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自蔓延法制备陶瓷复合材料

大连理工大学学报 1995年第2期35卷 242-244页

作者：赵金龙周文龙季首华徐延伟大连理工大学铸造工程研究中心

自蔓延法制备陶瓷复合材料赵金龙，周文龙，季首华，徐延伟（大连理工大学铸造工程研究中心１１６０２４）关键词：陶瓷复合材料／自蔓延高温合成；三氧化二铝；碳化钛；硼二钛分类号：ＴＢ３３２自蔓延高温合成（ＳＨＳ）方法是由前苏... 详细信息

自蔓延法制备陶瓷复合材料赵金龙，周文龙，季首华，徐延伟（大连理工大学铸造工程研究中心１１６０２４）关键词：陶瓷复合材料／自蔓延高温合成；三氧化二铝；碳化钛；硼二钛分类号：ＴＢ３３２自蔓延高温合成（ＳＨＳ）方法是由前苏联科学家Ｍｅｒｚｈａｎｏｖ在１９６...

关键词：陶瓷复合材料自蔓延高温合成

禽呼肠孤病毒σC蛋白在毕赤酵母中的表达及免疫保护性研究

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禽呼肠孤病毒σC蛋白在毕赤酵母中的表达及免疫保护性研究

作者：徐延伟中国农业科学院

学位级别：硕士

禽呼肠孤病毒感染（Avian reovirus infection）是由禽呼肠孤病毒（Avian reovirus，ARV）引起的，主要引起雏鸡的病毒性关节炎和腱鞘炎，此外还与鸡的呼吸道病、肠道病、肉鸡矮小综合征、暂时性消化系统紊乱和吸收障碍综合征等病症有... 详细信息

禽呼肠孤病毒感染（Avian reovirus infection）是由禽呼肠孤病毒（Avian reovirus，ARV）引起的，主要引起雏鸡的病毒性关节炎和腱鞘炎，此外还与鸡的呼吸道病、肠道病、肉鸡矮小综合征、暂时性消化系统紊乱和吸收障碍综合征等病症有一定的联系，是一类危害较为严重的禽免疫抑制病。为了进行ARV亚单位疫苗的探索，本次研究根据已公布的ARV S1133病毒基因组序列设计扩增引物，以从感染ARV S1133病毒的鸡胚尿囊液中提取的病毒RNA反转录的cDNA为模板扩增σC基因，将σC基因克隆至pPIC9K酵母表达载体当中，构建pPIC9K-σC重组表达质粒。将pPIC9K-σC重组表达质粒中提后用SalⅠ酶切线性化，电转化毕赤酵母宿主菌GS115，经MD平板及YPD G418抗性平板筛选后挑取阳性克隆进行PCR鉴定，获得重组酵母菌株pPIC9K-σC/GS115。对阳性重组菌进行小量诱导表达，表达产物经SDS-PAGE、Western-blot分析，结果表明σC蛋白在毕赤酵母中获得分泌表达，表达产物以单体和三聚体形式存在，与兔源σC多克隆抗体及病毒多抗有良好的反应活性，分泌表达量达到42mg/L。为了进一步提高σC重组蛋白的表达量，本研究从宿主菌，插入基因拷贝数及发酵过程三个方面对ARV σC蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达条件进行了优化。宿主菌株上选择了KM71和GS115进行了MutS和Mut+表型表达量之间的比较;拷贝数上对增加拷贝数是否对基因的表达量有所提高进行了探索，构建了pPICZαC-σC重组表达质粒，转化已构建好的pPIC9K-σC/GS115宿主菌，经过Zeocin抗性筛选获得了pPIC9K-ZαC-σC/GS115宿主菌，与pPIC9K-σC/GS115宿主菌进行了表达量的对比;在表达条件上对发酵过程中的温度、pH进行了初步的探索。结果显示GS115宿主菌株的表达量普遍高于KM71宿主菌株，说明Mut+表型更利于蛋白的表达;pPIC9K-ZαC-σC/GS115宿主菌的表达量高于pPIC9K-σC/GS115宿主菌的表达量，说明提高基因的拷贝数有利于σC蛋白的表达;对发酵条件的优化结果显示在发酵过程中菌株的最佳表达温度为30℃，最佳pH值为7.0。优化后的σC重组蛋白的表达量达到540mg/L，为ARV σC蛋白的工业化大规模发酵奠定了基础。将毕赤酵母表达的重组σC蛋白用法国佐剂乳化后，以80μg/只肌肉注射3周龄SPF鸡，四周后进行二免，每周采集血清检测抗体滴度。结果表明，抗体水平于二免后迅速升高，二免后2周达到高峰，抗体阳性率为87.5%，二免后第2周至二免后17周平均抗体滴度在5000至7000之间，未见有明显下降。血清中和试验表明免疫之后的血清能够中和病毒，中和效价能够达到1:1000。一免后四周的攻毒试验表明σC蛋白可以阻止ARV在体内的复制，且能够对感染病毒进行清除。综上所述，本研究将ARV σC蛋白在毕赤酵母中进行了分泌表达，表达产物免疫原性良好，可以诱导机体产生保护性免疫反应，为ARV的诊断试剂和亚单位疫苗的研制奠定了基础。

