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Notch信号参与BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化及其机制的初步探讨

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中国生物工程杂志 2012年第11期32卷 14-22页

作者：谢佳瑛胥文春徐道晶张晓艳唐敏重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016

目的:探讨Notch信号对骨形成发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞成骨分化的影响以及作用机制。方法:用腺病毒AdGFP和AdBMP9处理C2C12细胞,细胞化学染色检测早晚期成骨指标碱性磷酸酶(ALP)和钙盐沉积,了解BMP... 详细信息

目的:探讨Notch信号对骨形成发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞成骨分化的影响以及作用机制。方法:用腺病毒AdGFP和AdBMP9处理C2C12细胞,细胞化学染色检测早晚期成骨指标碱性磷酸酶(ALP)和钙盐沉积,了解BMP9对间充质干细胞晚期成骨的影响;采用细胞密度实验以及DAPT(Notch信号通路抑制剂)处理C2C12细胞检测Notch信号靶基因Hey1、早晚期成骨指标ALP和OCN的表达;在DAPT处理下,用RT-PCR检测Notch信号对C3H10T1/2中BMPs信号受体、成骨指标Runx2、Col1a-α表达的影响,用WB检测Smad1/5/8以及p-Smad1/5/8的表达。结果:BMP9对于C2C12早晚期成骨均有影响。抑制C3H10T1/2中Notch信号后,ALK2、p-Smad1/5/8以及Runx2和Col1a-α表达均有所下调。结论:Notch信号参与了BMP9介导的间充质干细胞早晚期成骨的分化,其可能机制是其BMP9增强了Notch信号配受体的表达,同时Notch信号也反馈上调了BMP9受体表达,并对p-Smad1/5/8以及转录因子Runx2及Col1a-α的表达产生影响,增强了成骨分化。

关键词： Notch信号通路骨形态发生蛋白9 骨髓间充质干细胞成骨分化

Notch信号通路在骨形态发生蛋白9诱导的多潜能干细胞成骨分化中的作用

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第三军医大学学报 2010年第23期32卷 2492-2496页

作者：刘强翁亚光徐道晶罗敏唐敏重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016

目的初步探讨Notch信号通路对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导多潜能干细胞成骨分化的作用和机制。方法腺病毒表达载体(AdBM P9/AdGFP、AdHey1/AdRFP)和BMP9/GFP条件培养基处理C2C12细胞,细胞化学染色和活性定... 详细信息

目的初步探讨Notch信号通路对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导多潜能干细胞成骨分化的作用和机制。方法腺病毒表达载体(AdBM P9/AdGFP、AdHey1/AdRFP)和BMP9/GFP条件培养基处理C2C12细胞,细胞化学染色和活性定量检测早期成骨标志物碱性磷酸酶(ALP),定量RT-PCR检测Notch信号通路靶基因Hey1,以了解Hey1在AdBMP9介导的成骨分化作用中的表达和作用;采用细胞密度实验和Notch信号通路抑制剂(DAPT)检测Notch信号通路对成骨的影响;在AdBMP9/AdGFP处理下,检测细胞上Notch信号通路配体、受体表达变化。结果 AdBMP9作用下,1、3、5、7dALP活性持续增加(P<0.05);Hey1一过性升高,其与AdBMP9呈剂量依赖性;Hey1可协助BMP9成骨(P<0.05),不能单独起效。80%和40%细胞密度组ALP量和Hey1表达均高于20%组(P<0.05);DAPT组中ALP活性明显降低(P<0.05);在AdBMP9作用下,Notch信号通路配受体有不同程度的上调,其中受体Notch4和配体Jag-1上调最为明显(分别为11.3倍和5.1倍)。结论 Notch信号通路参与BMP9介导的多潜能干细胞成骨分化,其可能的机制是BMP9通过诱导Notch通路配体、受体表达上调使Hey1升高,后者协同成骨。

