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抗生素药代动力学生物测定法敏感条件的研究

湖南医科大学学报 2002年第1期27卷 94-94,F003页

作者：戴橄陈利玉周爱东中南大学湘雅医学院微生物学教研室长沙410078

抗生素药代动力学的测定方法，目前有两种，一是高压液相色谱（High-Performance Liguid Chromatographic Assay, HPLC），此法敏感，准确，重复性较好，但需要一些高敏感性检测器，如紫外检测器（敏感度为5 * 10~(-10) g·ml）；荧光... 详细信息

抗生素药代动力学的测定方法，目前有两种，一是高压液相色谱（High-Performance Liguid Chromatographic Assay, HPLC），此法敏感，准确，重复性较好，但需要一些高敏感性检测器，如紫外检测器（敏感度为5 * 10~(-10) g·ml）；荧光检测器(10~(-10)g·ml~(-1))；红外检测器（10~(-6)g·ml~(-1)）。电化学检测器(10~(-12)g·ml~(-1))等仪器昂贵，非一般实验室所能具备。另一种是微生物学方法为国内外常用，但影响因素较多。本研究对生物学方法一些主要影响因素进行分析，以寻求一种敏感、准确、重复性好的方法。

关键词：阿奇霉素药代动力学微生物测定法抗生素敏感条件

改良米汤培养基对白色念珠菌厚膜孢子形成的效果

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湖南医科大学学报 2000年第2期25卷 207-208页

作者：戴橄周爱东微生物学教研室长沙410078

对常用的刺激白色念珠菌厚膜孢子形成的三种培养基与改良米汤培养基比较 ,结果示 ,改良的米汤培养基产生的厚膜孢子的效果最佳 ,在 1 8h内即可产生大量的厚膜孢子。结果表明改良的米汤培养基制作简便、经济实用。

关键词：米汤培养基白色念珠菌孢子厚膜孢子

HCMV感染对人神经胶质瘤U251细胞p38 MAPK活性的影响

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中南大学学报（医学版） 2004年第4期29卷 486-488页

作者：李太存陈利玉戴橄邬国军罗敏华湖南省疾病预防控制中心微生物检验科长沙410005 中南大学湘雅医学院微生物教研室长沙410078

人巨细胞病毒(HCMV)在人群中的感染非常普遍.随着器官移植的广泛开展、艾滋病的传播以及耐药病毒株的出现,对HCMV致病、致畸机制的研究越来越受到重视.MAPK是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它介导的信号转导通路是生物信号引起核... 详细信息

人巨细胞病毒(HCMV)在人群中的感染非常普遍.随着器官移植的广泛开展、艾滋病的传播以及耐药病毒株的出现,对HCMV致病、致畸机制的研究越来越受到重视.MAPK是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它介导的信号转导通路是生物信号引起核反应的重要通路,参与细胞生长、分化、凋亡等多种生理过程,并在细胞恶性转化等病理过程中起重要作用.Johnson 等[1,2]发现HCMV感染血清饥饿的人胚肺成纤维细胞(HEL细胞)后,p38活性呈双相增高,即在10 h和24～48 h出现两个高峰,SB202190(FHPI)抑制p38活性后能够抑制病毒DNA复制和晚期基因的表达,说明p38通路参与了HCMV感染引起的宿主细胞代谢改变以及复制周期.Chen等[3]也证实在成纤维细胞(HFF)中应用FHPI抑制p38活性后能显著降低HCMV UL4启动子的活性。

关键词： HCMV感染 p38MAPK 神经胶质瘤细胞恶性转化人巨细胞病毒细胞内艾滋病 U251细胞苏氨酸蛋白激酶生理过程

人巨细胞病毒感染对小鼠脑组织同源框基因表达的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第8期24卷 595-599页

作者：谢妮陈利玉罗敏华戴橄邬国军中南大学湘雅医学院微生物学教研室

目的　研究小鼠脑组织同源框基因 (homeoboxgene ,Hox)的表达状态及人巨细胞病毒(humancytomegalovirus ,HCMV)感染对小鼠脑组织Hox基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的分子机制。方法　昆明系小鼠 4 8只 ,随机分为 :实验对照组 (16只 )... 详细信息

