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壳寡糖对冈田酸诱导大鼠海马神经元Tau蛋白过度磷酸化的保护作用

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壳寡糖对冈田酸诱导大鼠海马神经元Tau蛋白过度磷酸化的保护作用

作者：施美君大连医科大学

学位级别：硕士

目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是一种常见的发病于老年期的中枢神经系统退行性疾病,其临床表现主要为进行性智能减退,大脑记忆和认知功能障碍。随着人口老龄化的加剧,全球发病人数日益增多。由于AD患者严重影响其生活质... 详细信息

目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是一种常见的发病于老年期的中枢神经系统退行性疾病,其临床表现主要为进行性智能减退,大脑记忆和认知功能障碍。随着人口老龄化的加剧,全球发病人数日益增多。由于AD患者严重影响其生活质量并给社会和家庭带来沉重的负担,因此对于该病的防治显得尤为重要。AD典型的病理特征为老年斑(SP)、神经元纤维缠结(NFTs)和神经元缺失。SP的形成与β-淀粉样蛋白(Aβ)的过量产生和沉积有关。到目前为止,它们与神经细胞退行性变之间的关系尚不十分清楚。NFTs的主要成分是异常过度磷酸化的Tau蛋白,它聚积在发生退行性变的神经元胞体并与AD患者临床痴呆程度呈正相关[1],且Tau蛋白的病理改变出现在痴呆症状之前并独立于Aβ异常[2]。Tau蛋白是一种微管相关蛋白,主要存在于神经元,具有促进微管组装和维持微管稳定的功能。在AD患者脑中Tau蛋白被异常过度磷酸化,从而丧失了正常的生理功能,进而缠结形成NFTs。已知有多种蛋白磷酸酯酶,如PP-l、PP-2A和PP-2B都参与了Tau蛋白的AD样异常过度磷酸化。壳寡糖又称寡聚氨基葡糖(chitooligosaccharide, COS)或甲壳低聚糖(chitosan oligosaccharide),是由甲壳素(又称几丁质,chitin)脱乙酰化的产物壳聚糖(chitosan)降解获得,由2～10个氨基葡糖通过β-1,4-糖苷键连接而成的低聚糖[3,4]。COS是天然糖中唯一大量存在的碱性氨基寡糖,具有水溶性好、安全无毒、易被动物体吸收等优点。研究表明COS具有很多的生物活性,如抗氧化[5]、清除自由基[6]、免疫调节、抑菌[7]和调节造骨细胞生长[8]等多种生理功能。有文献证实,COS有提高神经干细胞的分化率和分化突起长度的作用[9],并且壳寡糖及可溶性的壳聚糖衍生物为BACE1(β位点APP切割酶)的抑制剂[10,11]。COS是否对于AD中Tau蛋白的异常过度磷酸化具有抑制作用,目前尚无文献报道。本实验通过冈田酸(okadaic acid,OA)诱导原代培养的大鼠海马神经元Tau蛋白过度磷酸化的细胞模型,观察COS对OA致海马神经元Tau蛋白过度磷酸化的作用。方法:选用出生24小时的SD大鼠,无菌分离并培养海马神经元,倒置显微镜进行形态学观察,培养至7天,经冷丙酮固定后,尼氏染色鉴定神经元。选用OA诱导Tau蛋白过度磷酸化。实验分为正常对照组(normal)、溶媒对照组(vehicle-control)、OA损伤组(OA model)和10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml不同浓度壳寡糖预处理组(COS)。正常对照组细胞正常换液,COS预处理组于培养第二天换全液时加入不同终浓度的壳寡糖,并且在换液时维持其终浓度不变。细胞培养至第七天时,OA损伤组和COS预处理组加入终浓度为10nmol/L的OA(溶于10%DMSO中,使DMSO的终浓度不超过0.01%),溶媒对照组加入相同浓度的DMSO,作用12h。采用MTT法鉴定海马神经元的细胞存活率,分光光度法检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量的变化,免疫细胞化学、Western blot方法观察、检测海马神经元内磷酸化Tau蛋白的表达变化并进行定量分析,观察OA对海马神经元的毒性作用及COS的保护作用。结果:1、原代培养大鼠海马神经元的鉴定倒置显微镜进行形态学观察,尼氏染色鉴定神经元,细胞胞浆内蓝紫色颗粒及明显的空泡状核,为神经元所特有,占细胞总数90%以上。细胞的数量与状态可用于本研究。2、壳寡糖对OA致海马神经元细胞损伤的保护作用倒置显微镜进行形态学观察,正常对照组与溶媒对照组海马神经元细胞生长良好,胞体饱满呈梭形,折光性强,突起连接较密;OA损伤组大部分细胞胞体变圆,折光性差,突起断裂不连续甚至消失,细胞数目减少;COS预处理组各组的细胞形态有所改善,部分细胞突起出现,尤以20μg/ml和40μg/mlCOS预处理组细胞形态改善明显。MTT结果显示,OA损伤组细胞存活率较正常对照组和溶媒对照组明显下降,COS预处理组的细胞存活率较OA损伤组升高,且以20μg/ml和40μg/mlCOS预处理组较为显著,有统计学差异(n=5, P<0.01)。检测细胞上清液中LDH含量,OA损伤组LDH含量较正常对照组和溶媒对照组明显增高,COS预处理组的LDH含量较OA损伤组下降,且以20μg/ml和40μg/mlCOS预处理组较为显著,有统计学差异(n=5,P<0.05)。3、COS降低OA致海马神经元细胞过度磷酸化Tau蛋白的表达免疫细胞化学结果显示,OA损伤组海马神经元细