关键词：禽呼肠孤病毒（ARV）毕赤酵母分泌表达表达优化 σC蛋白免疫

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化学汽相沉积TiN-TiC涂层耐磨性研究

大连理工大学学报 1990年第5期30卷 615-620页

作者：任连伟周秀璠王永辉徐延伟大连理工大学基础课教学部大连理工大学铸造工程研究中心

化学汽相沉积(Chemical Vapor Deposition,简称 CVD)是利用某些气体在高温下的固体表面进行化学反应,生成涂层。将一些硬度高、化学稳定性好的陶瓷材料沉积到硬质合金、工具钢等材料表面,制备涂层,已成为当前重要的发展技术之一。1 沉... 详细信息

化学汽相沉积(Chemical Vapor Deposition,简称 CVD)是利用某些气体在高温下的固体表面进行化学反应,生成涂层。将一些硬度高、化学稳定性好的陶瓷材料沉积到硬质合金、工具钢等材料表面,制备涂层,已成为当前重要的发展技术之一。1 沉积过程1.1预处理通用拉丝模是由韧性较好的硬质合金YG8制成模芯,压入45#钢套中,然后进行粗磨、精磨、抛光等工序制成,再经除油污、除锈等净化处理后干燥待用。1.2 沉积沉积装置见图1,将装有干净拉丝模(基体)的反应室封闭,N2置换后加热至H2还原温度,还原20min,WZK可控硅温度控制器控温,升温至反应温度。H2和N2经净化后进入TiC

关键词： CVD 涂层耐磨性拉丝模 TiN TiC

猪圆环病毒2型ORF2基因在Sf9细胞中表达及免疫原性研究

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畜牧与兽医 2015年第2期47卷 85-88页

作者：朱鹏张小飞徐延伟尹秀凤安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所江苏南京211102

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳(Cap)蛋白。将优化合成的PCV2 ORF2基因克隆到杆状病毒转移载体p Fast HTA中,并将鉴定正确的重组质粒p Fast HTA-Cap2转化至大肠杆菌感受态细胞,经蓝白斑筛选得到含有目的... 详细信息

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳(Cap)蛋白。将优化合成的PCV2 ORF2基因克隆到杆状病毒转移载体p Fast HTA中,并将鉴定正确的重组质粒p Fast HTA-Cap2转化至大肠杆菌感受态细胞,经蓝白斑筛选得到含有目的基因的重组杆状病毒质粒(r Bac-Cap2),转染至Sf9细胞,获得重组杆状病毒,对感染重组杆状病毒的细胞培养物进行重组蛋白的表达,进行SDS-PAGE和Western blot分析,并对表达的重组蛋白进行小鼠免疫试验及其病毒血清中和试验。SDS-PAGE分析表明,优化合成的PCV2 ORF2基因得到表达,蛋白分子质量大小为33 ku;Western blot证实重组蛋白能够识别抗PCV2阳性血清,表明重组蛋白具有反应原性;小鼠免疫试验结果显示,该蛋白能刺激机体产生特异性抗体,具有较好的免疫原性;病毒血清中和试验证实,抗PCV2 Cap血清抗体具有中和病毒的活性,中和效价为1∶42。该蛋白在杆状病毒系统中的成功表达,为PCV2感染的诊断及亚单位疫苗的研制奠定基础。

关键词：猪圆环病毒2型重组Cap蛋白免疫原性中和活性

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微型计算机的基础知识

铸造设备与工艺 1984年第3期 71-76页

作者：徐延伟大连工学院机械系

一、简介自从1946年世界上出现第一台电子数字计算机以来,计算机的科学发展十分迅速,按照组成计算机的电子器件来划分,至今经历了电子管,晶体管,集成电路和大规模集成电路器代的演变。计算机发展的一个明显趋势是体积越来越小,价格越来... 详细信息

