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细胞周期调控对大鼠局灶性脑缺血后迟发性神经元死亡的影响

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中风与神经疾病杂志 2005年第6期22卷 495-497,T0001页

作者：张贵斌徐运兰王伟谢敏杰华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科湖北武汉430030

目的探讨细胞周期调控对脑神经细胞凋亡的影响。方法采用光化学方法制作大鼠局灶性缺血模型,术后立即腹腔注射细胞周期抑制剂Olomoucine进行干预。HE染色来测定皮层梗死灶的体积;应用免疫组织化学法观察缺血后第3天假手术组、缺血对照... 详细信息

目的探讨细胞周期调控对脑神经细胞凋亡的影响。方法采用光化学方法制作大鼠局灶性缺血模型,术后立即腹腔注射细胞周期抑制剂Olomoucine进行干预。HE染色来测定皮层梗死灶的体积;应用免疫组织化学法观察缺血后第3天假手术组、缺血对照组和干预组大鼠损伤侧皮层病灶周围凋亡神经细胞的表达;聚丙烯酰胺凝胶电泳(Western blot)和半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)观察Caspase-3蛋白及mRNA的表达。结果 HE染色显示对照组梗死灶明显大于干预组;免疫组织化学可见病灶周围凋亡神经细胞的阳性表达,干预组较假手术组显著增高,但明显低于对照组(P<0．05);Western blot和RT-PcR显示Caspase-3蛋白和mRNA的表达,干预组较假手术组增高(P<0．05),而较对照组明显降低(P<0．05)。结论脑缺血损伤后细胞周期调控参与了迟发性神经元的死亡过程。

关键词：细胞周期周期蛋白依赖激酶抑制剂细胞凋亡 Caspase-3 脑缺血

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浅谈任中经济责任审计问题及对策

财经界(学术版) 2012年第7期 246-247页

作者：徐运兰乐平矿务局

任中经济责任审计是主要就在任领导干部履行经济责任请况进行的审计。本文首先主要就任中经济责任审计的重要性进行了探讨,从责任归因、审计监督效果、经济责任审计制度及经济责任审计人员数量安排几方面提出了我国目前在任中经济责任... 详细信息

任中经济责任审计是主要就在任领导干部履行经济责任请况进行的审计。本文首先主要就任中经济责任审计的重要性进行了探讨,从责任归因、审计监督效果、经济责任审计制度及经济责任审计人员数量安排几方面提出了我国目前在任中经济责任审计过程中存在的主要问题,并就这些问题提出了一些对策建议。

关键词：任中审计经济责任问题对策

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经济责任审计评价体系的思考

中国乡镇企业会计 2012年第3期 137-138页

作者：徐运兰乐平矿务局审计处

经济责任审计评价体系的构建,是解决经济审计的核心所在,也是提高审计效率与审计质量的有效保障。通过科学、合理的经济责任审计评价体系,可确保经济责任审计工作的顺利开展,更好地落实经济责任,发挥审计的监督职能。

关键词：经济责任审计工作审计评价体系经济审计审计质量审计效率监督职能

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浅谈任中经济责任审计问题及对策

财经界 2012年第14期 246-247页

作者：徐运兰乐平矿务局

关键词：任中审计经济责任问题对策

细胞周期抑制剂对局灶性缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的影响

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中华急诊医学杂志 2006年第1期15卷 15-18页

作者：张贵斌徐运兰王伟谢敏杰襄樊市第一医院神经内科湖北省襄樊441000 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科

目的探讨细胞周期抑制剂对脑神经细胞凋亡的影响。方法采用光化学方法制作局灶性缺血模型,干预组大鼠腹腔注射细胞周期抑制剂Olomoucine。用HE染色测定皮层梗死灶的体积;免疫组织化学法观察缺血后第3天假手术组、缺血对照组和干预组大... 详细信息

