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番茄1──氨基环丙烷羧酸(ACC)合成酶基因的反义RNA──核酶嵌合DNA序列的构建

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遗传 1999年第2期21卷 1-6页

作者：仇润祥扈廷茂王永胜张晓海刘中大内蒙古大学生物系呼和浩特010021

根据番茄ACC合成酶基因（LE—ACC2）DNA序列，以番茄(LycopersiconesculentumMill)果实的总DNA为模板，利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列，插入到质粒载体pGEM—3zf(＋)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化***—5α... 详细信息

根据番茄ACC合成酶基因（LE—ACC2）DNA序列，以番茄(LycopersiconesculentumMill)果实的总DNA为模板，利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列，插入到质粒载体pGEM—3zf(＋)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化***—5α，可选出重组子pRE，经酶切，PCR及DNA序列分析证明克隆成功；将pRE上的目的DNA序列以反义方式构建到我室已合成并克隆的含核酶DNA序列的重组质粒pRⅠ的BamHⅠ和HindⅢ之间，构成含有反义RNA-核酶嵌合DNA序列的重组质粒pREⅠ，经酶切及序列分析，结果与预期一致.

关键词：番茄 ACC合成酶反义RNA 核酶嵌合基因

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原核显微注射产生转基因绵羊胚胎

内蒙古大学学报（自然科学版） 2007年第6期38卷 660-664页

作者：马玉珍扈廷茂夏国良旭日干内蒙古自治区医院内科呼和浩特010020 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021 中国农业大学生物学院北京100094

体外采集绵羊卵丘卵母细胞复合体,成熟培养24 h,经过体外受精培养17 h,比较高速离心对胚胎发育的影响;高速离心可以使黑色脂滴甩到一边从而使受精卵原核清晰可见.然后将绵羊乳腺特异表达人肝细胞再生增强因子和真核细胞表达增强绿色荧... 详细信息

体外采集绵羊卵丘卵母细胞复合体,成熟培养24 h,经过体外受精培养17 h,比较高速离心对胚胎发育的影响;高速离心可以使黑色脂滴甩到一边从而使受精卵原核清晰可见.然后将绵羊乳腺特异表达人肝细胞再生增强因子和真核细胞表达增强绿色荧光蛋白(EnhancedGreen fluorescence protein,EGFP)的载体DNA显微注射于绵羊受精卵雄原核中,并将异构胚在SOF液中发育培养.结果表明:高速离心组囊胚率低于对照组,但是没有显著性差异(P>0.05);显微注射外源基因2天后在激光共聚焦显微镜下可见荧光胚胎;PCR检测5个荧光胚胎均可见特异性条带.在原核显微注射生产转基因胚胎中,绿色荧光蛋白可作为标记基因进行早期胚胎筛选,为提高转基因动物移植效率奠定实验基础.

关键词：原核显微注射增强绿色荧光蛋白转基因绵羊胚胎

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大鼠胎脑神经干细胞的分离和培养

内蒙古大学学报（自然科学版） 2004年第5期35卷 540-545页

作者：李雪玲扈廷茂苏慧敏陈明杰于海泉 John R.Morrision 内蒙古大学实验动物研究中心哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021 Monash Institute of Reproduction and Development

从胚龄14.5～16.5d(E14.5～16.5)的大鼠胎脑组织获得大鼠胎脑神经干细胞(ratfe-talneuralstemcells,rFNSCs),培养于含有碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)和表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)的无血清培养液DMEM/F12中,用3[H]胸苷掺入试验检测EGF和bFGF对大鼠胚胎神经干细胞分裂和增殖的影响.BrdU结合反应和nestin免疫组化检测显示培养细胞在早期时代约90%以上具有分裂增殖能力并显示nestin阳性,而且这些细胞在培养过程中可以分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,证明分离培养的是神经干细胞,可用于移植、定向分化和基因转移的研究.

关键词：大鼠胎儿神经干细胞 DMEM/F12 表皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子

黄河鲤和德国镜鲤及其杂种F_1同工酶的比较研究

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内蒙古大学学报（自然科学版） 1994年第3期25卷 305-312页

作者：扈廷茂刘明秋王焕来田学军内蒙古大学生物学系内蒙古自治区水产科学研究所

本研究用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，以亲本黄河鲤（ＣｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏＬ．（ＹｅｌｌｏｗＲｉｖｅｒｃａｒｐ））和德国镜鲤（ＳｅａｔｔｅｒｅｄＣｙｐｒｉｎｕｓＣａｒｐｉｏ．Ｌ．ｍｉｒｒｏｒ）及其杂种Ｆ＿１的肝... 详细信息

