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作者：徐立璋第二军医大学

学位级别：硕士

研究目的:骨植入体植入失败是目前临床亟待解决的问题。前期研究显示锌钙摩尔比为0.5的锌修饰硅酸钙(Ca2ZnSi2O7)陶瓷涂层比硅酸钙(CaSiO3)陶瓷涂层具有更好的促前成骨细胞粘附、增殖及分化的作用,并能与宿主骨界面形成有效的整合,揭示... 详细信息

研究目的:骨植入体植入失败是目前临床亟待解决的问题。前期研究显示锌钙摩尔比为0.5的锌修饰硅酸钙(Ca2ZnSi2O7)陶瓷涂层比硅酸钙(CaSiO3)陶瓷涂层具有更好的促前成骨细胞粘附、增殖及分化的作用,并能与宿主骨界面形成有效的整合,揭示经过Zn离子修饰的CaSiO3陶瓷涂层对前成骨细胞生物学效应产生重要作用。骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为体内成骨细胞的主要分化来源,探索出对于BMSCs具有最理想生物学活性锌钙摩尔比的Ca2ZnSi2O7陶瓷涂层,并研究其浸提液对BMSCs的生物学影响及作用机制显得尤为重要,为进一步探讨其作为骨植入体涂层运用于大体实验以及骨科和牙科临床奠定实验基础。研究内容:(1)BMSCs的提取、纯化和鉴定。使用全骨髓贴壁法提取SD大鼠BMSCs,培养至第三代后,使用流式细胞术检测CD29、CD90、CD45、CD31阳性率,进行成骨成脂诱导分化后,分别行茜素红和油红O染色后观察分化情况,使用免疫荧光染色法进行Vimentin染色后观察染色情况。(2)构建并优化Ca2ZnSi2O7陶瓷涂层。采用溶胶-凝胶法并调节锌钙离子的摩尔比,构建锌钙摩尔比分别为0.1、0.3、0.5的Ca2ZnSi2O7陶瓷粉体,然后使用大气等离子喷涂系统(APS)进行喷涂,在特定参数下获得Ca2ZnSi2O7陶瓷涂层,检测涂层表面形貌、化学稳定性及与钛基底材料的结合强度等。(3)观察不同锌钙摩尔比的Ca2ZnSi2O7陶瓷涂层对BMSC的生物学影响。检测涂层浸提液中的钙(Ca)、硅(Si)、锌(Zn)离子浓度。通过CCK-8试剂盒检测、倒置显微镜观察BMSC在涂层材料表面及其浸提液中培养后的粘附、增殖情况;通过ELISA方法检测BMSCs在涂层材料表面及其浸提液中添加成骨诱导剂培养后ALP、BGP、COL-I的生成情况,茜素红染色观察钙结节形成情况,ALP染色观察ALP分泌情况。探索出促BMSCs生物学活性最优的锌钙摩尔比Ca2ZnSi2O7陶瓷。(4)TGF-β1及IGF-1所介导的TGF-β/Smad、MAPK/ERK及PKC信号转导通路研究。