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基于核酸适配体传感器的石房蛤毒素快速检测方法研究

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基于核酸适配体传感器的石房蛤毒素快速检测方法研究

作者：奚潇雨中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

石房蛤毒素(saxitoxin,STX)是麻痹性贝类毒素中毒性最强的一种海生生物毒素,具有麻痹性与致死性,一般误食30 min后嘴唇会感到刺痛,同时还伴随呼吸麻痹、血压下降乃至心脏停搏等一系列症状,致死率极高。如今,全世界每年约有2000起STX中... 详细信息

石房蛤毒素(saxitoxin,STX)是麻痹性贝类毒素中毒性最强的一种海生生物毒素,具有麻痹性与致死性,一般误食30 min后嘴唇会感到刺痛,同时还伴随呼吸麻痹、血压下降乃至心脏停搏等一系列症状,致死率极高。如今,全世界每年约有2000起STX中毒事件,平均死亡率高达15%。除了食用海产品中毒之外,人类还可能通过饮用水接触STX。世界各地的饮用水资源都很容易受到毒素的威胁。此外,STX是中间谱系战剂的代表之一,《禁止化学武器公约》和《禁止生物武器公约》目前已将STX列入了核查附表。因此,无论从民用还是军事的角度来看,都需要将STX列入最严格的监管,也因此迫切需要开发简单快速的检测方法用于STX的现场监测。STX传统的检测方法包括小鼠生物法、酶联免疫吸附实验以及高效液相色谱法,然而这些传统的检测手段存在重现性差、成本高、操作繁琐、耗时长等问题,都难以实现快速检测和实时监控。核酸适配体(aptamer,Apt)的出现给STX的快速检测及防治带来新的研究方向。核酸适配体是一类具有特异性识别功能的单链DNA或RNA,通过折叠成特定的三维结构与生物靶标结合,因此具有高亲和力和强特异性。核酸适配体亲和力可与单克隆抗体相媲美,同时核酸适配体还具有筛选周期短、合成成本低、稳定性好、易于合成与修饰、靶标范围广、易于储存与运输等特点而被称为"化学抗体"。综上所述,本论文使用核酸适配体作为新型识别元件开发核酸适配体传感器达到快速检测STX的目的,主要研究内容和结果如下:首先以插入型染料噻唑橙(thiazole orange,TO)为信号探针对现有的STX适配体进行筛选,最终以适配体73a作为识别元件首次构建了一种基于协同型靶标诱导构象变化法的非标记核酸适配体传感器检测STX。本适配体传感器先通过分子动力学模拟深入探究了三聚体是以STX-TO处于G-四链体的同一平面且TO占据G-四链体核心的模式存在,然后进一步通过圆二色谱以及生物膜干涉技术进行实验检测原理验证,为进一步的应用研究提供坚实的理论基础。适配体73a是富含G碱基的单链DNA,通过圆二色谱实验证实73a与STX形成混合型G-四链体复合物。TO在游离状态下几乎没有荧光,但可以插入G-四链体中,产生极大的荧光增强效应。因此当STX不存在时,少量TO会嵌入到因阳离子诱导而部分形成G-四链体的适配体73a中,产生微弱的荧光信号;当STX存在时,STX与大部分适配体73a结合以混合型G-四链体存在,大量TO嵌入到混合型G-四链体复合物中形成了三聚体,并产生更强的荧光信号,基于靶标诱导构象变化而产生不同的荧光强度可以实现对STX的特异性检测。在最适反应条件下,本适配体传感器对STX进行检测的线性范围为10 p M-50 n M,检测限为0.22 p M,并应用于海水以及贝类样品中的STX检测,回收率在91.9%-107.3%范围内,RSD为6.6%-10.8%。因此,这种非标记核酸适配体传感器简单快速、成本低、灵敏性和选择性好,为STX的快速检测检测提供了简单、快速的新方法。基于上述研究,本论文将适配体73a与侧流层析检测(lateral flow assay,LFA)相结合,首次构建了基于STX和73a互补链竞争结合适配体73a的新型LFA,以达到目视比色定性的目的,或借助手机达到半定量甚至定量的目的。基于c DNA的位置选择、错位设计以及长度设计了信号探针Au NPs-c DNA,并进一步确定了Na Cl终浓度为100 n M、c DNA反应量为7μL 0.1m M、信号探针加载体积为1μL、T线上SA喷样量为0.6 mg/ml以及适配体浓度为30 n M时,Apt-LFA的性能影响更佳。在最佳反应条件下,对Apt-LFA进行特异性进行分析,结果表明AptLFA仅对STX有较大的响应,其余海洋生物毒素对试纸条影响不明显;本AptLFA对STX进行检测的线性范围为5 n M-10μM,仪器检测限为2.79 n M,目视检测限为10 n M,已能基本满足很多国家提出的STX检测限度指导值10 n M的要求。将Apt-LFA进一步应用于海水以及贝类样品中的STX检测,回收率在82.6%-109.1%范围内,RSD为6.1%-14.6%。此外,还进一步评估了Apt-LFA在室温密封保存条件下的稳定性,通过连续8周对同批次试纸条检测高浓度STX,发现其响应信号与抑制率保持稳定,证明LFA试纸条至少可保存两个月并保持检测性能,为Apt-LFA技术的长期应用提供了科学依据。因此,这种简单、便携、低成本的核酸适配体侧流层析传感器为现场快速筛查大量STX污染样品提供了可行的解决方案。