本研究用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，以亲本黄河鲤（ＣｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏＬ．（ＹｅｌｌｏｗＲｉｖｅｒｃａｒｐ））和德国镜鲤（ＳｅａｔｔｅｒｅｄＣｙｐｒｉｎｕｓＣａｒｐｉｏ．Ｌ．ｍｉｒｒｏｒ）及其杂种Ｆ＿１的肝脏、脾脏、心、肾脏、脑和肌肉为材料，进行了乳酸脱氢酶同工酶（ＬＤＨ），苹果酸脱氢酶同工酶（ＭＤＨ）和酯酶同工酶（ＥＳＴ）电泳图谱的比较分析，结果表明，同种鱼不同组织的同工酶谱有明显的组织特异性，亲本及Ｆ＿１的同种不同组织同工酶谱也有差异，亲本各组织的大多数同工酶在Ｆ＿１代得到表观，杂种Ｆ＿１的同工酶谱的表现又可分为三类：１）与双亲完全互补型；２）部分互补和少数亲本酶带消失型；３）产生双亲均无得以出现的酶带或杂种酶带型．本文还讨论了黄河鲤、德国镜鲤及其Ｆ＿１的同工酶的遗传基础和亚基组成．

关键词：杂种F1 同工酶鲤科遗传学

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内蒙古五种蒿属植物的染色体研究

内蒙古大学学报（自然科学版） 1991年第3期22卷 422-427页

作者：扈廷茂曹瑞王汉屏张寿洲内蒙古大学生物系西安教育学院生物系

本文报道了内蒙古蒿属五种植物的染色体核型,其核型公式为:Artemisia sieversianaWilld.2n=2x=18=14m+2sm+2st(2SAT);*** L.2n=2x=18=12m+4sm+2st;***.2n=4x=36=26m+6sm+4st;*** Bess 2n=4x=36=24m+10sm+2st(4SAT);*** Kragh.2n=4x=36=28m+6sm+2st.其中前4种核型为首次报道。同时对该属染色体的原始基数,倍性变化及形态结构变异进行了初步分折。

关键词：蒿属染色体核型内蒙古

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黄芪合剂抗尼古丁和焦油作用的研究

中国预防医学杂志 2005年第4期6卷 310-312页

作者：常福厚扈廷茂内蒙古医学院药学系药理呼和浩特010059 内蒙古大学生命科学学院遗传工程室

目的研究黄芪合剂对尼古丁和焦油引起小鼠超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量变化的影响。方法以超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)活性和脂质过氧化物(Lipidperoxidation,LPO)为指标,采用邻苯三酚自氧化法和荧光法测定SOD的... 详细信息

目的研究黄芪合剂对尼古丁和焦油引起小鼠超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量变化的影响。方法以超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)活性和脂质过氧化物(Lipidperoxidation,LPO)为指标,采用邻苯三酚自氧化法和荧光法测定SOD的活性和LPO的含量。结果1%LD50尼古丁组的SOD活性为(418.4±78.0)U/(g,Hb),黄芪合剂加1%LD50尼古丁组的SOD活性为(571.5±48.7)U/(g,Hb)。2%LD50尼古丁组的SOD活性为(375.1±56.1)U/(g,Hb),黄芪合剂加2%LD50尼古丁组的SOD活性为(476.9±12.5)U/(g,Hb)。1%LD50焦油组的SOD活性为(209.6±17.7)U/(g,Hb),黄芪合剂加1%LD50焦油组的SOD活性为(462.6±16.2)U/(g,Hb)。2%LD50焦油组的SOD活性为(227.9±23.1)U/(g,Hb),黄芪合剂加2%LD50焦油组的SOD活性为(431.2±21.2)U/(g,Hb)。1%LD50尼古丁组的LPO含量为(2.8140±1.3691)nmol/ml,黄芪合剂加1%LD50尼古丁组的LPO含量为(0.4823±0.0032)nmol/ml。2%LD50尼古丁组的LPO含量为(2.7328±1.3902)nmol/ml,黄芪合剂加2%LD50尼古丁组的LPO含量为(0.3420±0.1018)nmol/ml。1%LD50焦油组的LPO含量为(1.1566±0.603)nmol/ml,黄芪合剂加1%LD50焦油组的LPO含量为(0.3671±0.1223)nmol/ml。2%LD50焦油组的LPO含量为(1.4468±0.5940)nmol/ml,黄芪合剂加2%LD50焦油组的LPO含量为(0.5050±0.3101)nmol/ml。黄芪合剂可使不同浓度的尼古丁和焦油降低的SOD活性升高,可使不同浓度的尼古丁和焦油升高的LPO降低。结论黄芪合剂有抗脂质过氧化作用,对尼古丁和焦油引起小鼠超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量的改变有保护作用。

