思考

中国中西医结合杂志 2018年第6期38卷 737-740页

作者：王海燕陈达灿晏烽根广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医院皮肤科广州510120

本文旨在探讨特应性皮炎中西医发病理论的共性与差异。笔者从遗传、免疫、肠道菌群和皮肤屏障功能四个方面阐释了中西医观点间的交融、差异与启发,发现中、西医对特应性皮炎发病机制的认识有诸多相似之处,中医学理论对特应性皮炎的现代... 详细信息

本文旨在探讨特应性皮炎中西医发病理论的共性与差异。笔者从遗传、免疫、肠道菌群和皮肤屏障功能四个方面阐释了中西医观点间的交融、差异与启发,发现中、西医对特应性皮炎发病机制的认识有诸多相似之处,中医学理论对特应性皮炎的现代研究具有一定的启发作用。

关键词：特应性皮炎发病机制中西医

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中医湿证动物模型的研究进展

世界中医药 2022年第8期17卷 1184-1191页

作者：吴清莫秀梅陈达灿晏烽根广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院省部共建中医湿证国家重点实验室粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广州510120

湿,属六气之一。湿证是指具有湿之特性的各种不同证候。近年来,湿证是中医证候研究的热点和重点具有重要的科学研究价值,证候的构建是中医与现代医学的桥梁和纽带。构建能客观体现及反映湿证的动物模型是进一步开展临床和基础研究的立... 详细信息

湿,属六气之一。湿证是指具有湿之特性的各种不同证候。近年来,湿证是中医证候研究的热点和重点具有重要的科学研究价值,证候的构建是中医与现代医学的桥梁和纽带。构建能客观体现及反映湿证的动物模型是进一步开展临床和基础研究的立足点。目前,已有很多的中医湿证实验室研究报道,尤其在各种中医湿证动物模型的构建及相关指标的检测。现对中医湿证的理论源流、湿证动物模型分类及湿证模型检测指标及意义的研究进展进行探讨,为中医湿证动物模型的建立及优化研究提供参考及启示,以期为湿证动物模型的构建及湿证生物学机制研究提供思路。

关键词：中医湿证湿证动物动物模型

马尼地平介导AKT/ERK/STAT5信号通路增强阿霉素抗皮肤鳞癌的作用机制

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中国皮肤性病学杂志 2021年

作者：冯森玲袁中文林颖晏烽根曹礼慧黄鸿亮梁宝莹广州医科大学附属第三医院药学部广东省产科重大疾病重点实验室广州中医药大学第二附属医院广东省中医院皮肤科

目的探讨马尼地平增强阿霉素抗皮肤鳞癌的作用及可能的机制。方法体外培养A431，实验分为对照组、阿霉素（0.01μmol/ L）、阿霉素和马尼地平（2.5、5、10μmol/ L）联合给药组；MTT法检测细胞增殖活力；细胞克隆形成实验检测细胞的... 详细信息

目的探讨马尼地平增强阿霉素抗皮肤鳞癌的作用及可能的机制。方法体外培养A431，实验分为对照组、阿霉素（0.01μmol/ L）、阿霉素和马尼地平（2.5、5、10μmol/ L）联合给药组；MTT法检测细胞增殖活力；细胞克隆形成实验检测细胞的增殖能力；荧光显微镜观察阿霉素进入细胞核的荧光强度；流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞内阿霉素的含量；Westernblot实验检测AKT、ERK、STAT5及磷酸化蛋白p-AKT、p-ERK、p-STAT5的表达情况。结果MTT法结果显示，马尼地平（2.5、5、10μmol/L）与阿霉素联用均可增加A431细胞对阿霉素的敏感性；细胞克隆形成实验结果显示，马尼地平（2.5、5、10μmol/L）与阿霉素联用能抑制A431细胞克隆的形成，而单用马尼地平或阿霉素时A431细胞克隆的形成无明显变化；荧光显微镜观察结果显示，马尼地平（10μmol/L）能增加阿霉素在A431细胞内的分布；流式细胞仪检测结果显示，马尼地平（2.5、5、10μmol/L）与阿霉素联用能促进A431细胞的凋亡；Westernblot实验结果显示，马尼地平（2.5、5、10μmol/L）与阿霉素联用能降低A431细胞p-AKT、p-ERK、p-STAT5蛋白的表达水平；当AKT/ERK/STAT5信号通路的活性被0.1μmol/LBosutinib抑制后，5μmol/L马尼地平不能发挥阿霉素对皮肤鳞癌的增敏作用。结论马尼地平可能通过调节A431细胞的AKT/ERK/STAT5信号通路从而增强阿霉素抗皮肤鳞癌的作用。

