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脑脂结合蛋白在胶质母细胞瘤U251细胞自噬中的调节作用

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南通大学学报（医学版） 2023年第3期43卷 207-210页

作者：张惠雯张俊荣施金洪南通大学附属医院护理部南通226001 南通大学附属医院妇产科南通226001 南通大学医学院人体解剖学系

目的:探讨脑脂结合蛋白(brain lipid binding protein,BLBP)在胶质母细胞瘤U251细胞自噬中的调节作用。方法:应用CRISPR/Cas9技术敲除U251细胞中BLBP的表达,检测BLBP敲除后U251细胞的活力变化;Ad-GFP-LC3b腺病毒感染U251细胞后,检测细胞... 详细信息

目的:探讨脑脂结合蛋白(brain lipid binding protein,BLBP)在胶质母细胞瘤U251细胞自噬中的调节作用。方法:应用CRISPR/Cas9技术敲除U251细胞中BLBP的表达,检测BLBP敲除后U251细胞的活力变化;Ad-GFP-LC3b腺病毒感染U251细胞后,检测细胞中GFP-LC3b绿色荧光颗粒的数目;Western Blot检测自噬相关分子微管相关蛋白1轻链3βⅠ/Ⅱ(microtubule associated protein 1 light chain 3 betaⅠ/Ⅱ,LC3bⅠ/Ⅱ)、自噬相关基因5(autophagy-related genes 5,ATG5)、选择性自噬接头蛋白(sequestosome1,SQSTM1)的蛋白表达水平;Real-time PCR检测ATG5、SQSTM1的基因表达变化。结果:BLBP基因敲除后,U251细胞的活力明显下调,GFP-LC3b绿色荧光颗粒数目较对照组明显增多;此外,LC3bⅡ的蛋白表达水平较对照组明显增高,SQSTM1蛋白水平明显下降,而ATG5的基因和蛋白表达水平均明显上调。结论:BLBP基因敲除能提高U251细胞的自噬水平,BLBP具有调节胶质母细胞瘤细胞自噬的能力。

关键词：胶质母细胞瘤脑脂结合蛋白 U251细胞自噬

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丙戊酸钠诱导神经干细胞分化过程中肝配蛋白A3的表达

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解剖学报 2018年第3期49卷 294-298页

作者：李雯何辉彭敏秦建兵施金洪金国华南通大学医学院人体解剖学系、江苏省神经再生重点实验室神经再生协同创新中心江苏南通226001

目的探讨丙戊酸钠(VPA)促进神经干细胞分化过程中肝配蛋白A3(Efna3)的表达以及Efna3在神经系统里的表达模式。方法分离培养SD大鼠海马神经干细胞,在VPA诱导分化后24 h和48 h,利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、免疫印迹法(Weste... 详细信息

目的探讨丙戊酸钠(VPA)促进神经干细胞分化过程中肝配蛋白A3(Efna3)的表达以及Efna3在神经系统里的表达模式。方法分离培养SD大鼠海马神经干细胞,在VPA诱导分化后24 h和48 h,利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、免疫印迹法(Western blotting)和免疫荧光技术检测Efna3的动态表达;Real-time PCR检测Efna3在成年SD大鼠各组织以及神经干细胞、星形胶质细胞和神经元中的表达水平。结果 VPA处理组与对照组相比,Efna3的表达量明显上升;Efna3在端脑和海马中呈现优势表达;Efna3在神经元中表达较高,而在星形胶质细胞中表达较低。结论 VPA促进神经干细胞分化可能与Efna3的表达上调有关。

关键词：肝配蛋白A3 丙戊酸钠神经干细胞神经元实时定量聚合酶链反应大鼠

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当前局部解剖学教学中的问题与解决对策

交通医学 2012年第2期26卷 203-204页

作者：施金洪金国华张新化南通大学医学院人体解剖学系江苏226001

局部解剖学（topographicor regional anatomy）是在系统解剖学的基础上,研究人体各个局部区域的层次和器官的位置、毗邻关系的一门科学[1]。学习该课程的主要目的是通过实地解剖,

关键词：局部解剖学教学体系教学改革

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际华公司精益生产人员培训问题与对策研究

际华公司精益生产人员培训问题与对策研究

作者：金洪凯西南科技大学

学位级别：硕士

本论文旨在研究和评述精益生产人员培训,并以际华公司为例进行分析。精益生产作为一种旨在提高生产效率和质量的管理方法,对于制造业企业的竞争力至关重要。通过文献综述和实证研究,本文揭示了精益生产人员培训的重要性和存在的问题,并... 详细信息