关键词：黄芪合剂中药制剂尼古丁焦油脂质过氧化物超氧化物歧化酶抗烟毒药抗衰老药

谷胱甘肽和活性氧对哺乳动物配子作用的研究进展

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动物医学进展 2005年第12期26卷 6-10页

作者：常福厚扈廷茂内蒙古医学院药学院药理学教研室内蒙古呼和浩特010059 内蒙古大学生命科学学院内蒙古呼和浩特010021

文章综述了近年来关于谷胱甘肽对哺乳动物精子、卵母细胞和胚胎早期发育的作用及活性氧对精子功能的影响。在雄性和雌性配子中,谷胱甘肽起着保护精子和卵母细胞免受氧化损害的作用。在卵母细胞减数分裂中谷胱甘肽具有维持纺锤体形态的作... 详细信息

文章综述了近年来关于谷胱甘肽对哺乳动物精子、卵母细胞和胚胎早期发育的作用及活性氧对精子功能的影响。在雄性和雌性配子中,谷胱甘肽起着保护精子和卵母细胞免受氧化损害的作用。在卵母细胞减数分裂中谷胱甘肽具有维持纺锤体形态的作用,受精后,巯基在精核的形成中起着积极的作用,并促进早期胚胎发育到囊胚阶段。在卵母细胞成熟过程中,谷胱甘肽的浓度发生着变化。它的合成受促性腺激素的调节,在精子的发生过程中随着精子的成熟,谷胱甘肽的浓度逐渐降低,但活性氧对精子功能也有多方面的作用。文章对卵丘细胞中小分子巯基化合物在谷胱甘肽合成中的重要作用也进行了综述。

关键词：谷胱甘肽活性氧配子哺乳动物

烟焦油及被动吸烟对小鼠肺芳香烃羟化酶活性的影响

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动物医学进展 2006年第3期27卷 59-62页

作者：常福厚扈廷茂内蒙古医学院药学院药理学教研室内蒙古呼和浩特010059 内蒙古大学生命科学学院内蒙古呼和浩特010021

为研究烟焦油和被动吸烟对小鼠肺芳香烃羟化酶(AHH)活性的影响,同时观察烟焦油对AHH活性影响的剂量反应关系和时间反应关系,以1%LD50(5.29 mg/kg),2%LD50(10.58 mg/kg)和3%LD50(15.87mg/kg)的烟焦油分别使小鼠染毒24,48 h和72 h,每日1次... 详细信息

为研究烟焦油和被动吸烟对小鼠肺芳香烃羟化酶(AHH)活性的影响,同时观察烟焦油对AHH活性影响的剂量反应关系和时间反应关系,以1%LD50(5.29 mg/kg),2%LD50(10.58 mg/kg)和3%LD50(15.87mg/kg)的烟焦油分别使小鼠染毒24,48 h和72 h,每日1次,然后测定肺AHH的活性。被动吸烟组置于体积50 L自制染毒柜中,烟雾浓度为69.41 g/m3,每日2次。对照组不吸烟,但处于相同条件。2周后测定肺AHH的活性。结果表明,2%LD50烟焦油组在72h后和3%LD50烟焦油组在48 h和72 h后均可以提高小鼠肺AHH的活性。2%LD50和3%LD50烟焦油作用小鼠72 h和48 h比较,对AHH活性的影响差异显著(P<0.05)。被动吸烟也可提高小鼠肺AHH的活性。表明烟焦油在一定的浓度和时间内可使AHH的活性上调,这种上调作用表现为剂量依赖性和时间依赖性,被动吸烟也可提高小鼠肺AHH的活性。

关键词：香烟焦油芳香烃羟化酶被动吸烟

人肝再生增强因子和荧光蛋白基因在绵羊成纤维细胞中的表达

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北方药学 2007年第6期4卷 35-36页

作者：扈会平马玉珍扈廷茂丽珠制药厂珠海519000 内蒙古大学生命科学学院呼和浩特010021

本实验利用LipofectAMINETM介导pEGFP/ALR载体转染sFFCs,经G418筛选,10d后共形成38个单克隆细胞,细胞用于提取蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫组化检测。结果表明:3个荧光单克隆细胞,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期相符的57KD大小的融... 详细信息

本实验利用LipofectAMINETM介导pEGFP/ALR载体转染sFFCs,经G418筛选,10d后共形成38个单克隆细胞,细胞用于提取蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫组化检测。结果表明:3个荧光单克隆细胞,聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期相符的57KD大小的融合蛋白,免疫组化检测可见ALR蛋白分布于sFFCs胞质和胞核,且细胞核含量多于细胞质。

关键词：人肝再生增强因子 EGFP 成纤维细胞表达