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重视病因,加深退行性脊柱侧凸的认识与规范治疗

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中华骨科杂志 2024年第11期44卷 717-723页

作者：杨惠林苏州大学附属第一医院骨科苏州215000

退行性脊柱侧凸(degenerative scoliosis,DS)是成人最常见的脊柱畸形类型,尤其在中老年人群中发病率较高。随着人口老龄化趋势的加剧,其发病率逐年上升,给社会和个人带来了沉重的经济负担。DS的病因复杂,与椎间盘退变、生物力学改变、... 详细信息

退行性脊柱侧凸(degenerative scoliosis,DS)是成人最常见的脊柱畸形类型,尤其在中老年人群中发病率较高。随着人口老龄化趋势的加剧,其发病率逐年上升,给社会和个人带来了沉重的经济负担。DS的病因复杂,与椎间盘退变、生物力学改变、骨质疏松和肌肉减少症等因素密切相关。诊断DS依赖临床体格检查和影像学检查,脊柱侧凸研究学会(Scoliosis Research Society,SRS)分型、Schwab分型、SRS-Schwab分型、Lenke-Silva分型、Berjano分型等分型系统为其分类和治疗提供了标准。DS的治疗包括保守治疗和手术治疗。保守治疗如物理治疗、药物治疗主要用于控制症状,治疗效果缺乏高等级的临床研究证据支持。手术治疗需要个性化规划,微创手术技术提供了创伤小、恢复快的治疗选择,但存在特定适应证和禁忌证。针对目前存在的疾病病因复杂、机制不清晰、微创手术存在局限、手术方式差异化大等问题,进一步深入DS的生物学机制研究非常必要。其目的是拓展安全、有效的微创技术应用,精细化个体化治疗策略和手术规划,以应对人口老龄化背景下DS带来的健康和经济挑战。

关键词：椎间盘退行性变脊柱侧凸骨质疏松

企业所得税优惠政策对企业慈善捐赠的激励效应研究 ——基于捐赠抵税政策改革的实证研究

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企业所得税优惠政策对企业慈善捐赠的激励效应研究 ——基于捐赠...

作者：惠林梦山东财经大学

学位级别：硕士

随着我国经济社会发展进入新常态,慈善事业的形式和特征也随之呈现出新的趋势。作为第三次收入再分配的重要载体,慈善捐赠体现了公共主体对社会财富再分配的参与力度,尤其在应对自然灾难及公共卫生突发事件的过程中,其显示出不容忽视的... 详细信息

随着我国经济社会发展进入新常态,慈善事业的形式和特征也随之呈现出新的趋势。作为第三次收入再分配的重要载体,慈善捐赠体现了公共主体对社会财富再分配的参与力度,尤其在应对自然灾难及公共卫生突发事件的过程中,其显示出不容忽视的效力。因此,本文的研究立足于宏观财税的理论框架,以税收政策为切入点,着重探析企业所得税制度如何作用于企业慈善捐赠行为,通过深入剖析现行企业所得税政策的规定及其在实际运作中的效果,进而评估税收对于引导企业开展慈善捐赠活动的激励性,并提出如何强化税收对企业捐赠积极性的影响,从而促进企业的慈善捐赠行为。基于上述背景,本文通过构建理论框架并结合实证资料进行深度分析,在对涉及所得税优惠政策与企业慈善捐赠行为两个领域的探索中,尝试深层次地发掘并阐释两者之间的潜在联系,并把实证研究重点放在2017年实施的企业所得税递延抵扣政策改革上。在理论分析部分,首先对企业参与慈善捐赠活动的内在动因进行了细致阐释,并深入分析了对慈善捐赠行为产生影响的因素。其次,简要概述慈善捐赠和税收优惠政策的概念,在税收杠杆理论、成本收益理论和第三次分配理论基础上,运用利润最大化模型和效用最大化模型,阐述所得税优惠政策如何影响企业慈善捐赠行为,并重点讨论税收如何通过价格效应和收入效应影响企业慈善捐赠行为。接着,深入剖析了我国企业在公益慈善捐赠活动中所表现出的实际情况,全面系统地分析了国内企业在参与慈善捐赠活动中所能享受的各项税收优惠政策,并着重对慈善捐赠所得税优惠政策的实施现状及其在实施过程中所暴露的问题进行了详尽分析,以为政策制定者提供决策参考,促进企业慈善捐赠行为的健康发展。在此基础上,本文利用国泰安数据库中2013-2021年期间1353家A股上市公司12177份数据,以企业慈善捐赠支出为被解释变量,以捐赠抵税政策改革为核心解释变量,采用双重差分法构建计量经济学模型,系统地验证了企业所得税优惠对企业慈善捐赠行为的影响情况。其次通过平行趋势检验、安慰剂检验和缩小样本区间等稳健性检验方法验证实证结果的准确性和可靠性。最后通过异质性分析发现,所得税优惠政策改革对不同盈利能力的企业、不同行业性质的企业以及不同地区的企业会产生不同的激励效果。基于以上结论并结合现状,考虑到慈善捐赠所得税优惠在实践中存在的问题,本文旨在提出一系列具有针对性的政策建议,为我国当前企业慈善捐赠的税收优惠政策体系提供有效的补充和完善。

