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电阻抗法快速检测鲜牛奶中细菌总数

中国乳品工业 2001年第3期29卷 30-31页

作者：易敏英李志勇广州出入境检验检疫局广东广州510623

采用阻抗法监控鲜牛奶中的细菌总数，建立了利用阻抗法检测供港鲜牛奶中细菌总数的标准曲线及计算方程。同传统平板计数方法相比，阻抗法检测鲜牛奶中细菌总数不仅快速、准确，且操作简便。

关键词：阻抗法鲜牛奶细菌总数检测方法

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广州市场活鸡盐酸克仑特罗残留调查

食品科学 2003年第8期24卷 117-119页

作者：李志勇王菊芳易敏英胡科峰广州出入境检验检疫局广州510623 华南理工大学广州510640

建立并运用酶联免疫法直接测定家禽组织盐酸克仑特罗含量,调查了广州市场6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量。结果表明:6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量为155.27±81.17～322.00±127.56ng/kg,符合残留低限,平均回收率为94.30%... 详细信息

建立并运用酶联免疫法直接测定家禽组织盐酸克仑特罗含量,调查了广州市场6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量。结果表明:6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量为155.27±81.17～322.00±127.56ng/kg,符合残留低限,平均回收率为94.30%,酶联免疫法可快速、准确测定家禽组织中盐酸克仑特罗含量。

关键词：活鸡盐酸克仑特罗测定酶联免疫法鸡肉鸡肝

速冻水饺中金黄色葡萄球菌的DiversiLab分型研究

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食品科技 2012年第9期37卷 311-314页

作者：刘静宇郑晶凌莉易敏英袁慕云席静广东出入境检验检疫局技术中心广州510623 福建出入境检验检疫局技术中心福州350003

目的:对速冻水饺中分离的20株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布。方法:采用DiversiLab自动分型系统扩增金黄色葡萄球菌基因组中广泛分布的重复序列,然后在Agilent2100自动生物分析仪上对扩增片段进行微流体... 详细信息

目的:对速冻水饺中分离的20株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布。方法:采用DiversiLab自动分型系统扩增金黄色葡萄球菌基因组中广泛分布的重复序列,然后在Agilent2100自动生物分析仪上对扩增片段进行微流体电泳分离,并使用DiversiLab Software软件实时分析和处理数据,对20株金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果:DiversiLab分型系统将20株金黄色葡萄球菌分为13个型别,其中P1型包含菌株L17、L14、L11,P2型包含L16、L12、L19、L4菌株,P3型包含菌株L3、L18、L13,其余10株金黄色葡萄球菌的每一个菌株被分为一个单独的型别。结论:20株金黄色葡萄球菌从基因型来看有一定的聚集性,可能来自相近的污染源。同时也有一些金黄色葡萄球菌菌株之间的基因型差异较大,遗传学上关系较远,可能来自不同的污染途经。Diversilab自动化分型技术方便快捷,是监控食品及其生产企业细菌性污染的有力工具。

关键词：金黄色葡萄球菌 DiversiLab自动分型系统细菌基因组重复序列PCR

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阻抗法快速预测盒装巴氏奶货架期

食品科学 2001年第12期22卷 69-72页

作者：李志勇易敏英高健婷翁文川许龙岩广州出入境检验检疫局 510623

采用阻抗法进行盒装风行巴氏奶货架期预测。结果表明,风行巴氏奶货架期与细菌数对数值密切相关。在30℃、6h预培养下加样100、200μ1及37℃、6h预培养下加样100～400μ1进行阻抗测定,建立回归方程式均可快速准确地进行盒装风行巴氏货架... 详细信息

采用阻抗法进行盒装风行巴氏奶货架期预测。结果表明,风行巴氏奶货架期与细菌数对数值密切相关。在30℃、6h预培养下加样100、200μ1及37℃、6h预培养下加样100～400μ1进行阻抗测定,建立回归方程式均可快速准确地进行盒装风行巴氏货架期预测,整个预测过程耗时11～14h。

