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流式细胞术分选小鼠骨髓造血干细胞的技术方案

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分析仪器 2022年第5期 61-65页

作者：户乃丽首都医科大学中心实验室北京100069

流式细胞术是检测和分选造血干细胞的重要手段,根据其表型和功能,目前有多种不同组合的表面标记物用于识别小鼠的骨髓造血干细胞。但是由于其含量极低,因此在实验操作中存在着一定难度。本实验以目前公认度较高的LSK方案结合SLAM家族分... 详细信息

流式细胞术是检测和分选造血干细胞的重要手段,根据其表型和功能,目前有多种不同组合的表面标记物用于识别小鼠的骨髓造血干细胞。但是由于其含量极低,因此在实验操作中存在着一定难度。本实验以目前公认度较高的LSK方案结合SLAM家族分离策略为依据,首先对小鼠骨髓细胞分群及亚型检测,而后结合生物素标记的免疫磁珠对样品进行预纯化,再经流式分选,得到了纯度和活性均高于90%的LSK阳性造血干细胞。本文详细介绍了染色的方案及具体操作,以及流式分选的技术细节。

关键词：造血干细胞免疫磁珠分选流式分选

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流式细胞术研究细胞增殖的方法与技术

医学信息 2019年第1期32卷 47-49页

作者：户乃丽首都医科大学中心实验室

流式细胞术是检测细胞增殖的一种重要手段,较以往的检测方法,流式细胞仪的优点在于能够实现多荧光指标同时检测,并且可以对混合样品中的特定细胞进行增殖分析,本文就目前常用细胞增殖检测染料的检测原理,应用范围及染色方法作进行阐述。

关键词：细胞增殖流式细胞 DNA染色示踪染料

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医学院校开展流式细胞技术培训的应用与体会

基础医学教育 2024年第4期26卷 315-317页

作者：户乃丽徐晓雪邹林樾首都医科大学中心实验室北京100069

流式细胞术是一项功能强大的生物检测分析技术,在医学科研中应用广泛。文章详细介绍了近年来结合流式技术特点,首都医科大学中心实验室通过理论讲座和实践操作,对用户开展分层次、渐进式、有针对性的细胞检测和分选的技术培训模式,包括... 详细信息

流式细胞术是一项功能强大的生物检测分析技术,在医学科研中应用广泛。文章详细介绍了近年来结合流式技术特点,首都医科大学中心实验室通过理论讲座和实践操作,对用户开展分层次、渐进式、有针对性的细胞检测和分选的技术培训模式,包括分级课程设计、模块化教学和培训效果评估,并探讨性地提出目前培训中存在的问题及可能的解决方案,力争将大型仪器的共享与资源利用最大化。

关键词：基础医学实验教学流式技术开放共享模块化教学分级培训

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首都医科大学中心实验室

基础医学教育 2024年第5期26卷 F0003-F0003页

作者：户乃丽首都医科大学中心实验室

首都医科大学中心实验室成立于2005年,是我校重要的专业技术公共服务平台,负责学校科研技术共享平台的建设和管理,承担大型仪器设备的运行和开放共享,为学校的教学和科研提供技术支撑服务。中心实验室位于首都医科大学科研北楼地下2层至... 详细信息

首都医科大学中心实验室成立于2005年,是我校重要的专业技术公共服务平台,负责学校科研技术共享平台的建设和管理,承担大型仪器设备的运行和开放共享,为学校的教学和科研提供技术支撑服务。中心实验室位于首都医科大学科研北楼地下2层至6层,下设:电子显微镜研究平台、流式细胞研究平台、光学显微镜研究平台、机能学研究平台、基因组学研究平台、蛋白质组学研究平台、药学研究平台和医学影像学研究平台。截止目前,中心实验室拥有140余台大中型先进的科研仪器设备,各类仪器设备总价值达3.1亿元。中心实验室拥有一支稳定的专业技术队伍,现有各类技术人员40人,硕士及以上学历占比70%,中级及以上技术职称占比97%,其中高级技术职称占比57.25%。经过近20年的发展,中心实验室形成了持续有效的专业技术服务能力,每年为校本部、附属医院以及高等院校、科研院所等50余家单位提供测试服务及技术支撑。同时,中心实验室承担着学校研究生、本科生现代生物研究技术(大型仪器设备使用)课程教学,涉及专业为医学实验技术、基础医学专业、阶平班-临床医学和阶平班-口腔医学。

关键词：专业技术队伍学校科研技术职称大型仪器设备校本部医学影像学测试服务专业技术服务

雷公藤甲素对脑胶质瘤细胞凋亡的影响及机制探讨

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继续医学教育 2018年第9期32卷 145-147页

作者：邹林樾徐晓雪户乃丽首都医科大学中心实验室北京100069

目的研究雷公藤甲素(TP)对脑胶质瘤细胞u87的细胞凋亡、线粒体膜电位和ROS生成的影响,探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法体外培养U87细胞,用10,50,250,1 250 nmol/L四个浓度雷公藤甲素作用于细胞24小时后,流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞线... 详细信息

目的研究雷公藤甲素(TP)对脑胶质瘤细胞u87的细胞凋亡、线粒体膜电位和ROS生成的影响,探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法体外培养U87细胞,用10,50,250,1 250 nmol/L四个浓度雷公藤甲素作用于细胞24小时后,流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞线粒体膜电位,以及活性氧。结果随着药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加,线粒体膜电位检测到绿色荧光区域细胞比例逐渐增多,细胞活性氧生成水平逐渐升高,与对照组比差异有统计学意义,TP对细胞凋亡的诱导作用与药物浓度呈正相关。结论雷公藤甲素可体外诱导U87细胞凋亡,机制可能与线粒体信号通路参与了TP诱导的细胞凋亡,同时通过细胞氧化应激反应,升高ROS,诱导细胞凋亡有关。