关键词：石房蛤毒素核酸适配体无标记型分子动力学模拟侧流层析检测

山东省工业绿色创新效率和经济高质量发展耦合协调研究

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山东省工业绿色创新效率和经济高质量发展耦合协调研究

作者：荣潇亭安徽理工大学

学位级别：硕士

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S集团人力资源三支柱管理模式优化研究

S集团人力资源三支柱管理模式优化研究

作者：王笔潇重庆交通大学

学位级别：硕士

当今,人工智能等各种高科技技术迅猛发展,在这样的技术与市场环境下,企业内部和外部客户的需求也随着环境的变化发生了根本性的改变。企业家们为了保持公司的核心竞争力,实现企业的长期发展目标,就需要及时优化和调整组织架构,以及实施... 详细信息

当今,人工智能等各种高科技技术迅猛发展,在这样的技术与市场环境下,企业内部和外部客户的需求也随着环境的变化发生了根本性的改变。企业家们为了保持公司的核心竞争力,实现企业的长期发展目标,就需要及时优化和调整组织架构,以及实施战略性变革,然而这些举措在推动企业发展的同时,也为企业人力资源管理带来了一定挑战。在企业发展过程中,人力资源的管理不仅需要紧随企业的发展战略,同时又要为企业提供专业的指引,并确保它们在企业的成长过程中成为不可或缺的合作伙伴,这些是每一位从事人力资源工作的专业人士都需要深入思考的议题。本研究以国内知名的装修企业S集团作为分析对象,首先,在国内外资源基础理论、权变理论等相关理论的指导下,对人力资源三支柱模式在企业中的应用情况进行了系统归纳、梳理,包括该模式的发展背景、各角色的胜任力模型以及职责与定位、组织架构和模式的实际应用成效等。然后,再综合利用问卷调查法、访谈法等方法进行调查分析,根据调查分析结果识别出企业实施该模式时面临的相关问题,这些问题包括共享服务信息的智能化水平较差、HRBP只重视事务性工作,忽视业务发展,HRCOE的设计制度与方案难以满足业务需求。对于上述几项问题,本文主要从制度、能力、组织三方面出发,深入分析了问题出现的原因。基于已识别出的三支柱模式在实施中遇到的问题和企业战略发展的实际需求,本文明确了优化的必要性与优化中需要遵循的四大原则,同时规划出了改进的八大步骤,最后结合问题成因给出了具有的优化策略。为了保证优化策略的针对性与高效性,本文首先重新定位了各角色和划分了相应职能,然后结合不同层级情况制定了胜任力模型,最后给出了相应的评价机制。在简化、整理人力资源管理流程的基础上,进一步强化了内部流程制度,希望可以引导共享服务朝着智能化方向不断前进。与此同时,为了确保优化措施的顺利实施,本文还从组织和机制两方面给出了具体的保障措施。希望本文提出的建议可以为S集团在解决相关问题时提供一定参考,同时也希望本文提出的建议可以为丰富企业应用人力资源三支柱模式实例提供一定帮助,为实践提供有益的指导。

关键词：三支柱模式角色定位模式优化

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脉动气泡在黏性介质中的声发射

物理学报 2024年第17期73卷 216-224页

作者：申潇卓吴鹏飞林伟军中国科学院声学研究所声场声信息国家重点实验室北京100190 中国科学院大学北京100049

在气泡辐射声问题中一直被使用的气泡声发射公式并未考虑介质的黏性在声波传播过程中产生的影响.本文结合气泡的边界条件,对黏性介质中的声波方程进行求解,给出黏性介质中经过修正的气泡的声发射公式,进行气泡动力学方程求解和有限元仿... 详细信息

在气泡辐射声问题中一直被使用的气泡声发射公式并未考虑介质的黏性在声波传播过程中产生的影响.本文结合气泡的边界条件,对黏性介质中的声波方程进行求解,给出黏性介质中经过修正的气泡的声发射公式,进行气泡动力学方程求解和有限元仿真等数值计算后发现,在考虑介质的黏性时,本文提出的黏性介质中气泡声发射公式所计算出的声压小于经典气泡声发射公式计算出的声压,并且随着介质黏度、超声频率以及传播距离的增加,二者之间的误差逐渐增大.