关键词：壳寡糖 Tau蛋白冈田酸阿尔茨海默病

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数学学科育人要有“思想”的脊梁

数学教学通讯 2023年第31期 15-17页

作者：施美君江苏省海安市角斜镇老坝港小学 226633

数学思想是数学学科的灵魂。在小学数学教学中,教师要多层次显化数学思想、全方位敞亮数学思想、立体性澄明数学思想,引导学生超越题海、超越数学学科的“工具理性”,借助数学思想走向数学学科知识的“实践理性”“解放理性”等。通过... 详细信息

数学思想是数学学科的灵魂。在小学数学教学中,教师要多层次显化数学思想、全方位敞亮数学思想、立体性澄明数学思想,引导学生超越题海、超越数学学科的“工具理性”,借助数学思想走向数学学科知识的“实践理性”“解放理性”等。通过显化、敞亮、澄明数学思想,让思想成为学生数学育人的脊梁。

关键词：小学数学学科育人 “思想”的脊梁

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基于多元智能理论的小学数学教学设计与实践

数学大世界(上旬) 2024年第6期 23-25页

作者：施美君海安市金港实验小学

在现代教育理念日益深入人心的今天，人们逐渐认识到教育的真正意义不仅在于传授知识，更在于促进学生综合素质与能力的全面发展。在这样的背景下，多元智能理论在小学数学教学中的应用引起了广泛的关注。这一理论是由心理学家加德纳提...

在现代教育理念日益深入人心的今天，人们逐渐认识到教育的真正意义不仅在于传授知识，更在于促进学生综合素质与能力的全面发展。在这样的背景下，多元智能理论在小学数学教学中的应用引起了广泛的关注。这一理论是由心理学家加德纳提出的，他强调智能并非仅限于语言智能和逻辑数学智能，而是涵盖了空间智能、音乐智能、身体运动智能、人际交往智能等多个方面。这一理论为我们提供了新的研究视角，促使我们重新审视小学数学教学的目标与方法。

关键词：

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浅谈市场经济下护理服务角色调适

浅谈市场经济下护理服务角色调适

天升元口服液对苯及环磷酰胺诱导的再生障碍性贫血模型小鼠的效应观察

全国护理行政管理学术交流暨专题讲座会议

作者：施美君武汉大学人民医院

现在大多数综合性医院的护理服务方式仍是计划经济体制的产物,与“福利型”的卫生事业相适应的,年复一年,已成习惯,被人们所接受。而在市场经济条件下,这种传统的服务模式受到了冲击和挑战。在临床护理工作中,护士气学的护理专业知识及...

现在大多数综合性医院的护理服务方式仍是计划经济体制的产物,与“福利型”的卫生事业相适应的,年复一年,已成习惯,被人们所接受。而在市场经济条件下,这种传统的服务模式受到了冲击和挑战。在临床护理工作中,护士气学的护理专业知识及相关的学科知识,与日趋白热化的医疗市场竞争不相匹配;护理理念以“疾病为中心到以病人为中心”的更新,但管理模式仍停留在“疾病

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来源： cnki会议评论

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中国实验方剂学杂志 2011年第24期17卷 184-188页

作者：施美君秦晓天朱传江中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050 北京天雨义鸣生物科技有限公司北京100078

目的:观察天升元口服液在苯及环磷酰胺诱导的再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)模型小鼠的效应。方法:给予雄性CD1小鼠环磷酰胺(50 ***-1.d-1,qd×7次,sc)和苯(2 ***-1.d-1,qod×15次,sc)制备AA小鼠模型,同时给予天升元口服液(含生药3... 详细信息