关键词：阻抗法货架期预测巴氏奶奶制品

用DiversiLab系统对食品中分离的金黄色葡萄球菌进行分型溯源研究

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食品科技 2012年第12期37卷 310-316页

作者：刘静宇凌莉陈思强焦红邓翼惠易敏英广东出入境检验检疫局技术中心广州510623 佛山出入境检验检疫局佛山528000 深圳市龙岗区平湖预防保健所深圳518111

目的:对分离自食品样本中的44株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布,为食源性疾病溯源及预警提供依据。方法:采用DiversiLab自动分型系统扩增广泛分布于金黄色葡萄球菌基因组中的重复序列,并在Agilent2100自动... 详细信息

目的:对分离自食品样本中的44株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布,为食源性疾病溯源及预警提供依据。方法:采用DiversiLab自动分型系统扩增广泛分布于金黄色葡萄球菌基因组中的重复序列,并在Agilent2100自动生物分析仪上对扩增产物进行微流体电泳分离,然后使用DiversiLabSoftware软件实时分析和处理数据,对44株金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果:DiversiLab分型系统将44株金黄色葡萄球菌分为26个型别,其中P1型包含菌株n76、n78和n71;P2型包含z78、z60和g75菌株;P3型包含菌株n61、z77、g31;P4型包含菌株0868和10786;P5型包含菌株6’-3600和13-3462;菌株1167、11219和z12属于P6型;菌株n73和n75属于P7型;菌株1151和11059为P8型;菌株3-1154和0979为P9型;菌株11-2063和6-1310为P10型;P11型包含菌株z67、z63、z64、z61和z36;其余15株金黄色葡萄球菌的每一个菌株被分为一个单独的型别。结论:DiversiLab分型结果准确揭示了44株来自食品的金黄色葡萄球菌的遗传特征和亲缘关系;Diversilab自动化分型技术方便快捷、结果可靠,是监测分析食源性致病菌和对食源性疾病溯源及预警的有力工具。

关键词：金黄色葡萄球菌 DiversiLab自动分型系统细菌基因组重复序列PCR

对食品中分离的金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型研究

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中国卫生检验杂志 2012年第8期22卷 1818-1820,1823页

作者：刘静宇凌莉陈春梅易敏英胡科峰广东出入境检验检疫局技术中心广州510623 湛江出入境检验检疫局广东湛江524000

目的:对来自湛江的食品样本中分离的16株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布,为食源性疾病溯源及预警提供依据。方法:采用DiversiLab自动分型系统对16株金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果:DiversiLab分型系统... 详细信息

目的:对来自湛江的食品样本中分离的16株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布,为食源性疾病溯源及预警提供依据。方法:采用DiversiLab自动分型系统对16株金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果:DiversiLab分型系统将16株金黄色葡萄球菌分为9个型别,其中P1型包含菌株0902和0901;P2型包含0971、0923、0967、09108菌株;P3型包含菌株0969、0970、10010;P4型包含菌株09118和09119。其余5株金黄色葡萄球菌的每一个菌株被分为一个单独的型别。结论:DiversiLab分型结果准确揭示了16株食品中金黄色葡萄球菌的遗传特征和亲缘关系;Diversilab自动化分型技术方便快捷、结果可靠,是监测分析食源性致病菌和对食源性疾病溯源及预警的有力工具。

关键词：金黄色葡萄球菌 DiversiLab自动分型系统细菌基因组重复序列PCR

基于弧菌毒力基因多重PCR法的建立及其在副溶血弧菌毒力基因检测中的应用

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现代食品科技 2015年第7期31卷 309-315页

作者：冼钰茵易敏英魏霜余翀李志勇吴希阳凌莉暨南大学理工学院广东广州510000 广东省出入境检验检疫局广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510000 汕头出入境检验检疫局广东汕头515000 广东省食品安全卫生应急技术研究中心广东广州510000

针对副溶血弧菌常见的11种毒力基因(tox R、Collagenase、tox S、trh、tdh、tlh、Ure R、Fla A、omp W、Asp A、fur),建立了两套六重PCR检测体系,应用于副溶血弧菌环境分离株和水产品分离株的毒力基因分布情况调查。在调查的248株副溶... 详细信息