关键词：雷公藤甲素脑胶质瘤细胞细胞凋亡线粒体膜电位活性氧

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高校大型仪器设备平台流式细胞仪的开放共享

医学教育管理 2021年第S01期7卷 112-115页

作者：邹林樾徐晓雪户乃丽田蜜首都医科大学中心实验室北京100069

流式细胞术是对单个细胞或生物颗粒进行多参数定量分析和分选的技术,已广泛应用于科学研究的各个领域。为了充分实现大型仪器设备的开放共享,自流式细胞仪开放使用以来,我室分层次开设了流式细胞术的培训课程,对技术重点难点的多色实验... 详细信息

流式细胞术是对单个细胞或生物颗粒进行多参数定量分析和分选的技术,已广泛应用于科学研究的各个领域。为了充分实现大型仪器设备的开放共享,自流式细胞仪开放使用以来,我室分层次开设了流式细胞术的培训课程,对技术重点难点的多色实验和荧光补偿重点培训,对进入实验室的课题研究者采取“一对一”的老师指导流式检测和分选过渡到学生独立使用仪器的全开放模式,同时保障仪器高效正常使用,帮助学生掌握流式细胞术,提高科研分析及解决问题的能力,为学生在科研实验中应用流式细胞术打下良好的基础。

关键词：流式细胞术开放使用培训

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流式微球捕获蛋白定量检测技术的原理与应用

继续医学教育 2022年第9期36卷 129-132页

作者：徐晓雪户乃丽邹林樾赵君朋首都医科大学中心实验室北京100069

流式微球捕获蛋白定量检测技术也被称为悬浮点阵技术、液态芯片技术,是基于流式检测技术和荧光微球捕获技术的液相、高通量、多重蛋白定量技术,基本原理是在荧光编码捕获微球表面进行的荧光标记液相抗原抗体反应,具有流式技术检测速度... 详细信息

流式微球捕获蛋白定量检测技术也被称为悬浮点阵技术、液态芯片技术,是基于流式检测技术和荧光微球捕获技术的液相、高通量、多重蛋白定量技术,基本原理是在荧光编码捕获微球表面进行的荧光标记液相抗原抗体反应,具有流式技术检测速度快、定量准确、多参数、高通量的特点,检测所需样品量小,可同时检测一个样品中数种到数十种可溶性蛋白,具有良好的可重复性,是固相酶联免疫吸附检测的一项良好的替代技术,在病毒感染、各类炎症、过敏性疾病、自身免疫病、肿瘤、移植、药物研发等相关的研究领域具有应用价值,在儿科危重病患儿的诊断和治疗、急性公共传染性疾病的研究和临床诊治中具有特殊意义。文章主要介绍流式微球捕获蛋白定量检测技术的技术原理、特点、应用与局限性。

关键词：流式细胞术液相多重蛋白定量技术蛋白捕获微球酶联免疫吸附技术细胞因子炎症因子

两种碘化丙啶染色DNA定量方法检测HL-60细胞凋亡结果的比较

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首都医科大学学报 2014年第6期35卷 823-826页

作者：徐晓雪户乃丽孙丽娜孔璐首都医科大学医学实验与测试中心北京100069 首都医科大学基础医学院药理学系北京100069 首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系北京100069

碘化丙啶（propidium iodide,PI）是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发... 详细信息

碘化丙啶（propidium iodide,PI）是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发出峰值610~620 nm 的荧光,可以准确的反映细胞群体中DNA 含量的分布情况,适用于 DNA 定量检测。

关键词： HL-60细胞凋亡碘化丙啶染色定量检测 DNA 定量方法双链核酸特异性结合流式细胞仪

鸡红细胞标准品制备及其在流式细胞仪DNA周期检测中的应用

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继续医学教育 2013年第2期27卷 52-55页

作者：邹林樾徐晓雪户乃丽首都医科大学医学实验与测试中心北京100069

目的:制备鸡红细胞标准品并探索其在流式细胞仪DNA周期检测中的应用。方法:采集鸡红细胞制成纯净红细胞,然后用乙醇固定,放于4℃冰箱备用。用PI荧光染料标记鸡红细胞和分别加入鸡红细胞的人结肠癌细胞SW480、人喉癌细胞系Hep2、人肺腺... 详细信息

目的:制备鸡红细胞标准品并探索其在流式细胞仪DNA周期检测中的应用。方法:采集鸡红细胞制成纯净红细胞,然后用乙醇固定,放于4℃冰箱备用。用PI荧光染料标记鸡红细胞和分别加入鸡红细胞的人结肠癌细胞SW480、人喉癌细胞系Hep2、人肺腺癌细胞A5494,用流式细胞仪检测DNA含量。结果:鸡红细胞替代正常二倍体细胞与肿瘤细胞同时染色,直方图显示两种细胞G0/G1期峰位置相差大,可清晰分辨,得到肺腺癌细胞A549的G0/G1期峰道数和鸡红细胞峰道数比值为4.712 0,喉癌细胞系Hep2的G0/G1期峰道数和鸡红细胞峰道数比值为7.096 2,结肠癌细胞SW480的G0/G1期峰道数和鸡红细胞峰道数比值为4.523 4。结论:利用流式细胞术,以鸡红细胞为内标标记,可以准确计算并识别多种肿瘤细胞DNA倍体,并且可以辅助流式检测的质量控制,此方法简便易行值得推广。

关键词：流式细胞术鸡红细胞 DNA