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神经干细胞三维培养及构建类神经组织的研究

神经干细胞三维培养及构建类神经组织的研究

作者：戚艳丽大连理工大学

学位级别：硕士

目前,神经干细胞(Neural stem cells, NSCs)的体外培养主要采用悬浮培养和贴壁培养体系,然而这两种培养体系都存在无法模拟体内NSCs生长微环境的缺点。而三维的细胞培养体系能够为细胞提供良好的生长环境,促进细胞分泌细胞外基质,从而... 详细信息

目前,神经干细胞(Neural stem cells, NSCs)的体外培养主要采用悬浮培养和贴壁培养体系,然而这两种培养体系都存在无法模拟体内NSCs生长微环境的缺点。而三维的细胞培养体系能够为细胞提供良好的生长环境,促进细胞分泌细胞外基质,从而形成与体内组织相近的结构。因此,本研究采用三维培养体系来培养NSCs,并构建出类神经组织结构。实验以大鼠海马脑组织来源的NSCs为种子细胞,选用天然生物材料-胶原水凝胶为支架材料。首先对胶原内呈三维生长的细胞与传统单层培养细胞及悬浮培养细胞的生长和代谢情况进行比较。进而采用先期使用增殖培养基、后期使用分化培养基的策略,使NSCs在胶原水凝胶内先增殖然后向神经细胞分化,形成相互连接的类神经网络。采用cck-8试剂盒(Cell counting kit-8)对所构建的三维网络内细胞的增殖情况进行检测;使用激光扫描共聚焦显微镜观察所构建的三维类网络结构内经死活染色和免疫荧光染色后的细胞生长和分化情况。最后,对三维灌注式培养NSCs进行了初步的研究。实验结果显示,胶原内三维培养的NSCs增殖倍数最大,4 d内可达70倍,而普通悬浮培养和单层培养的扩增倍数分别为2.5倍和35倍。葡萄糖和乳酸代谢检测结果表明,胶原内细胞的葡萄糖比消耗速率最小,比消耗速率曲线最平缓,且乳酸的比生成速率也最小。细胞-胶原构建物体外培养42 d后,构建物内的细胞活率维持在82%左右,细胞在构建物内分布较均匀,而且能够分化成神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞。此外,层粘连蛋白(Laminin, LN)预处理胶原蛋白海绵支架内NSCs的接种率(55.8±1.21%)较单纯用培养基处理的支架内接种率(43.1±1.18%)有显著提高。最后,灌注式生物反应器培养条件下,NSCs在支架中呈团簇生长、分布均匀、且阳性表达Nestin;灌注式三维培养利于细胞营养物质的供应,能够使pH值维持在细胞正常的耐受范围。由以上实验结果我们得出以下结论：胶原内的三维培养条件更加利于NSCs的增殖和代谢,而且本研究所获得的三维组织构建物在形态、细胞构成等方面均与神经组织相类似;经LN预处理的胶原蛋白海绵支架更利于NSCs的粘附,可提高细胞在支架上的接种率;灌注式生物反应器培养条件有助于NSCs在支架中均匀分布和增殖,保持NSCs的特性。

关键词：神经干细胞三维培养胶原分化类神经组织灌注式生物反应器

洛阳地区不同基因型HP感染的临床流行特征及与胃肠疾病关系

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洛阳地区不同基因型HP感染的临床流行特征及与胃肠疾病关系

作者：戚艳丽河南科技大学

学位级别：硕士

目的:1.探讨洛阳地区幽门螺杆菌（***）的临床感染率。2.探讨洛阳地区***感染的优势基因型。3.探讨洛阳地区不同地域、不同年龄、不同性别***感染的优势基因型的差别。4.探讨洛阳地区***感染的基因型与胃肠疾病的关系。方法:收集于2013... 详细信息

