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L-瓜氨酸生产菌株的选育及其代谢调控研究

L-瓜氨酸生产菌株的选育及其代谢调控研究

作者：戴安迪浙江工业大学

学位级别：硕士

L-瓜氨酸,一种非蛋白质氨基酸,是人体内尿素循环的中间代谢产物,具有重要的生理功能。自然界中,有些微生物能产生精氨酸脱亚氨酶,转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸,称为酶法生产L-瓜氨酸。该方法条件温和,转化率高,环境友好,在大规模工业化生... 详细信息

L-瓜氨酸,一种非蛋白质氨基酸,是人体内尿素循环的中间代谢产物,具有重要的生理功能。自然界中,有些微生物能产生精氨酸脱亚氨酶,转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸,称为酶法生产L-瓜氨酸。该方法条件温和,转化率高,环境友好,在大规模工业化生产中具有良好的应用前景。本研究自主筛选西瓜大棚土壤中L-瓜氨酸产量较高的菌株,并对其进行紫外诱变,探索发酵、转化过程中各个因素对L-瓜氨酸产量的影响,并尝试敲除代谢瓜氨酸的编码基因对其进行代谢调控研究。首先利用精氨酸双水解酶筛选培养基和高效液相色谱法测定L-瓜氨酸的质量浓度,对杭州市勾庄地区西瓜大棚土壤中的微生物进行初筛和复筛,共获得45株产L-瓜氨酸的菌株。其中一株细菌(菌株编号15)转化L-精氨酸生成L-瓜氨酸的能力最强,生产的L-瓜氨酸质量浓度最高。对15号菌株分别进行形态学观察,生理生化试验以及分子生物学鉴定,初步鉴定该菌株为气单胞菌(Aeromonas),将其命名为Aeromonas ***。并用紫外照射的方法对出发菌株Aeromonas ***进行处理,从中筛选到一株瓜氨酸产量较高的诱变株Aeromonas ***-89,传5代后L-瓜氨酸生产能力仍然稳定良好。本研究考察了Aeromonas ***-89发酵,转化过程中各种因素对L-瓜氨酸产量的影响,得了到最优的发酵条件,即碳源为2.5 g/L蔗糖,氮源为15 g/L酵母粉、10 g/L蛋白胨,诱导物L-精氨酸浓度为20 g/L,添加10mol/L Co,接种量为3%,温度为37℃,培养基初始p H=7,装液量为100 m L/250 m L,转速为180 r/min。在此条件下发酵20 h,0.252 g菌体(干重)在60 m L起始p H=6的0.4 mol/L醋酸缓冲液反应体系中转化4 h后,可将160 g/L底物L-精氨酸转化成93.5 g/L的L-瓜氨酸,可检测到的最高L-瓜氨酸浓度为113.03 g/L,转化率达70.24%。本文还尝试利用Red同源重组技术对Aeromonas ***-89的L-瓜氨酸代谢的基因鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OTC)基因进行敲除,希望能使产生的L-瓜氨酸积累到较高浓度而不被菌体所降解。结果显示卡那霉素抗性(kana)基因重组到了Aeromonas ***-89基因组中,Aeromonas ***-89已获得kana抗性,但是kana基因未能够替换原有的OTC基因,未能定点敲除OTC基因。这可能是由于所设计的同源臂靶向性不好,导致敲除脱靶。后续研究可设计能使同源重组更加专一的同源臂来完成对OTC基因的敲除。

关键词： L-瓜氨酸菌株选育代谢调控气单胞菌 Red同源重组

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职业教育视域下的影视剧本创作教学改革研究

大观（论坛） 2022年第8期 63-65页

作者：戴安迪安徽新闻出版职业技术学院

职业院校要密切结合影视剧本的市场化运作,结合学生的兴趣,创设剧本写作环境,制定考评机制,按照企业、职业技能大赛对剧本的要求来衡量学生的创作成果。在影视剧本创作课程教学中,教师应阐明市场准入规则,贯彻职业教育理念,融入工匠精神... 详细信息

