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天山雪莲细胞肽的制备与活性研究

天山雪莲细胞肽的制备与活性研究

作者：马海朝大连海洋大学

学位级别：硕士

天山雪莲是一种珍稀濒危的药用植物,作为药材使用具有悠久的历史。通过植物细胞培养技术成功培养天山雪莲细胞,解决了野生雪莲资源短缺的问题。雪莲细胞培养物在2010年获批植物类“新资源食品”,2021年通过化妆品新原料备案,可在各类保... 详细信息

天山雪莲是一种珍稀濒危的药用植物,作为药材使用具有悠久的历史。通过植物细胞培养技术成功培养天山雪莲细胞,解决了野生雪莲资源短缺的问题。雪莲细胞培养物在2010年获批植物类“新资源食品”,2021年通过化妆品新原料备案,可在各类保健食品、医药品及化妆品等领域中添加。雪莲细胞培养物中蛋白质较为丰富,但目前对其细胞培养物中活性蛋白/肽的研究与应用较少。论文以天山雪莲细胞培养物为研究对象,采用蛋白酶酶解法制备天山雪莲细胞肽。通过筛选适宜的蛋白酶进行酶解,结合单因素实验和正交实验,得到天山雪莲细胞肽适宜的酶解条件为采用胰蛋白酶酶解,料液比1:25,酶解温度为42℃,酶添加量为10000 U·g,酶解液的蛋白/肽含量为129.52 mg·g雪莲细胞。通过响应面法对蛋白酶的酶解条件进一步优化,优化后的酶解条件为料液比1:26.8、酶解温度43.8℃、酶添加量10717.1 U·g,在此条件下蛋白/肽含量的理论值为130.8 mg·g雪莲细胞。经过验证检验提取的雪莲蛋白/肽含量为128.3 mg·g雪莲细胞粉,与预测值接近,证明模型可行,可用于分析和预测天山雪莲酶解蛋白的条件优化。该结论与正交实验结果基本相吻合,说明采用该响应面模型优化天山雪莲细胞的酶解条件合理。采用上述优化的适宜酶解条件进行制备天山雪莲细胞酶解液。经离心、过滤得到上清液,结合透析富集和葡聚糖凝胶Sephadex G柱层析的分离纯化,获得不同分子量范围的蛋白/肽组分,分别为:500 Da以下（A组分）、500～1000 Da（B组分）、1000～2000 Da（C组分）、2000～3500 Da（D组分）、3500～5000 Da（E组分）。其中A、B组分经过葡聚糖凝胶Sephadex G-10纯化分别得到F、G活性肽组分,C、D、E组分经过葡聚糖凝胶Sephadex G-25纯化分别得到H、I、J活性肽组分。采用透析和葡聚糖凝胶柱层析对不同分子量范围的天山雪莲细胞蛋白/肽具有较好的富集和分离纯化作用。对上述天山雪莲细胞肽组分进行清除自由基活性实验。其中未经Sephadex G柱层析纯化前的天山雪莲细胞肽组分对DPPH自由基清除活性较好的是A组,经过葡聚糖凝胶纯化后的天山雪莲多肽各组分对DPPH自由基清除活性有一定的提升,纯化后的F和G组分清除DPPH自由基活性较强,IC值分别为0.052、0.066 mg·mL。未经纯化前的天山雪莲细胞肽组分中,A组分对羟基自由基的清除效果最好,IC值约为1.037 mg·mL,经过纯化后,G组分对羟基自由基的清除效果最好,IC值约为0.375 mg·mL,经纯化后的各多肽组分对羟基自由基清除能力明显增强。对其清除超氧阴离子活性进行测定,未经纯化前的天山雪莲细胞肽组分和经纯化后的组分均具有一定的超氧阴离子清除活性,其中A组和F组在各个浓度条件下具有较高的超氧阴离子清除活性。H组分浓度从0.078 mg·mL增加到0.625mg·mL,呈现了一定的浓度-活性的正相关性,清除率最高可达75.3%。对天山雪莲细胞肽进行抑制酪氨酸酶活性实验。其中未经Sephadex G柱层析纯化前的E组分对酪氨酸酶的清除效果较好,IC约为0.573 mg·mL,经过纯化后的G组分和I组分多肽对酪氨酸酶的抑制效果较好,IC分别为0.620和0.661 mg·mL。提示天山雪莲细胞肽具有一定的抑制酪氨酸酶活性,即具有一定的美白作用。结合HPLC-MS-MS液相-质谱联用技术,分析G、H多肽组分的氨基酸组成与序列。将得到的片段氨基酸序列通过PEAKS Studio数据库检索,分析总离子流色谱图,得到G组分含量相对较高的3条肽段氨基酸序列分别为:VPTVDVS（Val-Pro-Thr-Val-Asp-Val-Ser）.SMKKLTIL（Ser-Met-Lys-Lys-Leu-Thr-Ile-Leu）.GSNARDL（Gly-Ser-Asn-Ala-Arg-Asp-Leu）。H组分含量相对较高的4条肽段氨基酸序列分别为:PVVKLGGETLTVS（Pro-Val-Val-Lys-Leu-Gly-Gly-Glu-Thr-Leu-Thr-Val-Ser）.LVALC（+57.02）QSVDLRH[Leu-Val-Ala-Leu-Cys（+57.02）-Gln-Ser-Val-Asp-Leu-Arg-His]IVVAETADSPA（Ile-Val-Val-Ala-Glu-Thr-Ala-Asp-Ser-Pro-Ala）.VLADLSIGVFLWIA（Val-Leu-Ala-Asp-Leu-Ser-Ile-Gly-Val-Phe-Leu-Trp-Ile-Ala）。部分肽段的存在可能与其清除自由基活性、抑制酪氨酸酶活性有关。上述实验研究表明,采用胰蛋白酶酶解法制备的天山雪莲细胞肽具有