使用最适锌钙摩尔比的Ca2ZnSi2O7陶瓷涂层作为实验组,BMSCs在含成骨诱导剂的各组浸提液中培养后,采用qRT-PCR方法检测成骨标记基因ALP、BGP、COL-I,TGF-β/Smad信号通路中TGF-β1、Smad2、Smad3,以及MAPK/ERK、PKC信号通路中的IGF-I、ERK1、REK2、PKC-δ等关键基因mRNA的表达情况。探索TGF-β/Smad及MAPK及PKC信号转导通路在Ca2ZnSi2O7陶瓷涂层对BMSCs生物学影响的作用。结果:(一)使用全骨髓贴壁法成功传代培养出了数量较多、细胞纯度较高的sd大鼠bmscs,具有良好的分化潜能。(二)成功制备了锌钙摩尔比为0.1、0.3、0.5的ca2znsi2o7陶瓷涂层,各组涂层的表面形貌均较为粗糙,与钛基的结合强度均明显强于casio3陶瓷涂层,三组之间未见明显区别;各组材料在dmem/f12培养液中浸泡1d后,casio3涂层释放ca、si离子浓度最高,而zn离子浓度同普通培养基一致,ca2znsi2o7陶瓷涂层ca、si离子浓度随着锌钙摩尔比的增加而减少,同时zn离子浓度随之增加。(三)bmscs在三组ca2znsi2o7陶瓷涂层表面及浸提液中粘附和增殖情况均显著优于未涂层钛合金金属片及casio3陶瓷涂层,其中锌钙摩尔比为0.3的ca2znsi2o7陶瓷涂层显著优于其余两组;在添加成骨诱导剂的条件下,bmscs在三组ca2znsi2o7陶瓷涂层表面及浸提液中培养后,成骨分化及生成alp、col-i、bgp以及钙结节形成情况均显著优于未涂层钛片及casio3陶瓷涂层,其中锌钙摩尔比为0.3的ca2znsi2o7陶瓷涂层显著优于其余两组。(四)bmscs在各组含成骨诱导剂的浸提液中培养后,alp、bgp、col-imrna的表达量以及tgf-β1、smad2、smad3mrna的表达量均随时间变化而升高,锌钙摩尔比为0.3的ca2znsi2o7陶瓷涂层的表达量最高,casio3组次之。igf-i、erk1、erk2、pkc-δmrna的表达量随时间延长而轻度升高,组间无明显差异,21d时igf-imrna的表达量在锌钙摩尔比为0.3的ca2znsi2o7陶瓷涂层浸提液中显著增多。结论:不同锌钙摩尔比的ca2znsi2o7陶瓷涂层都具有粗糙的表面形貌、丰富的孔隙和生物活性的化学组分,并可释放出的生物活性离子,无论是bmscs在其表面直接培养,还是使用其浸提液进行培养,均表现出了相对于未涂层纯钛金属片和casio3陶瓷涂层更为优秀的促bmscs粘附、增殖及成骨分化和矿化的能力。其中锌钙摩尔比为0.3的ca

