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尿液中外泌体糖蛋白检测在膀胱癌无创诊断中的前瞻性对照研究

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尿液中外泌体糖蛋白检测在膀胱癌无创诊断中的前瞻性对照研究

作者：徐希中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

【背景】作为泌尿系统中常见的恶性肿瘤,膀胱癌根据不同的病理分期分为非肌层浸润性膀胱癌(Non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌(Muscle invasive bladder cancer,MIBC)。初诊膀胱癌患者中,大约70%为NMIBC,NM... 详细信息

【背景】作为泌尿系统中常见的恶性肿瘤,膀胱癌根据不同的病理分期分为非肌层浸润性膀胱癌(Non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌(Muscle invasive bladder cancer,MIBC)。初诊膀胱癌患者中,大约70%为NMIBC,NMIBC的5年复发率高达31%-78%,并且17%-45%的病例在5年内可进展为MIBC,给患者和社会带来沉重的经济负担。外泌体作为细胞外囊泡(Extracellular vesicle,EV)的一种,由细胞内生成的多囊泡体与细胞膜融合形成前体,通过出胞的方式分泌至胞外的双膜结构囊泡。外泌体通过携带DNA、RNA、mi RNA、非编码RNA和蛋白质等,实现细胞间生物信息的交换和传递。与正常组织相比,膀胱癌细胞衍生的外泌体所携带的蛋白质存在差异性表达,对膀胱癌的诊断具有潜在价值。通过检测尿液中外泌体糖蛋白成分,并利用生物信息学分析,可以用于诊断膀胱癌。相比尿液脱落细胞学检查,这种方法有着耗时较少、检测标志物种类多、易定量、数据客观等优势。通过这种检测方法,有希望对膀胱癌进行早期诊断。【目的】通过蛋白组学的技术检测膀胱癌患者尿液中外泌体糖蛋白的差异分子,筛选确定膀胱癌诊断标志物,并得出敏感性和特异性。【材料与方法】1.高速离心法进行外泌体分离后,进行一系列的表征检测,包括透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM)观察形态、纳米微粒追踪分析(Nanoparticle tracking analysis,NTA)探测粒径大小、蛋白质印迹(Western blot,WB)验证蛋白表达情况。2.选取膀胱癌患者3例和健康对照组3例,质谱技术检测尿液中外泌体来源的蛋白种类和浓度,使用外泌体标志性蛋白质中的FLOT1、FLOT2等Marker进行鉴定。将3例膀胱癌患者尿液中鉴定到的外泌体蛋白质进行汇总后,与外泌体数据库Exocarta进行比对分析。3.选取5例膀胱癌血尿患者,新鲜尿液于4℃,2000rpm,5min离心4次,每次离心完成后尿沉渣涂片镜检(400X)。选取3例膀胱癌血尿患者,选取孔径为5μm的滤膜,对尿液进行过滤,每次过滤完成后尿沉渣涂片镜检(400X)。4.选取1例膀胱癌血尿患者,将尿液等分成3份,分为不处理组、离心组、过滤组,检测蛋白种类和浓度。选取6例膀胱癌血尿患者,分为血尿处理组和不处理组,检测蛋白质种类和数量。5.选取膀胱癌组29人、泌尿系统良性疾病组36人、泌尿系统其他恶性肿瘤组27人、健康对照组21人,质谱法检测尿液中外泌体蛋白分布情况,绘制热图。6.通过质谱技术,以相对量比值大于2或小于1/2分析膀胱癌组与健康对照组相比的差异蛋白,基因本体论(Gene oncology,GO)描绘成分和与进程情况,京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)描绘参与通路情况,绘制差异蛋白间相互作用(Protein-protein interaction,PPI)网络图,筛选出位于核心位置含糖基的差异蛋白补体C1子成分(Complement C1 subcomponent,C1S)、胰蛋白酶间抑制剂重链H2(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H2,ITIH2)、对氧磷酶1(paraoxonase 1,PON1)、补体C1q子成分亚基A(Complement C1q subcomponent subunit A,C1QA)、角蛋白I型细胞骨架20(Keratin,type I cytoskeletal20,K1C20)分子组合。7.通过WB法,验证差异糖蛋白分子组合在膀胱癌患者及健康对照组各50例中的灵敏度与特异度,描绘出受试者工作特征(Receiver operator characteristic,ROC)曲线。【结果】1.本研究分离的外泌体具有典型的囊泡状结构,直径约100nm,且表达外泌体经典的标志物CD63、TSG101。2.3例膀胱癌与健康对照组外泌体来源蛋白数量和强度明显不同,3例膀胱癌中有907个相同的蛋白,其中773个蛋白在Exocarta数据库中。3.血尿是膀胱癌常见的临床表现,经过4次高速离心或1次5um滤膜过滤后,尿液中红细胞数量明显减少。处理前血尿中检测到的蛋白种类为1518种,离心后为1429种,过滤后为1471种。血尿处理组和不处理组蛋白的种类和数量存在明显差别。4.热图显示膀胱癌、泌尿系统良性疾病组、泌尿系统其他恶性肿瘤组、健康对照组的蛋白来源存在差别。膀胱癌组与健康对

