检索结果-南通市图书馆

定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质病毒突变的荧光MAPREC法的建立和应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

药物分析杂志 2018年第2期38卷 288-292页

作者：徐康维张平英志芳何蕊王剑锋江征李长贵中国食品药品检定研究院北京100050 北京天坛生物制品有限公司北京100176

目的:使用荧光标记代替同位素标记,建立定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒472位U到C突变比例的MAPREC(mutant analysis by PCR and restriction enzyme cleavage)法。方法:提取病毒样品RNA,反转录合成c DNA后进行非对称PCR反应以生成单... 详细信息

目的:使用荧光标记代替同位素标记,建立定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒472位U到C突变比例的MAPREC(mutant analysis by PCR and restriction enzyme cleavage)法。方法:提取病毒样品RNA,反转录合成c DNA后进行非对称PCR反应以生成单链DNA扩增产物,之后采用荧光标记引物进行扩增,合成双链产物,以突变位点敏感的限制性内切酶作用后电泳分离,并分析样品的突变比例。结果:采用建立的方法对4个国际标准品进行检测,100%DNA突变标准品、IS DNA标准品、LMVR标准品以及HMVR标准品的标示值分别为100%、0.9%、0.7%、1.1%,检测结果分别为95.59%、0.84%、0.68%、1.07%,与其标示值一致性良好,并且不同实验间RSD均小于15%。检测9个批次样品,结果突变率均小于1%,符合WHO要求。结论:初步建立了基于荧光素标记的MAPREC方法,可以代替同位素法进行病毒突变的定量检测。

关键词： MAPREC 脊髓灰质炎病毒疫苗荧光标记突变率

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

流感病毒中和抗体检测方法的建立及验证

中国生物制品学杂志 2014年第9期27卷 1199-1201,1206页

作者：赵慧江征李娟刘书珍邵铭徐康维李长贵中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的建立检测流感病毒中和抗体效价的微量病毒中和法(microneutralization tests,MNT),并进行验证。方法建立改进的微孔板病毒中和法,并对该方法的关键影响因素(不同代次MDCK细胞和细胞培养板边缘效应)以及方法的准确性和精密性进行验证... 详细信息

目的建立检测流感病毒中和抗体效价的微量病毒中和法(microneutralization tests,MNT),并进行验证。方法建立改进的微孔板病毒中和法,并对该方法的关键影响因素(不同代次MDCK细胞和细胞培养板边缘效应)以及方法的准确性和精密性进行验证;采用改进的微孔板病毒中和法和血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)试验分别检测甲型H1N1流感疫苗免疫的血清样本85人份,分析两种方法检测结果的相关性。结果采用改进的微孔板病毒中和法,用不同代次MDCK细胞(25、30、35代)以及在细胞培养板不同位置(边缘孔、非边缘孔)检测相同的血清样本的中和抗体滴度结果相同;该方法准确性和精密性良好;改进的微孔板病毒中和法和HI法测定甲型H1N1流感疫苗免疫后血清抗体效价结果的相关系数为0.81,表明两种方法的检测结果之间呈良好的正相关性。结论建立的微量病毒中和法可满足流感病毒中和抗体效价检测的要求,可用于评价疫苗的免疫效果。

关键词：流感病毒中和抗体微量病毒中和法血凝抑制试验

2009～2016年脊髓灰质炎灭活疫苗批签发汇总及质量分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2018年第1期31卷 97-99,105页

作者：王剑锋英志芳徐康维江征李长贵中国食品药品检定研究院北京100050

脊髓灰质炎（简称脊灰）是由脊灰病毒引起的一种急性肠道传染病,口服脊灰减毒活疫苗（oral poliovirus vaccine,OPV）对控制和消灭脊灰作出了巨大贡献。但OPV使用后有极低的概率引起疫苗相关麻痹型脊灰（vaccine associated paralytic p... 详细信息

脊髓灰质炎（简称脊灰）是由脊灰病毒引起的一种急性肠道传染病,口服脊灰减毒活疫苗（oral poliovirus vaccine,OPV）对控制和消灭脊灰作出了巨大贡献。但OPV使用后有极低的概率引起疫苗相关麻痹型脊灰（vaccine associated paralytic poliomyelitis,VAPP）和疫苗衍生脊灰病毒（vaccine deri-ved poliovirus，VDPV）