关键词：锌修饰硅酸钙生物陶瓷涂层骨植入体生物相容性骨髓间充质干细胞成骨分化信号通路

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基于深度学习的眼底病变辅助诊断系统的研究

基于深度学习的眼底病变辅助诊断系统的研究

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作者：徐立璋中北大学

学位级别：硕士

近些年来,随着科技发展和生产力的进步,人类罹患眼疾的可能性也越来也高,也有越来越多的人们因为眼部疾病的困扰而难以生活和生存。近视、视网膜脱离、视网膜静脉阻塞、糖尿病视网膜等疾病不仅需要在发病时及时诊断,更重要的是患者希望... 详细信息

近些年来,随着科技发展和生产力的进步,人类罹患眼疾的可能性也越来也高,也有越来越多的人们因为眼部疾病的困扰而难以生活和生存。近视、视网膜脱离、视网膜静脉阻塞、糖尿病视网膜等疾病不仅需要在发病时及时诊断,更重要的是患者希望能够在疾病早期就通过筛查手段发现病症,尽早治疗。随着越来越多的人们患有不同程度的眼部疾病,医疗系统中的眼科部门也逐渐感到力不从心。为此,针对眼科拍摄的各类照片使用计算机技术辅助医生进行诊断,可以大大增加医生的效率,减少患者等待时间,具有十分重大的意义。本文设计了一种基于超广角眼底照相的病变检测系统,对正常眼、病理性近视、视网膜脱落、视网膜静脉阻塞和糖尿病视网膜病变进行检测。我们以Efficient Net网络为基础,针对超广角眼底照相图片的特征,在原生网络的基础上加入注意力模块和正则化参数,取得了优秀的成果。最终,我们的网络达到了总精度92.57%的好成绩,各个病变分类的成果同样令人满意。同时,我们还使用同样的数据集和Res Net50网络和Res Net101网络进行了对比,证明了我们的改进网络能够更精确的诊断超广角眼底照相中的疾病。同时,针对糖尿病视网膜中的出血和棉绒斑病变,我们还设计了一种基于两阶段图像分割的Mask-RCNN网络。该网络通过提取输入图像中的特征,并精准划分出各个目标的候选框,再逐像素判断候选框中可能存在的病变区域。我们在网络中引入了额外的注意力模块,进一步优化了网络的检测效果。最终,我们的网络在出血病变和棉绒斑病变的检测中的精度分别取得了90.01%和87.64%的好成绩,证明糖尿病视网膜中的具体病变和病变区域位置可以使用深度学习的技术提取,在临床医学诊断过程中可以有效帮助医生提出诊断结果,增加工作效率。一套完整的眼底病变辅助诊断系统不仅可以大大减轻医生的工作量,加快疾病的诊断速度与精度,同时与远程诊疗、远端医疗技术相结合,还可以为偏远地区、无法获取优越医疗资源的患者提供福利,真正做到智慧医疗的伟大愿景。

关键词：人工智能深度学习视网膜疾病图像分割

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不同年龄大鼠终板软骨细胞抗氧化能力研究

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中国脊柱脊髓杂志 2016年第3期26卷 264-269页

作者：黄晓东叶晓健王洋王伟恒徐立璋马俊邓国英第二军医大学附属长征医院脊柱外科上海市200433

目的 :通过研究不同年龄大鼠的终板软骨细胞氧化应激的差异,探讨衰老对终板软骨细胞抗氧化能力的影响。方法:原代培养获取SD大鼠2个月、18个月来源的终板软骨细胞鉴定后,使用第三代细胞进行实验。实验分为两组,A组为2个月大鼠来源的终... 详细信息

目的 :通过研究不同年龄大鼠的终板软骨细胞氧化应激的差异,探讨衰老对终板软骨细胞抗氧化能力的影响。方法:原代培养获取SD大鼠2个月、18个月来源的终板软骨细胞鉴定后,使用第三代细胞进行实验。实验分为两组,A组为2个月大鼠来源的终板软骨细胞,B组为18个月大鼠来源的终板软骨细胞。待A、B两组细胞贴壁后,通过β-半乳糖脱氢酶染色和RT-PCR对端粒酶长度进行检测,比较两组细胞衰老的差异;通过总抗氧化能力试剂盒检测两组细胞总抗氧化能力的不同。以浓度为200umol/L过氧化氢对细胞进行2.5h的处理,RT-PCR法检测处理前后两组细胞Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、caspase-3及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,bcl-2)的m RNA表达情况,使用流式细胞仪检测两组细胞的凋亡情况。对Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、caspase-3及bcl-2的相对表达量进行组间t检验,P0.05),而B组在端粒酶的相对长度(T/S=10±2)及总抗氧化能力(0.72±0.18)较A组(T/S=135±5,1)显著降低(P<0.05)。在相同条件的过氧化氢刺激后,B组终板软骨细胞的Ⅱ型胶原(0.60±0.16)、蛋白聚糖(0.75±0.22)表达明显低于A组细胞(P<0.05),而凋亡率显著高于A组细胞(P<0.05)。结论 :不同年龄大鼠终板软骨细胞衰老及抗氧化能力存在差异,衰老越明显的终板软骨细胞,总抗氧化能力越低,抵抗过氧化损伤的能力越差。

关键词：终板软骨细胞总抗氧化能力衰老凋亡

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高浓度骨桥蛋白诱导双足直立雌性小鼠脊柱侧凸模型

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中国组织工程研究 2016年第49期20卷 7301-7306页