目的　研究小鼠脑组织同源框基因 (homeoboxgene ,Hox)的表达状态及人巨细胞病毒(humancytomegalovirus ,HCMV)感染对小鼠脑组织Hox基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的分子机制。方法　昆明系小鼠 4 8只 ,随机分为 :实验对照组 (16只 )和病毒感染组 (32只 ) ,病毒感染为脑内注射。在感染后 7、15、30、6 0d分别以病理学方法观察病理损伤 ,以免疫组化方法检查HCMV LA(latean tigen) ,PCR检测小鼠脑组织中HCMV DNA。在建立HCMV脑部感染的小鼠模型基础上 ,用RT PCR测定Hox基因在病毒感染组和实验对照组小鼠脑组织中的表达 ,并用同位素标记的Hox寡核苷酸探针进行Northernblot检测相应的表达状况。结果　 (1)接种HCMVAD16 9株的小鼠脑组织发生了病理改变 ,免疫组化和PCR方法在神经细胞内查到了HCMV LA和DNA ;(2 )RT PCR和Northernblot发现 :对照组的小鼠脑组织表达Hoxa2、Hoxb1和Hoxb2 ,但不表达Hoxb5、Hoxb8;HCMV感染后 ,小鼠脑组织被诱导表达Hoxa1,与对照组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ,且于感染后的 15d达到高峰 ,而Hoxb1的表达下调 (P <0 .0 5 ) ;Hoxa2和Hoxb2无明显变化 ;Hoxb5和Hoxb8仍旧不表达。结论　HCMVAD16 9株可感染小鼠神经系统。HCMV感染可诱导小鼠神经系统发育基因Hox基因表达改变。

关键词：人巨细胞病毒感染小鼠脑组织同源框基因基因表达 Hox基因

实时荧光定量PCR法检测人乳头状瘤病毒的实验研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第6期28卷 560-564页

作者：汪世平贾政军何卓戴橄钟飞吉首大学医学院 416000 中南大学湘雅医学院长沙410078 湖南省妇幼保健站

目的通过研究病变宫颈中人乳头状瘤病毒（HPV）16／18型的表达，探讨HPV16／18型病毒感染与宫颈病变发生发展之间的关系。方法结合病理切片诊断，以免疫组化作对照。运用实时荧光定量PCR技术检测病变宫颈中HPV16／18型DNA拷贝数，以及HP... 详细信息

目的通过研究病变宫颈中人乳头状瘤病毒（HPV）16／18型的表达，探讨HPV16／18型病毒感染与宫颈病变发生发展之间的关系。方法结合病理切片诊断，以免疫组化作对照。运用实时荧光定量PCR技术检测病变宫颈中HPV16／18型DNA拷贝数，以及HPV16／18型E7基因mRNA表达量。结果慢性宫颈炎患者中HPV16／18型感染率低（7．4％）。宫颈管上皮内瘤样变（CIN）组HPV16型感染率较高为69．6％，宫颈癌患者中为72．7％。HPV16型DNA的拷贝数在宫颈上皮内瘤样变患者中与病理分级没有明显的相关性。但在宫颈癌患者中，病毒DNA的拷贝数明显升高，二者差异明显。CIN轻度（Ⅰ）、中度（Ⅱ）、高度（Ⅲ）组和宫颈癌患者中，HPV16 E7基因的表达率分别为0、37．5％、42．9％、63．6％。统计学分析表明，HPV16 E7 mRNA的拷贝数与病情呈明显的正相关性。结论感染者中主要以HPV16型为主，HPV18型较少。宫颈癌患者中HPV16 DNA拷贝数明显高于CINⅡ、Ⅲ组，HPV16型E7 mRNA在宫颈癌中表达率及表达量明显增加并与宫颈癌变呈正相关。实时荧光定量PCR适合临床宫颈病变病毒的筛查与检测。

关键词：荧光定量PCR 人乳头状瘤病毒宫颈癌

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泌尿生殖道微生物感染检测及细菌药敏试验

湖南医科大学学报 2003年第3期28卷 269-271页

作者：李闻文阎祖炜戴橄龚道科中南大学湘雅医学院临床微生物学免疫学教研室长沙410078

目的 :从泌尿生殖道分泌物中分离培养细菌、支原体及衣原体 ,了解细菌对多种抗菌药物的敏感情况。方法 :人工培养方法从泌尿生殖道分泌物分离培养细菌、支原体和衣原体 ,用多种抗生素对细菌进行药敏实验。结果 :分离培养的细菌大多数为... 详细信息

目的 :从泌尿生殖道分泌物中分离培养细菌、支原体及衣原体 ,了解细菌对多种抗菌药物的敏感情况。方法 :人工培养方法从泌尿生殖道分泌物分离培养细菌、支原体和衣原体 ,用多种抗生素对细菌进行药敏实验。结果 :分离培养的细菌大多数为表皮葡萄球菌和棒状杆菌 ,少数为革兰阴性杆菌或大肠杆菌或伴有支原体、衣原体生长。细菌对丁胺卡那霉素、先锋霉素Ⅴ号、利福平、庆大霉素及强力霉素等敏感。结论 :表皮葡萄球菌和棒状杆菌是泌尿生殖道感染的重要病原菌。

