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乙型肝炎核心抗体阳性肾病综合征患者糖皮质激素治疗后乙型肝炎病毒再激活一例

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中华传染病杂志 2016年第2期34卷 120-121页

作者：曹爽方均燕沈波刘英莉上海交通大学医学院附属第九人民医院肾脏内科 200011

患者男，78岁，因反复双下肢水肿半年，加重伴恶心、呕吐2周，于2015年8月17日收住上海交通大学医学院附属第九人民医院。肾脏内科。患者半年前无明显诱因出现双下肢水肿，为凹陷性，伴泡沫尿，2015年3月5日至外院就诊，查尿蛋白（＋＋... 详细信息

患者男，78岁，因反复双下肢水肿半年，加重伴恶心、呕吐2周，于2015年8月17日收住上海交通大学医学院附属第九人民医院。肾脏内科。患者半年前无明显诱因出现双下肢水肿，为凹陷性，伴泡沫尿，2015年3月5日至外院就诊，查尿蛋白（＋＋＋），24h尿蛋白5．99g，

关键词：乙型肝炎病毒再激活肾病综合征激素治疗患者抗体阳性糖皮质 24h尿蛋白双下肢水肿

大电导钙依赖性钾通道对LPS诱导THP-1来源巨噬细胞免疫活性的影响

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现代免疫学 2021年第4期41卷 278-283页

作者：方均燕宋阿会刘英莉上海交通大学医学院附属第九人民医院肾内科上海200011

为鉴定人单核细胞系THP-1中大电导钙依赖性钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channel,BKca)蛋白的表达及其对THP-1细胞活性、极化及细胞因子分泌功能的影响,用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导人单核细胞系THP-1,使其成为具有贴壁能力的巨噬细胞,用Western blotting检测BKca蛋白的表达,先后应用LPS和BKca特异性抑制剂影响巨噬细胞上BKca的活性,用CCK-8检测细胞活性的变化,流式细胞仪检测巨噬细胞表型极化情况,qRT-PCR检测细胞因子mRNA(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10)的表达。结果显示,Western blotting检测到人单核细胞系THP-1来源的巨噬细胞上存在BKca的表达,随着BKca特异性抑制剂浓度的增加,细胞活力明显降低(P<0.05)。应用LPS和BKca特异性抑制剂,可抑制BKca的表达,降低M1标志物CD80的表达,促进M2标志物CD206的表达(P<0.05),同时降低其分泌的促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平,促进抑炎因子IL-10的分泌(P<0.05)。该研究提示,BKca参与LPS诱导的巨噬细胞的早期活化及M2/M1亚型的极化,介导炎症反应的发生、发展,可能是抗炎治疗的潜在靶点。

关键词：大电导钙依赖性钾通道人单核细胞系细胞活性极化细胞因子

腹膜透析滤出液外泌体miR-200a在不同腹膜转运特性患者中的表达差异及其生物学功能预测

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第1期41卷 42-48页

作者：佟琰方均燕邓海宋阿会李璞刘英莉上海交通大学医学院附属第九人民医院肾内科上海200011

目的·提取和鉴定腹膜透析滤出液(peritoneal dialysis effluent,PDE)外泌体,比较不同腹膜转运特性患者PDE外泌体miR-200a的表达水平,预测其潜在靶基因及参与的生物学过程。方法·将20例腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者按照腹膜... 详细信息

目的·提取和鉴定腹膜透析滤出液(peritoneal dialysis effluent,PDE)外泌体,比较不同腹膜转运特性患者PDE外泌体miR-200a的表达水平,预测其潜在靶基因及参与的生物学过程。方法·将20例腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者按照腹膜平衡实验(peritoneal equilibrium test,PET)值分为H组(高转运/高平均转运)和L组(低转运/低平均转运)。每位患者收集500 mL留腹过夜PDE,浓缩后超速离心,透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、纳米粒子跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)和Western blotting鉴定外泌体。提取外泌体miRNA,实时荧光定量PCR检测2组患者PDE外泌体miR-200a的表达水平,分析其与PET值和超滤量的相关性。利用Targetscan、miRmap和miRWalk数据库预测miR-200a的靶基因,用DAVID数据库进行基因功能(gene ontology,GO)富集分析。结果·浓缩的PDE超速离心后提取到的外泌体,TEM下呈双层膜包裹的圆形囊泡,NTA显示其直径大多在50~150 nm,表面具有外泌体标志蛋白CD9和CD63。L组中PDE外泌体miR-200a的相对表达量显著高于H组,并且与PET值呈负相关(r=-0.871,P=0.000),与4 h超滤量呈正相关(r=0.448,P=0.048),但与24 h超滤量无相关性(r=0.355,P=0.125)。生物信息学分析发现共有679种基因可由3个数据库共同预测到;GO分析显示这些靶基因不仅参与正向调控间充质细胞增殖,也在金属离子结合方面有一定富集。结论·PDE中存在外泌体,腹膜转运特性较低的患者PDE外泌体miR-200a相对表达量较高,其与PET值呈负相关,与4 h超滤量呈正相关。miR-200a的潜在靶基因众多,可能通过不同生物学过程影响腹膜转运特性。

