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链格孢ATMT转化体系的构建及弱毒突变株验证

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基因组学与应用生物学 2009年第6期28卷 1056-1062页

作者：徐后娟徐荣燕李多川山东农业大学植物保护学院泰安271018

本文利用来自质粒pUCATPH的构巢曲霉色氨酸合成基因trpC的启动子(PtrpC)、终止子(TtrpC)和潮霉素磷酸转移酶抗性基因(hph)以及植物表达载体pROKⅡ成功构建了适用于丝状真菌的根癌农杆菌介导转化的双元载体pROKIIHPH,并转化根癌农杆菌Agr... 详细信息

本文利用来自质粒pUCATPH的构巢曲霉色氨酸合成基因trpC的启动子(PtrpC)、终止子(TtrpC)和潮霉素磷酸转移酶抗性基因(hph)以及植物表达载体pROKⅡ成功构建了适用于丝状真菌的根癌农杆菌介导转化的双元载体pROKIIHPH,并转化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404,建立了根癌农杆菌LBA4404介导的链格孢Alternaria alternata分生孢子转化体系;再从乙酰丁香酮(AS)浓度、不同的共培养时间、受体菌分生孢子浓度和农杆菌菌液浓度对A. alternata转化效率的影响对体系进行优化。结果确定了根癌农杆菌菌液体积为200mL(OD600=0.15),A. alternata分生孢子浓度为106个/mL,在A. tumefaciens的预培养时期以及与A. alternata共培养时期分别加入200μmo1/LAS,共培养时间48h,转化率达120～200个/105分生孢子。在所筛选的约800个转化子中获得了1株毒性明显低于野生菌sd1的弱毒突变株t108,通过PCR验证推测其毒力降低可能由于T-DNA插入阻断了基因的表达。该实验结果为与突变相关基因的研究以及弱毒株t108的进一步研究和利用提供了实验材料,也为深入研究链格孢sd1菌株的基因功能奠定了基础。

关键词：链格孢根癌农杆菌 ATMT 双元载体

30%苯甲·丙环唑EC对玉米后期叶斑病的防效

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中国植保导刊 2013年第1期33卷 49-50,34页

作者：王尽松徐荣燕李瑞花山东省德州市植保站山东德州253016

30%苯甲·丙环唑EC对玉米后期叶斑病有明显的防治效果,药剂处理区的玉米功能叶片青叶率为46.67%,秃顶率为11.97%,防病、控秃、保叶效果均优于对照药剂,且与空白对照相比增产11.17%。建议在生产中使用该药剂。

关键词：苯甲·丙环唑玉米叶斑病秃顶率

嗜热子囊菌光孢变种内切葡聚糖酶I基因在毕赤酵母中的表达及部分酶学性质

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应用与环境生物学报 2009年第3期15卷 419-422页

作者：张亚波刘连盟徐荣燕李多川山东农业大学环境生物系泰安271018 中国水稻研究所杭州310006

嗜热子囊菌是一种嗜热真菌,可以产生具有很高工业价值的内切葡聚糖酶.本研究成功表达了嗜热子囊菌内切葡聚糖酶Ⅰ基因,并获得热稳定的重组内切葡聚糖酶.提取嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus ***)总RNA,通过RT-PCR方法克隆... 详细信息

嗜热子囊菌是一种嗜热真菌,可以产生具有很高工业价值的内切葡聚糖酶.本研究成功表达了嗜热子囊菌内切葡聚糖酶Ⅰ基因,并获得热稳定的重组内切葡聚糖酶.提取嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus ***)总RNA,通过RT-PCR方法克隆出内切-β-葡聚糖酶eg1基因的成熟肽编码序列.采用基因重组的方法构建该基因的巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris分泌型表达载体pPIC9K-eg1,经线性化后采用电穿孔法将其导入毕赤酵母GS115中,大量筛选后获得高效表达内切葡聚糖酶Ⅰ的毕赤酵母工程菌株GpN24.该菌株采用甲醇诱导120h后,内切葡聚糖酶Ⅰ的活力可达570.7U/mL,最适温度为55℃,在90℃的条件下保温30min后仍具有60%的酶活力;最适pH为5.0,在pH3.0～5.0的条件下酶活力保持稳定.