关键词：膀胱癌外泌体糖蛋白血尿生物标志物

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清代白族诗人师范对杜甫诗歌的接受

民族文学研究 2024年第3期42卷 154-165页

作者：吕祥徐希平西南民族大学中国语言文学学院西华师范大学

清代白族文人的少数民族汉语诗文创作比较突出。白族文人对杜甫诗歌的接受,充分体现他们对中华传统经典文化的认同。师范是清代诗坛具有代表性的白族诗人,受当时诗坛崇杜思潮的影响,加之其与杜高度契合的人生际遇和人生理想,其诗歌创作... 详细信息

清代白族文人的少数民族汉语诗文创作比较突出。白族文人对杜甫诗歌的接受,充分体现他们对中华传统经典文化的认同。师范是清代诗坛具有代表性的白族诗人,受当时诗坛崇杜思潮的影响,加之其与杜高度契合的人生际遇和人生理想,其诗歌创作效法杜甫明显,承继关系突出。探究师范对杜甫诗歌的接受,不仅丰富了杜甫诗歌接受史的少数民族篇章,还可从文学比较研究中揭示中华各民族间内在的共同体属性,对铸牢中华民族共同体意识有着重要的现实意义。

关键词：清代师范杜甫诗歌接受

碳纳米管增强Ti-24Nb-4Zr-2.5Mn合金的制备及微观结构与性能研究

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碳纳米管增强Ti-24Nb-4Zr-2.5Mn合金的制备及微观结构与性能研究

作者：徐希伟成都大学

学位级别：硕士

亚稳态β钛合金因具有高比强度和良好的生物相容性,被广泛应用于航天航空、医学等领域。但亚稳态β钛合金的强度和硬度较低,制约了其在生物医用领域的应用。因此本研究选用高强度、刚度的碳纳米管（CNTs）作为增强材料,提高合金的强度... 详细信息

