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反相高压液相色谱折叠重组人白细胞介素-2

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生物工程学报 1997年第2期13卷 180-183页

作者：凌明圣许祥裕施凤霞朱有华龙娜南京军区军事医学研究所

重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ２）基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在，经过菌体发酵和收集、超声破菌、包涵体抽提、稀释透析初步复性、反相高压液相色谱纯化，终产物纯度大于９９％。反相高压液相色谱不仅可以纯化... 详细信息

重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ２）基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在，经过菌体发酵和收集、超声破菌、包涵体抽提、稀释透析初步复性、反相高压液相色谱纯化，终产物纯度大于９９％。反相高压液相色谱不仅可以纯化ｒｈＩＬ２，且使产物的总活性提高７９～９倍，比活性提高１４～１８倍，达到１５×１０７ｕ／ｍｇ蛋白质，蛋白得率为５０％～５６％。结果表明，反相高压液相色谱具有纯化和显著提高ｒｈＩＬ２折叠效率的双重功效。

关键词：重组人白细胞介素-2 折叠高压液相色谱制备

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重组粒单系集落刺激因子的中试分离纯化研究

药物生物技术 1995年第3期2卷 1-6页

作者：凌明圣许祥裕丁树标唐治华施凤霞朱有华龙娜南京军区军事医学研究所

重组粒单系集落刺激因子（ｒＧＭ－ＣＳＦ）在大肠杆菌中以包涵体形式表达。在实验室规模分离纯化的基础上，我们进行了中试分离纯化研究，优化了发酵、破菌、包涵体的回收、产物的抽提、复性、色谱分离及放大过程。根据包涵体表达产物... 详细信息

重组粒单系集落刺激因子（ｒＧＭ－ＣＳＦ）在大肠杆菌中以包涵体形式表达。在实验室规模分离纯化的基础上，我们进行了中试分离纯化研究，优化了发酵、破菌、包涵体的回收、产物的抽提、复性、色谱分离及放大过程。根据包涵体表达产物的共性，第一步分离用分子排阻层析可以除去大部分大分子杂质，进一步的纯化方案根据包涵体溶解试剂和产物本身的分子特性采用阴离子交换层析。阴离子交换层析后活性回收率在１２０％左右。得到的产品经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染为单一条带，比活可达１．５×１０￣７ｕ／ｍｇ。

关键词：重组粒单系集落刺激因子包涵体纯化中试

聚乙二醇增加重组人粒-单系集落刺激因子复性效率的研究

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药物生物技术 1997年第1期4卷 5-8页

作者：凌明圣许祥裕施凤霞丁树标张永恒南京军区军事医学研究所南京210002 中国药科大学药物分析教研室南京210009

重组人粒 -单系集落刺激因子 (rh GM- CSF)在大肠杆菌表达后积累在细胞中形成包涵体 ,在变性的包涵体的抽提液复性过程中 ,目的产物可能聚积而使活性蛋白的得率降低。本研究对聚乙二醇 (PEG)增加复性的能力进行试验。将 rh GM- CSF在 6 ... 详细信息

重组人粒 -单系集落刺激因子 (rh GM- CSF)在大肠杆菌表达后积累在细胞中形成包涵体 ,在变性的包涵体的抽提液复性过程中 ,目的产物可能聚积而使活性蛋白的得率降低。本研究对聚乙二醇 (PEG)增加复性的能力进行试验。将 rh GM- CSF在 6 mol/L尿素中变性 ,迅速稀释到不同浓度尿素和 PEG的溶液中并保持蛋白浓度为 0 .2 mg/ml,在尿素浓度为 2 .0 mol/L,PEG4 0 0 0对rh GM- CSF的摩尔比为 2 0∶ 1时活性蛋白从 4 0 %增加到 55% ,rh GM- CSF的比活从 5.1× 10 6u/mg增加到 1.0× 10 7u/mg,总蛋白得率从 50 %增加到 10 0 %。表明 PEG能增加变性蛋白的复性效率。