关键词：企业慈善捐赠企业所得税税收激励税收优惠政策

Twist在肺癌中高表达并与肺癌的分化有关

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Twist在肺癌中高表达并与肺癌的分化有关

作者：惠林萍中国医科大学

学位级别：硕士

前言转录因子Twist是上皮-间质转变(EMT)过程中的重要调控因子,在肿瘤进展中发挥重要作用。上皮间质化是肿瘤进展的重要过程,Twist被认为通过调节E-cadherin的表达通过EMT途径调控肿瘤的转移。然而Twist在肿瘤进展中的具体作用仍不清... 详细信息

前言转录因子Twist是上皮-间质转变(EMT)过程中的重要调控因子,在肿瘤进展中发挥重要作用。上皮间质化是肿瘤进展的重要过程,Twist被认为通过调节E-cadherin的表达通过EMT途径调控肿瘤的转移。然而Twist在肿瘤进展中的具体作用仍不清。本研究采用肺癌组织标本,检测Twist在肺癌组织中的表达水平,及其与临床病理因素的关系,同时检测Twist蛋白和Twist1、Twist2的mRNA在多种肺癌细胞系中的表达,深入研究Twist与肺癌发生发展的关系。材料和方法一、病例和材料收集中国医科大学附属第一医院2000年11月至2006年4月间手术切除并经病理确诊的68例肺腺癌和肺鳞癌标本,其中男性40例,女性28例,患者平均年龄59岁;所有病例术前均未接受过放化疗及免疫治疗,取例癌旁正常肺组织作为对照。细胞系用含15%胎牛血清的RPMI-1640培养基,其它细胞都用含10%FBS的RPMI-1640培养基,pH值保持在7.2～7.4之间,于含5%CO的37℃孵箱内培养。二、试剂 Twist兔抗人多克隆抗体Twist(H-81)购自美国Santa Cruz生物技术公司,SP超敏免疫组织化学试剂盒(KIT-9710)和DAB显色试剂盒(DAB-0031)购自福州迈新生物技术公司,Trizol试剂购自美国Invitrogen公司,RT-PCR试剂盒TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0购自大连宝生物(TaKaRa)公司,RPMI-1640购自GIBCO公司。三、方法应用免疫组化SP法检测肺癌组织及癌旁正常肺组织中Twist的表达。染色方法按SP免疫组化试剂盒说明书进行,经柠檬酸(pH=6.0)微波抗原修复。每张切片在光学显微镜(×400)下随机选取10个视野,每个视野计数100个肿瘤细胞,计数其中的阳性细胞数,然后取平均值。染色强度分级为:阴性为0,淡黄色为1,黄棕色为2,深棕色为3。以阳性肿瘤细胞数分级:＜5%为0,5%～25%为1,25%～50%为2,＞50%为3。利用染色强度与阳性肿瘤细胞数乘积来评定结果,0为阴性,1为弱阳性,2～4为阳性,6～9为强阳性。电泳成像后进行分析光密度值。将Twist1、Twist2的光密度值与GAPDH光密度值的比值作为Twist1、Twist2的相对表达量进行比较分析。四、统计分析方法统计学分析采用SPSS for Windows 13.0统计分析软件进行分析,对Twist的表达与临床病理特征的关系采用两组资料非参数检验和多组资料非参数秩和检验,Twist在细胞系中的表达采用方差分析,P＜0.05为有统计学意义。