职业院校要密切结合影视剧本的市场化运作,结合学生的兴趣,创设剧本写作环境,制定考评机制,按照企业、职业技能大赛对剧本的要求来衡量学生的创作成果。在影视剧本创作课程教学中,教师应阐明市场准入规则,贯彻职业教育理念,融入工匠精神,让学生根据真实任务,有目标、有系统地开展剧本创作,提升实践能力。同时,要坚持市场导向,明确编剧职责,让学生根据喜爱的题材自由创作,改变以往重理论、轻实践的教学观念,带领学生走出去,利用田野调查法、情境教学法,强化学生的审美能力。因此,分析影视剧本创作课程教学改革思路,提出创新教学模式的策略,以更好地提升学生的审美趣味。

关键词：剧本创作教学改革职业教育影视行业

新世纪以来都市电视剧中“家道”观念的现代化表达

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艺术评鉴 2020年第7期 187-188页

作者：戴安迪安徽新闻出版职业技术学院

中国传统文化博大精深,历史悠久。传统文化是文化之“根”,而影视作品更是文化传统的重要载体。无论是通过传承、升华或是解构,传统文化与影视传播的结合是必然的。从宏观上看,在市场经济、城市化发展、电视剧产业化的影响下,由传统儒... 详细信息

中国传统文化博大精深,历史悠久。传统文化是文化之“根”,而影视作品更是文化传统的重要载体。无论是通过传承、升华或是解构,传统文化与影视传播的结合是必然的。从宏观上看,在市场经济、城市化发展、电视剧产业化的影响下,由传统儒家思想的“修身齐家治国平天下”转变为个人独立自主的意识加强,都市电视剧形成了以表现个人诉求、个人欲望为主的宏观态势。微观上,传统家道观念在家庭伦理电视剧中有很多种现代化的表达方式,主要体现在三个方面:传统婚嫁观念的颠覆,男女关系的重构,父母子女关系的现代化表达。

关键词：都市电视剧家庭伦理电视剧家庭道德观念现代化表达

纪录片中人物形象的塑造与表现——《枪与玫瑰》的创作审视

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艺术大观 2022年第7期 97-99页

作者：戴安迪安徽新闻出版职业技术学院

文艺都是关乎于“人”的，纪录片也是如此，它需要塑造相对独立完整的人物形象体系和个性形态，以真实可感的具体形象去唤醒受众的情感体验，从而产生涤荡人心的艺术效果。《枪与玫瑰》选择安徽省女子特警队黑豹突击队中两个不同的人物... 详细信息

文艺都是关乎于“人”的，纪录片也是如此，它需要塑造相对独立完整的人物形象体系和个性形态，以真实可感的具体形象去唤醒受众的情感体验，从而产生涤荡人心的艺术效果。《枪与玫瑰》选择安徽省女子特警队黑豹突击队中两个不同的人物，来表现目前女子特警队伍中的两类人，所选取的人物既有代表性也具有多样性、普遍性。该纪录片作品关注政治、经济、社会发展下的“85后”女子特警的成长历程与心理变化。因此本文就作品《枪与玫瑰》的创作展开思考，从人物性格形象化、故事化叙述、人物关系以及视听语言几方面论述纪录片中人物形象的塑造及表现。人物性格形象化就是指，将抽象的人物性格运用语言、画面、音乐、色彩等表现形式或者是依托某种“物体”将其形象地展现在受众面前，是给难以把握的人物性格，赋予一个物质外壳。故事化叙述就是用讲故事的方式来塑造更加生动的人物以及以更有意思的方式表达纪录片的内容。从人物关系入手塑造人物形象，可以使人物性格更加鲜明。在视听语言上，《枪与玫瑰》运用了固定镜头、不同配乐、明暗色彩去直接表现人物性格。

关键词：纪录片人物形象塑造情感

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基于女性主义视角的奉俊昊电影解读

传媒论坛 2020年第6期3卷 152-153,155页

作者：戴安迪文闻安徽新闻出版职业技术学院安徽合肥230000

奉俊昊电影中的女性角色经历了寻找本体的荆棘之路。从愤怒地举起斧头的母亲到手无缚鸡之力与统治阶级抗争的女孩,从无数名身着红衣的女性被害者到为了打破阶级"寄生"富人家庭的女管家。本文将奉俊昊电影中的女性形象进行梳理及分类,挖... 详细信息

奉俊昊电影中的女性角色经历了寻找本体的荆棘之路。从愤怒地举起斧头的母亲到手无缚鸡之力与统治阶级抗争的女孩,从无数名身着红衣的女性被害者到为了打破阶级"寄生"富人家庭的女管家。本文将奉俊昊电影中的女性形象进行梳理及分类,挖掘背后呈现出的导演对社会制度与人性本质的独特思考。

