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组氨酸标签蛋白纯化介质的合成及应用

中国食品学报 2016年第10期16卷 80-86页

作者：华伟伟徐维元黄建颖杨利军浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室杭州310018

以离子液体为萃取溶剂,将氮杂大环功能性配体与疏水性离子液体链接构建亲和性离子液体,通过氮杂大环螯合金属离子构成复合物;利用螯合的金属离子(Cu2+、Ni2+、Zn2+)对组氨酸标签特异的亲和性,对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,结果表... 详细信息

以离子液体为萃取溶剂,将氮杂大环功能性配体与疏水性离子液体链接构建亲和性离子液体,通过氮杂大环螯合金属离子构成复合物;利用螯合的金属离子(Cu2+、Ni2+、Zn2+)对组氨酸标签特异的亲和性,对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,结果表明:AIL螯合金属离子后才会对FITC-(His)6-OH产生亲和性。Cu-AIL亲和性最强,对于His-tag EGFP的选择性最差;Ni-AIL受限于其低的金属离子结合量,获得的目的蛋白最少;Zn-AIL能有效亲和His-tag EGFP,纯化效率相对最佳。结合以上不同亲和介质的特性,开发出利用Zn-AIL与Cu-AIL的二次纯化体系,获得纯度约90%的His-tag EGFP。

关键词：亲和性离子液体螯合组氨酸标签蛋白质纯化

亲和性离子液体的合成及应用于组氨酸标签蛋白纯化的研究

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亲和性离子液体的合成及应用于组氨酸标签蛋白纯化的研究

作者：徐维元浙江工商大学

学位级别：硕士

离子液体(Ionic Liquids, ILs)是近年来研究广泛的一种绿色溶剂。离子液体具有很多优良的特性,比如宽的液态范围、热力学稳定性、高离子电导率等,而且离子液体与很多有机物溶解性良好、可燃性低、蒸汽压可忽略。以上特性使离子液体被应... 详细信息

离子液体(Ionic Liquids, ILs)是近年来研究广泛的一种绿色溶剂。离子液体具有很多优良的特性,比如宽的液态范围、热力学稳定性、高离子电导率等,而且离子液体与很多有机物溶解性良好、可燃性低、蒸汽压可忽略。以上特性使离子液体被应用于众多的全新的领域,比如耐高温润滑剂、萃取溶剂、合成与催化的反应溶剂及太阳能或燃料电池的新式电解液。离子液体通常被用作传统有机溶剂的环境友好型替代品应用在化学反应中作为分子溶剂使用。近期,离子液体的功能化研究兴起,通过离子液体支载功能化基团赋予离子液体额外的功能特性。本文以离子液体作为萃取溶剂,利用离子液体可设计的特性将氮杂大环功能性配体与疏水性离子液体链接构建亲和性离子液体(Affinity Ionic Liquid, AIL),通过氮杂大环螯合金属离子构成复合物,利用螯合的金属离子对组氨酸标签特异的亲和性对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化。主要研究内容如下：(1)以咪唑、1-溴辛烷、1,6-二溴己烷等为基本原料合成烷基咪唑阳离子;以乙二醇、二乙烯三胺、对甲苯磺酰氯为基本原料合成功能性配体;链接烷基咪唑阳离子与功能性配体,并通过阴离子交换得到疏水性AIL。主要中间产物及最终产物均通过NMR、MS等方法进行结构鉴定。(2)对于AIL与离子液体[bdmim][NTf2]构成的离子液体二元萃取体系进行金属离子螯合特性测试。配制含梯度AIL质量的二元萃取体系,分别螯合Cu2+、Ni2+、Zn2+三种金属离子,通过原子吸收分光光度计火焰法测金属离子吸收量。发现当AIL含量过高时“三明治结构”的形成会影响金属离子结合量。通过FITC-(His)6-OH测试了AIL对于聚六组氨酸多肽的亲和性,结果表明只有当AIL螯合金属离子后才会对FITC-(His)6-OH产生亲和性。(3)在不同离子强度条件下研究了M-AIL (M=Cu、Ni、Zn)对组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白(His-tag EGFP)萃取量的变化。结果表明,随着离子强度的升高Cu-AIL结合His-tag EGFP的量减少,Ni-AIL、Zn-AIL的结合量逐渐上升。说明了离子强度对于亲和介质与蛋白质之间的静电效应及疏水作用的影响。同时,研究了不同AIL含量的萃取体系对于His-tag EGFP萃取量的影响,表明金属离子与AIL形成的“三明治结构”是影响蛋白质的萃取量的重要因素。(4)将M-AIL应用于大肠杆菌表达总蛋白的中His-tag EGFP的纯化。选择适宜的AIL含量,在高离子强度条件下进行His-tag EGFP的纯化。结果表明：Cu-AIL亲和性最强,对于His-tag EGFP的选择性最差;Ni-AIL受限于其低的金属离子结合量,获得的目的蛋白最少;Zn-AIL能有效地亲和His-tag EGFP,纯化效率相对最佳。并结合以上不同亲和介质的特性,开发出了利用Zn-AIL与Cu-AIL的二次纯化体系,获得了纯度约为90%的His-tag EGFP。(5)重复利用能力是离子液体利用的一项重要指标,本文研究了M-AIL连续使用过程中对His-tag EGFP亲和能力的变化。结果表明M-AIL虽然在经过咪唑洗脱后其亲和性有显著的下降,但是离子液体重复使用性能良好。最后利用EDTA解吸金属离子,重新装载金属离子后亲和性能大幅上升,验证了AIL重新装载金属离子的能力及亲和性能恢复的方法。