实验结果一、免疫组化 68例肺鳞癌和腺癌组织中,有8例为Twist阴性(11.76%),9例为Twist弱表达(13.24%),28例Twist表达(41.18%),有23例Twist高表达(33.82%)(图1)。Twist在8例癌旁肺组织中弱表达。Twist的表达情况与肺癌的分化程度(P=0.002)和肺癌患者的年龄(P=0.012)相关。Twist的表达水平与患者的性别(P=0.820)、组织学类型(P=0.426)、TNM分期(P=0.200)和有无淋巴结转移(P=0.392)关系并不显著。二、RT-PCR Twist1和Twist2的mRNA在HBE和8种肺癌细胞系中的表达并不一致(图2)。Twist1在HBE表达,在不同组织学类型的癌细胞系之间比较,Twist1在在肺腺癌A549表达最高,在肺鳞癌SK细胞系中表达较A549少;在肺大细胞癌460和661和肺巨细胞癌LH7和BE1细胞系中的表达水平基本相同,表达水平较低;在肺邢赴?46细胞系中表达水平较A549低。Twist2在HBE表达,但较Twist1表达水平低,在不同组织学类型的癌细胞系之间比较,Twist2在肺鳞癌细胞系SK中表达较高,肺腺癌A549和LTE中表达较SK少;在肺大细胞癌460和661和肺巨细胞癌LH7和BE1细胞系中的表达水平基本相同,表达水平较低;在肺小细胞癌446细胞系中表达水平较高。其次在同种组织学类型的不同细胞系中比较,Twist2 mRNA在A549的表达低于LTE;在460、661两种细胞系中表达水平也较为一致;在LH7和BE1细胞系表达水平也无明显差别。三、免疫荧光在人支气管上皮HBE细胞系中,Twist弱表达,Twist蛋白在不同肺癌细胞系中表达水平不同(图3～图8),在肺腺癌LTE和A549细胞系和肺鳞癌SK中表达较强,大细胞癌460和661荧光强度比腺癌和鳞癌弱,Twist蛋白表达定位以细胞浆为主。结论在癌旁肺组织中Twist弱表达,肺鳞癌和肺腺癌组织中Twist较高表达。Twist的表达情况与肺癌的分化程度相关,低分化的肺癌Twist高表达,中高分化的肺癌其阳性表达,这表明Twist可能在肺癌发生中起重要作用。Twi

关键词： Twist 肺肿瘤肿瘤标志物

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李惠林基于肺主治节辨治甲亢经验

世界中医药 2024年第5期19卷 682-686页

作者：钟淑贞李惠林方泽彬熊倪广州中医药大学第四临床医学院/深圳市中医院内分泌科深圳518033

甲状腺功能亢进症是指甲状腺合成释放过多甲状腺激素,导致神经、消化、循环等系统兴奋性增高,且伴有代谢亢进及免疫异常的一种自身免疫性内分泌疾病。李教授认为该病发病与肺失治节密切相关,治疗上,在各个阶段均应注意调节肺的治节功能... 详细信息

甲状腺功能亢进症是指甲状腺合成释放过多甲状腺激素,导致神经、消化、循环等系统兴奋性增高,且伴有代谢亢进及免疫异常的一种自身免疫性内分泌疾病。李教授认为该病发病与肺失治节密切相关,治疗上,在各个阶段均应注意调节肺的治节功能,通过疏风宣肺、理气化痰、滋阴清热、补益肺气等治法加强肺的治节作用,使气血顺畅,脏腑和谐,则该病自愈。

