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Science China Chemistry 1986年第12期29卷 1267-1272页

作者：戴仁鸣巫爱珍孙玉昆 Academia Sinica Shanghai Institute of Biochemistry

The particles of CPV of silkworm contain double-stranded RNA polymerase and methyltransferase. It was reported in a previous paper that the genome-enzyme complex could be isolated. The genome-enzyme complex shows high enzyme activity of RNA polymerase and methyltransferase in spite of the fact that it consists of only 5 percent of the protein. In order to clarify the protein subunits of the RNA polymerase and methyltransferase, two methods were adopted. The SDS-polyacrylamide gel electrophoretogram showed that theI-labeled genome-enzyme complex of CPV contained three protein components in molccular weight of 33 K, 67 K and 142 K daltons respectively and each protein component of them consisted of more than two protein subunits with different isoelectric points in 2-dimensional electrophoretogram. The antibody to the five protein components （P1, P2, P3, P4, P5） was prepared and used to inhibit the enzyme activities of RNA polymerase and mthyltransferase. It showed that the RNA polymerase was inhib

关键词： CPV THE PROTEIN SUBUNITS OF THE DOUBLESTRANDED RNA DEPENDENT RNA POLYMERASE AND METHYLTRANSFERASE OF THE CYTOPLASMIC POLYHEDROSIS VIRUS OF SILKWORM Bombyx mori RNA

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家蚕细胞质多角体病毒的研究

生命的化学 1980年第4期 12-19页

作者：戴仁鸣巫爱珍沈学仁孙玉昆中国科学院上海生物化学研究所

家蚕细胞质多角体病毒(Cytoplasmic Polyhedrosis Virus,简称CPV)是双链RNA病毒。目前已知的双链RNA病毒已有16种左右,它们的寄主范围很广。有脊椎动物(呼肠病毒),植物(水稻普通矮缩病毒、甘蔗斐济病毒),昆虫(细胞质多角体病

关键词： CPV 双链体外合成聚合酶多聚酶转肽酶家蚕细胞病毒颗粒 RNA 免疫交叉反应

体外合成的家蚕细胞质多角体病毒mRNA于麦胚无细胞系统中翻译其结构蛋白

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中国科学:数学 1981年第3期 358-363+386页

作者：孙玉昆巫爱珍戴仁鸣沈学仁中国科学院上海生物化学研究所

家蚕细胞质多角体病毒(Cytoplasmic polyhedrosis virus以下简称CPV)颗粒中含有以双链RNA为模板的RNA多聚酶,于体外合成系统中可以获得毫克量的CPV单链RNA.体外合成反应液经DEAE-Sephadex A-25柱层析分离、纯化、浓缩,再经2.5％聚丙烯... 详细信息

家蚕细胞质多角体病毒(Cytoplasmic polyhedrosis virus以下简称CPV)颗粒中含有以双链RNA为模板的RNA多聚酶,于体外合成系统中可以获得毫克量的CPV单链RNA.体外合成反应液经DEAE-Sephadex A-25柱层析分离、纯化、浓缩,再经2.5％聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,表明体外合成的单链RNA含有九条区带.体外合成的单链RNA,于小麦胚无细胞制剂翻译系统中给予同位素标记的氨基酸,翻译的蛋白与家蚕CPV抗血清产生免疫沉淀线,说明体外系统转录的单链RNA含有足够的基因信息,指导家蚕CPV的结构蛋白的合成.

关键词：体外合成单链质多角体病毒结构蛋白蛋白质家蚕细胞细胞系统 mRNA 麦胚

家蚕细胞质多角体病毒(CPV)双链RNA为模板的RNA多聚酶和转甲基酶的蛋白亚基组成

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中国科学(B辑化学生物学农学医学地学) 1986年第7期 729-733页

作者：戴仁鸣巫爱珍孙玉昆中国科学院上海生物化学研究所

本文以家蚕CPV的基因与酶复合物为材料进一步研究了家蚕CPV-的RNA多聚酶和转甲基酶的蛋白亚基组成,一种方法是直接用125Ⅰ-标记的基因与复合物中的蛋白质分析。其中含有三种不同分子量的蛋白质即结构蛋白P1（分子量33,000）,P2（分子量6... 详细信息