目的:1.探讨洛阳地区幽门螺杆菌（***）的临床感染率。2.探讨洛阳地区***感染的优势基因型。3.探讨洛阳地区不同地域、不同年龄、不同性别***感染的优势基因型的差别。4.探讨洛阳地区***感染的基因型与胃肠疾病的关系。方法:收集于2013年9月至2014年4月到河南科技大学第一附属医院就诊洛阳地区胃肠病患者3495例,用14C尿素呼气试验检测***,将14C尿素呼气试验检测阳性,胃镜及病理诊断为慢性胃炎、消化性溃疡、十二指肠球炎、胃癌、胃息肉、反流性食管炎等546例患者（男性294例,女性252例,年龄范围10—79岁）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）,检测细胞毒素相关基因A蛋白（Cytotoxin-associated gene A,Cag A）和空泡毒素相关蛋白A（vacuolating cytotoxin Vac A）。再将Vac A检测阳性者进一步检测Vac A亚型:Vac A-s1a、Vac A-s1b、Vac A-s2、Vac A-m1、Vac A-m2。然后进行统计学处理。结果:1.洛阳地区3495例胃肠病患者***的感染率为47.01%（1643/3495）;市区41.66%（352/780）和县区48.54%（1318/2715）,市区略低于县区,P=0.04;各县区之间***感染率两两相比P值均大于0.05,无显著性差异。2.洛阳地区546例***阳性胃肠病患者中,Cag A阳性率35.16%（192/546）;Vac A阳性率48.35%（264/546）,两者都阳性27.83%（152/546）,单纯Cag A阳性7.32%（40/546）,单纯Vac A阳性20.51%（112/546）。264例Vac A阳性的胃肠病患者中Vac A亚型的阳性率分别为sla:76.51%（202/264）、slb:20.45%（54/264）、s2:0.75%（2/264）、ml:21.96%（58/264）、m2:72.24%（196/264）,s区未分型6例,m区未分型10例,s区以sla:76.51%为最高;m区以m2:72.24%为最高;Vac A基因亚型嵌合体的阳性率分别为s1a/m1:15.9%（42/264）、s1a/m2:50.00%（132/264）、s1b/m1:3.03%（8/264）、s1b/m2:13.63%（36/264）,以sla/m2占优势50.00%（132/264）未发现s2嵌合体。3.洛阳地区不同地域之间相比:市区与县区、各县区之间的Cag A阳性率、Vac A阳性率、Vac A亚型sla、slb、s2、ml、m2阳性率、Vac A基因亚型嵌合体的阳性率均无显著性差异,P值均大于0.05。不同年龄段之间相比:Cag A阳性率、Vac A阳性率、Vac A亚型sla、slb、s2、ml、m2阳性率、Vac A基因亚型嵌合体的阳性率均无显著性差异,P值均大于0.05。不同性别之间相比:Cag A阳性率、Vac A阳性率、Vac A亚型sla、slb、s2、ml、m2阳性率、Vac A基因亚型嵌合体的阳性率均无显著性差异,P值均大于0.05。4.洛阳地区不同胃肠疾病之间相比:Cag A阳性率、Vac A阳性率、Vac A亚型sla、slb、s2、ml、m2阳性率、Vac A基因亚型嵌合体的阳性率亦均无显著性差异。结论:1.洛阳地区***的临床感染率为47.01%;市区略低于县区,不同县区之间差异无显著性。2.洛阳地区胃肠病患者感染的***中,Vac A阳性者为48.35%、Cag A阳性者为35.16%;两者均阳性者为27.83%。Vac A亚型中s区以sla为最高,m区以m2为最高;亚型嵌合体以s1a/m2为最高。提示洛阳地区胃肠病患者感染的***,以Vac A sla/m2阳性为主要基因型,且多数以Vac A、Cag A同阳性和Vac A sla/m2嵌合体的形式存在。3.洛阳地区感染的***,其Cag A、Vac A及Vac A各基因亚型的阳性率,在洛阳不同地区、不同年龄段、不同性别之间分布无显著性差异。4.洛阳地区感染的***,其Cag A、Vac A及Vac A各基因亚型的阳性率,在不同胃肠疾病之间分布无显著性差异。5.洛阳地区感染的***基因型,多数致病性较弱。