关键词：甲状腺功能亢进症瘿气瘿病肺主治节中医药辨证论治名医经验 @李惠林

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认知神经科学如何言说儒道佛

心理研究 2024年第3期17卷 286-288页

作者：蒋柯邱惠林绍兴文理学院大脑、心智与教育研究中心绍兴312000 四川大学外国语学院成都610207

2021年12月,由刘昌教授、罗劲教授和郭斯萍教授等人共同撰写的《儒道佛与认知神经科学》一书经由科学出版社出版了。我猜想,刚拿到这本书时,很多读者会有和我类似的好奇与疑问:如何用认知神经科学的技术来言说儒道佛呢?或者,儒道佛为何... 详细信息

2021年12月,由刘昌教授、罗劲教授和郭斯萍教授等人共同撰写的《儒道佛与认知神经科学》一书经由科学出版社出版了。我猜想,刚拿到这本书时,很多读者会有和我类似的好奇与疑问:如何用认知神经科学的技术来言说儒道佛呢?或者,儒道佛为何可能与认知神经科学发生勾连呢?毕竟,儒道佛与认知神经科学之间存在如此巨大的系统性话语反差。当我们试图用一种文化体系的话语范畴去言说另一种文化体系时,必然会遭遇文化的解释悖论。因为,人们无法给文化做出一个“属+种差”式的逻辑定义。然而,当我们用一种文化去言说另一种文化时,必然要对所言说的“他种文化”做出适当的逻辑定义,两种话语体系之间是否具有意义同一性以及可转译性等问题就成为了文化之间的言说障碍(管素叶等,2020)。

关键词：认知神经科学儒道佛文化的解释同一性言说话语范畴系统性

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特异性杀伤肝癌细胞的噬菌体药物载体的构建

中国生物制品学杂志 2013年第6期26卷 829-833,839页

作者：李嵚赵晨阳惠林萍何琳于涛中国医科大学附属第四医院中心实验室辽宁沈阳110032

目的以T4噬菌体为载体,构建特异性杀伤肝癌细胞的噬菌体药物载体,并对其选择性细胞毒活性进行初步评价。方法通过噬菌体文库筛选肝癌细胞特异性结合肽（tumor specific peptide,TSP）,利用分子克隆技术和噬菌体体外展示技术,将其与噬菌... 详细信息

目的以T4噬菌体为载体,构建特异性杀伤肝癌细胞的噬菌体药物载体,并对其选择性细胞毒活性进行初步评价。方法通过噬菌体文库筛选肝癌细胞特异性结合肽（tumor specific peptide,TSP）,利用分子克隆技术和噬菌体体外展示技术,将其与噬菌体小衣壳蛋白Soc重组,并展示在T4噬菌体表面。同时通过1-乙基（-3-二甲基氨基丙级基）碳酰二亚胺[1-ethyl-3-（3-dimethylaminopropyl）carbodiimide hydrochloride,EDC]化学法,将表阿霉素（epido-xorubicin,Epi）偶联在噬菌体衣壳表面,采用MTT法在细胞水平上检测噬菌体药物载体对人肝癌细胞Bel-7402和正常肝细胞HL-7702的选择性杀伤作用。结果 Soc-TSP融合蛋白以846拷贝/噬菌体颗粒的密度展示在T4噬菌体表面,Epi载药率达每个噬菌体颗粒表面近2 000个药物分子。与游离的Epi相比,构建的T4噬菌体药物载体对肝癌Bel-7402细胞的杀伤作用提高了4~6倍,而对正常肝细胞HL-7702的影响不大。结论肿瘤特异噬菌体药物载体可提高药物对肿瘤细胞的靶向性以及肿瘤细胞对药物分子的摄入,从而实现对肿瘤细胞的特异性杀伤。

关键词：噬菌体药物载体表阿霉素肿瘤靶向

甲基丙烯化明胶微球缓释Kartogenin修复髓核退变的体外评估

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中国组织工程研究 2024年第5期28卷 724-730页