关键词： Notch信号通路骨形态发生蛋白9 多潜能干细胞发状分裂相关增强子-1 DAPT

Wnt3a协同BMP9调控间充质干细胞成骨分化及机制研究

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重庆医科大学学报 2012年第7期37卷 565-569页

作者：张晓徐道晶林良波梁熙黄伟重庆医科大学附属第一医院骨科.重庆400016 重庆医科大学临床检验诊断学重点实验室重庆400016

目的:探讨经典Wnt信号通路与骨形态发生蛋白9(Bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(Mes-enchymal stem cells,MSCs)成骨的相互影响及分子机制。方法:以小鼠骨髓来源MSCs C3H10T1/2为目的细胞,用Wnt3a上调经典Wnt信号通... 详细信息

目的:探讨经典Wnt信号通路与骨形态发生蛋白9(Bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(Mes-enchymal stem cells,MSCs)成骨的相互影响及分子机制。方法:以小鼠骨髓来源MSCs C3H10T1/2为目的细胞,用Wnt3a上调经典Wnt信号通路,联合BMP9作用于细胞,通过碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性测定、钙盐沉积实验、real time PCR、免疫细胞化学染色等方法观测BMP9与经典Wnt信号通路联合后对MSCs成骨分化的影响。结果:Wnt3a明显促进了BMP9诱导的ALP活性的增加[F=264.962,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-BMP9=7.19,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-Wnt3a=16.36,P=0.000],同时也明显增加了成骨标志物骨钙蛋白(Osteocalcin,OC)[F=3 920.102,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-BMP9=39.10,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-Wnt3a=62.56,P=0.000]和骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)[F=1 935.824,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-BMP9=40.88,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-Wnt3a=56.42,P=0.000]的表达以及Runx2的mR-NA的表达[F=3 635.980,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-BMP9=79.37,P=0.000;t(BMP9+Wnt3a)-Wnt3a=86.96,P=0.000],并且还促进了钙盐沉积。结论:Wnt3a与BMP9相互协同诱导MSCs的骨向分化,其中成骨转录因子Runx2可能作为二者的交汇点起了重要作用。

关键词：骨形态发生蛋白9 Wnt3a 间充质干细胞骨向分化

朗格汉斯细胞组织细胞增生症合并ASXL1突变1例

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检验医学与临床 2023年第7期20卷 1022-1024页

作者：徐道晶张晓孙荣同山东省威海市立医院检验科山东威海264200 威海卫人民医院关节骨病科山东威海264200

朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)发病原因不明、发病率极低,相关研究甚少,该病是一种多系统起病,临床表现多样化的罕见病。现报道1例起源于脊柱溶骨破坏的LCH供大家参考。1临床资料1.1 一般资料患者,男,56岁,“脂肪肝、酒精肝”10余年... 详细信息

朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)发病原因不明、发病率极低,相关研究甚少,该病是一种多系统起病,临床表现多样化的罕见病。现报道1例起源于脊柱溶骨破坏的LCH供大家参考。1临床资料1.1 一般资料患者,男,56岁,“脂肪肝、酒精肝”10余年未系统治疗。2020年3月无诱因出现腰背部疼痛,无发热,就诊于当地医院。检查提示T10压缩性骨折、T5隐裂,经手术治疗好转。

关键词：朗格汉斯细胞组织细胞增生症溶骨破坏 BRAF-V600E突变 ASXL1突变

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T淋巴母细胞淋巴瘤合并急性未分化白血病1例

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医学检验与临床 2022年第9期33卷 77-78,56页

作者：徐道晶张晓孙荣同威海市立医院检验科山东威海264200 威海卫人民医院关节骨病科山东威海264200

急性未分化白血病(Acute undifferentiated leukemia,AUL)在临床上是一种罕见的白血病临床亚型,占急性白血病的不到5%,细胞形态学和细胞化学染色不能对其进行分型,髓系标记一般阴性,常为CD34,HLA-DR、CD38、CD7、TDT阳性,不表达髓系和... 详细信息