本论文旨在研究和评述精益生产人员培训,并以际华公司为例进行分析。精益生产作为一种旨在提高生产效率和质量的管理方法,对于制造业企业的竞争力至关重要。通过文献综述和实证研究,本文揭示了精益生产人员培训的重要性和存在的问题,并提出了改进措施。研究表明,精益生产人员培训对企业具有重要价值。通过培训,员工能够掌握精益生产的理论知识和实践技能,提高生产效率和产品质量。同时,培训还能够增强员工的问题解决和持续改进能力,培训创新思维和团队合作精神,为企业的可持续发展提供支持。然而,在实际培训中存在诸多问题,包括培训内容不够深入、培训方法传统、评估机制不完善等。针对这些问题,本文提出了改进精益生产人员培训的措施。首先,际华公司应该改进培训课程的内容和形式,提供更系统、全面的精益生产知识,帮助员工深入理解和应用精益原则和工具。其次,引入互动性和灵活性的培训方法,激发员工的学习兴趣和动力,培训解决问题和团队合作的能力。同时,建立有效的培训评估和反馈机制,及时了解员工的学习进展,确保培训的有效性和持续改进。通过改进精益生产人员培训,际华公司能够提高员工的技能水平和专业知识,促进精益生产理念的传播和实施。这将有助于提高际华公司在市场的竞争优势,推动际华公司向更高层次发展。改进精益生产人员培训对于际华公司的长远发展具有重要意义。

关键词：精益生产人员培训生产效率质量际华公司

切割穹窿海马伞海马提取液和银杏叶提取物联合诱导海马NSCs向胆碱能神经元的分化

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神经解剖学杂志 2009年第5期25卷 557-561页

作者：田美玲金国华谭雪锋朱惠霞秦建兵施金洪赵荷艳南通大学人体解剖学教研室暨神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室南通226001

为探讨切割穹窿海马伞海马提取液和银杏叶提取物(extract of ginkgo bilobo,EGb)在海马NSCs向胆碱能神经元定向分化中的作用,分别制备大鼠穹窿海马伞切割侧和正常侧海马提取液;将从鼠胚海马中分离扩增的NSCs球分成4组,应用不同的培养液... 详细信息

为探讨切割穹窿海马伞海马提取液和银杏叶提取物(extract of ginkgo bilobo,EGb)在海马NSCs向胆碱能神经元定向分化中的作用,分别制备大鼠穹窿海马伞切割侧和正常侧海马提取液;将从鼠胚海马中分离扩增的NSCs球分成4组,应用不同的培养液促其分化:(1)联合组:含切割侧海马提取液和银杏内酯的DMEM/F12培养基;(2)提取液组:含切割侧海马提取液的DMEM/F12培养基;(3)EGb组:含银杏内酯的DMEM/F12培养基;(4)对照组:含正常侧海马提取液的DMEM/F12培养基。培养14d后行ChAT免疫荧光检测,计算ChAT阳性神经元的分化率,图像处理细胞面积和周长。结果显示联合组各项指标均明显优于其它各组(P0.05)。上述提示切割穹窿海马伞的海马提取液和EGb联合应用可诱导海马NSCs分化为更多、更为成熟的胆碱能神经元。

关键词：海马提取液银杏内酯神经干细胞胆碱能神经元分化大鼠

大鼠海马神经干细胞Brn-4基因的特异性siRNA研究

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苏州大学学报（医学版） 2009年第6期29卷 1021-1025,F0002页

作者：朱蕙霞施金洪金国华田美玲秦建兵南通大学医学院生物化学教研室江苏南通226001 南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的筛选出高效针对大鼠海马神经干细胞Brn-4基因沉默的特异性siRNA。方法设计4对抑制Brn-4基因表达的特异性siRNA序列,通过脂质体转染入体外培养的大鼠海马神经干细胞中,采用RT-PCR和免疫荧光检测转染细胞Brn-4基因的表达,筛选出沉默Br... 详细信息

目的筛选出高效针对大鼠海马神经干细胞Brn-4基因沉默的特异性siRNA。方法设计4对抑制Brn-4基因表达的特异性siRNA序列,通过脂质体转染入体外培养的大鼠海马神经干细胞中,采用RT-PCR和免疫荧光检测转染细胞Brn-4基因的表达,筛选出沉默Brn-4基因最为有效的siRNA序列,并优化其转染条件。结果4对siRNA不同程度地阻断了海马神经干细胞Brn-4基因的表达,阻断效率最高的1^# siRNA最适转染剂浓度为0.5μmol/L,最佳转染时长为48 h。结论应用1^# siRNA可以高效率地沉默大鼠海马神经干细胞Brn-4基因的表达。

关键词：海马神经干细胞 siRNA Brn-4 大鼠

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海马放射状胶质细胞的体外诱导激活及其意义

神经解剖学杂志 2009年第4期25卷 375-380页

作者：赵荷艳田美玲施金洪秦建兵张新化金国华南通大学人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室南通226001

为探讨海马放射状胶质细胞在切割穹窿海马伞侧海马提取液的诱导下形态发生的变化,将培养的海马胶质细胞接种于24孔培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液,对照组加入单纯的细胞培养液... 详细信息

