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新型氢离子敏感型荧光探针的合成及其在细胞成像中的应用

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新型氢离子敏感型荧光探针的合成及其在细胞成像中的应用

作者：文朝朝山西医科大学

学位级别：硕士

目的:将苯并咪唑及其衍生物通过C=C键与一个荧光基团连接,构成以苯并咪唑为氢离子响应部分,以荧光基团为信号发射部分,以乙烯桥为连接部分的新型氢离子敏感型荧光探针。共设计合成两类探针,第一类为探针C2(4-(2-(1H-benzo[d]imidazol-2-... 详细信息

目的:将苯并咪唑及其衍生物通过C=C键与一个荧光基团连接,构成以苯并咪唑为氢离子响应部分,以荧光基团为信号发射部分,以乙烯桥为连接部分的新型氢离子敏感型荧光探针。共设计合成两类探针,第一类为探针C2(4-(2-(1H-benzo[d]imidazol-2-yl)vinyl)-N,N-dimethylaniline),以苯并咪唑桥联二甲苯胺为结构基础,第二类为系列探针C4(4-(2-(5-halo-1H-benzo[d]imidazol-2-yl)vinyl)-N,N-diphenylaniline),分为C4-F、C4-Cl、C4-Br、C4-I,以卤代苯并咪唑桥联三苯胺为结构基础。研究两类探针的紫外吸收及荧光光谱特性、荧光稳定性、可逆性、选择性、生物相容性、溶酶体靶向性等性质,并对其在细胞成像中的应用做出初步探索。方法:1.通过一步式缩合反应合成上述两类探针,并对产物进行纯化。2.使用核磁共振氢/碳谱、质谱的方式分析所合成的探针以确认其结构;通过测定吸收光谱和发射光谱的方法检测所合成探针的光学指征及响应性能。根据不同探针的应用需要,计算探针的荧光量子产率和荧光寿命。以酸碱滴定的方式,通过核磁共振氢谱分析探针的响应及荧光机理。3.通过长时间对探针溶液荧光强度的持续监测研究探针的光稳定性;通过在探针溶液中反复的酸碱滴定研究探针对氢离子响应的可逆性;通过向不同pH值的探针溶液中添加适量的干扰离子研究探针在复杂环境中对氢离子的选择性。4.以MTT法检测两类探针的细胞毒性,为后续细胞成像研究做准备。5.通过分析所合成的探针与商品溶酶体靶向探针在细胞荧光图像中的Pearson’s系数并根据重合度来研究其对溶酶体的靶向能力,再讨论定位机制。6.调节细胞内酸碱度至特定的pH值,通过激光共聚焦显微镜观察探针对胞内氢离子的响应能力;用氯喹、NAC、HO等药物刺激细胞,研究探针对细胞自发的pH变化的监测能力;用汉克斯平衡盐溶液孵育细胞,使细胞受到饥饿刺激及来诱导其发生自噬,研究探针对细胞自噬的监测能力。结果:1.合成了两类、五种新型探针,经过多种波普表征,表明合成成功。2.探针C2具有双吸收、双发射的荧光特性,并呈现出比率型荧光性质,其响应机制为:苯并咪唑基C=N上的氮原子质子化后,二苯胺将电子通过乙烯桥转移至苯并咪唑,引起荧光波长的改变;系列探针C4的发光机制与探针C2类似,但普遍具有较强的单发射荧光信号,其中,C4-F和C4-Cl具有较稳定的荧光量子产率,分别为0.26和0.22。系列探针C4均具有一长一短两个荧光寿命,且均属于静态猝灭荧光类型。3.探针C2可表现出长时间的稳定发光特性、对pH环境的循环响应性以及对氢离子响应的高度特异性;系列探针C4以探针C4-F为研究对象,同样具有上述的良好发光性能。4.探针C2的细胞毒性较弱,生物相容性较好;系列探针C4中,C4-F和C4-Cl的细胞毒性相对较弱,C4-Br和C4-I在较低的浓度范围内对细胞具有安全性。5.这两类探针均有较好的溶酶体靶向能力。探针C2的Pearson’s共定位系数为0.9099,以咪唑基和二甲氨基为靶向基团;系列探针C4的Pearson’s共定位系数全都大于0.89,最高甚至超过了0.94,其靶向基团为咪唑基和与苯环偶联的卤素原子。6.两类探针在细胞pH定量能力、细胞鉴别能力以及对细胞pH生理性改变的监测能力中表现良好,探针C2表现出良好的细胞自噬监测能力。结论:1.探针C2可以辅助监测细胞自噬的发生和发展,是一个在细胞成像应用中表现良好的探针,并且具有较大的组织或活体成像的应用潜力。2.系列探针C4可以很好地靶向细胞溶酶体,并对细胞溶酶体pH值进行实时的响应监测,还能对细胞由于应激而产生的pH值变化做出快速响应,是一类性能良好且具有一定应用潜力的氢离子敏感型荧光探针。