关键词：天山雪莲细胞蛋白酶酶解活性肽清除自由基活性抑制酪氨酸酶活性

CO2/N2混合物在新型Cr3O@SO3-MIL-101（Cr）复合材料中的吸附分离性能研究

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CO2/N2混合物在新型Cr3O@SO3-MIL-101（Cr）复合材料中的吸附分离...

作者：郎朝中北大学

学位级别：硕士

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基于知识图谱的智库人才政策研究

基于知识图谱的智库人才政策研究

作者：程镇朝河北大学

学位级别：硕士

MLR、FIB、GRACE评分与NSTE-ACS患者冠脉病变程度及预后的相关研究

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MLR、FIB、GRACE评分与NSTE-ACS患者冠脉病变程度及预后的相关研究

作者：罗朝赣南医科大学

学位级别：硕士

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腕关节康复装置优化及动力学控制研究

腕关节康复装置优化及动力学控制研究

作者：辛朝燕山大学

学位级别：硕士

TC4-Cu合金的微结构与耐微生物腐蚀性能的相关性研究

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TC4-Cu合金的微结构与耐微生物腐蚀性能的相关性研究

作者：姚升朝天津理工大学

学位级别：硕士

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基于边界剥离思想的全局中心聚类算法

郑州大学学报（工学版） 2024年第5期45卷 86-94页

作者：程明畅敖兰刘浏四川师范大学可视化计算与虚拟现实四川省重点实验室四川成都610066 四川师范大学数学科学学院四川成都610066 成都理工大学数学地质四川省重点实验室四川成都610059 成都理工大学数理学院四川成都610059

全局中心聚类算法如k-means、谱聚类在类簇分布出现重叠粘连现象时往往容易陷入局部最优且参数难以设定,极大地限制了全局中心聚类算法在实际应用中的效果。为解决此问题,提出了一种基于边界剥离思想的全局中心聚类算法。首先,设计了一... 详细信息