亚稳态β钛合金因具有高比强度和良好的生物相容性,被广泛应用于航天航空、医学等领域。但亚稳态β钛合金的强度和硬度较低,制约了其在生物医用领域的应用。因此本研究选用高强度、刚度的碳纳米管（CNTs）作为增强材料,提高合金的强度与耐磨性。本研究采用机械球磨与放电等离子烧结结合制备出CNTs增强Ti-24Nb-4Zr-2.5Mn（CNTs/TNZM）合金,并系统研究了碳纳米管的添加含量与方式和烧结工艺以及在机械球磨过程中的球磨介质、Nb粒径等对CNTs/TNZM合金的组织结构和力学性能的影响,并将最优制备工艺下的CNTs/TNZM合金放置于模拟人体体液中进行耐腐蚀性能研究。主要研究成果如下:（1）探究了碳纳米管的添加方式（分步添加、直接添加）与添加含量（0.2 wt%、0.4 wt%、0.6 wt%、0.8 wt%）以及烧结温度对合金的微观组织和性能的影响。结果表明,在球磨制粉时直接添加CNTs较分步添加CNTs对合金的力学性能提升更为明显,CNTs在合金基体中分布更加均匀,减少了碳纳米管的团簇现象。CNTs添加含量为0.4 wt%时力学性能相对较优。另外,提高烧结温度可以有效促进Nb元素的固溶,但会造成CNTs与Ti反应更加剧烈,生成更多的高硬度的Ti C相,降低合金的塑性。在此工艺下直接添加0.4 wt%的CNTs在1050℃烧结制备的CNTs/TNZM合金性能最佳。（2）研究了制备过程中球磨介质（无水乙醇、硬脂酸）和Nb单质粉末粒径（15μm、1～3μm、1μm）对TNZM合金的微观组织和力学性能的影响。研究表明,无水乙醇、硬脂酸作为球磨介质可以促进Nb固溶,但会在合金中引入FCC相,导致弹性模量的升高。采用1～3μm的Nb粉制备的合金在1100℃进行烧结可以实现Nb完全固溶,力学性能更为优异,降低了烧结温度。此时添加0.8 wt%的碳纳米管制备的CNTs/TNZM合金的力学性能相对较优,极限拉伸强度为1142 MPa,延伸率为9.5%,弹性模量为88.6GPa,硬度为346.8±12 HV。（3）采用电化学方法对商用纯钛、TNZM合金（TNZM-1100）和相对其他合金弹性模量更低的添加了0.4 wt%CNTs的TNZM合金（0.4C/TNZM-1100）在Ringers’溶液中进行耐蚀性研究。研究结果表明,0.4C/TNZM-1100的腐蚀电位（-0.287 V）更接近正值,具有更低的腐蚀倾向。商用纯钛具有更低的腐蚀电流密度（34.78 n A/cm）。TNZM合金腐蚀形貌较浅没有观察到明显的点蚀和腐蚀坑。三种合金在Ringers’溶液中的低腐蚀电位和低腐蚀电流密度表明其满足作为生物医用植入材料的要求。

关键词： CNTs/TNZM合金力学性能微观组织弹性模量

北半球高纬度多年冻土区对全球野火燃烧碳排放的贡献

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中国科学:地球科学 2024年第10期54卷 3292-3304页

作者：朱星儒徐希燕贾根锁中国科学院大气物理研究所东亚区域气候-环境重点实验室中国科学院大学地球与行星科学学院

野火是多年冻土区生态系统的主要扰动形式之一,近年来有逐渐增强的趋势.多年冻土区的野火不仅燃烧地上和地下有机质,还会促进冻土融化,从而向大气中释放大量二氧化碳、甲烷等温室气体,但目前对于北半球高纬度多年冻土区对全球野火燃烧... 详细信息

野火是多年冻土区生态系统的主要扰动形式之一,近年来有逐渐增强的趋势.多年冻土区的野火不仅燃烧地上和地下有机质,还会促进冻土融化,从而向大气中释放大量二氧化碳、甲烷等温室气体,但目前对于北半球高纬度多年冻土区对全球野火燃烧碳排放贡献的认识仍然有限.本研究利用卫星遥感与地面观测资料相结合的野火燃烧碳排放数据,分析了21世纪以来北半球高纬度多年冻土区地上和地下燃料燃烧分别对全球野火燃烧碳排放的贡献及其时空变化特征.研究发现, 2002～2020年期间,多年冻土区生态系统约贡献全球野火燃烧碳排放的11.96%,其中地上燃烧碳排放约贡献全球地上野火燃烧碳排放的3.94%、地下燃烧碳排放约贡献全球地下燃烧碳排放的63.57%.整个北半球高纬度多年冻土区对全球的贡献在7月和8月增加最为显著,而连续冻土区(冻土覆盖范围大于90%的区域)则在6月和7月增加最为显著.北半球高纬度多年冻土区的地上和地下燃烧对全球的野火燃烧排放量贡献都在增加,主要是因为全球的燃烧排放总量在减少,而北半球高纬度多年冻土区的野火燃烧排放量在增加,其中连续冻土区燃烧排放量的增加和对全球贡献的增长最为显著.本研究强调了北半球高纬度多年冻土区野火,尤其是地下生物质燃烧导致的碳排放,对全球燃烧碳排放的重要贡献.野火导致的多年冻土区有机碳分解和燃烧向大气中释放更多的温室气体,进而可能增强大气温室气体累积和气候变暖之间的正反馈效应.