关键词：氢离子敏感型荧光探针胞内成像溶酶体定位自噬跟踪

甲酰基去氧胆酸修饰的Fe_(3)O_(4)纳米粒子的制备及其对土霉素负载的应用

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应用化学 2022年第12期39卷 1920-1926页

作者：弓韬文朝朝秦凯莉赵莹珠张宇奇梁文婷董川山西医科大学基础医学院太原030001 山西大学环境科学研究所太原030006

成功构建了甲酰基去氧胆酸修饰的磁性Fe_(3)O_(4)纳米粒子(FDCA-MNPs),采用红外光谱和透射电子显微镜等手段研究了复合材料的结构、形貌、粒径以及磁性能。以制备的磁性纳米材料为药物载体,用荧光光谱法研究了FDCA-MNPs磁性纳米复合物... 详细信息

成功构建了甲酰基去氧胆酸修饰的磁性Fe_(3)O_(4)纳米粒子(FDCA-MNPs),采用红外光谱和透射电子显微镜等手段研究了复合材料的结构、形貌、粒径以及磁性能。以制备的磁性纳米材料为药物载体,用荧光光谱法研究了FDCA-MNPs磁性纳米复合物对于土霉素(OTC)的载药和释药性能,并提出了可能的载药机理。考察了37℃的条件下,pH值在7和9时载体的药物负载和药物释放性能,发现药物的释放率在pH=9时(11.8%)高于pH=7(8.8%)。此外,在体外条件下对比了药物载体、土霉素和药物载体-土霉素复合物在不同浓度的条件下对大肠杆菌的抑菌效果,结果表明FDCA-MNPs本身不具有杀灭大肠杆菌的能力,与土霉素相比,负载有土霉素的纳米药物复合物在相同浓度条件下展现出了更好的灭菌能力。在实验条件下最小抑菌浓度为3μg/mL,此时抑菌率达到97.8%。证明磁性纳米载体与药物的协同作用可以有效地杀菌,从而减少抗生素的用量。

关键词： Fe_(3)O_(4)纳米粒子土霉素药物释放

生物素修饰的Fe3O4纳米粒子作为抗癌药物载体的应用研究

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山西大学学报(自然科学版) 2023年第6期46卷 1393-1401页

作者：弓韬侯雪怡王晓宇文朝朝黄昱张雅静郭睿梁文婷山西医科大学生物化学与分子生物学教研室山西大学环境科学研究所

本文将生物素(Biotin)修饰于Fe3O4磁性纳米粒子表面制备了BIO-MNPs纳米材料。盐酸阿霉素(DOX)可以通过与生物素之间的氢键作用和自聚集作用负载于BIO-MNPs表面，实验条件下的最大负载量可达823.6 mg/g，且BIO-MNPs@DOX对DOX的释放在弱... 详细信息

本文将生物素(Biotin)修饰于Fe3O4磁性纳米粒子表面制备了BIO-MNPs纳米材料。盐酸阿霉素(DOX)可以通过与生物素之间的氢键作用和自聚集作用负载于BIO-MNPs表面，实验条件下的最大负载量可达823.6 mg/g，且BIO-MNPs@DOX对DOX的释放在弱酸性环境下更优。体外溶血实验以及细胞毒性实验证明BIO-MNPs具有良好的血液相容性和较低的生物毒性；体外细胞摄取实验证明BIO-MNPs@DOX对肝癌细胞和人乳腺癌细胞具有较好的靶向性能，且具有良好的抑制效果。以上结果表明BIO-MNPs可作为药物载体负载抗癌药物DOX，且BIOMNPs@DOX在癌细胞的靶向抑制方面具有一定的应用价值。

关键词：生物素 Fe3O4磁性纳米粒子盐酸阿霉素癌症

2000-2021年新疆植被覆盖度变化及驱动力

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水土保持研究 2024年第1期31卷 385-394页

作者：马楠白涛蔡朝朝新疆农业大学计算机与信息工程学院乌鲁木齐830052 新疆农业信息化工程技术研究中心乌鲁木齐830052

[目的]探讨2000—2021年新疆植被覆盖变化及其驱动力的分析,为新疆地区环境监测提供理论依据。[方法]借助GEE平台获取由NASA提供的NDVI数据,利用趋势分析、Hurst指数法对新疆地区2000—2021年植被覆盖变化进行动态分析,结合气象等数据,... 详细信息

