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重组人β-防御素-3基因在小鼠乳腺中表达的初步研究

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重组人β-防御素-3基因在小鼠乳腺中表达的初步研究

作者：徐雪丽河南农业大学

学位级别：硕士

防御素是近年来发现的一种内源性多肽,在肌体免疫中发挥着重要作用,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、甚至是病毒都具有很强的抑杀作用,并且分子量小、热稳定好、水溶性强、无免疫原性,具有独特的研究和开发价值。人β-防御素-3(hB... 详细信息

防御素是近年来发现的一种内源性多肽,在肌体免疫中发挥着重要作用,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、甚至是病毒都具有很强的抑杀作用,并且分子量小、热稳定好、水溶性强、无免疫原性,具有独特的研究和开发价值。人β-防御素-3(hBD3)是2001年发现的第三种人源性β防御素,与其他防御素相比,在抗菌活性方面具有明显的优势,对革兰氏阳性菌和阴性菌具有强烈的杀灭作用,是所有抗菌肽中抗菌能力最强少数几种之一,只要几微克/毫升就可杀灭葡萄球菌、大肠杆菌、芽胞杆菌等,有很强的应用价值。我们曾使其在大肠杆菌中得到了高效表达,但是需要复性才能有活性,与传统的原核表达系统相比,应用动物乳腺生产重组蛋白产品具有生产成本低、产量大,表达产物的生物活性高、产品易于纯化等优点。本研究通过PCR克隆了牛β-酪蛋白(β-CN)基因5′调控区和hBD3的基因组序列,并构建了hBD3的真核表达载体pcDNA3.1(+)-hBD3,将此重组质粒注射到泌乳期小鼠乳腺内,进行初步的表达和活性检测。在此基础上,进一步构建牛β-CN基因5′调控区和hBD3的重组克隆载体,以实现在小鼠乳腺中的特异表达。具体试验结果如下:1.hBD3基因的克隆根据GenBank中NT077531序列设计了一对引物,运用PCR技术,以人基因组DNA为模板,扩增了约1392bp的基因片段并把它克隆到pMD18-T载体上,构建的重组质粒pMD18-hBD3经PCR、酶切及序列测定表明,插入的序列与NT077531公布的hBD3基因同源性达到99.93%。2.牛β-CN基因5′调控区的克隆根据GenBank中X14711序列设计一对引物,运用PCR技术,以奶牛基因组DNA为模板,扩增了约2334bp的奶牛β-酪蛋白5′调控区。测序结果表明所得序列与X14711的同源性达98.29%。奶牛β-酪蛋白基因5′调控区的克隆为进一步构建乳腺特异表达载体奠定了基础。3.hBD3基因在小鼠乳腺中的表达将pMD18-hBD3用KpnI和XbaI双酶切,回收小片段,定向克隆至经同样酶切处理的质粒pcDNA3.1(+),构建表达载体pcDNA3.1(+)-hBD3,经PCR和双酶切鉴定,结果表明,hBD3基因已正确插入到真核表达pcDNA3.1(+)中,分别把纯化后的空载质粒pcDNA3.1和表达质粒pcDNA3.1(+)-hBD3按25μg/次/乳头的剂量直接注射到泌乳期小鼠乳腺体内,然后取其乳汁,用琼脂糖平板溶圈法检测hBD3的活性,结果表明,试验组和对照组无明显差异。

关键词：人β-防御素-3 表达小鼠乳腺

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稀疏亲合度谱聚类方法的研究及应用

稀疏亲合度谱聚类方法的研究及应用

作者：徐雪丽兰州大学

学位级别：硕士

稠密亲合性是使算法复杂度增加的首要因素。尽管目前有关稀疏化算法的研究取得了一些进展,但是将这些算法运用于谱图聚类分析,常引起聚类质量的降低,并且导致谱聚类方法的应用领域受限。本论文基于稀疏化算法进而提出新的谱技术—稀疏... 详细信息