关键词：野火多年冻土碳排放气候变化地下燃料消耗

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2型糖尿病患者使用预混胰岛素治疗效果不佳转换为德谷门冬双胰岛素1例

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中华糖尿病杂志 2024年第Z1期16卷 56-58页

作者：倪怀文徐希坤山东省临沂市兰陵县人民医院内分泌科临沂

回顾性分析山东省临沂市兰陵县人民医院内分泌科收治的1例2型糖尿病患者应用德谷门冬双胰岛素替代预混胰岛素的诊疗过程, 并进行文献复习。患者为中年男性, 主因"发现血糖升高5年"入院, 入院前降糖方案为门冬胰岛素30, 2次/d餐前皮下注... 详细信息

回顾性分析山东省临沂市兰陵县人民医院内分泌科收治的1例2型糖尿病患者应用德谷门冬双胰岛素替代预混胰岛素的诊疗过程, 并进行文献复习。患者为中年男性, 主因"发现血糖升高5年"入院, 入院前降糖方案为门冬胰岛素30, 2次/d餐前皮下注射, 血糖控制欠佳, 逐渐出现糖尿病相关并发症。入院后调整方案为德谷门冬双胰岛素每日2次餐前皮下注射, 联合二甲双胍、阿卡波糖降糖, 血糖逐步达标, 低血糖发生率降低, 疗效满意。出院时降糖方案为:德谷门冬双胰岛素早晚各28 U+二甲双胍0.5 g、2次/d+阿卡波糖50 mg、3次/d。出院后3个月患者于门诊随访, 复查空腹血糖6.05 mmol/L, 餐后2 h血糖7.8 mmol/L, 糖化血红蛋白6.7%。

关键词：糖尿病, 2型德谷门冬双胰岛素

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变电站地震灾损评估方法与应急资源调配研究

世界地震工程 2024年第2期40卷 208-216页

作者：严屹然冯杰徐希源于振国网智能电网研究院有限公司北京102209 电力网络安全防护与监测技术实验室北京102209

为提高震后电力系统灾损评估的时效性,快速生成应急资源调配方案,辅助电力应急指挥决策,提升应急处置效率。本文基于脆弱性理论构建了110 kV和220 kV变电站地震灾损评估模型,结合NewMark理论建立了地震诱发滑坡风险定量化分析模型,提出... 详细信息

为提高震后电力系统灾损评估的时效性,快速生成应急资源调配方案,辅助电力应急指挥决策,提升应急处置效率。本文基于脆弱性理论构建了110 kV和220 kV变电站地震灾损评估模型,结合NewMark理论建立了地震诱发滑坡风险定量化分析模型,提出了考虑次生滑坡灾害影响的应急资源调配方法。针对某区域电网开展了地震灾害模拟与实例分析,定量评估了3所不同变电站在6级、7级和8级地震场景下损毁概率。结果表明:各变电站在不同地震破坏下损毁概率范围为7%~26%,而震级与震中距是影响变电站震损程度的主要原因;评估计算了地震诱发滑坡概率及道路风险值,综合考虑该区域电网附近应急人员驻点、仓库位置以及道路风险值,给出了7级地震场景下面向各变电站应急队伍与应急物资需求的应急资源调配路径最优化规划。本文的研究可为震后资源调配与指挥决策提供辅助与支撑。

关键词：地震变电站灾损评估滑坡应急资源调配

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《2023年JCS心肌炎诊断和治疗指南》解读

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协和医学杂志 2024年第2期15卷 320-327页

作者：张松邱露虹刘颖娴徐希奇哈尔滨医科大学附属第一医院心内科哈尔滨150001 中国医学科学院北京协和医院心内科北京100730

《2023年JCS心肌炎诊断和治疗指南》在心肌炎的定义和分类、流行病学、病理生理学、诊断标准、诊断流程、治疗及管理等多个方面进行了全新诠释,为临床医师提供了更贴合临床实际的心肌炎诊断和治疗建议。鉴于我国近期无心肌炎相关指导性... 详细信息