关键词：幽门螺杆菌 Cag A Vac A 临床流行特征胃肠疾病

产时彻底清除新生儿胃内容物预防咽下综合征临床观察

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中国误诊学杂志 2008年第1期8卷 45-46页

作者：戚艳丽河南省宜阳县人民医院 471600

目的:改革产时新生儿护理措施,为降低新生儿咽下综合征发生率提供有效方法。方法:选择106例足月阴道分娩新生儿采取产时彻底吸尽胃内物且在不拔除胃管的情况下直接洗胃。结果:能有效控制新生儿呕吐的发生,避免咽下综合征。结论:产时洗... 详细信息

目的:改革产时新生儿护理措施,为降低新生儿咽下综合征发生率提供有效方法。方法:选择106例足月阴道分娩新生儿采取产时彻底吸尽胃内物且在不拔除胃管的情况下直接洗胃。结果:能有效控制新生儿呕吐的发生,避免咽下综合征。结论:产时洗胃可防止新生儿咽下综合征。

关键词：恶心/预防和控制呕吐/预防和控制洗胃婴儿,新生分娩

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胸外科胃肠减压插管深度的探讨

中原医刊 2006年第1期33卷 51-52页

作者：戚艳丽河南省宜阳县人民医院宜阳471600

胸外科胃肠减压患者术后仍有部分感腹胀不适，针对这一问题，将260例胃肠减压术患者随机分为观察组和对照组．各130例。在其他条件相同的情况下，观察组改胃肠减压管插入深度为55—68cm，对照组按常规插管，观察两组患者腹胀及引流等情... 详细信息

胸外科胃肠减压患者术后仍有部分感腹胀不适，针对这一问题，将260例胃肠减压术患者随机分为观察组和对照组．各130例。在其他条件相同的情况下，观察组改胃肠减压管插入深度为55—68cm，对照组按常规插管，观察两组患者腹胀及引流等情况。结果显示两组患者腹胀情况及引流液量比较经统计学处理，差异有统计学意义（P〈0.01），提示观察组能使胃液引流量增加，明显减轻腹胀。

关键词：胃肠减压插管法深度

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胆道手术合并糖尿病43例围手术期护理

护理实践与研究 2009年第17期6卷 43-44页

作者：戚艳丽河南省宜阳县人民医院 471600

随着人们生活水平的提高,糖尿病也越来越引起关注[1].2007年1月～2008年1月在我科接受胆道手术治疗合并糖尿病患者43例,由于精心护理,均安全渡过了围手术期,现报道如下.

关键词：围手术期护理合并糖尿病胆道手术糖尿病患手术治疗精心护理生活水

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让阅读的原野开满个性的花朵

辽宁教育 2009年第6期 33-34页

作者：戚艳丽

长期以来．受传统的教学观念的影响．教师拥有对教材文本绝对的解释权．学生对课文的理解被限制在教师的理解范畴之内，于是．学生个性化的阅读理解被扼杀殆尽。法国著名的儿童心理学家卢梭说：“儿童有他特有的看法、想法和感情。如果... 详细信息

长期以来．受传统的教学观念的影响．教师拥有对教材文本绝对的解释权．学生对课文的理解被限制在教师的理解范畴之内，于是．学生个性化的阅读理解被扼杀殆尽。法国著名的儿童心理学家卢梭说：“儿童有他特有的看法、想法和感情。如果用我们的看法、想法和感情去代替他们，那简直是最愚蠢的。”学生作为一个个性鲜明的生命个体，总是带着自己已有的知识、经验和情感来接触新的阅读文本，他们的阅读个性是客观存在的。

关键词：阅读理解个性化花朵原野教材文本教学观念心理学家生命个体