作者：唐峰谢宁吴涛刘军王彬彬王洋徐立璋解放军第二军医大学附属长征医院脊柱外科上海市200003 南京医科大学第二附属医院骨科江苏省南京市210011

背景:近年来相关研究证实骨桥蛋白水平增高可能导致特发性脊柱侧凸发生发展。建立合适的青少年特发性脊柱侧凸动物模型对于此类疾病的研究与治疗具有重大意义。目的:观察高浓度骨桥蛋白诱导双足直立雌性小鼠脊柱侧凸的发生情况,为建立... 详细信息

背景:近年来相关研究证实骨桥蛋白水平增高可能导致特发性脊柱侧凸发生发展。建立合适的青少年特发性脊柱侧凸动物模型对于此类疾病的研究与治疗具有重大意义。目的:观察高浓度骨桥蛋白诱导双足直立雌性小鼠脊柱侧凸的发生情况,为建立理想的青少年特发性脊柱侧凸药物模型提供依据。方法:选取同周龄C3H/HeJ小鼠,随机分为高浓度骨桥蛋白雌性小鼠及雄性小鼠各20只,并设立对照雄性小鼠组及对照雌性小鼠组各20只。4组小鼠均于3周龄施行上肢截肢合并鼠尾切除术建立双足直立小鼠模型,术后放置特殊鼠笼诱导直立状态。高浓度骨桥蛋白雌性小鼠组及高浓度骨桥蛋白雄性小鼠组每日腹腔注射高浓度(40μg/kg)骨桥蛋白,对照组腹腔注射生理盐水,诱导3个月后,行小动物脊柱X射线检查,测量Cobb角大于10°定为侧凸诱导成功,评估侧凸发生率及严重程度。结果与结论:(1)高浓度骨桥蛋白雌性小鼠组18只发生脊柱侧凸,Cobb角16°-38°,平均(25.8±6.7)°,高浓度骨桥蛋白雄性小鼠组16只发生脊柱侧凸,Cobb角11°-34°,平均(20.9±6.8)°;对照雄性小鼠组8只发生脊柱侧凸,Cobb角12°-21°,平均(15.6±3.1)°;对照雌性小鼠组9只发生脊柱侧凸,Cobb角11°-24°,平均(17.1±4.5)°;(2)高浓度骨桥蛋白雌性、雄性小鼠组脊柱侧凸发生率均明显高于对照雌性、雄性小鼠组(P0.05),但其侧凸角度高浓度骨桥蛋白雌性组较高浓度骨桥蛋白雄性组明显加重(P<0.05);(3)结果表明,高浓度骨桥蛋白水平诱导的雌性双足直立小鼠其侧凸发生率更高,侧凸严重程度更重,其更贴近于人类特发性脊柱侧凸女性高发的实际情况。

关键词：骨桥蛋白质脊柱侧凸女(雌)性组织工程实验动物骨软骨损伤与修复动物模型骨桥蛋白雌性双足直立鼠国家自然科学基金

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BMSCs旁分泌对软骨细胞IL-1β损伤后的保护作用

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中国修复重建外科杂志 2015年第8期29卷 996-1002页

作者：徐立璋邓国英王伟恒黄晓东杨向群叶晓健第二军医大学附属长征医院骨科上海200003 第二军医大学解剖学教研室

目的研究BMSCs对于软骨细胞IL-1β损伤后的保护作用,以及BMSCs存在情况下软骨细胞对于IL-1β抵抗能力的变化。方法取SD大鼠6只随机分为实验组(制备膝关节软骨缺损)和对照组,6 h后取软骨组织行实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q ... 详细信息