关键词：马尼地平阿霉素人皮肤鳞癌 AKT/ERK/STAT5

新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用机制研究

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肿瘤 2011年第7期31卷 580-584页

作者：周兰贞晏烽根李庆林省部共建新安医学教育部重点实验室安徽省中药研究与开发重点实验室安徽中医学院合肥230038

目的:探讨新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用及其可能的分子机制。方法:采用MTT法检测新藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用;DAPI染色及荧光显微镜观察细胞凋亡情况;FCM法检测细胞周期分布;蛋白质印迹法检测新藤黄酸对cy... 详细信息

目的:探讨新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用及其可能的分子机制。方法:采用MTT法检测新藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用;DAPI染色及荧光显微镜观察细胞凋亡情况;FCM法检测细胞周期分布;蛋白质印迹法检测新藤黄酸对cyclin D1、cyclin E、P21、P27和多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]蛋白表达的影响。结果:新藤黄酸对HCT116细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度和时间依赖性。DAPI染色后荧光显微镜观察发现,新藤黄酸能明显诱导HCT116细胞凋亡。FCM法检测发现,新藤黄酸可以使HCT116细胞G0/G1期比例显著升高,S期比例相应降低,表明细胞周期阻滞于G0/G1期。蛋白质印迹法检测结果表明,新藤黄酸下调了细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin E的表达,上调了P21和P27的蛋白表达,诱导了PARP蛋白的剪切。结论:新藤黄酸通过下调细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin E的表达和上调P21、P27的表达,使HCT116细胞阻滞在G0/G1期,进而显著抑制HCT116细胞的增殖,并诱导其凋亡。

关键词：结肠肿瘤抗肿瘤药植物细胞周期细胞凋亡 HCT116细胞新藤黄酸

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HPLC法同时测定连翘中6个成分的含量

中药材 2020年第4期43卷 932-935页

作者：刘佩仪李春彦晏烽根黎雄莫秀梅吴依娜广州中医药大学中药学院广东广州510006 广东省中医院/广东省中医药防治难治性慢病重点实验室广东广州510006

目的:建立同时测定连翘(青翘)中异连翘酯苷、连翘酯苷A、连翘苷、Cornoside、五福花苷酸、松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷6个成分的含量测定方法。方法:采用Synerg^(TM) polar-RP 80A色谱柱(250 mm×4.6 mm,4μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸... 详细信息

目的:建立同时测定连翘(青翘)中异连翘酯苷、连翘酯苷A、连翘苷、Cornoside、五福花苷酸、松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷6个成分的含量测定方法。方法:采用Synerg^(TM) polar-RP 80A色谱柱(250 mm×4.6 mm,4μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;流速为0.6 mL/min;柱温为30℃;进样量为20μL;检测波长为240 nm。结果:6种成分在一定的浓度范围内与峰面积的线性关系良好(r≥0.9997),平均加样回收率为98.13%~102.06%,RSD为0.72%~1.47%。结论:该方法专属性强,重复性好,稳定、可控,可为连翘药材的质量评价与控制提供参考。

关键词：连翘含量测定 HPLC 环己酮苷环烯迷萜苷

特应性皮炎寒湿证病证结合小鼠模型的构建研究

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中国中医基础医学杂志 2024年

作者：吴汶丰余彦栩吴清叶思褀张瑜刘俊峰莫秀梅陈达灿晏烽根省部共建中医湿证国家重点实验室广州中医药大学第二附属医院广州中医药大学第二临床医学院粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室

目的构建特应性皮炎（atopicdermatitis，AD）寒湿证病证结合小鼠模型，并对模型进行宏观表征及微观指标评价。方法将Balb/c小鼠随机分为正常对照组、疾病模型组、寒湿证组、病证结合组，每组6只。其中正常对照组小鼠外涂基质液；疾病... 详细信息