[目的]探讨2000—2021年新疆植被覆盖变化及其驱动力的分析,为新疆地区环境监测提供理论依据。[方法]借助GEE平台获取由NASA提供的NDVI数据,利用趋势分析、Hurst指数法对新疆地区2000—2021年植被覆盖变化进行动态分析,结合气象等数据,采用Mann-Kendall、偏相关分析法等对植被覆盖变化与气候、地表因素的响应进行分析。[结果](1)2000—2021年新疆地区NDVI年际变化总体以0.0014/a的速率波动式增长;年内变化总体呈倒U型,草甸植被的NDVI月均值波动最大。(2)2000—2021年新疆地区NDVI年均值77.9%在0~0.3波动,在空间分布表现为北部和西北部高,南部和东南部低。(3)2000—2021年新疆地区总体slope值在-0.036~0.052波动,主要变化趋势为基本不变和轻微改善,结合Hurst指数,新疆植被主要未来趋势变化为改善到退化。(4)22年间新疆地区的气温总体呈上升趋势,降水、土壤湿度和径流总体呈下降趋势。NDVI年均值与气温、降水、土壤湿度和径流呈显著负相关性的像元数占比均大于正相关性的像元数占比,且存在明显的空间地域特征。[结论]新疆植被覆盖变化总体呈上升趋势,但未来趋势不容乐观,需要重点关注新疆地区的环境监测等保护措施。

关键词：植被类型 NDVI 趋势变化气温降水土壤湿度径流

Th17/Treg细胞在前列腺疾病中的作用研究进展

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中国免疫学杂志 2024年第9期 1981-1985页

作者：李佳蔚孟佳林梁朝朝安徽医科大学第一附属医院泌尿外科

初始CD4+T细胞在免疫效应的启动和维持中起着关键作用，在细胞因子和共刺激分子的作用下可分化为Th1、Th2、Treg和Th17等细胞。近年来越来越多证据显示，Th17和Treg细胞在免疫稳定、自身免疫性疾病和肿瘤中发挥着重要作用。慢性前列腺炎... 详细信息

初始CD4+T细胞在免疫效应的启动和维持中起着关键作用，在细胞因子和共刺激分子的作用下可分化为Th1、Th2、Treg和Th17等细胞。近年来越来越多证据显示，Th17和Treg细胞在免疫稳定、自身免疫性疾病和肿瘤中发挥着重要作用。慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征（CP/CPPS）是发病率最高的前列腺炎类型，占90%～95%，并与良性前列腺增生和前列腺癌的疾病进展有着密不可分的关系。前列腺良性疾病和前列腺癌在免疫微环境上有诸多相似之处，故本综述以Th17和Treg细胞为视角，总结近年来关于Th17/Treg细胞及相关细胞因子在前列腺疾病中的作用研究进展。

关键词： Th17细胞 Treg细胞前列腺炎前列腺癌

动态监测血浆SOD、CysC、KIM-1水平对老年脓毒症患者发生急性肾损伤风险的预测价值

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武汉大学学报（医学版） 2024年第4期45卷 442-445,450页

作者：苟丽霞刘朝朝陈娜南京航空航天大学医院检验科江苏南京210000 南京医科大学第四附属医院呼吸科江苏南京211106 明基医院检验科江苏南京210000

目的:探讨老年脓毒症患者血浆超氧化物歧化酶(SOD)、胱抑素C(CysC)、肾损伤分子-1(KIM-1)水平对急性肾损伤(AKI)发生风险的预测价值。方法:选取入住南京医科大学第四附属医院并诊断为脓毒症的162例患者为研究对象,根据住院期间有无并发... 详细信息

目的:探讨老年脓毒症患者血浆超氧化物歧化酶(SOD)、胱抑素C(CysC)、肾损伤分子-1(KIM-1)水平对急性肾损伤(AKI)发生风险的预测价值。方法:选取入住南京医科大学第四附属医院并诊断为脓毒症的162例患者为研究对象,根据住院期间有无并发AKI将其分为AKI组114例和非AKI组48例。分析血浆SOD、CysC、KIM-1水平对老年脓毒症患者发生AKI风险的预测价值。结果:AKI组24、36、72 h血浆CysC、KIM-1水平均高于非AKI组,SOD水平均低于非AKI组(P<0.05);与0 h相比,AKI组24、36、72 h血浆CysC、KIM-1水平升高,SOD水平降低(P<0.05)。血浆SOD、CysC、KIM-1水平三者联合预测的ROC曲线下面积(AUC)为0.948,特异性为93.7%,敏感度为84.2%。KIM-1是老年脓毒症患者发生AKI的独立危险因素(P<0.05),SOD是老年脓毒症患者发生AKI的保护因素(P<0.05)。结论:老年脓毒症患者并发AKI后血浆CysC、KIM-1水平升高,SOD水平降低,联合检测血浆SOD、CysC、KIM-1可早期预测老年脓毒症患者AKI发生风险,有一定的临床参考价值。