一、简介自从1946年世界上出现第一台电子数字计算机以来,计算机的科学发展十分迅速,按照组成计算机的电子器件来划分,至今经历了电子管,晶体管,集成电路和大规模集成电路器代的演变。计算机发展的一个明显趋势是体积越来越小,价格越来越低。以大规模集成电路(LSI)为基础的微型计算机正因为具有体积小,价格低廉,耗电量少等显著优点,自1971年问世以来,得到了迅速发展,已成为现代电子计算机的一个重要发展方向。

关键词：微型计算机个人电脑电子数字计算机存贮器存储器寄存器计算机内部总线微机系统计算机系统程序计数器指令计数器

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冷却机扬料板新型耐热抗磨材料的研究

大连理工大学学报 1984年第2期 43-48页

作者：徐延伟聂永福大连工学院铸工教研室

本文研究了在高温（７００—９００℃）磨料环境下应用的耐热抗磨材料。采用Ｃｒ，Ａｌ，Ｓｉ等多元合金化的方法获得的新合金，具有较好的高温抗氧化及抗磨损性能；与Ｃｒ２５Ｎｉ２０耐热合金钢相比，铬含量较低；不含镍。用该合金... 详细信息

本文研究了在高温（７００—９００℃）磨料环境下应用的耐热抗磨材料。采用Ｃｒ，Ａｌ，Ｓｉ等多元合金化的方法获得的新合金，具有较好的高温抗氧化及抗磨损性能；与Ｃｒ２５Ｎｉ２０耐热合金钢相比，铬含量较低；不含镍。用该合金制成的水泥冷却机扬料板，经生产运转试验，寿命比球铁扬料板提高５—６倍，使用成本降低３０－５０％。

关键词：抗磨材料球铁磨损量高温磨料磨损冷却机扬料板

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有效提问精彩课堂

禽网状内皮组织增生病病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立及应用

都市家教(下半月) 2017年第8期 70-71页

作者：徐延伟浙江省兰溪市外国语中学

课堂是实施教学的主要渠道,提问是课堂教学的有效方式之一.精心预设的问题,能使教学效率大大提高,达到启发学生心智,培养学生能力,促进学生发展的目的.本文将从课堂的各个环节和提问技巧等方面阐述作者在课堂提问方面所做的一些实践和思考.

关键词：提问有效性

来源：博看期刊评论

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中国兽医科学 2010年第11期40卷 1137-1141页

作者：李凯高宏雷高立祁小乐高玉龙徐延伟王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

根据GenBank中禽网状内皮组织增生病病毒(REV)基因组序列设计1对针对REVgp90基因的引物和1条特异性TaqMan探针,建立了一种快速检测REV病毒载量的TaqMan荧光定量PCR方法。通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在1×101～1×108copi... 详细信息

根据GenBank中禽网状内皮组织增生病病毒(REV)基因组序列设计1对针对REVgp90基因的引物和1条特异性TaqMan探针,建立了一种快速检测REV病毒载量的TaqMan荧光定量PCR方法。通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在1×101～1×108copies/μL范围内具有良好的线性关系,灵敏度达到10copies/μL,是常规PCR方法的100倍,该方法与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复性试验变异系数均小于2%。用REV HLJR0901株人工感染1日龄SPF雏鸡,定期剖检,对感染鸡体内各器官的病毒分布及载量进行检测,结果表明,在肝、脾、法氏囊、胸腺和腺胃中均可检测到病毒,其病毒载量并无明显差异。本研究结果表明,该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于REV的定量检测,为该病毒的诊断及致病性的研究提供了技术手段。

关键词：禽网状内皮组织增生病病毒荧光定量聚合酶链反应 TaqMan探针

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计算机在铸造生产中的应用

铸造设备与工艺 1984年第3期 1-2页

作者：徐延伟铸工教研室

近年来计算机技术已得到迅速发展,在工农业生产和生活领域中发挥着巨大作用。从1971年微处理机诞生以来,计算机的应用领域进一步扩大,它已成为各国工业发展水平的标志。在铸造生产中计算机技术也正在逐步扩大应用,其主要范围有以下几方面:

关键词：计算机领域铸造生产铸造机械