关键词：脊灰灭活疫苗批签发 D抗原含量质量分析

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原国家标准品的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2018年第1期31卷 52-54,58页

作者：英志芳江征蔡玮周健王剑锋徐康维李长贵中国食品药品检定研究院呼吸道病毒疫苗室北京100050 中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650503

目的制备Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原国家标准品,并进行协作标定及稳定性检测。方法委托中国医学科学院医学生物学研究所按照国家批准工艺制备分装三价候选国家标准品,并考察其均匀性;组织5家实验室采用统一的D抗原ELISA检测方法对... 详细信息

目的制备Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原国家标准品,并进行协作标定及稳定性检测。方法委托中国医学科学院医学生物学研究所按照国家批准工艺制备分装三价候选国家标准品,并考察其均匀性;组织5家实验室采用统一的D抗原ELISA检测方法对候选标准品协作标定,确定D抗原标示值,并对其稳定性进行初步检测。结果候选标准品分装精度变异系数(CV)为0.21%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型CV值分别为7.39%、6.21%、7.75%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型在不同实验室间D抗原含量的CV值分别为4.03%~5.90%、3.48%~4.00%、3.03%~4.53%,抗原含量均一性良好;确定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型最终标准品效价分别为180、191、243 DU/m L。将标准品于4及-20℃放置4个月,3个血清型的D抗原含量均未发生较大变化;25℃放置约7周时,各血清型D抗原含量才出现下降趋势;37℃放置1周时开始下降,尤以Ⅰ型最为明显。结论制备的候选标准品满足国家生物标准物质的要求,可应用于Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗体外效力检测。

关键词： Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗 D抗原标准品

sIPV疫苗D抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2023年第10期36卷 1230-1234,1241页

作者：徐康维朱文慧宋彦丽英志芳王剑锋权娅茹李长贵中国食品药品检定研究院国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室北102629 北京市药品检验研究院病毒疫苗室北京102206

目的建立牛多抗对兔多抗夹心ELISA方法检测Sabin株脊灰病毒灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus Vaccine,sIPV)D抗原含量,并对建立的方法进行验证。方法分别采用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV疫苗原液作为抗原制备兔多抗,并通过间接EL... 详细信息

目的建立牛多抗对兔多抗夹心ELISA方法检测Sabin株脊灰病毒灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus Vaccine,sIPV)D抗原含量,并对建立的方法进行验证。方法分别采用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV疫苗原液作为抗原制备兔多抗,并通过间接ELISA法检测其效价及特异性。以牛多抗为包被抗体、兔多抗为显示抗体建立检测D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,并对方法的准确度、精密度及D抗原专属性进行验证。用建立的方法检测国内5家企业sIPV疫苗样品。结果制备获得型别特异性好、效价高的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型兔多抗,并成功建立了双抗体夹心ELISA方法。采用四参数拟合,3型别标准曲线均具有良好的线性关系,R^(2)均>0.99。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型各试验加标回收率均为80%~120%,各浓度平均回收率分别为98.11%、97.41%、98.66%;重复性与中间精密度CV均<10%;能够对D/C抗原进行区分。建立的方法对5家企业生产的sIPV疫苗均能够进行D抗原定量检测。结论成功建立了检测sIPV疫苗D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,该方法准确度、精密度良好,具有一定的D抗原特异性,能够对不同厂家生产的疫苗进行检测。

关键词： Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗 D抗原酶联免疫吸附试验抗体

AA-PR8冷适应流感病毒疫苗株在小鼠中的保护作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2022年第9期35卷 1040-1044页

作者：徐康维郭航炜李星星谢莹权娅茹赵慧李长贵中国食品药品检定研究院国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室北京102629

目的将AA-PR8冷适应流感病毒疫苗株免疫小鼠,检测小鼠IgG和IgA抗体产生情况,并对免疫后小鼠进行PR8流感病毒攻击,评价其保护效果。方法用AA-PR8冷适应流感病毒疫苗株滴鼻免疫小鼠2次,免疫间隔21 d,分别于第1次免疫后0、7、14、21、28、3... 详细信息