稠密亲合性是使算法复杂度增加的首要因素。尽管目前有关稀疏化算法的研究取得了一些进展,但是将这些算法运用于谱图聚类分析,常引起聚类质量的降低,并且导致谱聚类方法的应用领域受限。本论文基于稀疏化算法进而提出新的谱技术—稀疏亲合度谱聚类(Sparse Affinity Spectral Clustering,简称“SASC”),该方法利用Minkowski距离指数变换函数和稀疏化算法来构建分块对角矩阵以重新解释样本之间的亲合度,随后构造新颖的Laplace矩阵以实现进一步压缩数据阵,有望为解决算法复杂度问题带来新的希望。此外,传统谱聚类技术还存在着初始簇心敏感性问题使得算法运行结果值变得十分不稳定,为此本论文还尝试结合Partitioning Around Medoids (PAM)方法取代传统谱技术中的KMeans方法对特征向量空间执行聚类,提出SASC的运行稳定性版本—基于K-Medoids的SSKM方法(Sparse Spectral clustering based on K-Medoids)。高维集群聚类问题是当前统计研究的重点,本论文提出的SASC和SSKM两种新方法只是适用于低维数据群的聚类,为了使新方法能够有效地处理高维数据群,本论文又引入高相关系数过滤和主成分分析降维技术以尽力消除高维度给数据群体分析带来的灾难,提出了 SASC和SSKM的高维聚类版本 HSASC (High-dimensional version of SASC)和 HSSKM (High-dimensional version of SSKM)。最后文章引入比较算法,结合模拟数据、低维UCI数据群和高维基因表达数据群设计了实验方案,并以不同的聚类质量评价指标来衡量本论文研究算法的聚类性能,实验指标值显示本论文提出的4种新方法能够更精确、更有效的对实际数据群聚类。

关键词：稠密亲合性分块对角矩阵降维技术稀疏谱方法

当代中国农民政治意识研究：权利意识还是规则意识 ——基于T市和Q市农民的调查

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当代中国农民政治意识研究：权利意识还是规则意识 ——基于T市和...

作者：徐雪丽山东农业大学

学位级别：硕士

本研究缘起于当前学术界对农民政治意识判定的争议,裴宜理认为当前农民政治意识属于规则意识,而李连江则认为当前农民的政治意识不仅停留在规则意识阶段还诞生了权利意识。本研究基于上述理论争论,通过实地调研访谈发现:当前中国农民群... 详细信息

本研究缘起于当前学术界对农民政治意识判定的争议,裴宜理认为当前农民政治意识属于规则意识,而李连江则认为当前农民的政治意识不仅停留在规则意识阶段还诞生了权利意识。本研究基于上述理论争论,通过实地调研访谈发现:当前中国农民群体政治意识属于规则意识,未诞生权利意识。农民仅对地方政府进行质疑和抗争,以中央规则为基准判断地方政府行为的合法性、合理性而不是以天赋人权的自然法中的“理”为依据去判断既有国家规则的合理性。农民规则意识的具体形成机理是中央与时俱进的引导策略塑造:国家依据社会反抗的不同程度对干预力度、干预方式及时做出调整,进而影响农民政治意识的发展、变化及结果,实现对农民规则意识的有效塑造。当农民反抗了国家某一项具体的规则或法律,未必意味着依据天赋权利对整个体系的抗争,未必意味着权利意识的诞生。本文共分为五章。第一章绪论,主要介绍本文的研究背景,对农民政治意识研究状况进行梳理,在明确学术界对当前农民政治意识判定存有争议的基础上提出本文的研究方法;第二章对规则意识与权利意识的概念以及两者之间的关系进行解读,基于天赋人权理论对权利意识进行界定,并阐明规则意识与权利意识之间的层次差异性,为准确判断农民政治意识现状确立判断标准;第三章基于实地访谈,对从农业税时代到后农业税时代,农民的政治意识状况进行分析、判定,试图在理论上进一步澄清学术界对于农民政治意识所处现状的争议;第四章对农民政治意识具体形成机理进行探讨,深入分析影响农民政治意识发展、变化的因素;第五章对本研究的结论做出总结,指出本文对既有研究的推进,并对本文的不足之处做了进一步讨论。

关键词：农民政治意识规则意识权利意识

基于Android平台的虚拟试衣关键技术研究

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基于Android平台的虚拟试衣关键技术研究

作者：徐雪丽陕西科技大学

学位级别：硕士

随着电子商务技术的蓬勃发展，Internet逐渐成为服装业一个引人注目的销售渠道。但是，服装的自身特点决定了其无法用规格、文字以及照片等方式准确地将特征信息描述清楚，导致了消费者根据网上提供的有限信息难以判断想要购买服装的合... 详细信息