急性未分化白血病(Acute undifferentiated leukemia,AUL)在临床上是一种罕见的白血病临床亚型,占急性白血病的不到5%,细胞形态学和细胞化学染色不能对其进行分型,髓系标记一般阴性,常为CD34,HLA-DR、CD38、CD7、TDT阳性,不表达髓系和淋系的特异性标志,且预后差。现报道一例局部淋系表达的AUL。

关键词：急性未分化白血病 T淋巴母细胞淋巴瘤流式细胞术

HSP90和HSP70与肿瘤发生的研究进展

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医学检验与临床 2016年第9期27卷 52-54,67页

作者：徐道晶张晓孙荣同威海市立医院检验科山东威海264200 威海卫人民医院关节外科山东威海264200

热休克蛋白（Heat shock proteins，HSP）又称热激蛋白，是一类功能性相关蛋白质，根据它们的相对分子质量的大小，将HSPs分为HSP100，HSP90，HSP70，HSP60，HSP40和小热休克蛋白（sHSP）6个亚族，广泛存在于生物界原核到真核细胞中的... 详细信息

热休克蛋白（Heat shock proteins，HSP）又称热激蛋白，是一类功能性相关蛋白质，根据它们的相对分子质量的大小，将HSPs分为HSP100，HSP90，HSP70，HSP60，HSP40和小热休克蛋白（sHSP）6个亚族，广泛存在于生物界原核到真核细胞中的一类具有高度保守性的蛋白质。当细胞在受到某些不利因素（如高热、感染、缺血、缺氧及化学物质等）刺激时，HSP会迅速短暂地大量合成，这种表达的增长是受到转录调控的，合成后通过与细胞内部分变性的蛋白质结合，协助其复性或将其运送至溶酶体降解而发挥细胞保护功能，因而可以认为HSPs在细胞内的出现标志着细胞自身保护机制的启动。

关键词： HSP70 HSP90 肿瘤发生热休克蛋白相关蛋白质真核细胞相对分子质量自身保护机制

p38蛋白激酶参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化

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中国生物工程杂志 2011年第5期31卷 15-21页

作者：徐道晶王锦何娟文胡晶翁亚光罗进勇重庆医科大学医学检验系重庆医科大学检验医学教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016

目的:初步分析丝裂原活化蛋白激酶p38在BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化过程中的作用。方法:利用BMP9重组腺病毒感染C3H10T1/2细胞,Western blot检测p38激酶总蛋白表达水平和磷酸化水平。p38的特异性抑制剂SB203580抑制p38活性或... 详细信息

目的:初步分析丝裂原活化蛋白激酶p38在BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化过程中的作用。方法:利用BMP9重组腺病毒感染C3H10T1/2细胞,Western blot检测p38激酶总蛋白表达水平和磷酸化水平。p38的特异性抑制剂SB203580抑制p38活性或RNA干扰抑制p38表达后,分析ALP活性变化,利用茜素红S染色检测钙盐沉积,Real Time PCR检测Smad6和Smad7的mRNA表达水平,动物实验确认在RNA干扰p38蛋白激酶后,对于BMP9诱导的C3H10T1/2细胞异位成骨的影响。结果:BMP9不影响p38激酶的蛋白表达水平,但却可以促进p38激酶的磷酸化;p38抑制剂SB203580可剂量依赖性地抑制由BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,RNA干扰导致p38基因沉默同样也可抑制BMP9诱导的ALP活性,但抑制效应不及SB203580;SB203580还能够抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的钙盐沉积;BMP9的靶基因Smad6和Smad7的mRNA表达也能被SB203580所抑制;干扰p38蛋白激酶可抑制BMP9诱导的C3H10T1/2细胞在裸鼠皮下异位成骨。结论:p38蛋白激酶参与了BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化。