关键词：集落刺激因子聚乙二醇复性

不同产地PHA诱导脾脏淋巴细胞产生IL-2活性的研究

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生化药物杂志 1991年第1期 61-63页

作者：虞冠华施凤霞罗丽华丁树标朱有华丁邦裕南京军区军事医学研究所江苏省肿瘤防治研究所

白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)是由Margtn等人在1976年发现的免疫调节因子,近年来的研究表明,它不仅对T细胞,而且对NK细胞、LAK细胞、TIL细胞、B细胞都有激活作用,特别是由IL-2诱导和激活产生的LAK、TIL细胞在肿瘤治疗上取得的显著... 详细信息

白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)是由Margtn等人在1976年发现的免疫调节因子,近年来的研究表明,它不仅对T细胞,而且对NK细胞、LAK细胞、TIL细胞、B细胞都有激活作用,特别是由IL-2诱导和激活产生的LAK、TIL细胞在肿瘤治疗上取得的显著疗效,更引起了人们对IL-2的极大关注。天然IL-2可以通过丝裂原刺激T淋巴细胞而产生。本文用南京、上海、广州生产的PHA在相同实验条件下进行平行实验,对不同产地PHA诱导产生IL-2的能力进行了研究。

关键词： IL-2 PHA 脾淋巴细胞活性

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重组白细胞介素-2的纯化和生物活性研究

江苏医药 1992年第2期18卷 88-89页

作者：丁树标虞冠华许祥裕施凤霞朱敏生南京军区后勤部军事医学研究所

本文在对重组白细胞介素-2(rIL-2)纯化的基础上,用rIL-2进行LAK 细胞活性诱导及NK 细胞活性等研究,现将结果报道如下。材料和方法***-2的纯化,rIL-2包含体用8moL/L盐酸胍溶解后,上sephede XG-100柱,分部收集,合并活性峰,对50mmoL/L Tris... 详细信息

本文在对重组白细胞介素-2(rIL-2)纯化的基础上,用rIL-2进行LAK 细胞活性诱导及NK 细胞活性等研究,现将结果报道如下。材料和方法***-2的纯化,rIL-2包含体用8moL/L盐酸胍溶解后,上sephede XG-100柱,分部收集,合并活性峰,对50mmoL/L Tris-HClpH8.2溶液透析后,用W650蛋白质纯化系统(wa-ters 公司)进一步纯化。***-2活性测定:MTT 比色分析法进行,效应细胞为CTLL-2,用酶标仪(英国Flon 公

关键词：生物活性 LAK 细胞活性白细胞介素活性测定

As-80号复方注射液对4例DDVP中毒的临床验证报告

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As-80号复方注射液对4例DDVP中毒的临床验证报告

肾小球疾病患儿外周血IL-2活性水平及IL-2受体表达的研究

全国中毒与救治学术交流会暨中国毒理学会中毒与救治专业委员会成立大会

作者：丁树标唐治华荣曙施凤霞岑芳桂许祥裕李振松南京军区军事医学研究所南京市第一医院

As-80号复方由南京军区联勤部军事医学研究所研制,在完成临床前药理、毒理研究后,经本军区卫生部批准,在南京军区部队和个别地方医院进行临床验证。在1985年夏我们同南京市第一人民医院合作,按救治敌敌畏中毒的临床验证方案,对轻度和中...