关键词：泌尿生殖道微生物感染检测细菌药敏试验

单核细胞增多型李氏忒菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡

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湖南医科大学学报 2001年第4期26卷 305-308页

作者：陈利玉蒋洪敏邬国军戴橄中南大学湘雅医学院微生物学教研室长沙410078 中南大学湘雅二医院检验科长沙410011

以流式细胞仪 (FCM)分析 ,DNA琼脂糖凝胶电泳分析及细胞形态学改变为指标 ,研究单核细胞增多型李氏忒菌 (LM)感染对小鼠胸腺细胞凋亡的诱导作用。结果发现 ,LM能诱导小鼠胸腺细胞产生典型的细胞凋亡形态学改变 ;FCM分析显示特征性的凋亡... 详细信息

以流式细胞仪 (FCM)分析 ,DNA琼脂糖凝胶电泳分析及细胞形态学改变为指标 ,研究单核细胞增多型李氏忒菌 (LM)感染对小鼠胸腺细胞凋亡的诱导作用。结果发现 ,LM能诱导小鼠胸腺细胞产生典型的细胞凋亡形态学改变 ;FCM分析显示特征性的凋亡峰 ;琼脂糖凝胶电泳分析显示胸腺细胞出现典型的DNA“梯状带” ;胸腺细胞凋亡于LM(5× 10 5CFU)感染后 8h出现 ,48h达高峰 ;胸腺萎缩于LM感染后 16h出现 ,48h达最低水平 ;胸腺细胞凋亡百分率随LM感染剂量增加而增高。提示 ,LM以时间和剂量依赖方式诱导小鼠胸腺细胞凋亡。

关键词：单核细胞增多型李氏忒菌胸腺细胞细胞凋亡动物疾病模型小鼠 LM

HCMV感染对人神经胶质瘤细胞HOXB1～4及HOXB9基因表达影响的研究

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中国人兽共患病杂志 2004年第7期20卷 613-616页

作者：戴橄陈利玉李太存邬国军罗敏华中南大学湘雅医学院微生物学教研室长沙410078

目的　研究人神经胶质瘤U2 5 1细胞株的HOXB基因表达状态及人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对U2 5 1细胞HOXB1,HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB9基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的可能机制。方法　应用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检... 详细信息

目的　研究人神经胶质瘤U2 5 1细胞株的HOXB基因表达状态及人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对U2 5 1细胞HOXB1,HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB9基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的可能机制。方法　应用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检测U2 5 1细胞感染HCMV和 /或全反式维甲酸 (ATRA)处理前后HOXB1,HOXB2 ,HOXB3,HOXB4和HOXB9基因的相对表达水平。结果　U2 5 1细胞表达HOXB1,HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB9基因 ;HCMV感染后 ,U2 5 1细胞HOXB1基因表达明显上调 ,HOXB2和HOXB4基因表达轻微上调 ,HOXB3基因于HCMV感染后表达被抑制 ,HOXB9基因的表达在HCMV感染后不同时间无明显变化 ;ATRA能显著上调HCMV感染后U2 5 1细胞HOXB1基因的表达。结论　HCMV感染能诱导U2 5 1细胞HOXB基因表达改变 ,HCMV有可能通过调控HOXB基因表达异常引起胚胎发育畸形。

关键词：人类巨细胞病毒 HOXB基因 RT—PCR 神经胶质瘤 U251细胞株

人类巨细胞病毒感染对人胚肺细胞HOXB1,HOXB5,HOXB6及HOXB9基因表达的影响

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湖南医科大学学报 2001年第3期26卷 189-191页

作者：陈利玉邬国军戴橄姚孟辉罗敏华中南大学湘雅医学院微生物学教研室长沙410078

目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB1,HOXB5 ,HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对上述基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6 ,但不表达HOXB1和HOX... 详细信息

目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB1,HOXB5 ,HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对上述基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6 ,但不表达HOXB1和HOXB9;②HCMV感染后 ,HEL细胞HOXB6基因的表达上调 ,且被HCMV诱导表达HOXB9T ,而HOXB5基因的表达无明显改变 ,HOXB1基因仍旧不表达 ;③全反式维甲酸 (ATRA)能上调HCMV感染后HOXB9基因的表达 ,但对HCMV感染晚期HOXB6基因的表达有抑制作用。结论 :HCMV能诱导HOXB6和HOXB9基因表达异常。

关键词：巨细胞病毒基因表达细胞肺胚胎 RT-PCR 先天性畸形