目的探讨细胞周期抑制剂对脑神经细胞凋亡的影响。方法采用光化学方法制作局灶性缺血模型,干预组大鼠腹腔注射细胞周期抑制剂Olomoucine。用HE染色测定皮层梗死灶的体积;免疫组织化学法观察缺血后第3天假手术组、缺血对照组和干预组大鼠梗死灶周围凋亡细胞的表达;用聚丙烯酰胺凝胶电泳(Westernblot)观察Caspase3蛋白的表达。结果对照组梗死灶明显大于干预组;干预组梗死灶周围凋亡细胞数较假手术组显著增高,但明显低于对照组(P<0.05);Westernblot显示Caspase3蛋白的表达,干预组较假手术组增高(P<0.05),而较对照组明显降低(P<0.05)。结论脑缺血损伤后细胞周期调控参与了神经细胞的凋亡过程。

关键词：细胞周期周期蛋白依赖激酶抑制剂细胞凋亡脑缺血

细胞周期调控对缺血缺氧性脑损伤后星形胶质细胞增殖的影响

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中华创伤杂志 2006年第3期22卷 209-213页

作者：张贵斌徐运兰王伟谢敏杰中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科

目的探讨局灶性脑梗死后细胞周期调控对星形胶质细胞增殖的影响。方法光化学方法制作大鼠缺血模型,腹腔注射细胞周期抑制剂Olomoucine进行干预。应用免疫组织化学法观察缺血后30d假手术组、对照缺血组和干预组(按8mg/kg给予Olomoucine)... 详细信息

目的探讨局灶性脑梗死后细胞周期调控对星形胶质细胞增殖的影响。方法光化学方法制作大鼠缺血模型,腹腔注射细胞周期抑制剂Olomoucine进行干预。应用免疫组织化学法观察缺血后30d假手术组、对照缺血组和干预组(按8mg/kg给予Olomoucine)损伤侧皮层病灶周围胶质纤维酸性蛋白(glial fibriliary acidic proten,GFAP)阳性表达;免疫印迹法(Westernblot)观察GFAP和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)蛋白的表达;半定量逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)观察GFAP mRNA的表达;HE染色测定皮层中风囊的体积。结果缺血后30d缺血组损伤侧皮质有明显的中风囊,形成胶质瘢痕,且周围胶质细胞增殖、活化呈密集型改变;对照组GFAP mRNA的表达最明显(P<0.05);干预组损伤侧皮质中风囊体积明显减小(P<0.05),胶质细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),且GFAP和PCNA蛋白表达明显减弱(P<0.05)。结论细胞周期调控可部分抑制胶质细胞的活化、增殖及瘢痕的形成。

关键词：脑缺血神经胶质增生细胞周期细胞周期蛋白质依赖激酶类

细胞周期抑制剂对大鼠局灶性脑缺血后神经元的保护作用

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中国组织化学与细胞化学杂志 2006年第1期15卷 54-59页

作者：张贵斌徐运兰王伟谢敏杰华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430030

目的通过观察选择性细胞周期抑制剂olomoucine对局灶性脑缺血边缘区神经元凋亡的影响,以探讨细胞周期调控与神经元细胞凋亡的关系。方法建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为脑缺血组(对照组和干预组)和假手术组,采用HE染色... 详细信息

目的通过观察选择性细胞周期抑制剂olomoucine对局灶性脑缺血边缘区神经元凋亡的影响,以探讨细胞周期调控与神经元细胞凋亡的关系。方法建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为脑缺血组(对照组和干预组)和假手术组,采用HE染色显示梗死灶并测定其面积;应用免疫荧光化学法检测梗死灶周围神经元核心抗原(NeuN)的表达及通过TUNEL方法检测神经元凋亡;免疫印迹(Western blot)观察损伤侧皮层NeuN、周期素蛋白A(cyclin A)和周期素蛋白B1(cyclin B1)蛋白的表达。结果缺血后3d对照组梗死灶面积占脑片面积百分比值的平均值明显大于干预组(P<0.05);缺血后缺血边缘区NeuN表达减弱,对照组NeuN表达明显弱于干预组(P<0.05);缺血后梗死灶周围可见大量TUNEL阳性染色细胞,而且对照组数量明显多于干预组(P<0.05);干预组大鼠NeuN(TUNAL双标阳性表达明显弱于对照组大鼠(P<0.05);NeuN的蛋白量的表达,干预组较对照组明显增加(P<0.05),而对照组cyclin A和cyclin B1蛋白量的表达明显高于干预组(P<0.05)。结论通过对细胞周期的调控,可减少神经元凋亡和脑梗死体积,从而为缺血性脑损伤后的神经元提供一个保护作用。