为探讨海马放射状胶质细胞在切割穹窿海马伞侧海马提取液的诱导下形态发生的变化,将培养的海马胶质细胞接种于24孔培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液,对照组加入单纯的细胞培养液,分别于培养后1、3、7和14d时行BLBP免疫荧光检测和Hoechst标记。计算两组各天时BLBP阳性细胞占Ho-echst阳性细胞的百分比,并用LeicaQiwn图像处理软件检测BLBP阳性细胞的周长和面积(含突起)。Stata8.0统计软件行组间比较。结果显示,1d时诱导组BLBP阳性细胞的比例稍高于对照组,两组细胞胞体均较小,突起均较短较细,无明显差异;3d时,诱导组BLBP阳性细胞的比例明显高于对照组,且胞体较大,突起较粗较长;7d时诱导组BLBP阳性细胞的比例明显高于对照组达到高峰,胞体更大,突起更粗更长交织成网;14d时两组BLBP阳性细胞的比例均稍有降低,但诱导组的比例仍明显高于对照组,两组细胞的胞体稍变小,突起稍变细变短。上述结果提示,切割穹窿海马伞侧海马提取液可明显地诱导BLBP阳性放射状胶质细胞增殖,并使胞体变大,突起变粗变长,呈"激活"状态。

关键词：放射状胶质细胞脑脂结合蛋白海马提取液免疫荧光细胞培养大鼠

基于五桥臂MMC-UPQC的复合模型预测控制研究

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电力系统保护与控制 2024年第11期52卷 179-187页

作者：李金洪周建萍夏文豪龚益琳上海电力大学自动化工程学院上海200090

针对模块化多电平统一电能质量调节器(modular multilevel unified power quality conditioner, MMC-UPQC)六桥臂结构下的单相桥臂故障问题,提出了一种五桥臂拓扑,这种新型拓扑可实现故障情况下的电能质量补偿。首先,对MMC-UPQC串并联... 详细信息

针对模块化多电平统一电能质量调节器(modular multilevel unified power quality conditioner, MMC-UPQC)六桥臂结构下的单相桥臂故障问题,提出了一种五桥臂拓扑,这种新型拓扑可实现故障情况下的电能质量补偿。首先,对MMC-UPQC串并联侧的数学模型进行分析,提出了一种复合模型预测控制(hybrid model predictive control,H-MPC),所提控制方法结合了有限集模型预测控制(finite-control-set model predictive control, FCS-MPC)以及快速模型预测控制(fast model predictive control, F-MPC)。然后,通过构建两侧独立的价值函数减少了控制方法的计算量,同时也实现了五桥臂解耦控制。最后,相比传统线性(例如PI)和非线性(例如无源控制passivity-based control,PBC)的控制策略,所提复合模型预测控制在电压补偿、负序电压抑制以及谐波电流补偿等方面具有一定优势,并在一定程度上避免了复杂的参数整定及坐标变化环节。仿真实验结果证明了所提控制方法的可行性和优越性。

关键词：桥臂故障电能质量模块化多电平统一电能质量调节器五桥臂拓扑复合模型预测控制

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顺铂诱导大鼠星形胶质细胞衰老的研究

神经解剖学杂志 2018年第3期34卷 382-386页

作者：杨清清施金洪韩笑秦建兵金国华李浩明南通大学杏林学院医学系南通226008 南通大学医学院人体解剖学系南通226001

目的:探讨顺铂(CDDP)对星形胶质细胞增殖的影响,明确CDDP在星形胶质细胞衰老中的作用。方法:分离、纯化大鼠星形胶质细胞,分别应用0,1,5,10,20μmol/L的CDDP处理细胞24 h,再用新鲜培养液培养3 d,随后进行细胞活力检测。10μmol/L CDDP... 详细信息

目的:探讨顺铂(CDDP)对星形胶质细胞增殖的影响,明确CDDP在星形胶质细胞衰老中的作用。方法:分离、纯化大鼠星形胶质细胞,分别应用0,1,5,10,20μmol/L的CDDP处理细胞24 h,再用新鲜培养液培养3 d,随后进行细胞活力检测。10μmol/L CDDP处理星形胶质细胞24 h,更换为新鲜培养液继续培养3 d后,分别应用免疫荧光检测Ki67阳性细胞,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)标记衰老细胞,Western Blot检测p16和p21的表达变化,并用流式细胞术检测细胞周期。结果:10μmol/L和20μmol/L CDDP处理星形胶质细胞24 h后,细胞活力明显下调;即使在新鲜培养液中继续培养3 d,细胞活力仍受明显抑制。10μmol/L CDDP减少Ki67阳性细胞的比例,但增加SA-β-Gal阳性细胞的比例;此外,10μmol/L CDDP还能够上调p16、p21的表达水平,并使细胞周期阻滞于S期。结论:CDDP能够抑制大鼠星形胶质细胞的增殖并诱导细胞衰老。

关键词：星形胶质细胞细胞衰老顺铂细胞活力大鼠