目的研究BMSCs对于软骨细胞IL-1β损伤后的保护作用,以及BMSCs存在情况下软骨细胞对于IL-1β抵抗能力的变化。方法取SD大鼠6只随机分为实验组(制备膝关节软骨缺损)和对照组,6 h后取软骨组织行实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)和ELISA检测IL-1β基因表达和相对含量。BMSCs修复功能实验:取培养的18孔SD大鼠软骨细胞随机分为3组(n=6),空白组不作处理,损伤组和共同培养组细胞采用IL-1β干预后,共同培养组使用Transwell小室建立SD大鼠BMSCs与软骨细胞共同培养体系,采用q RT-PCR法测定软骨细胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和含凝血酶敏感素基序的去整合素金属蛋白4(a disintegrin and metalloprotease with Thrombospondin motifs 4,ADAMTS-4)、ADAMTS-5 m RNA相对表达量,ELISA法检测各组Caspase-3含量,以及流式细胞术检测各组细胞凋亡率。BMSCs保护功能实验:将12孔软骨细胞分为2组(n=6),共同培养组置入含BMSCs的Transwell小室后,两组均采用IL-1β干预,检测指标同修复功能实验。结果动物体内损伤现象研究结果示,实验组IL-1βm RNA相对表达量和IL-1β相对含量均高于对照组(P<0.05)。BMSCs修复功能实验结果示,损伤组和共同培养组Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 m RNA相对表达量及Caspase-3含量、细胞凋亡率均显著高于空白组,损伤组显著高于共同培养组,差异均有统计学意义(P<0.05)。BMSCs保护功能实验结果示,共同培养组Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 m RNA相对表达量及Caspase-3含量、细胞凋亡率均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论作为组织工程种子细胞的BMSCs同时具有抗炎、抗凋亡的应用潜质。

关键词： BMSCs 间接共同培养旁分泌抗炎症抗凋亡组织工程种子细胞

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生长因子对椎间盘终板软骨细胞抗氧化能力的影响

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中国组织工程研究 2017年第4期21卷 520-526页

作者：黄晓东邓国英王伟恒徐立璋马俊叶晓健解放军第二军医大学附属长征医院脊柱外科上海市200433 上海交通大学附属上海市第一人民医院上海市200000

背景:维生素E的抗氧化能力众所周知,但其他生长因子是否对终板软骨细胞具有抗氧化能力,国内外未见报道。目的:观察不同生长因子对椎间盘终板软骨细胞抗氧化能力的影响。方法:将原代培养获取的终板软骨细胞后分为4组,即空白对照组、血清... 详细信息

背景:维生素E的抗氧化能力众所周知,但其他生长因子是否对终板软骨细胞具有抗氧化能力,国内外未见报道。目的:观察不同生长因子对椎间盘终板软骨细胞抗氧化能力的影响。方法:将原代培养获取的终板软骨细胞后分为4组,即空白对照组、血清剥夺组、过氧化氢刺激组、过氧化氢刺激后+不同生长因子干预组。第4组再细分为胰岛素生长因子1组、碱性成纤维细胞生长因子组、转化生长因子β组、Forskolin组、维生素E组,共5个亚组,通过RT-PCR检测各组半胱氨酸蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶抑制剂1及凝血酶4、凝血酶5等基因表达情况;通过凋亡试剂盒及流式细胞仪分析不同组内细胞凋亡情况;Western blot检测细胞的合成与分泌;使用试剂盒检测总抗氧化能力和过氧化氢含量,并进行统计学分析。结果与结论:(1)不同生长因子对终板软骨细胞凋亡、分泌和抗氧化能力的影响存在差异;(2)总体来讲,转化生长因子β和Forskolin对过氧化氢刺激后的细胞具有进一步损伤作用,而胰岛素生长因子1和维生素E对损伤后的细胞存在保护作用。

关键词：椎间盘胰岛素样生长因子Ⅰ 转化生长因子β 维生素E 组织工程组织构建软骨细胞胰岛素生长因子1 碱性成纤维细胞生长因子转化生长因子 Forskolin 终板软骨细胞总抗氧化能力过氧化氢国家自然科学基金

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应用人工智能识别超广角眼底照相多病种的初步研究

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中华眼底病杂志 2022年第2期38卷 132-138页