目的将AA-PR8冷适应流感病毒疫苗株免疫小鼠,检测小鼠IgG和IgA抗体产生情况,并对免疫后小鼠进行PR8流感病毒攻击,评价其保护效果。方法用AA-PR8冷适应流感病毒疫苗株滴鼻免疫小鼠2次,免疫间隔21 d,分别于第1次免疫后0、7、14、21、28、35和42 d采集小鼠血清和肺泡灌洗液,间接ELISA法检测IgG和IgA抗体效价。对采用1次免疫或0、14 d 2次免疫程序的小鼠进行5倍半数致死剂量的PR8流感病毒攻击,观察攻击后小鼠死亡情况及体重变化,攻击后第3天取小鼠肺脏,检测病毒载量。结果小鼠第1次免疫后7、14和21 d,血清IgG抗体GMT分别为152、230和264,肺泡灌洗液IgA抗体GMT分别为23、211和92;第2次免疫后7、14和21 d,血清IgG抗体GMT分别为348、919和1056,肺泡灌洗液IgA抗体GMT分别为53、368和160。免疫1次后14 d进行攻击,小鼠保护率为83.33%(5/6),体重降低幅度减少,肺脏病毒载量显著降低;0、14 d免疫2次后14 d进行攻击,小鼠保护率为100%(6/6),体重基本不降低,肺脏未检测到病毒。结论AA-PR8冷适应流感病毒疫苗株在小鼠中具有良好的免疫原性,显著降低小鼠AA-PR8流感病毒攻击后的肺脏病毒载量,提高了生存率。

关键词：流感疫苗冷适应流感病毒 IgG抗体 IgA抗体

新型冠状病毒高效价中和血清的快速制备及应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2020年第8期33卷 918-920页

作者：徐康维王剑锋权娅茹邵铭赵慧李长贵王军志中国食品药品检定研究院呼吸道病毒疫苗室北京102629

目的制备新型冠状病毒高效价中和血清。方法使用重组表达的新型冠状病毒RBD蛋白作为免疫原,免疫SPF级家兔,制备抗血清。通过ELISA和微量中和试验检测抗血清效价。将制备的抗血清分发至我国多家新冠灭活疫苗研发企业,检测抗血清效价。结... 详细信息

目的制备新型冠状病毒高效价中和血清。方法使用重组表达的新型冠状病毒RBD蛋白作为免疫原,免疫SPF级家兔,制备抗血清。通过ELISA和微量中和试验检测抗血清效价。将制备的抗血清分发至我国多家新冠灭活疫苗研发企业,检测抗血清效价。结果经3次免疫后,抗血清的ELISA效价大于160万,中和效价为8192。5家企业返回微量中和效价检测结果的几何平均效价为6950。结论成功制备了新型冠状病毒高效价中和血清,并分发至我国多家新型冠状病毒灭活疫苗生产企业用于毒株鉴别及外源病毒因子检测,解决了制约疫苗快速研发的技术瓶颈。

关键词：新型冠状病毒抗血清毒株鉴别外源病毒因子

SDS-PAGE荧光染色法测定单价流感疫苗血凝素含量

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

SDS-PAGE荧光染色法测定单价流感疫苗血凝素含量

2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：徐康维邵铭刘书珍李长贵王军志中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的建立蛋白定量结合电泳后荧光染色的方法检测单价流感疫苗中血凝素含量。方法在前期研究的基础上,采用PAGE后荧光染色方法,测定HA在总蛋白中比例,并与考马斯亮蓝染色方法进行了对比。结果荧光染色法与考马斯亮蓝染色法计算得出HA条...

目的建立蛋白定量结合电泳后荧光染色的方法检测单价流感疫苗中血凝素含量。方法在前期研究的基础上,采用PAGE后荧光染色方法,测定HA在总蛋白中比例,并与考马斯亮蓝染色方法进行了对比。结果荧光染色法与考马斯亮蓝染色法计算得出HA条带比例基本一致。结论本研究建立的荧光法与考马斯亮蓝染色法一致性良好,且灵敏度更高,能够用于单价流感疫苗成品的效力检测。

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品的建立

流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品的建立