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胃癌相关miRNAs的筛选和鉴定

胃癌相关miRNAs的筛选和鉴定

作者：摇豪谧浙江大学

学位级别：硕士

MicoRNAs(miRNAs)是一类内源性表达的长约22个核苷酸的非编码单链RNA,在哺乳动物细胞中,miRNAs以非完全互补的方式与靶mRNA的3’非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)配对结合,从而引起翻译抑制或靶mRNA降解。当前研究表明miRNAs... 详细信息

MicoRNAs(miRNAs)是一类内源性表达的长约22个核苷酸的非编码单链RNA,在哺乳动物细胞中,miRNAs以非完全互补的方式与靶mRNA的3’非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)配对结合,从而引起翻译抑制或靶mRNA降解。当前研究表明miRNAs参与调节生物体各种生命活动,包括细胞增殖,分化,凋亡和迁移等[1]。正是因为miRNA几乎参与调节生命体全部的生理病理过程,近年的研究多集中于miRNA的异常表达与人类肿瘤发生发展的关系。大量实验结果显示人类肿瘤通常显示特征性的miRNA表达谱,表达异常的miRNA(升高或减低)在肿瘤的发生发展过程分别扮演致癌基因或抑癌基因的角色。尽管已有实验显示某些miRNAs与人类消化系统肿瘤相关,包括肝癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌和胆管癌等[2,3],但这方面研究尚留有很大空白,特别是胃癌中异常表达的miRNAs。而中国恰恰是胃癌发病率最高的几个国家之一,因此我们选用胃癌作为研究对象,以期揭示胃癌中异常表达的miRNAs,并初步研究其功能。通过传统的生物芯片技术我们对胃癌中异常表达的miRNA进行筛选,芯片结果提示hsa-miR-542-5(miR-542-5p)在胃癌组织中高表达,进而采用Real-time PCR法对胃癌组织和正常远端胃组织中miR-542-5p的表达水平进行检测验证,从而确定miR-542-5p的高表达是否在胃癌中普遍存在。然后,我们采用Mann-Whitney Test和Kruskal-Wallis Test分析miR-542-5p表达水平与年龄、性别、肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、病理分型(Lauren、组织类型)的相关性。最后,我们综合计算机法(miRanda,Pictar,Targetscan)预测可能与胃癌有关的miR-542-5p的潜在靶基因。一、材料和方法: 所有胃癌组织及配对正常远端组织均来源于胃癌手术病人,并进行病理确证。为了全面了解胃癌组织及其正常远端组织中miRNAs的表达情况,我们采用了含677个人类成熟miRNAs探针的芯片来检测胃癌组织及其正常远端组织中miRNAs的表达水平,并比较其差异。对miRNAs芯片结果进行分析筛选,选取上调最明显的目标miRNA在20对胃癌组织及其正常远端组织中用Real-time PCR进行验证。采用miRanda,Pictar,Targetscan预测miR-542-5p靶基因,并对这些潜在的靶基因做进一步分析。二、结果对生物芯片结果进行分析后发现,与远端正常胃组织相比,胃癌组织中miRNAs表达水平上调超过两倍的有6个,miR-542-5p,-125b,-199a,-10a,-199a,-594,下调超过两倍的有11个,miR-182,-143,-194,-765,-200c,-192,-200b,-148a,-141,-215,-200a,其中上调最明显的是miR-542-5p,故我们选择miR-542-5p作为我们的研究对象。用Real-time PCR的方法在20例胃癌样本中检测miR-542-5p的表达水平,结果发现miR-542-5p在9例样本中上调,11例样本中下调。用SPSS13.0软件包对这20例胃癌样本中miR-542-5p表达水平和临床病理的相关性进行分析后发现,虽然miR-542-5p表达水平与病人的性别、年龄、肿瘤直径、浸润深度、Lauren分型无关,但miR-542-5p表达水平的改变与淋巴结转移(P=0.048,Mann-Whitney Test),临床TNM分期(P=0.048,Mann-Whitney Test)和组织类型(P=0.018,Mann-Whitney Test)有关。有淋巴结转移胃癌组织与无淋巴结转移胃癌组织比较而言,前者的miR-542-5p表达水平上调;TNM分期为Ⅲ期和Ⅳ期的胃癌组织与TNM分期为Ⅰ期和Ⅱ期的胃癌组织比较而言,前者的miR-542-5p表达水平上调;此外,印戒细胞癌患者的胃癌组织中miR-542-5p表达水平与非印戒细胞癌患者的胃癌组织miR-542-5p表达水平相比,后者的miR-542-5p表达水平上调。对miR-542-5p潜在靶基因进行生物信息学分析,我们发现其中一些可能的靶基因与肿瘤的生长和转移有关,提示miR-542-5p可能参与胃癌的发生发展过程。三、结论尽管对20对胃癌样本的验证结果显示胃癌组织及其正常远端组织的miR-542-5p的表达水平无明显差异,但是结合各病例的具体情况,我们还是发现在一定的病理条件下,miR-542-5p的高表达还是与胃癌存在一定联系。就发生淋巴结转移的胃癌组织与无淋巴结转移胃癌组织比较而言,前者的miR-542-5p表达水平上调;TNM分