作者：孙功鹏王晓玲徐立璋李嫦王雯钰易佐慧子郑红梅李志清陈长征武汉大学人民医院眼科中心武汉430060 武汉爱眼帮科技有限公司武汉430073 天津医科大学眼科医院、眼视光学院、眼科研究所天津市视网膜功能与疾病重点实验室天津市眼科学与视觉科学国际联合研究中心天津300384

目的构建一个小样本超广角眼底照相(UWFI)多疾病分类人工智能模型,初步探究人工智能对UWFI多病种分类任务的能力。方法回顾性研究。2016年至2021年于武汉大学人民医院眼科就诊并行UWFI检查的1123例患者的1608张图像用于UWFI多疾病分类... 详细信息

目的构建一个小样本超广角眼底照相(UWFI)多疾病分类人工智能模型,初步探究人工智能对UWFI多病种分类任务的能力。方法回顾性研究。2016年至2021年于武汉大学人民医院眼科就诊并行UWFI检查的1123例患者的1608张图像用于UWFI多疾病分类人工智能模型构建。其中,糖尿病视网膜病变(DR)、视网膜静脉阻塞(RVO)、病理性近视(PM)、视网膜脱离(RD)、正常眼底图像分别为320、330、319、268、371张。来自天津医科大学眼科医院106例患者的135张图像作为外部测试集。选取EfficientNet-B7作为主干网络,对纳入的UWFI图像进行分类分析。使用受试者工作特征曲线及曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异性、准确率评估分类模型在测试集上的表现,所有数据均使用数值及95%可信区间(CI)表达。将数据集在网络模型ResNet50、ResNet101上进行训练,并在外部测试集上进行测试,对比观察EfficientNet与上述两种模型的性能。结果UWFI多疾病分类人工智能模型在内部、外部测试集上的总分类准确率分别为92.57%(95%CI 91.13%~92.92%)、88.89%(95%CI 88.11%~90.02%)。其中,正常眼底分别为96.62%、92.59%,DR分别为95.95%、95.56%,RVO分别为96.62%、98.52%,PM分别为98.65%、97.04%,RD分别为97.30%、94.07%。在内部、外部测试集上的平均AUC分别为0.993、0.983。其中,正常眼底分别为0.994、0.939,DR分别为0.999、0.995,RVO分别为0.985、1.000,PM分别为0.991、0.993,RD分别为0.995、0.990。内部、外部测试集上EfficientNet性能均较ResNet50、ResNet101模型更佳。结论初步构建的小样本UWFI多疾病分类人工智能模型对常见眼底疾病的分类水平较高,可能具有辅助临床筛查及诊断的价值。

关键词：视网膜疾病人工智能深度学习超广角眼底照相

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有限性选择性颈椎前路减压融合术治疗老年多节段颈椎病

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实用老年医学 2017年第8期31卷 779-782页

作者：唐峰谢宁席焱海余将明王洋马俊徐立璋黄晓东上海长征医院脊柱外科上海市200003

颈椎病作为一种退变性疾病,随着人均寿命的延长,在老年病人中发病率逐渐增高。老年人颈椎病往往表现出起病隐匿,就医晚,症状重,多节段受累的特点,而且老年病人合并慢性内科疾病的比例非常高,故老年人颈椎病的手术治疗有其独特的规律[1]... 详细信息

颈椎病作为一种退变性疾病,随着人均寿命的延长,在老年病人中发病率逐渐增高。老年人颈椎病往往表现出起病隐匿,就医晚,症状重,多节段受累的特点,而且老年病人合并慢性内科疾病的比例非常高,故老年人颈椎病的手术治疗有其独特的规律[1]。现回顾分析本中心有限性选择性颈椎前路减压融合手术治疗老年人多节段颈椎病17例的治疗情况。1资料与方法1.1病例资料1.1.1一般情况：

关键词：退变性疾病颈椎前路减压手术节段椎间隙高度脊髓前方性选择后缘高度相邻节段颈椎后路颈椎前路手术

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锌修饰硅酸钙陶瓷涂层与骨整合

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中国组织工程研究 2016年第12期20卷 1704-1710页