《2023年JCS心肌炎诊断和治疗指南》在心肌炎的定义和分类、流行病学、病理生理学、诊断标准、诊断流程、治疗及管理等多个方面进行了全新诠释,为临床医师提供了更贴合临床实际的心肌炎诊断和治疗建议。鉴于我国近期无心肌炎相关指导性文件发布,本文将结合国内外最新心肌炎研究进展,对该指南要点进行全面解读,以期为我国心肌炎临床诊疗提供参考。

关键词：心肌炎心内膜活检临床分型治疗

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脑类器官的构建及其神经疾病应用现状

生理科学进展 2024年

作者：刘凯曹霞余江南徐希明江苏大学药学院江苏省工程研究中心

从十多年前发现自组装脑类器官（brain organoids）构建方案以来，这一领域取得了显著进展。这些脑类器官的细胞类型和结构与发育中的人类大脑极为相似，使其成为获得性和遗传性脑疾病的致病机制及病因学的理想模型。此外，区域特异性... 详细信息

从十多年前发现自组装脑类器官（brain organoids）构建方案以来，这一领域取得了显著进展。这些脑类器官的细胞类型和结构与发育中的人类大脑极为相似，使其成为获得性和遗传性脑疾病的致病机制及病因学的理想模型。此外，区域特异性脑类器官的开发，为药物发现和毒性测试提供了针对性的平台。作为研究工具，脑类器官为揭示人类神经系统疾病的分子机制提供了新的视角。本文综述了构建脑类器官的技术以及这些技术在模拟神经疾病方面的应用研究，旨在为该领域的应用研究提供有价值的参考和启示。

关键词：脑类器官质量鉴定疾病模型神经疾病

清肠化湿方调控Nrf2/ARE通路缓解溃疡性结肠炎的机制研究

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南京师大学报(自然科学版) 2024年

作者：程迎迎刘志琴郑凯张洁徐希南京理工大学分子代谢中心南京中医药大学附属医院江苏省中医院消化科南京中医药大学附属医院江苏省中医院检验科

溃疡性结肠炎（UC）是一类特发性的慢性炎症性肠道疾病，该病易反复，严重影响了患者的身体健康和生活质量。本研究使用构建的小鼠溃疡性结肠炎模型，以氧化应激途径为重点，探讨清肠化湿方缓解UC的作用机制。主要方法为以DSS作为诱导... 详细信息

溃疡性结肠炎（UC）是一类特发性的慢性炎症性肠道疾病，该病易反复，严重影响了患者的身体健康和生活质量。本研究使用构建的小鼠溃疡性结肠炎模型，以氧化应激途径为重点，探讨清肠化湿方缓解UC的作用机制。主要方法为以DSS作为诱导剂，构建小鼠溃疡性结肠炎模型。每日测量小鼠体重，观察并记录小鼠粪便性状及出血情况；试验结束后，留取小鼠结肠组织并记录结肠长度，分别从基因、蛋白和病理水平检测相关指标。收集的结肠组织一部分采用qRT-PCR检测结肠组织中HO-1、NQO-1、Keap1和Nrf2的表达；一部分进行核磁代谢组学分析各组结肠代谢物的变化并进行多元统计分析；一部分用于制备结肠病理切片进行HE染色和免疫组化，HE染色后评估结肠病理炎症情况，免疫组化检测结肠组织中Keap1和Nrf2的表达。结果显示清肠化湿方（QHR）可提高溃疡性结肠炎小鼠的生存率；与正常对照组（Ctrl）相比，DSS模型组小鼠体重降低，结肠长度变短（P＜0.05），结肠组织病理炎症评分较高（P＜0.05），抗氧化反应元件表达降低，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；QHR给药后，与DSS组相比，小鼠体重升高，结肠长度变长（P＜0.05），结肠组织病理炎症评分较低（P＜0.05），结肠组织中HO-1、NHO-1、Nrf2表达升高，Keap1表达降低，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。本研究发现QHR通过升高Nrf2上调ARE相关分子的表达进而缓解过度氧化引起的肠道黏膜损伤。

关键词：清肠化湿方溃疡性结肠炎氧化应激抗氧化反应元件