针对副溶血弧菌常见的11种毒力基因(tox R、Collagenase、tox S、trh、tdh、tlh、Ure R、Fla A、omp W、Asp A、fur),建立了两套六重PCR检测体系,应用于副溶血弧菌环境分离株和水产品分离株的毒力基因分布情况调查。在调查的248株副溶血弧菌中,鞭毛丝蛋白基因Fla A、外膜蛋白基因omp W和铁吸收调节蛋白基因fur的分布最广(100%),其次为碱性丝氨酸蛋白酶基因Asp A(99.60%),胶原蛋白酶基因Collagenase、不耐热性溶血毒素基因tlh以及毒力调控基因tox R和tox S的分布率均在90%以上且tox R和tox S的分布极为相似,尿素酶基因Ure R的分布极少(1.21%),而耐热直接溶血素基因tdh和耐热相关溶血素基因trh在这248株副溶血弧菌中没有检出。本研究建立的多重PCR检测体系能快速、高效地检测多个毒力基因的分布情况,为副溶血弧菌的毒力机制研究和风险评估提供方法和依据。

关键词：副溶血弧菌毒力基因多重PCR

活的非可培养状态副溶血性弧菌实时荧光逆转录PCR检测方法的建立及其毒力研究

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中国食品卫生杂志 2013年第4期25卷 309-315页

作者：刘静宇凌莉邓翼惠易敏英胡科锋陈碧玲广东出入境检验检疫局技术中心广东广州510623 深圳市龙岗区平湖预防保健所广东深圳518111

目的建立检测活的非可培养(VBNC)状态副溶血性弧菌的荧光逆转录PCR方法并研究其毒力基因表达。方法将副溶血性弧菌AS079菌株添加到陈化海水中,4℃冰箱内培养,使其进入VBNC状态,针对其管家基因、鉴定基因和毒力基因分别设计实时荧光逆转... 详细信息

目的建立检测活的非可培养(VBNC)状态副溶血性弧菌的荧光逆转录PCR方法并研究其毒力基因表达。方法将副溶血性弧菌AS079菌株添加到陈化海水中,4℃冰箱内培养,使其进入VBNC状态,针对其管家基因、鉴定基因和毒力基因分别设计实时荧光逆转录PCR引物,通过不同的PCR反应程序和引物浓度组合试验,摸索最佳反应体系条件,用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力研究。结果用所建立的检测VBNC状态副溶血性弧菌的实时荧光逆转录PCR方法,对接种于陈化海水培养的不同时期的AS079副溶血性弧菌进行荧光定量逆转录PCR扩增,结果显示,随着培养时间的延长,毒力基因tdh2和鉴定基因toxR表达水平持续下降,但即使细菌进入VBNC状态,这两个基因也能够得到很好的扩增,说明以toxR基因和tdh2基因对进入VBNC状态的副溶血性弧菌进行检测和毒力研究方法可行。灵敏度试验表明,鉴定基因toxR的最低检测限可达到48 cfu/ml,研究毒力基因tdh2的表达需要细菌浓度至少为4.8×102cfu/ml,同时试验证明此方法与其他相近食源性致病菌无交叉反应。结论该实时荧光逆转录PCR方法检测快速、特异性强、敏感度高,适用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力分析。

关键词：副溶血性弧菌活的非可培养实时荧光逆转录PCR 毒力基因食源性致病菌

转基因玉米Bt176品系特异性环介导等温扩增检测方法的研究

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食品工业科技 2013年第3期34卷 310-313页

作者：凌莉刘静宇易敏英吴少云刘津蔡颖李志勇高东微广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东广州510623 华南理工大学广东广州510640 汕头出入境检验检疫局广东汕头515031

根据转基因玉米品系Bt176外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系Bt176的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价。评价结果表明:... 详细信息

根据转基因玉米品系Bt176外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系Bt176的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价。评价结果表明:该方法定性检测低限为0.5%,特异性和稳定性均达到100%。

关键词：环介导等温扩增品系特异性转基因玉米品系Bt176 检测