作者：徐立璋叶晓健李恺郑学斌唐峰许鹏席焱海许国华侯春林余将明解放军第二军医大学附属长征医院骨科上海市200003 中国科学院上海市硅酸盐研究所上海市200050

背景:前期实验在钛基材表面制备了锌修饰硅酸钙陶瓷涂层,具有良好的化学稳定性及抗菌性能。目的:进一步观察锌修饰硅酸钙陶瓷涂层对骨整合的影响。方法:将锌修饰硅酸钙陶瓷涂层钛片(实验组)、硅酸钙陶瓷涂层钛片(对照组)及纯钛片(空白... 详细信息

背景:前期实验在钛基材表面制备了锌修饰硅酸钙陶瓷涂层,具有良好的化学稳定性及抗菌性能。目的:进一步观察锌修饰硅酸钙陶瓷涂层对骨整合的影响。方法:将锌修饰硅酸钙陶瓷涂层钛片(实验组)、硅酸钙陶瓷涂层钛片(对照组)及纯钛片(空白对照组)分别与前成骨细胞MC3T3-E1共同培养,检测细胞的黏附、增殖、钙化及Ⅰ型胶原和骨钙素表达。将上述3组材料分别置入新西兰大白兔股骨内,置入后1.5个月观察骨质增生及植入体与宿主骨整合情况。结果与结论:(1)体外实验:培养12 h,实验组黏附细胞数量多于对照组、空白对照组(P<0.05);培养14 d,实验组细胞增殖活性、钙结节形成能力强于对照组、空白对照组(P<0.05);培养21 d,3组细胞Ⅰ型胶原表达无差异,但实验组骨钙素表达高于对照组、空白对照组(P<0.05)。(2)体内实验:实验组骨质增生明显,涂层材料与骨界面直接接触,界面间可见新骨生成,纤维组织分隔较少;对照组可见少量骨质增生,空白对照组几乎不见骨质增生,且两组植入体表面小部分区域与宿主骨接触,大部分区域与周围的骨小梁之间有纤维组织分隔。(3)结果表明,锌修饰硅酸钙陶瓷涂层可促进钛种植体与宿主骨整合。

关键词：骨整合锌成骨细胞组织工程生物材料骨生物材料锌修饰硅酸钙陶瓷涂层 MC3T3-E1细胞成骨分化矿化国家自然科学基金

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水平振摇在骨髓间充质干细胞提纯中的作用

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脊柱外科杂志 2015年第1期13卷 45-49页

作者：王伟恒邓国英徐立璋程自申杨向群叶晓健第二军医大学附属长征医院骨科上海200003

目的研究水平振摇对全骨髓贴壁分离大鼠骨髓间充质干细胞在细胞数量、纯度、凋亡及远期增殖及分化能力的影响,探索更为简单、高效的间充质干细胞提纯方法。方法在全骨髓贴壁法的基础上,使用水平摇床,以180 r/min、4 h为干预条件,水平振... 详细信息

目的研究水平振摇对全骨髓贴壁分离大鼠骨髓间充质干细胞在细胞数量、纯度、凋亡及远期增殖及分化能力的影响,探索更为简单、高效的间充质干细胞提纯方法。方法在全骨髓贴壁法的基础上,使用水平摇床,以180 r/min、4 h为干预条件,水平振摇后计算贴壁细胞总数量;使用流式细胞仪测定贴壁细胞纯度及凋亡情况;使用MTT法测定振摇后贴壁细胞24 h的增殖情况;对分离纯化后细胞使用定向诱导培养基进行诱导分化。结果经振摇处理后,获得的细胞总量有所下降,细胞纯度显著提升,凋亡略有增加,增殖情况变化不大,具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的能力。结论水平振摇法可显著提高全骨髓贴壁法的提纯效率,具有推广价值。

关键词：大鼠骨髓间质干细胞分离和提纯

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