关键词：胃癌 miRNA miR-542-5p 筛选鉴定

内镜室医护人员幽门螺杆菌感染现状及耐药性分析

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中华医院感染学杂志 2014年第2期24卷 511-513页

作者：雷家才马丹刘勇攀郭艳摇豪谧杭州师范大学附属余杭医院消化科浙江杭州311000

目的探寻目前杭州地区内镜室医护人员幽门螺杆菌感染现状及其耐药性分析,并提出针对性防治对策,降低感染发生率。方法选取2010-2012年杭州地区的32所医院300名内镜室医护人员作为观察组,对其进行问卷调查,包括:性别、年龄、医(护)龄、... 详细信息

目的探寻目前杭州地区内镜室医护人员幽门螺杆菌感染现状及其耐药性分析,并提出针对性防治对策,降低感染发生率。方法选取2010-2012年杭州地区的32所医院300名内镜室医护人员作为观察组,对其进行问卷调查,包括:性别、年龄、医(护)龄、操作内镜时间及家族史;选取各所医院的非内镜室医务人员312人作为对照组进行对比研究,对两组医务人员进行静脉血抗幽门螺杆菌IgG检测,采用ELESA法进行需氧培养,应用克拉霉素、阿莫西林、呋喃唑酮、甲硝唑和左氧氟沙星进行幽门螺杆菌药敏试验;采用SPSS13.0软件进行统计分析。结果幽门螺杆菌抗体阳性率观察组35.3%、对照组13.5%,两组之间差异有统计学意义(P0.05)。结论有效防护需要注意个人习惯养成,以及有效的药敏试验实现精准治疗是目前的关键。

关键词：幽门螺杆菌感染现状耐药性

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和胃降逆法治疗胆汁反流性胃炎的疗效观察

浙江中医杂志 2015年第7期50卷 501-502页

作者：何侠垠摇豪谧桑怡刘苏娅浙江省杭州市第一人民医院浙江杭州310006 浙江省杭州市余杭区第一人民医院浙江余杭311100 浙江省杭州市中医院浙江杭州310007

胆汁反流性胃炎（BRG）是一种常见的胃肠道动力障碍性疾病。临床上多采用制酸剂、胃肠动力药及黏膜保护剂的联合应用,对胆汁反流性胃炎虽取得了一定进展,但对病程较长、病情较重者,疗效差且易反复。我们运用中药和胃降逆法,对患者临床... 详细信息

胆汁反流性胃炎（BRG）是一种常见的胃肠道动力障碍性疾病。临床上多采用制酸剂、胃肠动力药及黏膜保护剂的联合应用,对胆汁反流性胃炎虽取得了一定进展,但对病程较长、病情较重者,疗效差且易反复。我们运用中药和胃降逆法,对患者临床症状评分、胃液中和胃黏膜组织内的总胆汁酸（TBA）浓度、胃镜下分级等均取得了明显的疗效,现报告如下。