关键词：腹膜透析滤出液外泌体 miR-200a 腹膜转运特性生物信息学

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慢性肾病免疫功能的研究进展

国际泌尿系统杂志 2009年第3期29卷 388-391页

作者：方均燕(综述) 张薇(审校) 上海交通大学医学院附属第九人民医院肾脏内科上海200011

慢性肾病（chronic kidney disease CKD）的发生大多数与免疫异常有着密切的关系，迄今为止。免疫功能的现状以及各相关因素对机体免疫系统功能的作用机理等问题，尚未完全清楚，且相应的干预靶点及具体措施也未明确．故阐明CKD的免疫... 详细信息

慢性肾病（chronic kidney disease CKD）的发生大多数与免疫异常有着密切的关系，迄今为止。免疫功能的现状以及各相关因素对机体免疫系统功能的作用机理等问题，尚未完全清楚，且相应的干预靶点及具体措施也未明确．故阐明CKD的免疫功能对患者的生存率和生活质量有重要相关性，本文简要阐述CKD患者免疫功能的研究进展。

关键词：肾疾病慢性病免疫性

维持性透析患者安全用药知信行现状调查及相关因素分析

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上海交通大学学报（医学版） 2023年第1期43卷 88-94页

作者：魏珊纪鸥洋陈志豪黄泽慧李璞方均燕刘英莉上海交通大学医学院附属第九人民医院肾脏内科上海200125

目的·调查维持性透析患者药物治疗管理过程中安全用药知识、信念、行为(知信行;knowledge,attitude,belief and practice,KAP)现状并分析其相关因素。方法·该研究为横断面研究,选取2019年3月至2021年3月上海交通大学医学院附属第九人... 详细信息

目的·调查维持性透析患者药物治疗管理过程中安全用药知识、信念、行为(知信行;knowledge,attitude,belief and practice,KAP)现状并分析其相关因素。方法·该研究为横断面研究,选取2019年3月至2021年3月上海交通大学医学院附属第九人民医院肾脏内科的维持性透析患者,使用经过信度、效度验证的慢性肾脏病患者安全用药KAP量表评价其用药安全情况,同时调查其人口学特征、用药清单和临床特征,根据Strand分类系统评估药物相关问题(medication-related problem,MRP)的发生情况。采用单因素分析及多重线性回归分析探索透析患者安全用药KAP水平的相关因素。结果·共纳入187例维持性透析患者,其中103例维持性血液透析患者,84例持续非卧床腹膜透析患者,平均年龄(60.19±12.80)岁,平均透析龄为(44.31±36.90)个月,平均共病(6.37±2.17)种,平均用药(7.48±2.66)种。用药安全KAP量表总分为(77.68±18.53)分,其中安全用药知识平均(24.96±8.92)分,安全用药信念平均(17.19±3.18)分,安全用药行为平均(35.40±8.18)分。单因素分析结果显示:维持性透析患者的安全用药KAP得分在不同透析方式、文化程度、经济水平及是否并发肾性贫血上差异存在统计学意义(均P均P均月收入>6000元(β=8.309,95%CI 1.891~14.727,P=0.011)及共病数更少(β=-1.582,95%CI-2.783~-0.382,P=0.010)、发生的MRP更少(β=-2.284,95%CI-3.987~-0.581,P=0.009)的透析患者安全用药KAP量表得分更高。结论·维持性透析患者的安全用药KAP水平较低,血液透析、低文化程度、低经济水平、高共病数及高MRP数是透析患者安全用药KAP低水平的危险因素。

关键词：血液透析腹膜透析安全用药知识-信念-行为(知信行) 药物安全管理健康教育

慢性肾脏病患者安全用药知信行量表的编制及信度、效度分析

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上海交通大学学报（医学版） 2022年第12期42卷 1729-1738页