关键词：骨形态发生蛋白9 间充质干细胞 p38 成骨分化

劈肱三头肌入路双钢板治疗肱骨远端骨折疗效分析

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中国医师杂志 2017年第6期19卷 922-924页

作者：张晓徐道晶于华强纪伟彬威海卫人民医院关节外科山东省威海264200 威海市立医院检验科山东省威海264200

目的探讨劈肱三头肌入路垂直双钢板固定治疗肱骨远端骨折疗效。方法2012年2月至2015年5月肱骨远端骨折的患者12例，男5例，女7例，年龄40-65（中位年龄58．5）岁。根据AO分型标准均为C型骨折，其中c1型3例，c2型5例，C3型4例，其中开放... 详细信息

目的探讨劈肱三头肌入路垂直双钢板固定治疗肱骨远端骨折疗效。方法2012年2月至2015年5月肱骨远端骨折的患者12例，男5例，女7例，年龄40-65（中位年龄58．5）岁。根据AO分型标准均为C型骨折，其中c1型3例，c2型5例，C3型4例，其中开放性骨折1例（Gustilo—Anderson Ⅰ型）。手术均采用肘后正中切口，劈肱三头肌入路显露肱骨远端，垂直双钢板固定骨折。采用Cassebaum评分系统进行疗效评价。结果本组患者随访时间10—20（中位数14．5）个月，术后复查X线骨折全部愈合，无延迟愈合或不愈合情况。Cassebaum评分系统进行疗效评价，其中优6例，良4例，可1例，差1例。结论劈肱三头肌入路垂直双钢板固定技术治疗肱骨远端骨折固定牢固，能早期功能锻炼，可取得较好的临床效果。

关键词：肱骨骨折/外科学钢骨板骨折固定术肱骨/外科学

急性混合表型白血病合并BCR/ABL(p230)阳性一例

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海南医学 2020年第17期31卷 2303-2304页

作者：徐道晶张晓李彬彬王海娟孙荣同威海市立医院检验科山东威海264200 威海卫人民医院关节骨病科山东威海264200

急性混合表型白血病(mixed phenotype acute leukemia,MPAL)是白血病细胞同时表达髓系和淋系抗原标志或患者骨髓同时含有髓系和淋系两类白血病细胞,是一种少见类型的急性白血病(AL)。人abl基因位于9号染色体长臂,bcr基因位于22号染色体... 详细信息

急性混合表型白血病(mixed phenotype acute leukemia,MPAL)是白血病细胞同时表达髓系和淋系抗原标志或患者骨髓同时含有髓系和淋系两类白血病细胞,是一种少见类型的急性白血病(AL)。人abl基因位于9号染色体长臂,bcr基因位于22号染色体长臂。bcr基因断裂点集中在三个区域:主要(major bcr,M-bcr)、次要(minor bcr,m-bcr)和μ(μ-bcr)区域有6种BCR-ABL融合转录方式,分别转译蛋白p210、p190、p230,形成的BCR/ABL融合基因由于大小不同以及转化活性不同,临床及血液学表现也不同,其中慢性粒细胞白血病(CML)最常见的是p210型,急性淋巴细胞白血病(ALL)最常见p190型和p210型,p230型极其罕见,此病例是两个极少见类型的结合,现报道如下:1病例简介患者,男,33岁,因“乏力2周,发现白细胞增高1 d”于2018年9月24日入院,现病史:患者两周前出现乏力,无头昏及发热,无咽痛流涕,无腹泻,于威海某医院就诊行血常规检查示白细胞(WBC)88.82×10^9/L,幼稚细胞95%,为进一步治疗来我院就诊。体格检查:轻度贫血貌,浅表淋巴结不大,胸骨无压痛;辅助检查:血片,原始粒细胞占96%,WBC为109.24×10^9/L。

关键词：急性混合表型白血病 p230阳性慢性粒细胞白血病