关键词：胆汁反流性胃炎和胃降逆法临床观察

杭州地区幽门螺杆菌感染者CYP2C19基因多态分布特征及其与雷贝拉唑四联法Hp根除率的关系

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浙江实用医学 2021年第5期26卷 395-397页

作者：摇豪谧何侠垠尤华强王晓飞杭州市临平区第一人民医院浙江杭州311100

目的探讨杭州地区幽门螺杆菌(Hp)感染者CYP2C19基因多态分布特征,探讨基因型与雷贝拉唑四联疗法Hp根除率的关系。方法选择2017年7月-2018年6月浙江省杭州市临平区第一人民医院就诊的Hp感染者216例,测序法检测CYP2C19基因型和代谢表型;... 详细信息

目的探讨杭州地区幽门螺杆菌(Hp)感染者CYP2C19基因多态分布特征,探讨基因型与雷贝拉唑四联疗法Hp根除率的关系。方法选择2017年7月-2018年6月浙江省杭州市临平区第一人民医院就诊的Hp感染者216例,测序法检测CYP2C19基因型和代谢表型;分析基因型与雷贝拉唑四联疗法Hp根除率的关系。结果检测出CYP2C19*1*17、*1*1、*1*2、*1*3、*2*2、*2*3、*3*3七种基因型,代谢表型频率:超快代谢型0.46%,快代谢型42.13%,中间代谢型41.67%,慢代谢型15.74%。不同性别、年龄、表型间Hp根除率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论杭州地区CYP2C19以中快代谢型为主,基因型分布符合东亚人群特征;雷贝拉唑四联疗法Hp根除率与CYP2C19基因型无明显关系。

关键词：幽门螺杆菌雷贝拉唑 CYP2C19 基因多态性 Hp根除

高校教师肠易激综合征的流行病学调查及其与心理因素的关系

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浙江中西医结合杂志 2013年第12期23卷 1038-1040页

作者：何侠垠桑怡摇豪谧邓燕勇丛衍群杭州市中医院消化内科杭州310007 杭州市余杭区第一人民医院消化内科浙江大学医学院附属邵逸夫医院消化内科浙江医院消化内科

肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）是一组包括腹痛、腹胀，伴排便习惯和粪便性状改变，持续或间歇发作，而又缺乏形态学和生化指标异常的症候群，属于胃肠功能紊乱性疾病。西方国家的IBS患病率约为4．4％～22％，

关键词：高校教师肠易激综合征流行病学精神心理

实验性溃疡性结肠炎大鼠外周血Th17细胞的变化及黄芪多糖对其的影响

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中华中医药学刊 2014年第9期32卷 2265-2267,I0012页

作者：郭艳石定万橱根摇豪谧冯国建杭州市余杭区第一人民医院消化科浙江杭州311100

目的:观察实验性溃疡性结肠炎大鼠外周血Th17细胞的变化及黄芪多糖对其的影响。方法:雄性清洁级Wistar大鼠40只,随机分成4组:空白组、模型组、黄芪多糖组、柳氮磺胺砒啶(SASP)组。各组在造模后第3d开始给药,共14 d。给药结束后,腹主动... 详细信息

目的:观察实验性溃疡性结肠炎大鼠外周血Th17细胞的变化及黄芪多糖对其的影响。方法:雄性清洁级Wistar大鼠40只,随机分成4组:空白组、模型组、黄芪多糖组、柳氮磺胺砒啶(SASP)组。各组在造模后第3d开始给药,共14 d。给药结束后,腹主动脉取血,离心取血清,ELISA法测定IL-17、TGF-β和IL-23。取距肛门2-10cm处结肠,沿肠黏膜缘剪开肠腔,取病变处组织,进行HE染色。结果:与空白组相比,模型组大鼠血清中IL-17、IL-23、TGF-β含量显著增高(P<0.05)。与模型组比较,SASP组与黄芪多糖组大鼠血清中IL-17、IL-23、TGF-β含量显著降低(P<0.05)。与SASP组比较,黄芪多糖组大鼠血清中IL-17、IL-23、TGF-β含量降低(P<0.05)。结肠病理显示:在各治疗组中,黄芪多糖组黏膜结构最完整、炎症细胞最少。结论:Th17细胞在实验性溃疡性结肠炎大鼠外周血中明显升高,黄芪多糖可能通过调节大鼠血清中IL-23、TGF-β的表达来调节Th17细胞,以减轻肠黏膜炎症损伤。

关键词：溃疡性结肠炎黄芪多糖 Th17细胞白介素-23 转化生长因子-β

早期肠内肠外营养支持对结直肠癌患者术后影响

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中国妇幼健康研究 2017年第S4期28卷 455-455页