随着电子商务技术的蓬勃发展，Internet逐渐成为服装业一个引人注目的销售渠道。但是，服装的自身特点决定了其无法用规格、文字以及照片等方式准确地将特征信息描述清楚，导致了消费者根据网上提供的有限信息难以判断想要购买服装的合体性以及舒适性等。如何解决虚拟试衣的真实感、个性化、实时性等问题成为服装相关研究领域的核心问题，也是突破服装电子商务发展瓶颈的关键问题。而Android平台的广泛应用为服装业的进一步发展提供了新的机遇。因此，本文开展了基于Android平台的虚拟试衣关键技术的研究，这对提高服装交易量与降低退货率具有重要的现实意义。具体工作可总结为以下几个方面： 1）采用Harris角点检测方法自动提取人体图像中关键部位信息，实现了人体特征尺寸的自动化获取。在边缘检测过程中，通过比较多种边缘检测算子的实验结果，最终选用具有高信噪比、高定位精度和单一边缘响应效果的Canny算子作为人体的边缘检测算子;在特征点的确定过程中，使用Harris角点检测算法确定人体图像的特征点;最后使用人体关键尺寸之间的比例关系计算获得实验所需的尺寸数据。 2）基于实例驱动的最相似实例检索方法，检索出与客户体形最接近的模特试衣实例，解决服装虚拟试穿的个性化效果展示。首先采集试衣实例建立实例库，当客户输入人体特征信息后，系统通过实例推理机制从实例库中检索到与客户体形最相似的模特试衣实例，并将其展现给客户。对于实例检索方法，本文采用了计算相似度的方法检索出相似实例，并将相似度最大的实例作为最相似实例。 3）采用图像分割与图像几何变换的方法进行头像移植，使试衣效果更加逼真、形象、生动。首先，在图像分割过程中，使用人体特征与像素定位相结合的方法确定待移植的头部图像，进而实现图像头部与身体部分的分割;其次进行头像移植配准，通过提取头部图像与身体图像的特征点，确定合适的空间变换关系，进而确定头像移植参数，完成图像配准;最后对移植后的图像进行融合，主要包括皮肤检测与肤色迁移。通过采用以上虚拟试衣关键技术，使得客户端实现了用户信息与服装信息的上传及虚拟试衣的效果展示，服务器端实现了自动获取人体特征尺寸信息与检索基于实例驱动的最相似试衣实例及头像移植，最终实现了基于Android开发平台的虚拟试衣原型系统。

关键词：边缘检测角点检测实例驱动虚拟试衣 Android平台

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低重金属城市污泥钢渣陶粒的制备

新型建筑材料 2016年第9期43卷 105-110页

作者：徐雪丽宋伟南阳理工学院生物与化学工程学院河南南阳473004

在对城市污泥和炼钢废渣进行元素分析的基础上,进一步利用处理后的城市污泥和炼钢废渣制备出轻骨料陶粒,获得了适宜的工艺条件:炼钢废渣加入量为城市污泥质量的35%,预热温度为400℃,预热时间为20~25 min,焙烧温度为1100℃,焙烧时间为15~... 详细信息

在对城市污泥和炼钢废渣进行元素分析的基础上,进一步利用处理后的城市污泥和炼钢废渣制备出轻骨料陶粒,获得了适宜的工艺条件:炼钢废渣加入量为城市污泥质量的35%,预热温度为400℃,预热时间为20~25 min,焙烧温度为1100℃,焙烧时间为15~20 min。在此条件下,制备的陶粒堆积密度为546~523 kg/m^3,吸水率为7.6%~7.8%,抗压强度为5.7~6.1 MPa,符合GB/T17431—2010中600密度等级高强轻集料的性能要求。

关键词：城市污泥炼钢废渣陶粒动电技术

溶胶-凝胶法制备H_3PW_(12)O_(40)/SiO_2催化合成甲缩醛

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天然气化工—C1化学与化工 2014年第2期39卷 25-28页

作者：徐雪丽宋伟南阳理工学院生物与化学工程学院河南南阳473004

采用溶胶-凝胶(Sol-Gel)方法制备合成甲缩醛的H3PW12O40/SiO2催化剂,优化了制备条件并对催化剂进行了表征。催化剂的比表面积达233m2·g-1,酸强度超过100%硫酸。考察了催化剂合成甲缩醛的催化性能并优化了合成条件。当合成条件为:甲醇18... 详细信息

采用溶胶-凝胶(Sol-Gel)方法制备合成甲缩醛的H3PW12O40/SiO2催化剂,优化了制备条件并对催化剂进行了表征。催化剂的比表面积达233m2·g-1,酸强度超过100%硫酸。考察了催化剂合成甲缩醛的催化性能并优化了合成条件。当合成条件为:甲醇18mL,37%甲醛15mL,催化剂2.5g,带水剂环己烷20mL和反应温度65℃,甲缩醛转化率可达到94.36%,收率达到91.55%。催化剂重复使用30次后,甲醛转化率及甲缩醛的收率仍可达到85%。