关键词：神经元核心抗原细胞凋亡细胞周期细胞周期蛋白周期素依赖激酶脑缺血

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毛细管电泳检测神经细胞凋亡

分析测试学报 2005年第3期24卷 37-40页

作者：谢敏杰朱舟余勇飞王伟徐运兰华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科研究室湖北武汉430030

建立了毛细管电泳检测凋亡细胞DNA片段的方法。以DNA相对分子质量标准品为溶质,考察了分离条件(电压、进样时间、温度、聚合物浓度)对分离的影响。在优化条件下,利用毛细管无胶筛分电泳对缺氧缺血过程中不同时间点神经PC12细胞DNA片段... 详细信息

建立了毛细管电泳检测凋亡细胞DNA片段的方法。以DNA相对分子质量标准品为溶质,考察了分离条件(电压、进样时间、温度、聚合物浓度)对分离的影响。在优化条件下,利用毛细管无胶筛分电泳对缺氧缺血过程中不同时间点神经PC12细胞DNA片段进行了分析,并与流式细胞仪结果比较,研究缺氧缺血时胶质细胞凋亡过程。

关键词：毛细管电泳星形胶质细胞凋亡 DNA

细胞周期素依赖性激酶抑制剂olomoucine对大鼠脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及其意义

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中华医学杂志 2006年第13期86卷 901-905页

作者：田代实王伟徐运兰喻志源谢敏杰王萍张贵斌华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430030

目的探讨细胞周期素依赖激酶抑制剂olomouc ine对脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及意义。方法建立脊髓半切损伤模型,实验大鼠随机分为假手术组、损伤对照组和olomouc ine干预组,采用W estern印迹分析脊髓损伤后细胞周期相关蛋白的表达... 详细信息

目的探讨细胞周期素依赖激酶抑制剂olomouc ine对脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及意义。方法建立脊髓半切损伤模型,实验大鼠随机分为假手术组、损伤对照组和olomouc ine干预组,采用W estern印迹分析脊髓损伤后细胞周期相关蛋白的表达;应用免疫荧光技术检测损伤区域胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)以及生长相关蛋白43(GAP-43)的表达;采用改良的Gale联合评分法对大鼠瘫痪后肢进行运动功能评估。结果假手术组细胞周期素(cyc lin)A、B1、E和增殖细胞核抗原以及GFAP、CSPG和GAP-43的表达较弱;脊髓损伤后cyc linA、cyc linB1、cyc linE和细胞周期素(PCNA)等细胞周期相关蛋白的表达显著增高,星形胶质细胞明显活化增殖,GFAP和CSPG的表达明显增强(均P<0.01),GAP-43的表达高于假手术组(P<0.05);给予olomouc ine干预后,细胞周期相关蛋白的表达显著下调,损伤区域星形胶质细胞的增殖和胶质瘢痕形成受到抑制,胶质瘢痕产生的CSPG的表达明显减少,GAP-43的表达显著增高,瘫痪后肢的运动功能明显改善(均P<0.05)。结论olomouc ine可通过调控细胞周期,抑制脊髓损伤后胶质细胞的活化增殖和胶质瘢痕的形成,减少抑制因子CSPG的表达以及上调有利于轴突再生的GAP-43的表达,改善损伤后轴突再生微环境最终促进瘫痪后肢的运动功能恢复。

关键词：脊髓损伤蛋白硫酸软骨素类 GAP-43蛋白细胞周期