目的构建特应性皮炎（atopicdermatitis，AD）寒湿证病证结合小鼠模型，并对模型进行宏观表征及微观指标评价。方法将Balb/c小鼠随机分为正常对照组、疾病模型组、寒湿证组、病证结合组，每组6只。其中正常对照组小鼠外涂基质液；疾病模型组小鼠外涂二硝基氯苯（dinitrochlorobenzene，DNCB），模拟特应性皮炎疾病模型；寒湿证组小鼠在外涂基质液基础上，采用人工气候箱模拟寒湿环境[温度(4±2)℃、相对湿度(90±)5%]，并结合高脂饲料喂养模拟寒湿证；病证结合组小鼠在DNCB造模基础上，结合寒湿证证候模拟方法进行复合造模。采用经皮水分流失测量仪对动物经皮水分流失（transepidermalwaterloss，TEWL）进行测量和评估；对小鼠皮炎和寒湿证证候情况进行观察评价；对搔抓行为进行记录分析；苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色观察小鼠背部皮肤组织病理改变，并对其表皮厚度和炎症细胞浸润情况进行分析；Westernblot法检测皮肤中紧密连接蛋白1(claudin-1)、瞬时受体电位香草酸3(transientreceptorpotentialvanilloid3，TRPV3)和TRPV4蛋白的表达水平；利用流式细胞术分析淋巴结辅助性T细胞17(helperTcells17，Th17)/调节性T细胞(regulatoryTcells，Treg)比值。结果与疾病模型组比较，病证结合组小鼠的证候评分明显升高（P<0.001），TEWL值明显升高、背部皮肤表皮厚度明显增加（P<0.05），背部皮肤的Claudin-1、TRPV3蛋白表达量显著降低（P<0.01），而TRPV4蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论采用DNCB进行特应性皮炎疾病造模，并结合寒湿环境及高脂饮食的寒湿证造模方式，能够成功构建特应性皮炎寒湿证病证结合小鼠模型。该研究为后续深入探索特应性皮炎寒湿证病证结合动物模型构建及中药复方对AD的药效学研究提供了较理想的动物模型。

关键词：特应性皮炎寒湿证病证结合 Claudin-1 TRPV3 TRPV4 Th17/Treg细胞比值

中药白术与苍术中聚炔类成分分析与质谱裂解规律研究

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中国新药杂志 2017年第9期26卷 1071-1078页

作者：李春彦孙振刚晏烽根罗懿妮黎雄广州中医药大学第二附属医院广州510120

目的:分析比较中药白术与苍术中聚炔类特征性成分。方法:采用超高效液相(UHPLC)联合二极管阵列检测器和高分辨多级质谱(LTQ Orbitrap MS/MS)在线检测技术,分析比较白术与苍术聚炔类特征性成分。结果:从炒白术和炒苍术中分别鉴定11和19... 详细信息

目的:分析比较中药白术与苍术中聚炔类特征性成分。方法:采用超高效液相(UHPLC)联合二极管阵列检测器和高分辨多级质谱(LTQ Orbitrap MS/MS)在线检测技术,分析比较白术与苍术聚炔类特征性成分。结果:从炒白术和炒苍术中分别鉴定11和19个聚炔类成分,两者共有聚炔7个,白术中特有的聚炔类成分4个,苍术中特有聚炔类成分12个。结论:通过高分辨液质联用在线分析技术可以快速鉴别白术和苍术中含量大、稳定性差不易被分离纯化的聚炔类成分;白术和苍术中不同聚炔成分可以作为二者的鉴别依据,也可为两者功效差异的物质基础研究提供参考,并为提升两者药材质量标准提供依据。

关键词：白术苍术聚炔类成分液质联用裂解规律

特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合动物模型的构建与评价

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中药新药与临床药理 2024年第6期 862-869页

作者：钟婷靖刘秦黎雄刘俊峰莫秀梅陈达灿晏烽根广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学第二附属医院(省部共建中医湿证国家重点实验室) 广东省中医药防治难治性慢病重点实验室粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室