As-80号复方由南京军区联勤部军事医学研究所研制,在完成临床前药理、毒理研究后,经本军区卫生部批准,在南京军区部队和个别地方医院进行临床验证。在1985年夏我们同南京市第一人民医院合作,按救治敌敌畏中毒的临床验证方案,对轻度和中度敌敌畏中毒患者进行了临

关键词：

来源： cnki会议评论

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南京医科大学学报（自然科学版） 1997年第1期17卷 25-27页

作者：陈迎章姜新猷虞冠华许祥裕丁树标施凤霞南京医科大学小儿肾脏病研究中心南京军区军事医学研究所海南医学院附院儿科

观察急性肾炎和肾病综合征患儿外周血白细胞介素－２（ＩＬ－２）活性及Ｔ细胞白细胞介素－２（ＩＬ－２Ｒ）表达。结果：①肾病患儿肾病期ＩＬ－２活性及ＩＬ－２Ｒ均下降，并与疾病的活动性有关；②肾病患儿ＩＬ－２活性变化与ＩｇＧ... 详细信息

观察急性肾炎和肾病综合征患儿外周血白细胞介素－２（ＩＬ－２）活性及Ｔ细胞白细胞介素－２（ＩＬ－２Ｒ）表达。结果：①肾病患儿肾病期ＩＬ－２活性及ＩＬ－２Ｒ均下降，并与疾病的活动性有关；②肾病患儿ＩＬ－２活性变化与ＩｇＧ含量变化呈正相关，提示ＩＬ－２活性下降可能是低ＩｇＧ血症的原因之一；③急性肾炎患儿在急性期淋巴细胞产生ＩＬ－２及表达ＩＬ－２Ｒ的能力均降低，而未经ＰＨＡ刺激的淋巴细胞ＩＬ－２Ｒ表达却高于正常对照。这些结果提示：①急性肾炎和肾病综合征患儿Ｔ淋巴细胞功能受损，免疫应答能力下降；②细胞免疫功能紊乱在这２种肾小球疾病的发病中可能有一定作用。

关键词：肾变病综合征肾小球肾炎白细胞介素-2

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蝎提取物对S180肉瘤抑制作用的实验观察

江苏医药 1990年第9期 513-514页

作者：朱东亚朱敏生朱有华丁树标施凤霞苏立许祥裕山东菏泽市药用生物研究所南京军区军事医学研究所

蝎乃传统中药材,有祛风、止痉、通络、解毒等功用,临床用于治疗癲痫、小儿惊厥及中风后面瘫等疾患。全蝎的醇制剂在体外能抑制人肝癌细胞呼吸,其水和醇提取物分别对人肝癌和结肠癌细胞有抑制作用。但迄今尚未见在体内有抗肿瘤作用的报... 详细信息

蝎乃传统中药材,有祛风、止痉、通络、解毒等功用,临床用于治疗癲痫、小儿惊厥及中风后面瘫等疾患。全蝎的醇制剂在体外能抑制人肝癌细胞呼吸,其水和醇提取物分别对人肝癌和结肠癌细胞有抑制作用。但迄今尚未见在体内有抗肿瘤作用的报道。本文观察蝎尾和蝎体提取物对S肉瘤的抑制作用,现报道如下。

关键词：提取物腹腔注射抑制作用基因互作瘤重灌胃法肉瘤

5-氟脲嘧啶、丝裂霉素C对外周血LAK细胞杀伤活性的影响

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江苏医药 1990年第2期16卷 70-71页

作者：朱敏生许祥裕丁树标虞冠华施凤霞田学信南京军区军事医学研究所南京军区司令部门诊部

本实验察了5-氟脲嘧啶(5-FU)、丝裂霉素C(MMC)对天然白细胞介素Ⅱ(N-IL_2)诱导的淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)杀伤活性的影响。结果发现5-FU、MMC 对LAK 细胞的杀伤活性有明显影响。作者认为在临床上应用LAK 治疗的同时不宜同时应用大剂最... 详细信息

本实验察了5-氟脲嘧啶(5-FU)、丝裂霉素C(MMC)对天然白细胞介素Ⅱ(N-IL_2)诱导的淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)杀伤活性的影响。结果发现5-FU、MMC 对LAK 细胞的杀伤活性有明显影响。作者认为在临床上应用LAK 治疗的同时不宜同时应用大剂最的5-氟脲嘧啶或丝裂霉素C。

关键词： 5-氟脲嘧啶丝裂霉素C LAK