作者：魏珊纪鸥洋陈志豪黄泽慧李璞方均燕刘英莉上海交通大学医学院附属第九人民医院肾脏内科上海200125

目的·编制慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者安全用药知识-信念-行为(knowledge,attitude,belief and practice,KABP)量表并检验其信度和效度。方法·基于KABP理论,通过系统的文献回顾和半结构化访谈,由科研小组成员综合讨... 详细信息

目的·编制慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者安全用药知识-信念-行为(knowledge,attitude,belief and practice,KABP)量表并检验其信度和效度。方法·基于KABP理论,通过系统的文献回顾和半结构化访谈,由科研小组成员综合讨论设计初始条目。采用德尔菲专家咨询法和预调查改进初始条目形成初始量表。纳入上海交通大学医学院附属第九人民医院CKD患者进行问卷调查,使用临界比值法、同质性检验进行条目分析,分别使用探索性因子分析和逻辑分析检验量表的结构效度和内容效度,使用Cronbach′s α系数、折半信度、重测信度检验量表信度。结果·初始量表由3个维度29个条目组成,共发放213份问卷,收集有效问卷209份。条目分析结果显示条目1、2、3、19均有3项以上指标未达标,因此删除这4个条目后进行效度检验。初始量表KMO (Kaiser-Meyer-Olkin)为0.946,Bartlett′s球形检验χ^(2)值为4 554.451 (P=0.000),提示总体的相关矩阵有共同因素存在,适合进行因素分析。使用主成分分析法及直交转轴最大变异法进行因素分析,最终删除条目13;根据各因素内的条目变量特性,提取的3个共同因素分别命名为“安全用药行为”“安全用药知识”“安全用药信念”,3个维度的特征值分别为6.565、6.176、3.863;累积方差贡献率为69.18%。全体一致量表水平内容效度(scale-level-content validity index/universal agreement,S-CVI/UA)和平均量表水平内容效度(S-CVI/average,S-CVI/Ave)分别为0.860和0.987。最终量表由3个维度24个条目组成。信度检验显示总量表的Cronbach′s α系数为0.964,折半信度为0.911,重测信度为0.892。结论·该研究编制的CKD患者安全用药KABP量表具有良好的信度和效度。

关键词：慢性肾脏病安全用药知识-信念-行为理论量表

小型动物连续性动脉-静脉血液滤过血液净化平台的构建

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中华肾脏病杂志 2016年第7期32卷 507-512页

作者：俞雯艳马帅徐庆青邓博方均燕刘婷彦丁峰上海交通大学医学院附属第九人民医院肾脏科危重肾脏病研究室 200011

目的：构建小型动物血液净化系统，为血液净化技术治疗机制的基础研究提供安全、可靠的实验平台。方法选用雄性SD大鼠，使用PE50插管开放右侧颈动脉和对侧颈静脉作为体外循环的血管通路，建立连续性动脉？静脉血液滤过血液净化系统。血... 详细信息

目的：构建小型动物血液净化系统，为血液净化技术治疗机制的基础研究提供安全、可靠的实验平台。方法选用雄性SD大鼠，使用PE50插管开放右侧颈动脉和对侧颈静脉作为体外循环的血管通路，建立连续性动脉？静脉血液滤过血液净化系统。血流速度、置换液速度和超滤速度均由小型蠕动泵控制在一定范围内。在维持麻醉和肝素抗凝的基础上进行4h血液净化治疗。检测血液净化治疗过程中动脉血气、电解质及血糖的变化情况；监测血压、心率等生命体征；观察血液净化治疗过程中是否发生大量出血、血栓形成及气体栓塞等不良反应。结果动脉血气、电解质及血糖未发生明显变化（P＞0.05）；血液净化治疗前后生命体征未发生明显波动（P＞0.05）；血液净化治疗过程中不良反应发生率低。结论动脉？静脉血液滤过对健康大鼠未造成明显不良反应，小型动物血液净化平台安全、可行。

关键词：模型动物大鼠 Sprague-Dawley 血液滤过血液净化

胰高血糖素样肽-1相关药物在糖尿病合并慢性肾脏病患者中的临床应用价值

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上海医药 2022年第3期43卷 3-7,11页

作者：方均燕丁峰李雪竹上海交通大学医学院附属第九人民医院肾内科上海200011

糖尿病是慢性肾脏病和终末期肾脏病的最常见病因,而慢性肾脏病是糖尿病的重要合并症之一,血糖控制不佳会使慢性肾脏病加速进展至终末期肾脏病。因此,控制糖尿病患者的血糖水平至关重要,寻找新方法防治糖尿病肾脏疾病已成为目前重要的医... 详细信息