关键词：离子液体亲和性离子液体二元体系 His-tag EGFP 液液萃取纯化重复利用

上海市比较文学研究会第十三届第一次会员大会暨青年学者论坛综述

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中国比较文学 2024年第1期134卷 277-280页

作者：徐维格复旦大学中文系

2023年9月10日,上海市比较文学研究会第十三届第一次会员大会暨青年学者论坛在复旦大学隆重召开。来自复旦大学、上海交通大学、上海外国语大学、同济大学、华东师范大学、上海大学、上海师范大学、上海社会科学院、上海译文出版社等多... 详细信息

2023年9月10日,上海市比较文学研究会第十三届第一次会员大会暨青年学者论坛在复旦大学隆重召开。来自复旦大学、上海交通大学、上海外国语大学、同济大学、华东师范大学、上海大学、上海师范大学、上海社会科学院、上海译文出版社等多所高校及机构的百余位专家学者齐聚一堂,共襄盛会。

关键词：上海社会科学院上海译文出版社上海外国语大学上海交通大学比较文学研究上海大学华东师范大学复旦大学

地质学与考古学的交汇点——袁复礼在中国西北科考团期间的甘肃考察

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敦煌学辑刊 2024年第2期2卷 172-180页

作者：徐维焱北京大学历史学系北京100871

在中国现代考古学建立的初期,地质学家发挥了重要的作用,不仅从理论层面为考古学提供方法论,还主持和参与了实践性的考古发掘活动.在此过程中,西方学者固然占据了决定性的地位,但中国科学家的的作用同样不可忽视.袁复礼作为中国地质学... 详细信息

在中国现代考古学建立的初期,地质学家发挥了重要的作用,不仅从理论层面为考古学提供方法论,还主持和参与了实践性的考古发掘活动.在此过程中,西方学者固然占据了决定性的地位,但中国科学家的的作用同样不可忽视.袁复礼作为中国地质学的奠基人,在考古学方面做出了巨大的贡献,他先后参与了外国学者和中国学者主持的考古发掘工作,积累了大量的田野发掘经验.中瑞西北科学考查团期间,他在甘肃地区独立主持的一系列考古调查活动,不仅是对甘肃地区史前考古发现的重要补充,同时也对甘肃民勤地区后续的考古工作提供了津梁.

关键词：中国西北科学考查团袁复礼地质学考古学甘肃民勤

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《塔尔巴哈台事宜》补续考

中国典籍与文化 2024年第1期 76-84页

作者：徐维焱北京大学历史学系

《塔尔巴哈台事宜》是新疆塔城的第一部地方性志书。该书由乾隆末年的塔尔巴哈台参赞大臣永保创纂,此后的数十年中,历经了后任多位参赞大臣的补辑和修订,形成了数个不同的版本。本文旨在厘清诸本之间的关系,钩沉当前研究中所忽视的相关... 详细信息

《塔尔巴哈台事宜》是新疆塔城的第一部地方性志书。该书由乾隆末年的塔尔巴哈台参赞大臣永保创纂,此后的数十年中,历经了后任多位参赞大臣的补辑和修订,形成了数个不同的版本。本文旨在厘清诸本之间的关系,钩沉当前研究中所忽视的相关人物,考证其中身份不明的补续者。同时结合新疆地区的其他事宜和方志,简要阐述新疆地区志乘的发展趋势,以期对西北地区的地方志研究有所补苴。

关键词：塔尔巴哈台事宜方志塔城新疆

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ESG披露、异质估值与权益资本成本

系统工程理论与实践 2024年第6期44卷 1768-1779页

作者：季昱丞徐维军赵琪张卫国华南理工大学工商管理学院广州510641 广州金融服务创新与风险管理研究基地广州510641

本文构建了含有异质估值的理性预期均衡模型,在传统价值投资者与ESG投资者对同一风险资产存在相关但不相同估值的设定下,分析了ESG披露质量如何影响公司权益资本成本.结果表明:在内生化传统价值投资者信息获取的情况下,当最优信息获取... 详细信息

本文构建了含有异质估值的理性预期均衡模型,在传统价值投资者与ESG投资者对同一风险资产存在相关但不相同估值的设定下,分析了ESG披露质量如何影响公司权益资本成本.结果表明:在内生化传统价值投资者信息获取的情况下,当最优信息获取为角点解时,提高公司ESG披露的质量将带来权益资本成本的降低;而当信息获取为内点解时,ESG披露的质量与权益资本成本之间呈非单调关系,同时,取得这些不同关系的参数条件也由模型的解析解给出.研究结果调和了当前结论相左的实证研究,也揭示了强制ESG披露可能存在的负面影响,即提高ESG披露的质量并不总是带来公司权益资本成本的下降.