关键词：老年脓毒症超氧化物歧化酶胱抑素C 肾损伤分子-1 急性肾损伤预测价值

肾移植术后尿路感染209例的临床特点及危险因素分析

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器官移植 2024年第4期15卷 614-621页

作者：王培宇丁汉东钟金彪廖贵益梁朝朝安徽医科大学第一附属医院泌尿外科安徽医科大学泌尿外科研究所泌尿男科疾病研究与医学转化安徽省重点实验室合肥230022

目的探讨肾移植术后不同时期尿路感染的特点及其相关危险因素。方法回顾性分析209例肾移植受者的临床资料,按照术后随访时间分为3个时期,第一时期为移植术后1个月内,第二时期为术后1~6个月,第三时期为术后7~12个月。分析肾移植术后不同... 详细信息

目的探讨肾移植术后不同时期尿路感染的特点及其相关危险因素。方法回顾性分析209例肾移植受者的临床资料,按照术后随访时间分为3个时期,第一时期为移植术后1个月内,第二时期为术后1~6个月,第三时期为术后7~12个月。分析肾移植术后不同时期尿路感染的发生情况,发生尿路感染受者的尿培养结果及常见病原菌耐药特点。分析反复尿路感染者的菌群,分析尿路感染的危险因素及尿路感染对移植肾功能的影响。结果第一时期尿路感染率为90.0%,第二时期尿路感染率为49.3%,第三时期尿路感染率为22.5%。第二时期、第三时期亲属活体器官捐献男性受者的尿路感染率低于女性受者(均为P<0.05)。尿培养结果阳性60例,共检出病原菌84株,以革兰阴性菌为主,其中肺炎克雷伯菌占比最高。66例受者反复发生尿路感染,检出病原菌包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、光滑假丝酵母菌和其他。单因素分析结果显示,术后使用抗胸腺细胞球蛋白是第一时期发生尿路感染的危险因素,术前尿路感染、供者类型是第二时期发生尿路感染组的危险因素,受者性别、年龄是第三时期发生尿路感染的危险因素;多因素分析结果显示,术后使用抗胸腺细胞球蛋白是第一时期发生尿路感染的危险因素,受者性别、年龄是第三时期发生尿路感染的危险因素(均为P<0.05)。第三时期治愈65例,未治愈38例,治愈患者治疗后血清肌酐及白细胞水平较治疗前下降(均为P<0.05)。结论肾移植受者尿路感染以革兰阴性菌为主,其耐药性较高;术后使用抗胸腺细胞球蛋白、女性和高龄是肾移植受者发生尿路感染的危险因素。

关键词：肾移植尿路感染革兰阴性菌肺炎克雷伯菌大肠埃希菌抗胸腺细胞球蛋白血清肌酐白细胞

右美托咪定与咪达唑仑对全身麻醉患者镇静治疗的临床效果差异

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中国科技期刊数据库医药 2024年第5期 0066-0069页

作者：黄朝朝广水市中医医院麻醉科湖北广水432700

研究全身麻醉镇静方面右美托咪定、咪达唑仑的效果差异。方法选择2022年1月至2023年3月全身麻醉手术患者69例,采用随机数表法进行分组,常规组采用咪达唑仑,实验组应用右美托咪定进行镇静。对比两组镇静效果。结果实验组诱导方面心率... 详细信息

研究全身麻醉镇静方面右美托咪定、咪达唑仑的效果差异。方法选择2022年1月至2023年3月全身麻醉手术患者69例,采用随机数表法进行分组,常规组采用咪达唑仑,实验组应用右美托咪定进行镇静。对比两组镇静效果。结果实验组诱导方面心率、血压和BIS值好于常规组,P0.05。结论相对于咪达唑仑右美托咪定的镇静治疗效果更加明显,可以有效稳定血流动力学指标,降低麻醉风险与危害,值得推广。

关键词：右美托咪定咪达唑仑全身麻醉镇静治疗临床效果

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可持续发展视角下的企业财务管理革新方案

中国商人 2024年第6期 220-221页

作者：杨朝朝石家庄市财茂投资开发有限责任公司

可持续发展如今已是全球瞩目的焦点议题,其核心在于如何平衡当前与未来的需求,确保后代的福祉不受侵害。作为社会经济体的重要构成,企业在追求财务稳健的同时,亦需肩负起保护环境和履行社会责任的重任。可持续发展与企业财务管理的关联。

关键词：可持续发展焦点议题企业财务管理履行社会责任财务管理革新财务稳健保护环境经济体

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