目的:观察天升元口服液在苯及环磷酰胺诱导的再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)模型小鼠的效应。方法:给予雄性CD1小鼠环磷酰胺(50 ***-1.d-1,qd×7次,sc)和苯(2 ***-1.d-1,qod×15次,sc)制备AA小鼠模型,同时给予天升元口服液(含生药3.1,6.2,12.4 ***-1,bid×30 d,ig),检测外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)和网织红细胞(RET)数,并检测股骨骨髓有核细胞(BMNC)和巨核细胞数(MKC)及病理变化。结果:模型对照组所测指标(除WBC)均较正常对照组显著下降(P<0.05～0.001);天升元口服液24.8 ***-1能显著升高模型小鼠RBC,HGB,HCT,PLT,RET,BMNC和MKC数(P<0.05～0.01),比模型对照组分别增加8.3%,8.8%,7.4%,14.8%,102.0%,34.7%和66.7%,对WBC的提升作用不明显;能使过半数模型小鼠的骨髓造血细胞异常情况好转。结论:天升元口服液通过促进骨髓造血细胞增殖,改善造血功能,对AA模型小鼠显示出生物活性。

关键词：再生障碍性贫血天升元口服液造血功能苯环磷酰胺

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对基本医疗保险转诊患者的医疗关怀及管理

医学与哲学（A） 2009年第1期30卷 40-41页

作者：施美君胡春花方艳武汉大学人民医院湖北武汉430060

通过分析某医管中心2003年～2006年医保基金收支及转外就医情况,比较我院同期工作量。结果显示,某医管中心的参保人数从31957人增至42999人,转诊人员平均报销率从66%增至70%,人均住院费用下降14.46%,统筹基金支出占基金收入比在88%～91... 详细信息

通过分析某医管中心2003年～2006年医保基金收支及转外就医情况,比较我院同期工作量。结果显示,某医管中心的参保人数从31957人增至42999人,转诊人员平均报销率从66%增至70%,人均住院费用下降14.46%,统筹基金支出占基金收入比在88%～91%。我院住院人数增加,病床使用率提高,均住院日下降。表明转诊患者的医疗费用达到合理使用和控制,我院医疗资源使用达到最大化,经济及社会效益回报高。

关键词：转诊医疗费用管理

血管紧张素转换酶抑制剂所致咳嗽与血管紧张素转换酶基因多态性的相关性

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武汉大学学报（医学版） 2008年第1期29卷 92-94页

作者：施美君刘丹胡克陈国忠杨炯武汉大学人民医院内科湖北武汉430060 武汉大学中南医院呼吸内科湖北武汉430071

目的:探讨原发性高血压患者在口服血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)后发生的咳嗽与血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性之间的相关性。方法:应用多聚酶链反应(PCR)对口服ACEI的原发性高血压患者(包括发生咳嗽与不发生咳嗽者)ACE基因多态性进... 详细信息

目的:探讨原发性高血压患者在口服血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)后发生的咳嗽与血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性之间的相关性。方法:应用多聚酶链反应(PCR)对口服ACEI的原发性高血压患者(包括发生咳嗽与不发生咳嗽者)ACE基因多态性进行检测,并比较两组患者服药前血清ACE水平。结果:130例患者中有51例(39.2%)发生咳嗽。咳嗽组ACE的I型等位基因及II型基因型频率分别为62.7%和54.8%,非咳嗽组分别为39.2%和21.5%,两组比较差异有显著性(P<0.05)。咳嗽组服药前血清ACE水平[(27.37±11.43)U/L]明显低于非咳嗽组[(45.21±12.56)U/L],两组血清ACE水平比较差异有显著性(P<0.001)。服药前血清ACE水平在DD基因型最高[(36.65±12.78)U/L],ID型次之[(27.84±7.11)U/L],II型最低[(23.02±8.31)U/L],3个基因型间比较差异有显著性(P<0.01)。结论:血清ACE水平及ACE基因多态性与高血压患者口服ACEI后所致的咳嗽有关。

关键词：血管紧张素转换酶基因多态性咳嗽血管紧张素转换酶抑制剂

无创性双正压辅助通气治疗Ⅱ型呼吸衰竭的护理

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湖北医科大学学报 1993年第3期14卷 276-278页

作者：施美君曹作炎

天升元口服液在苯及环磷酰胺诱导的再生障碍性贫血模型小鼠上的效应观察

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天升元口服液在苯及环磷酰胺诱导的再生障碍性贫血模型小鼠上的效...