全局中心聚类算法如k-means、谱聚类在类簇分布出现重叠粘连现象时往往容易陷入局部最优且参数难以设定,极大地限制了全局中心聚类算法在实际应用中的效果。为解决此问题,提出了一种基于边界剥离思想的全局中心聚类算法。首先,设计了一步边界剥离法,根据样本点间的反向k近邻关系定义了一种局部距离加权密度,并利用密度经验分布函数一阶差分最大处的密度值作为阈值将数据集分为边界集与核心集。其次,嵌入传统的全局中心聚类算法对核心集进行聚类,得益于核心集的簇间重叠问题已明显改善,嵌入算法将更容易收敛到真实的簇中心。最后,提出一种边界吸引算法,从已被归类的核心集样本点出发,借助已有的反向k近邻关系迭代融合边界集中的样本点以完成对整个数据集的聚类。相较于目前以迭代方式进行的边界剥离算法,所提算法在计算效率上具有明显优势,不需要额外设定复杂的终止条件而直接通过阈值进行边界划分,并且全局性方法在数据局部密度存在差异的情形下具备更强的鲁棒性。在实验阶段,采用3个合成数据集以及6个真实数据集从算法性能、参数敏感性、时间消耗多个方面进行评估,实验结果进一步验证了此算法的有效性与实用性。

关键词：全局中心聚类算法边界剥离簇重叠反向k近邻经验分布

基于胜任力模型的JD广告公司创意人才招聘研究

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基于胜任力模型的JD广告公司创意人才招聘研究

作者：张青朝北京化工大学

学位级别：硕士

在我国社会主义市场经济高速发展的背景下,广告公司在品牌宣传,市场营销,文化传播和推动社会经济发展中发挥着重要作用。创意人才是广告公司的核心人才,是推动公司发展的关键动力。采用基于胜任力模型的广告创意人才招聘策略,能够有效... 详细信息

在我国社会主义市场经济高速发展的背景下,广告公司在品牌宣传,市场营销,文化传播和推动社会经济发展中发挥着重要作用。创意人才是广告公司的核心人才,是推动公司发展的关键动力。采用基于胜任力模型的广告创意人才招聘策略,能够有效地吸引和甄选出与公司发展要求匹配的人才。本文以JD广告公司为研究对象,采用文献研究法,访谈法和问卷调查法,深入剖析了公司在广告创意人才招聘方面存在的问题。通过调查对JD广告公司广告创意人才招聘问题产生的原因进行探究,构建了一个契合公司发展的广告创意人才胜任力模型。该模型将广告创意人才胜任力分为专业知识技能,基本职业素养,职业提升素养和个性特质四个维度,包含20项胜任力要素。其中,专业知识技能与基本职业素养是广告创意人才所应具备的基本胜任力,是进入广告公司的门槛,是容易被观察发现和培养的显性胜任力。职业提升素养和个性特质是广告创意人才的核心胜任力,决定者候选人能否在工作中取得优秀绩效的关键,是不容易被观察和培养隐性胜任力。在招聘的过程中通过胜任力模型制定对候选人的评测标准,基于胜任力模型对公司的招聘体系进行重塑和优化,通过基于胜任力模型的招聘策略,精准有效地招聘到具备专业核心胜任力并与公司岗位匹配的员工。以往关于胜任力模型的研究和实践大多聚焦于大型企业,对小微型广告企业的研究几乎没有。本研究对JD广告公司创意人才的招聘策略进行了深入的实证研究,不仅解决了JD广告公司的创意人才招聘问题,也为其他小微型广告企业在完善招聘体系,实施基于胜任力模型的招聘策略提供了参考。

关键词：胜任力模型广告公司创意人才招聘

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《史记》叙事立场研究

《史记》叙事立场研究

作者：王旭朝燕山大学

学位级别：硕士