关键词：气泡声发射黏滞声波方程气泡动力学有限元仿真

基于ScAlN差分式MEMS压电超声换能器性能研究

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基于ScAlN差分式MEMS压电超声换能器性能研究

作者：段潇雅中北大学

学位级别：硕士

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东南亚留学生来滇留学意愿研究

东南亚留学生来滇留学意愿研究

作者：文潇悦云南师范大学

学位级别：硕士

随着我国综合实力的上升,文化软实力也得到了显著提升,来华留学生总量连年增长,结构不断优化。在来华留学总人数中,亚洲留学生占大多数,在亚洲国家中,东南亚国家的来华留学生数量正在兴起,东南亚来华留学生成为来华留学的新兴力量。云... 详细信息

随着我国综合实力的上升,文化软实力也得到了显著提升,来华留学生总量连年增长,结构不断优化。在来华留学总人数中,亚洲留学生占大多数,在亚洲国家中,东南亚国家的来华留学生数量正在兴起,东南亚来华留学生成为来华留学的新兴力量。云南地处西南边疆,经济和教育水平也不是全国前列,来华留学生总数却居前国第9位。由于云南和东南亚有着天然的地缘和血缘关系,加之目前云南与东南亚各国的往来越加密切,来滇留学生中,东南亚的留学生人数是最多的。在一带一路建设中,云南和东南亚地区的经济与贸易以及交通等建设领域都有着广泛的合作,所以研究东南亚留学生来滇的留学意愿是非常有必要的。研究东南亚留学生来滇的留学意愿可以提升云南对东南亚留学生的吸引力,推动云南高校留学教育的发展,也可以为中国来华留学教育提供思路,吸收更多优质东南亚学子,培育更多双语人才,为周边国家人类命运共同体建构打下夯实的基础。本文基于近年的来滇留学生数据收集整理,深入东南亚留学生身边,和他们进行聊天,采用问卷调查法和深度访谈法的形式,完善相关数据和资料,在充分整理归纳的基础上进行了分析思考。主观方面,通过访谈,从东南亚留学生本人的家庭情况及他们的个人生活经历到他们是如何产生想要到云南留学的想法,再到他们如何学习汉语,来滇学习的时长,都进行了深入的了解。客观方面,通过数据,从经济因素、文化因素、社会因素及高校因素几方面去细致的了解哪些因素对他们来说更会成为他们来云南留学的推力及拉力。最后,通过提出增强云南高校同东南亚国家的联系、增强云南文化宣传力影响、积极利用孔子学院拓展优质生源等建议,让更多东南亚留学生了解到云南,增强来云南留学的意愿,为云南留学教育起到助推作用。

关键词：来滇留学东南亚留学生留学意愿调查

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临淄齐国故城供排水系统再认识

南方文物 2024年第3期 156-165页

作者：昝金国韩伟东山东省文物考古研究院淄博市临淄区文物保护中心

临淄齐国都城作为周代至汉代重要的东方大都市,其供排水系统是城市生活和生产的重要保障。本文在考古调查、钻探并结合考古发掘和地理文献资料的基础上,结合之前的排水系统研究,对供水系统有了新的发现,对排水系统也有了新的认识。加强... 详细信息

临淄齐国都城作为周代至汉代重要的东方大都市,其供排水系统是城市生活和生产的重要保障。本文在考古调查、钻探并结合考古发掘和地理文献资料的基础上,结合之前的排水系统研究,对供水系统有了新的发现,对排水系统也有了新的认识。加强对于供排水系统的研究,既能揭示齐故城营造背景、规划设计的理念,还能拓展齐故城考古和齐文化研究的视野。

关键词：齐国都城供水源头供排水系统

LDPE高压分离过程中的两相分离机制及流动特性探究

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LDPE高压分离过程中的两相分离机制及流动特性探究

作者：尤潇楠浙江大学

学位级别：硕士

异硫氰酸丙烯酯影响小菜蛾性信息素合成的分子机理

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异硫氰酸丙烯酯影响小菜蛾性信息素合成的分子机理

作者：祝潇雯福建农林大学

学位级别：硕士