关键词：纤维素酶内切葡聚糖酶嗜热子囊菌光孢变种嗜热真菌毕赤酵母

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玉米病虫草害防控技术示范及增产效果

中国植保导刊 2014年第9期34卷 53-54页

作者：王尽松徐荣燕李瑞花岳海均祝清光山东省德州市植保站山东德州253016

从玉米播种到收获整个生育期入手,选用新型药剂,整合植保技术在玉米各生长发育阶段的应用策略,最大限度地控制玉米田间病、虫、草害,减少产量损失。示范表明,玉米全生育期应用植保技术的示范田比常规防治对照田的苗情、长势更好,病虫草... 详细信息

从玉米播种到收获整个生育期入手,选用新型药剂,整合植保技术在玉米各生长发育阶段的应用策略,最大限度地控制玉米田间病、虫、草害,减少产量损失。示范表明,玉米全生育期应用植保技术的示范田比常规防治对照田的苗情、长势更好,病虫草害明显减轻,且增加15.87%。

关键词：玉米病虫草害植保技术增产

疏绵状嗜热丝孢菌糖化酶基因(gla)的克隆及在毕赤酵母中的表达

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农业生物技术学报 2010年第2期18卷 362-367页

作者：徐荣燕张亚波谢晨张超李多川山东农业大学植物保护学院环境生物系

本研究以疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)cDNA为模板,克隆了糖化酶基因(gla),序列分析表明gla的开放阅读框由1854个核苷酸组成,编码617个氨基酸。根据氨基酸序列推算该酶的分子量为64kD,属于糖苷水解酶第15家族,具有该家族... 详细信息

本研究以疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)cDNA为模板,克隆了糖化酶基因(gla),序列分析表明gla的开放阅读框由1854个核苷酸组成,编码617个氨基酸。根据氨基酸序列推算该酶的分子量为64kD,属于糖苷水解酶第15家族,具有该家族催化保守区的典型特征。PCR扩增gla的成熟蛋白编码基因,构建表达载体,经线性化后电击转化导入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastorisGS115),并成功进行了表达。重组酶经摇瓶发酵后酶活可达11.6U/mL,经硫酸铵沉淀、DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换等步骤纯化了该重组蛋白,SDS-PAGE显示该重组蛋白大小约为67kD,比推测的蛋白分子量稍大,可能与该蛋白的糖基化有关。该重组酶的最适反应温度和最适pH值分别为60℃和5.0,该酶具有较高的热稳定性,70℃保温20min后剩余酶活为54%。

关键词：疏绵状嗜热丝孢菌糖化酶克隆毕赤酵母性质

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核桃黑斑病的发生及防治

现代农业科技 2020年第20期 93-95页

作者：徐荣燕赵燕王冉冉德州学院山东德州253023 济南市森林保护站山东济南271000

核桃黑斑病是危害核桃的一种重要病害,发生范围广,危害重,严重影响了核桃的品质和产量,成为核桃产区制约农民收入的重要瓶颈。本文介绍了核桃黑斑病的危害症状、病原菌及发生规律,总结了核桃黑斑病的防治措施,以期为核桃黑斑病的防治提... 详细信息

核桃黑斑病是危害核桃的一种重要病害,发生范围广,危害重,严重影响了核桃的品质和产量,成为核桃产区制约农民收入的重要瓶颈。本文介绍了核桃黑斑病的危害症状、病原菌及发生规律,总结了核桃黑斑病的防治措施,以期为核桃黑斑病的防治提供参考。

关键词：核桃黑斑病危害症状病原菌发病规律防治措施

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药剂防治玉米叶斑病的田间示范

中国植保导刊 2016年第6期36卷 63-64页

作者：王尽松闫红芹徐荣燕于佃平祝清光山东省德州市植物保护站山东德州253016 山东省夏津县植物保护站山东夏津253200

为提高对玉米中后期叶斑病的防治能力,在山东省夏津县进行了6种杀菌剂的防治示范工作。从药剂的速效性、持效性及保叶效果看,供试药剂中50%苯甲·丙环唑水乳剂、430 g/L戊唑醇悬浮剂和40%苯甲·嘧菌酯悬浮剂表现较好,药后20 d防效分别为... 详细信息

为提高对玉米中后期叶斑病的防治能力,在山东省夏津县进行了6种杀菌剂的防治示范工作。从药剂的速效性、持效性及保叶效果看,供试药剂中50%苯甲·丙环唑水乳剂、430 g/L戊唑醇悬浮剂和40%苯甲·嘧菌酯悬浮剂表现较好,药后20 d防效分别为61.21%、65.52%、88.06%,且施药处理后植株抗逆性得到增强,单产增加在8%以上,应用效果明显。

关键词：杀菌剂玉米叶斑病试验示范防效增产