作者：田鑫刘滔杨惠林何帆苏州大学附属第一医院骨科江苏省苏州市215006 苏州大学骨科研究所江苏省苏州市215007

背景:细胞外基质合成与降解的失衡是髓核退变的主要原因,小分子药物Kartogenin(KGN)可恢复基质合成和降解的平衡。利用合适的载药系统实现KGN的缓释对KGN发挥长期有效的治疗至关重要。目的:用甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,Gel... 详细信息

背景:细胞外基质合成与降解的失衡是髓核退变的主要原因,小分子药物Kartogenin(KGN)可恢复基质合成和降解的平衡。利用合适的载药系统实现KGN的缓释对KGN发挥长期有效的治疗至关重要。目的:用甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)包裹KGN,通过微流控技术制备成可注射的水凝胶微球,探究其生物相容性和对髓核细胞生物学功能的影响。方法:将β-环糊精(β-cyclodextrins,β-CD)与KGN混合成包合物,与10%GelMA按1∶9的体积混合,利用微流控技术制备可注射水凝胶微球GelMA@β-CD@KGN,扫描电镜表征微球的微观形貌,检测水凝胶微球浸泡于PBS中1个月的药物释放情况。提取SD大鼠髓核细胞,将第1代细胞分3组培养:对照组单独培养髓核细胞,另外两组分别将GelMA@β-CD微球、GelMA@β-CD@KGN微球与髓核细胞共培养,利用CCK-8法检测细胞增殖,活死细胞染色检测细胞存活。分别用含有白细胞介素1β和不含白细胞介素1β的完全培养基将髓核细胞与两种微球共培养,采用RT-PCR法检测髓核细胞基质合成蛋白和分解蛋白的mRNA表达。结果与结论:①扫描电镜下可见,冻干后的GelMA@β-CD@KGN微球为规则的球形,保持高度分散且大小均一,形状饱满;GelMA@β-CD@KGN微球体外可持续释放药物,至30 d时药物释放量达到总量的62%;②活死细胞染色显示,GelMA@β-CD@KGN可保持髓核细胞的活性;CCK-8检测显示,GelMA@β-CD@KGN可促进髓核细胞的增殖;③在含或不含白细胞介素1β的完全培养基中,GelMA@β-CD@KGN微球组聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原的mRNA表达均高于GelMA@β-CD微球组(P<0.05,P<0.01),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5的mRNA表达均低于GelMA@β-CD微球组(P<0.01);④结果表明,GelMA@β-CD@KGN微球具有良好的生物相容性和药物缓释能力,作为载药系统是一种具有广阔应用前景的生物材料。

关键词：椎间盘髓核微球甲基丙烯化明胶微流控 Kartogenin 载药系统

展示KDR胞外区VEGF结合域的T4噬菌体对肺癌细胞增殖侵袭的抑制作用

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中国生物工程杂志 2013年第10期33卷 14-20页

作者：李嵚何琳惠林萍赵晨阳于涛中国医科大学附属四院中心实验室沈阳110032

目的:构建展示KDR的T4噬菌体并在细胞水平上检测其抑制肿瘤细胞增殖侵袭的作用及机制。方法:利用SOE-PCR的方法将KDR膜外区D2和D3与T4噬菌体小衣壳蛋白SOC基因融合并克隆到pET28b表达载体中,经IPTG诱导表达并纯化后,利用体外展示技术将... 详细信息