关键词： ESG披露异质估值信息获取权益资本成本

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二元双层耦合网络渗流行为分析

物理学报 2024年第16期73卷 217-228页

作者：高彦丽徐维南周杰陈世明华东交通大学电气与自动化工程学院南昌330013 华东师范大学物理与电子科学学院上海200241

本文建立了节点和连边耦合的二元相互依赖网络模型(binary interdependent networks with node and edge coupling,BINNEC).该模型中,网络A节点随机依赖网络B多条边从而形成边依赖群,当边依赖群的失效比例超过网络失效容忍度时,导致网络... 详细信息

本文建立了节点和连边耦合的二元相互依赖网络模型(binary interdependent networks with node and edge coupling,BINNEC).该模型中,网络A节点随机依赖网络B多条边从而形成边依赖群,当边依赖群的失效比例超过网络失效容忍度时,导致网络A的节点失效.基于自平衡概率法建立起理论分析框架,通过对3种经典网络结构下的BINNEC网络进行计算机仿真验证,并分析了该模型面对随机攻击下的相变行为和关键阈值.研究结果表明3种网络结构下的BINNEC网络和一元耦合网络一样脆弱,网络的相变行为都是一阶相变.当网络节点的边依赖群规模m越大,网络鲁棒性增强;在网络的边依赖群规模一定时,节点的失效容忍度越大网络鲁棒性越强.本文进一步研究在m和μ相同条件下,网络的度分布对BINNEC的影响.研究可以为此类二元耦合网络鲁棒性提供一定的理论依据,同时也为现实网络的安全设计提供指导意义.

关键词：相依网络二元耦合失效容忍度鲁棒性

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光酶催化混乱性反应的研究进展

合成生物学 2024年

作者：夏孔晨徐维华吴起浙江大学化学系

光催化具有条件温和、可再生、反应性强等优点，然而由于自由基的高活性往往导致其选择性难以调控，从而限制了光催化在不对称有机合成中的广泛应用。酶催化虽具有高选择性和专一性的优势，但这也导致其存在反应类型单一和底物谱窄等缺... 详细信息

光催化具有条件温和、可再生、反应性强等优点，然而由于自由基的高活性往往导致其选择性难以调控，从而限制了光催化在不对称有机合成中的广泛应用。酶催化虽具有高选择性和专一性的优势，但这也导致其存在反应类型单一和底物谱窄等缺陷。将反应性强的光催化与选择性高的酶催化相结合的光酶催化则可以提供一种全新的合成模式，实现优势互补，更加符合现代绿色有机合成的要求。狭义的光酶催化反应，也就是光酶协同反应一般包括以下四类：天然光酶反应，人工光酶反应，光催化与酶催化的偶联反应以及光酶催化混乱性反应。近年来，光酶催化的研究蓬勃发展，解决了许多传统有机合成中难以实现的问题，尤其是在不对称合成领域已占据重要地位。例如，脂肪酸光脱酸酶可以催化长链脂肪酸脱羧转化为相应烃类；结合光敏辅因子和蛋白骨架的人工光酶大大拓展了酶的应用范围，催化更多样化非天然有机化学品的生物合成；光催化剂催化光化学反应与通常酶催化反应的偶联方式可以实现一些复杂的有机合成过程；以及近年来一些含有光敏辅因子的氧化还原酶在光激发下催化新分子混乱性反应的功能。尽管已有许多文献对相关研究进行了总结，但是自2023年以来，光酶催化混乱性研究不断突破，涌现出许多全新的光酶催化反应类型和反应机理，立体选择性和区域选择性的精准调控更是满足了不对称合成的重大需求。对于这个飞速发展的领域，系统归纳其成果仍显得至关重要。因此本综述聚焦在光激发下光敏辅因子依赖型酶催化的混乱性反应最新研究成果，根据不同催化反应类型，分别介绍光酶通过自由基途径实现不对称脱卤、氢化、分子内环化、分子间C-C/C-N/C-S键交叉耦合等非天然反应。这些反应由于酶和底物的不同，展示了不同机理。例如在氧化还原起始过程中，包括单电子还原起始和单电子氧化起始两种类型；在自由基终止过程中，可能采用单电子还原终止和单电子氧化终止，而单电子还原终止方式中也存在氢原子转移和电子转移/质子转移耦合过程等不同情况。机理的多样性也为拓展更多的光酶催化混乱性反应提供了可能。在未来，新型的光酶催化方法将在快速发展的基因工程、合成生物学、酶工程，以及流动化学、人工智能等学科和技术的推动下，涌现出更多高效、高选择性的新分子新功能反应，显著拓展光酶催化方法在有机合成，尤其是绿色不对称合成领域中的应用范围。

关键词：光酶催化非天然反应不对称合成

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基于模型的移动应用GUI测试方法研究

基于模型的移动应用GUI测试方法研究

作者：徐维东西安工业大学

学位级别：硕士