目的通过比较2,4-二硝基氯苯（2,4-Dinitrochlorobenzene, DNCB）诱导特应性皮炎（Atopic Dermatitis,AD）小鼠疾病模型、“外湿+饮食失节+番泻叶灌胃”复合因素诱导脾虚湿蕴证小鼠模型，以及两者病证结合模型，建立特应性皮炎脾虚湿蕴... 详细信息

目的通过比较2,4-二硝基氯苯（2,4-Dinitrochlorobenzene, DNCB）诱导特应性皮炎（Atopic Dermatitis,AD）小鼠疾病模型、“外湿+饮食失节+番泻叶灌胃”复合因素诱导脾虚湿蕴证小鼠模型，以及两者病证结合模型，建立特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合小鼠研究模型，探索该方法的可行性。方法采用“外湿+饮食失节+番泻叶灌胃”复合因素造模方法，探索构建小鼠（Balb/c）脾虚湿蕴证，进一步应用DNCB诱导Balb/c小鼠出现特应性皮炎样病变，建立脾虚湿蕴证特应性皮炎病证结合模型。观察各组小鼠一般情况及体质量，进行脾虚、湿证症状评分；通过比较各组皮损程度、EASI评分、经皮水分散失（TEWL）值、脾脏系数和胸腺系数评价小鼠特应性皮炎严重程度；测定小鼠肌酐、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、胃泌素、淀粉酶水平。结果（1）在脾虚湿蕴证造模期间，与正常组比较，脾虚湿蕴证组、脾虚湿蕴型特应性皮炎组小鼠出现肥胖、精神萎靡、毛发污秽油腻、腹泻、肛周清洁度差等情况。在结合施加特应性皮炎模型后，与正常组比较，特应性皮炎组（P0.05）更高。（3）与正常组比较，特应性皮炎组的脾脏系数升高（P0.05）、胸腺系数都降低（P0.05）、甘油三酯（P>0.05）、胃泌素（P0.05）、葡萄糖（P0.05）、甘油三酯（P>0.05）、胃泌素（P0.05）。结论 “外湿+饮食失节+番泻叶灌胃”复合因素结合DNCB诱导特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合小鼠模型既可表现出明显的脾虚湿蕴证中医指征，也可表现出特应性皮炎病样特征，可作为可靠的特应性皮炎脾虚湿蕴证中医病证结合动物模型，为后续脾虚湿蕴型特应性皮炎病理机制探讨、中药复方药效评价、药理机制探讨等方面研究提供参考。

关键词：特应性皮炎脾虚湿蕴证病症结合动物模型高脂饲料小鼠

丹参素对银屑病小鼠皮损Yes相关蛋白的影响

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中华中医药杂志 2020年第11期35卷 5783-5786页

作者：贾金靖莫秀梅晏烽根郑焱李红毅陈达灿广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室广州510120 广州中医药大学第二附属医院皮肤科广州510120 广东省中医药防治难治性慢病重点实验室广州510120 西安交通大学第二附属医院皮肤科西安710004

目的:观察丹参素对银屑病小鼠皮损中Yes相关蛋白(YAP)表达影响。方法:用外用咪喹莫特的方式建立银屑病鼠模型,予以不同浓度丹参素(20、40、80mg·kg^-1·d^-1)进行灌胃处理,7d后观察鼠皮损的大体及组织病理情况,免疫组化及Western blot... 详细信息

目的:观察丹参素对银屑病小鼠皮损中Yes相关蛋白(YAP)表达影响。方法:用外用咪喹莫特的方式建立银屑病鼠模型,予以不同浓度丹参素(20、40、80mg·kg^-1·d^-1)进行灌胃处理,7d后观察鼠皮损的大体及组织病理情况,免疫组化及Western blot检测鼠皮损中YAP的表达。结果:模型组小鼠皮肤增厚,出现红斑鳞屑,予以丹参素灌胃后可见皮损逐渐变薄、鳞屑减少。模型组小鼠YAP的表达增加(P<0.01),丹参素灌胃后其表达下降,并且这一下降趋势随着丹参素浓度的增加而增大。结论:丹参素可能通过影响YAP的表达进而抑制了银屑病皮损进展。

关键词： Yes相关蛋白银屑病丹参素咪喹莫特小鼠模型