关键词：甲缩醛二甲氧基甲烷合成溶胶-凝胶法磷钨酸催化剂

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掺玉米秸秆脲醛缩合物的制备及缓释性能研究

中国土壤与肥料 2014年第2期 93-96页

作者：宋伟徐雪丽南阳理工学院河南南阳473004

以尿素和甲醛为原料,玉米秸秆粉末为填料,制备出低成本脲醛缓释化肥。获得了适宜的合成工艺参数：尿素和甲醛配比为1.4∶1（m∶m）,加入玉米秸秆粉末量为尿素质量的20%;加成反应温度为75-80℃,pH值为8.5-9.0,反应时间为90 min,缩合反应... 详细信息

以尿素和甲醛为原料,玉米秸秆粉末为填料,制备出低成本脲醛缓释化肥。获得了适宜的合成工艺参数：尿素和甲醛配比为1.4∶1（m∶m）,加入玉米秸秆粉末量为尿素质量的20%;加成反应温度为75-80℃,pH值为8.5-9.0,反应时间为90 min,缩合反应温度为80℃,pH值为4.5-5.0,反应时间为30-45 min。以水溶液和模拟土壤法对合成得到的脲醛缩合物进行了尿素缓释性能测定,结果表明,在优化条件下合成得到的缓释化肥,其7 d水中溶出率低于25%,7 d土壤中溶出率低于20%。

关键词：缓释化肥缓释性能脲醛缩合物玉米秸秆

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稀疏谱聚类方法及应用

兰州大学学报（自然科学版） 2017年第5期53卷 685-690页

作者：徐雪丽苏锦霞兰州大学数学与统计学院兰州730000 南开大学统计研究院天津300071

提出了一种新的谱聚类算法:基于K-Medoids的SSKM聚类,不仅利用距离指数变换函数及稀疏化算法构建了分块对角矩阵以重新解释样本之间的相似度,还结合PAM算法取代传统谱聚类中的k-means算法对特征向量聚类以提高算法的聚类稳定性.为了使S... 详细信息

提出了一种新的谱聚类算法:基于K-Medoids的SSKM聚类,不仅利用距离指数变换函数及稀疏化算法构建了分块对角矩阵以重新解释样本之间的相似度,还结合PAM算法取代传统谱聚类中的k-means算法对特征向量聚类以提高算法的聚类稳定性.为了使SSKM算法能够有效地处理高维数据,引入了高相关系数过滤及主成分分析降维技术,提出了SSKM算法的新版本HSSKM,能够识别高维数据结构以减少原始数据的特征规模.模拟数据及高维基因表达数据结果表明新算法具有聚类稳定、聚类结果更精确等显著性能.

关键词：稀疏谱聚类高维数据降维技术聚类评价指标

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相变干混保温砂浆的配制及性能研究

硅酸盐通报 2015年第2期34卷 575-580页

作者：赵冰徐雪丽宋伟南阳理工学院土木工程学院南阳473004 南阳理工学院生物与化学工程学院南阳473004

为了达到建筑节能,便于施工的目的,复配具有保温功能的相变干混水泥砂浆,以水泥质量为基数100%,确定了适宜的组分复配比例:相变材料20%,碳酸钙15%,砂子140%,木质纤维素0.5%,粉煤灰10%,羟甲基纤维素(CMC)0.04%。通过DSC对相变材料和干混... 详细信息

为了达到建筑节能,便于施工的目的,复配具有保温功能的相变干混水泥砂浆,以水泥质量为基数100%,确定了适宜的组分复配比例:相变材料20%,碳酸钙15%,砂子140%,木质纤维素0.5%,粉煤灰10%,羟甲基纤维素(CMC)0.04%。通过DSC对相变材料和干混砂浆相变潜热进行了表征,结果表明该相变材料相变潜热较高;通过电子显微镜及光学显微镜对相变材料的微观结构进行了观察,结果表明该相变材料粒径均匀,微胶囊状态良好;通过抗拉及抗折强度实验对相变干混水泥砂浆的力学性能进行了测定,结果表明该相变干混砂浆力学性能满足外墙材料要求,通过吸水性及透水性实验对相变干混砂浆的防水性能进行了测定,结果表明该相变干混砂浆满足墙体防水要求。

关键词：相变材料干混砂浆保温砂浆