关键词：女性阶级压迫独立

基于“政用产学研”深度融合的高职院校影视编剧类人才培养模式探究

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爱尚美术 2023年第5期 128-130页

作者：高倩戴安迪安徽新闻出版职业技术学院

我国影视教育与影视产业目前并未完全实现无缝对接，迫切需要高校培养出创新型、应用型的影视人才。文章即对高职院校影视编剧类专业“政用产学研”深度融合下的人才培养模式进行探究，分析如何更充分地发挥教学优势，形成适应于新时代... 详细信息

我国影视教育与影视产业目前并未完全实现无缝对接，迫切需要高校培养出创新型、应用型的影视人才。文章即对高职院校影视编剧类专业“政用产学研”深度融合下的人才培养模式进行探究，分析如何更充分地发挥教学优势，形成适应于新时代需求的人才培养模式。

关键词：政用产学研深度融合高职影视

新世纪以来都市电视剧中“家道”观念的现代化表达

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心事 2014年第6期 193-194页

作者：戴安迪赵丹旸中国传媒大学

新世纪以来，市场经济更加发达，从表面上看，市场经济是自由、平等的商品交换，但是从深层次来看，市场经济却意味着社会结构中个体的崛起和壮大，经济主体地位的确立使得个体独立自主的意识得到加强，个人的欲望、诉求也逐渐从宏观政... 详细信息

新世纪以来，市场经济更加发达，从表面上看，市场经济是自由、平等的商品交换，但是从深层次来看，市场经济却意味着社会结构中个体的崛起和壮大，经济主体地位的确立使得个体独立自主的意识得到加强，个人的欲望、诉求也逐渐从宏观政治的束缚中挣脱出来。纵观新世纪以来中国以家庭伦理道德为题材的都市电视剧可以发现，传统家道观念很多种现代化的表达方式，主要体现在四个方面：婚嫁观念、两性关系、婆媳关系、父母子女关系。

关键词：都市电视剧家庭伦理道德新世纪现代化

试论特定社会语境下电影艺术与权力的关系—以谢晋及其电影为例

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心事 2014年第6期 159-160页

作者：赵丹旸戴安迪中国传媒大学

电影艺术是与社会生活联系最紧密的艺术形态，在特定的社会语境中被创造，同时在创造过程不乏存在着权力因素的影响。权力与电影艺术在一定的社会语境中存在着同构关系。本文以谢晋电影为例，探讨谢晋电影与其特定社会语境的关系，并从... 详细信息

电影艺术是与社会生活联系最紧密的艺术形态，在特定的社会语境中被创造，同时在创造过程不乏存在着权力因素的影响。权力与电影艺术在一定的社会语境中存在着同构关系。本文以谢晋电影为例，探讨谢晋电影与其特定社会语境的关系，并从权力之于电影艺术的认证与控制和电影艺术之于权力的解构与重建两个方面，来探究谢晋及其电影艺术与权力的同构关系是如何形成的。

关键词：谢晋电影权力与政治意识形态社会语境

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L-瓜氨酸生产菌株的筛选及鉴定

发酵科技通讯 2016年第2期45卷 88-93页

作者：吴石金戴安迪浙江工业大学生物工程学院浙江杭州310014

通过选择性培养基初筛(利用精氨酸双水解酶筛选培养基)和复筛(高效液相色谱法测定L-瓜氨酸质量浓度),从杭州市勾庄地区西瓜大棚的土壤中筛选获得45株产L-瓜氨酸菌株。其中一株细菌(菌株编号11)转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸的能力最强,产生... 详细信息

通过选择性培养基初筛(利用精氨酸双水解酶筛选培养基)和复筛(高效液相色谱法测定L-瓜氨酸质量浓度),从杭州市勾庄地区西瓜大棚的土壤中筛选获得45株产L-瓜氨酸菌株。其中一株细菌(菌株编号11)转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸的能力最强,产生的L-瓜氨酸浓度最高,0.344 g湿菌,在60 m L转化体系中转化一天,可将20 g/L的底物L-精氨酸转化为9.31g/L的L-瓜氨酸。对11号菌株分别进行形态学观察,生理生化试验及分子生物学鉴定,初步鉴定该菌株为粪肠球菌(Enterococcus faecalis)。

关键词： L-瓜氨酸粪肠球菌筛选鉴定