目的:构建展示KDR的T4噬菌体并在细胞水平上检测其抑制肿瘤细胞增殖侵袭的作用及机制。方法:利用SOE-PCR的方法将KDR膜外区D2和D3与T4噬菌体小衣壳蛋白SOC基因融合并克隆到pET28b表达载体中,经IPTG诱导表达并纯化后,利用体外展示技术将重组KDR-SOC蛋白展示在T4噬菌体表面,得到T4-KDR噬菌体。MTT法检测T4-KDR噬菌体对肺癌A549细胞的增殖抑制作用,并采用Transwell法检测其对VEGF促侵袭作用的影响。RT-PCR法检测T4-KDR对MMP-2和MMP-9 mRNA水平的影响,并通过Western blot方法检测其对VEGF诱导ERK1/2磷酸化及其下游CyclinD1,p27,Bcl-2和Bax表达水平的影响。结果:KDR-SOC在大肠杆菌中稳定表达,展示KDR的T4-KDR噬菌体具有结合VEGF-165的能力,并显著抑制肿瘤细胞增殖和侵袭活性,降低MMP-2和MMP-9基因mRNA水平。Western blot结果表明T4-KDR噬菌体抑制VEGF诱导ERK1/2的磷酸化,降低CyclinD1及Bcl-2表达的同时,提高p27和Bax的表达。结论:展示KDR的T4噬菌体具有抑制肺癌细胞增殖和侵袭作用,其对MEK/ERK信号通路及其下游调控因子的影响是其作用的重要分子机制。

关键词： T4噬菌体增殖侵袭血管内皮生长因子受体-2 肺癌

负载褪黑素的甲基丙烯酰明胶微球延缓髓核退变

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中国组织工程研究 2024年第5期28卷 676-681页

作者：李洋锋田鑫何帆杨惠林苏州大学附属第一医院骨科苏州大学苏州医学院江苏省苏州市215006 苏州大学骨科研究所江苏省苏州市215006

背景:髓核退变是椎间盘退变的重要病理环节,褪黑素可通过抗炎抗氧化等途径对细胞产生保护作用,然而褪黑素对髓核作用的研究较少,目前各种生物支架的出现为药物与材料结合的研究提供了新思路。目的:探究褪黑素是否可以通过减轻氧化应激... 详细信息

背景:髓核退变是椎间盘退变的重要病理环节,褪黑素可通过抗炎抗氧化等途径对细胞产生保护作用,然而褪黑素对髓核作用的研究较少,目前各种生物支架的出现为药物与材料结合的研究提供了新思路。目的:探究褪黑素是否可以通过减轻氧化应激损伤来改善髓核的代谢状态,以及负载褪黑素的甲基丙烯酰明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)微球在体内对椎间盘退变的影响。方法:在体外,将褪黑素与成胶前的GelMA微球溶液结合,通过微流控技术将GelMA水凝胶制成微球,与髓核细胞共培养,利用CCK-8法检测细胞增殖活力,扫描电镜下观察微球的表面形态,用紫外分光光度计检测药物释放的速率,随后用白细胞介素1β诱导髓核退变,给予治疗后采用qRT-PCR检测基质合成基因聚集蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白α1及基质降解基因基质金属蛋白酶13、ADAMTS5的表达水平。在大鼠体内采用针刺方法诱导髓核退变,随后分别注入GelMA和GelMA@MT微球,6周后取标本进行组织染色,显微镜下观察组织形态的变化,对其进行组织学分析及评分。结果与结论:①电子扫描显微镜下观察制得的GelMA和GelMA@MT微球,褪黑素的结合并没有改变微球的形态与外貌;药物释放实验显示40 d后药物释放达到80%左右;②CCK-8结果显示,GelMA与GelMA@MT微球均无明显细胞毒性,且对髓核细胞增殖起促进作用;③qRTPCR结果揭示,GelMA@MT微球可使白细胞介素1β环境下聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原蛋白α1的表达分别提高42.1%和27.1%,使基质金属蛋白酶13和ADAMTS5的表达分别降低70.7%和109.3%;④白细胞介素1β+GelMA@MT组活性氧水平显著低于白细胞介素1β组和白细胞介素1β+GelMA组;⑤切片组织学染色可见,负载了褪黑素的GelMA微球在体内可显著延缓椎间盘退变;⑥提示将褪黑素与GelMA水凝胶结合制成的GelMA@MT微球在体外显示出良好的细胞相容性,在体内外显著延缓髓核退变。

关键词：褪黑素髓核椎间盘微球 GelMA