本文以家蚕CPV的基因与酶复合物为材料进一步研究了家蚕CPV-的RNA多聚酶和转甲基酶的蛋白亚基组成,一种方法是直接用125Ⅰ-标记的基因与复合物中的蛋白质分析。其中含有三种不同分子量的蛋白质即结构蛋白P1（分子量33,000）,P2（分子量67,000）和P4（分子量142,000）,这三种结构蛋白在SDS-等电聚焦电泳中都表现了二种以上分子量相同而电荷不同的蛋白。第二种方法是分别应用CPV的5种结构蛋白的抗体抑制CPV RNA多聚酶和转甲基酶的能力进行判断,结果表明CPV RNA多聚酶合有结构蛋白P1（33,000）,P2（67,000）和P4（142,000）,而转甲基酶主要由结构蛋白P1组成。

关键词：多聚酶聚合酶转甲基酶结构蛋白蛋白质蛋白亚基双链 RNA CPV

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家蚕软化病病毒血清学诊断研究

蚕业科学 1981年第2期 100-104页

作者：钱元骏胡雪芳戴仁鸣中国农业科学院蚕业研究所中国科学院上海生物化学研究所

家蚕病毒性软化病是生产中主要传染病之一。由于这种病毒(FV)在寄主细胞中不产生多角体,因此给镜检带来了困难。诊断本病一般采用生物鉴定方法,不仅时间较长,且正确性较差。国外曾应用砒罗红甲基绿染色法进行本病的细胞学诊断;近年来免... 详细信息

家蚕病毒性软化病是生产中主要传染病之一。由于这种病毒(FV)在寄主细胞中不产生多角体,因此给镜检带来了困难。诊断本病一般采用生物鉴定方法,不仅时间较长,且正确性较差。国外曾应用砒罗红甲基绿染色法进行本病的细胞学诊断;近年来免疫电泳、荧光抗体等血清学方法开始应用于诊断本病,它具有特异性强、灵敏度高、而且检出早、费时短等优点,是目前检查病毒性软化病比较先进的方法。

关键词：血清学诊断起蚕添食病蚕血清诊断检出时间肠组织巴比妥钠佛罗那钠琼脂板缓冲液体重变化硫酸铵盐析法电泳测定病毒性软化病对流免疫电泳免疫电渗电泳给桑喂蚕三氯甲烷氯仿氯代烃卵白蛋白抗血清

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家蚕细胞质多角体病毒基因-酶复合物的分离

中国科学 1981年第11期 1381-1385页

作者：戴仁鸣巫爱珍沈学仁钱力孙玉昆中国科学院上海生物化学研究所

本文报道了家蚕细胞质多角体病毒(简称CPV)颗粒经紫外光照射后,通过DEAE-Sephadex A-25 柱层析,用氯化钠溶液分步洗脱分离得到基因-酶复合物。以~3H-UTP和[~3H-甲基]-S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)作为底物时,该复合物均呈现RNA多聚酶和甲基... 详细信息

本文报道了家蚕细胞质多角体病毒(简称CPV)颗粒经紫外光照射后,通过DEAE-Sephadex A-25 柱层析,用氯化钠溶液分步洗脱分离得到基因-酶复合物。以~3H-UTP和[~3H-甲基]-S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)作为底物时,该复合物均呈现RNA多聚酶和甲基转移酶活力。与CPV的RNA基因相同,基因-酶复合物能由聚丙烯酰胺凝胶电泳分成9条片段,各个片段也均呈现RNA多聚酶和甲基转移酶的酶活力。说明CPV颗粒里的RNA多聚酶和甲基转移酶紧密结合于双链RNA基因上,在复制过程中,CPV的双链RNA基因的每一片段各自独立地进行转录。

关键词：酶复合物 RNA 多聚酶聚合酶基因片段甲基转移酶甲基化酶凝胶电泳分离颗粒双链家蚕细胞

家蚕细胞质多角体病毒的体外合成的mRNA编码信息及病毒蛋白组成

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中国科学(B辑化学生物学农学医学地学) 1983年第3期 209-212页

作者：巫爱珍戴仁鸣沈学仁孙玉昆中国科学院上海生物化学研究所

本文报道了体外合成的家蚕细胞质多角体病毒（CPV）mRNA的编码性质。该mRNA经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,各mRNA片段分别从切下的凝胶中抽提得到,并且分别置于麦胚无细胞体外翻译系统进行翻译。翻译生成的产物与CPV 5种蛋白组份的125I标... 详细信息

本文报道了体外合成的家蚕细胞质多角体病毒（CPV）mRNA的编码性质。该mRNA经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,各mRNA片段分别从切下的凝胶中抽提得到,并且分别置于麦胚无细胞体外翻译系统进行翻译。翻译生成的产物与CPV 5种蛋白组份的125I标记的抗体（IgG）进行免疫沉淀反应。所得结果表明,家蚕CPVmRNA的编码如下:mRNA1,mRNA3和mRNA9编码病毒蛋白P1组;mRNA2和mRNA6分别编码P2和P3组蛋白;mRNA7和mRNA8共同编码P4组蛋白,而mRNA9编码P5组蛋白。经双向电泳分离,观察到CPV颗粒蛋白组份至少有10种以上。