作者：高琳娇摇豪谧隋子奇浙江杭州市余杭区第一人民医院浙江杭州311100

目的:探讨早期不同营养支持方法对结直肠癌患者术后各项营养指标的影响。方法:回顾性分析医院2015年1月-2016年9月接受结直肠癌根治术的90例患者的临床资料,根据患者术后早期营养支持方法进行分组,其中48例患者应用肠内营养支持,命名为... 详细信息

目的:探讨早期不同营养支持方法对结直肠癌患者术后各项营养指标的影响。方法:回顾性分析医院2015年1月-2016年9月接受结直肠癌根治术的90例患者的临床资料,根据患者术后早期营养支持方法进行分组,其中48例患者应用肠内营养支持,命名为肠内组,其中42例应用肠外营养支持,命名为肠外组,比较两组患者术后不同营养指标比较。结果:两组患者在术后7天的PA、TF、ALB等各项指标均低于术前,但肠外组患者的各项指标均明显低于肠内组;肠内组患者肠胃功能恢复所需时间和住院时间均明显低于肠外组,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在结直肠癌患者术后应用肠内早期营养支持治疗,能有效提高机体抵抗力,改善胃肠道功能,值得临床推广。

关键词：早期肠内营养肠外营养结直肠癌

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58份青稞种质资源遗传多样性评价

作物杂志 2024年

作者：卢晶余波江谧彭镰心任远航吴琪成都大学食品与生物工程学院农业农村部杂粮加工重点实验室四川省甘孜藏族自治州农业科学研究所

为明确甘孜州青稞种质资源的遗传多样性，筛选优异种质，该研究对甘孜州收集的58份青稞种质资源的16个农艺性状进行遗传多样性、相关性、主成分、聚类分析和性状综合评价。结果表明，58份青稞材料具有丰富的遗传多样性，变异系数介于12%... 详细信息

为明确甘孜州青稞种质资源的遗传多样性，筛选优异种质，该研究对甘孜州收集的58份青稞种质资源的16个农艺性状进行遗传多样性、相关性、主成分、聚类分析和性状综合评价。结果表明，58份青稞材料具有丰富的遗传多样性，变异系数介于12%～64%之间。粒长和节数变异系数最小为12%，种皮颜色变异系数最大为64%，平均变异系数为26%。遗传多样性指数介于1.166～2.707之间，卷叶多样性指数最小为1.166，种皮颜色多样性指数最大为2.707。相关性分析结果表明，穗长、穗宽、单株穗数、千粒重和节数在育种工作中可作为评价青稞种质资源遗传多样性的重要指标。主成分分析结果表明：提取到的6个主成分累计贡献率为73.06%。穗下节间长、单株穗数、旗叶长、株高为主要指标。通过隶属函数值计算综合得分值（F值）初步筛选出排名前3的种质为CDU22、CDU19T、CDU57S。聚类分析将58份种质分为4类，结果表明当遗传距离为8时，第1类群所包含的13份种质综合特征值较高，此类材料可作为亲本以选育高产品种。

关键词：青稞农艺性状遗传多样性分析

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财富管理专业通识课程的教学优化路径

中文科技期刊数据库（引文版）教育科学 2024年第8期 0036-0039页

作者：吴嘉谧浙江经贸职业技术学院浙江杭州310018

随着经济的蓬勃发展和人们生活水平的显著提升,财富管理逐渐成为普遍关注的重点议题。传统的管理模式已无法满足现代社会的复杂需求,这对财富管理专业人才的培养提出了新的挑战。财富管理专业通识课程能帮助学生深入理解财富管理的基本... 详细信息

随着经济的蓬勃发展和人们生活水平的显著提升,财富管理逐渐成为普遍关注的重点议题。传统的管理模式已无法满足现代社会的复杂需求,这对财富管理专业人才的培养提出了新的挑战。财富管理专业通识课程能帮助学生深入理解财富管理的基本概念、运行原理及实践方法,并掌握其核心技能,以便为将来步入职场做好全面准备。基于此,本文详细分析了财富管理专业通识课程的教学探索与实践路径,以供参考。

关键词：财富管理通识课程教学探索