糖尿病是慢性肾脏病和终末期肾脏病的最常见病因,而慢性肾脏病是糖尿病的重要合并症之一,血糖控制不佳会使慢性肾脏病加速进展至终末期肾脏病。因此,控制糖尿病患者的血糖水平至关重要,寻找新方法防治糖尿病肾脏疾病已成为目前重要的医学研究课题之一。胰高血糖素样肽-1相关药物是近年来开发上市的新型降血糖药物,大量临床研究证实其还能降低糖尿病患者的心血管事件发生率,改善合并慢性肾脏病患者的肾脏结局,为糖尿病患者肾脏保护治疗提供了新的选择。本文概要介绍胰高血糖素样肽-1受体激动剂和二肽基肽酶-4抑制剂用于糖尿病合并慢性肾脏病患者治疗的研究进展及其临床益处。

关键词： 2型糖尿病慢性肾脏病胰高血糖素样肽-1受体激动剂二肽基肽酶-4抑制剂

不同腹膜转运特性患者腹膜透析滤出液外泌体miR-503表达差异及生物信息学分析

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中华肾脏病杂志 2020年第7期36卷 503-511页

作者：佟琰方均燕邓海宋阿会朱彤莹葛霄琳刘英莉上海交通大学医学院附属第九人民医院肾内科上海200011 复旦大学附属华山医院肾内科上海200040

目的比较腹膜透析滤出液(PDE)外泌体微RNA(microRNA,miR)-503在不同腹膜转运特性患者中的表达差异,并预测miR-503的靶基因及其可能的生物学作用,为其在腹膜转运特性方面的研究提供生物信息学数据。方法选取24例稳定维持性腹膜透析(PD)患... 详细信息

目的比较腹膜透析滤出液(PDE)外泌体微RNA(microRNA,miR)-503在不同腹膜转运特性患者中的表达差异,并预测miR-503的靶基因及其可能的生物学作用,为其在腹膜转运特性方面的研究提供生物信息学数据。方法选取24例稳定维持性腹膜透析(PD)患者,根据腹膜平衡试验(PET)结果分为高转运(高/高平均转运组,n=12)和低转运(低/低平均转运组,n=12)两组。收集患者留腹过夜的PDE 500 ml,利用超滤杯进行浓缩后,超速离心法提取外泌体,重悬于磷酸盐缓冲液(PBS),通过透射电镜(TEM)、纳米粒子跟踪分析(NTA)、Western印迹和荧光染色鉴定外泌体的形态结构和功能。提取PDE外泌体miR,实时荧光定量PCR法检测两组PDE外泌体miR-503的表达水平,并分析miR-503的相对表达量与PET值和24 h超滤量的相关性。使用Targetscan和miRDB数据库预测miR-503的靶基因,运用富集分析工具DAVID(https://***/)进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路分析。结果PDE中提取到的外泌体透射电镜下呈杯状,直径100 nm左右,表达特异性表面标志CD63、CD81和热休克蛋白-70(HSP-70),可被间皮细胞内化吞噬。与低转运组相比,高转运组PDE外泌体miR-503的相对表达量较高(P=0.002),且PDE外泌体miR-503的相对表达量与PET值呈正相关(r=0.547,P=0.006),但与24 h超滤量无相关性(r=-0.297,P=0.159)。miR-503共有156个靶基因可通过2个不同数据库同时预测出,156个靶基因的GO分析显示主要富集在与蛋白激酶结合、调节蛋白修饰和代谢过程以及调控上皮细胞增殖方面。KEGG通路则富集了许多肿瘤相关和经典的信号传导通路,包括转化生长因子-β(TGF-β)通路和血管内皮生长因子(VEGF)信号通路,同时血管内皮生长因子A(VEGFA)也是miR-503的直接靶基因,与许多纤维化机制中的蛋白相关。结论PDE外泌体miR-503在高转运组中明显升高,并与PET值呈正相关。生物信息学分析提示其可能通过靶向VEGFA调控腹膜血管新生。

关键词：腹膜透析外泌体微RNAs 滤出液腹膜转运状态 miR-503