关键词： mRNA CPV 质多角体病毒体外合成凝胶电泳分离体外翻译免疫沉淀反应编码信息病毒蛋白家蚕细胞

[~3H-甲基]-甲硫氨酸可以作为体外合成家蚕细胞质多角体病毒mRNA 5′-端的甲基供体

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中国科学 1981年第11期 1376-1380页

作者：巫爱珍戴仁鸣沈学仁孙玉昆中国科学院上海生物化学研究所

本文报道了用[3H-甲基]-甲硫氨酸代替S-腺苷-L甲硫氨酸作为甲基供体,在家蚕细胞质多角体病毒（简称CPV）颗粒所带的RNA多聚酶催化下于体外合成3H-mRNA。体外合成的3H-CPV mRNA经 DEAE-Sephadex A-25柱层析分离纯化。用核糖核酸酶P1和蛇... 详细信息

本文报道了用[3H-甲基]-甲硫氨酸代替S-腺苷-L甲硫氨酸作为甲基供体,在家蚕细胞质多角体病毒（简称CPV）颗粒所带的RNA多聚酶催化下于体外合成3H-mRNA。体外合成的3H-CPV mRNA经 DEAE-Sephadex A-25柱层析分离纯化。用核糖核酸酶P1和蛇毒磷酸二酯酶降解、纸电泳分离,结果表明甲硫氨酸的[3H-甲基]已参入CPV-RNA的5-末端。即使在S-腺苷-L-甲硫氨酸的存在下,[3H-甲基]-甲硫氨酸对于CPV-mRNA的5’-末端罩式结构的形成仍具有甲基供体的功能。

关键词：体外合成 CPV 质多角体病毒甲硫氨酸 mRNA 5 甲基供体家蚕细胞

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家蚕浓核病毒的研究

蚕业科学 1986年第2期 89-94页

作者：钱元骏胡雪芳孙玉昆戴仁鸣中国农业科学院蚕业研究所中国科学院上海生物化学研究所

家蚕浓核病与传染性软化病由于其外部症状,发病规律及病毒形态均十分相似,因而长期以来两者混淆不清。七十年代中期日本把家蚕浓核病毒(DNV)作为传染性软化病病毒(FV)的一个毒株,七十年代后期通过对病毒的生化分析才确认这是两类完全不... 详细信息

家蚕浓核病与传染性软化病由于其外部症状,发病规律及病毒形态均十分相似,因而长期以来两者混淆不清。七十年代中期日本把家蚕浓核病毒(DNV)作为传染性软化病病毒(FV)的一个毒株,七十年代后期通过对病毒的生化分析才确认这是两类完全不同的病毒,最近在日本除浓核病毒伊那株外,又分离出了山梨标及佐久株,这些病毒虽然都是以单链DNA为核酸的浓核病毒,但其抗原性、病原性及病毒结构蛋白分子量则各不相同。我国在1959年先于日本证实生产上所发生的家蚕空头性软化病是由病毒引起,1979年起我们开始对本病毒进行了较系统而深入的研究。

关键词：病原性软化病钱元骏抗原性家蚕浓核病毒待检样品致病力对流免疫电泳免疫电渗电泳 DNV 血清学诊断血清诊断

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紫外线对家蚕质型多角体病毒的钝化

蚕业科学 1980年第4期 271-272页

作者：胡雪芳钱元骏戴仁鸣钱力中国农业科学院蚕业研究所中国科学院上海生物化学研究所

家蚕CPV对紫外线照射的反应与其他许多病毒类似,经紫外线照射后,CPV也会不同程度地失活。有贺等报道,家蚕质型多角体的碱解液,经紫外线照射后,完全失活的时间是2小时、本研究认为,纯化CPV颗粒经紫外线照射数分钟后,病毒颗粒开始崩解。 ... 详细信息

家蚕CPV对紫外线照射的反应与其他许多病毒类似,经紫外线照射后,CPV也会不同程度地失活。有贺等报道,家蚕质型多角体的碱解液,经紫外线照射后,完全失活的时间是2小时、本研究认为,纯化CPV颗粒经紫外线照射数分钟后,病毒颗粒开始崩解。材料和方法一、CPV的纯化。质型多角体碱解清液经葡聚糖凝胶柱层析制得纯CPV制剂。

关键词：紫外线家蚕多角体电磁波桑蚕紫外线照射 CPV