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苏云金芽胞杆菌CT-43中苏云金素分泌机制的研究

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苏云金芽胞杆菌CT-43中苏云金素分泌机制的研究

作者：徐子雅华中农业大学

学位级别：硕士

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一类能形成芽胞的革兰氏阳性细菌,因其能产生多种活性物质而被广泛地应用于生物杀虫剂的研发及用作转基因作物的基因来源。苏云金素(thuringiensin,Thu)是一种小分子量的核苷类活性物质,由... 详细信息

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一类能形成芽胞的革兰氏阳性细菌,因其能产生多种活性物质而被广泛地应用于生物杀虫剂的研发及用作转基因作物的基因来源。苏云金素(thuringiensin,Thu)是一种小分子量的核苷类活性物质,由某些Bt菌株产生并分泌至胞外,对多种昆虫、线虫和螨类等有毒杀作用。Thu的结构由腺苷、阿洛糖二酸、葡萄糖和磷酸按照1:1:1:1的比例组成,分子式是CHONP,分子量是701 Da。前期本实验室在Bt菌株CT-43中分析、鉴定了Thu的生物合成基因簇,并推导了其合成途径。其中关键基因有5个,S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因thu1、磷酸激酶基因thu E、糖基转移酶基因thu F、转运蛋白基因thu T和非核糖体肽合成酶基因thu2。前期的敲除实验显示这5个基因均是苏云金素产生所必须的。体外催化实验证实了磷酸激酶Thu E能够将未磷酸化的苏云金素前体物C磷酸化为成熟的苏云金素,负责苏云金素合成的最后一步。苏云金素需要被分泌至胞外发挥作用,但其分泌机制目前仍不清楚。对其生物合成基因簇进行分析发现,只有一个与转运相关的基因thu T(major facilitater superfamily),推测可能与苏云金素的分泌相关。另外,由于在CT-43胞内未检测到已磷酸化的成熟的苏云金素,因此我们推测前体物C是在跨膜转运的过程中磷酸化为苏云金素的。通过一系列实验初步证实推测并得到以下结论:1.证明了Thu T是与转运相关的膜蛋白。*** T基因与苏云金素的产生相关。选取12h和24 h两个时间点,分别通过RT-PCR及HPLC分析,发现菌株CT-43中thu T基因转录量的变化与苏云金素产量的变化一致。*** T基因是苏云金素产生的必须基因。对thu T基因缺失突变株BMB1754进行质谱检测,发现苏云金素的产量与野生菌株CT-43相比减少了95%左右;对BMB1754进行thu T基因的回补,能够恢复苏云金素的产生,证实突变株BMB1754中苏云金素的产量大幅度下降是由该基因的缺失引起的。*** T是膜蛋白。序列分析显示Thu T含有十个跨膜结构域,利用绿色荧光蛋白标记,通过荧光显微镜观察到Thu T定位于细胞膜,对提取的重组菌株的细胞膜蛋白和细胞质蛋白用Western blot的方法证明了Thu T为膜蛋白。2.发现Thu T与Thu E协同作用完成苏云金素的成熟与分泌。*** T基因的缺失影响Thu E的功能。通过质谱检测,观察到thu T基因的缺失突变株BMB1754胞内苏云金素未累积,而前体物C发生了大量累积,表明thu T基因的缺失使前体物C未磷酸化为苏云金素而发生积累,磷酸化是由Thu E蛋白催化的,因此thu T基因的缺失影响到Thu E蛋白的功能。*** T与Thu E存在相互作用。基于thu T基因的缺失影响Thu E的功能,我们推测与苏云金素转运相关的Thu T与负责苏云金素成熟的Thu E之间存在相互作用,并利用Ligand blot杂交的方法证明了这一推测。*** E依赖于Thu T定位于细胞膜附近。通过序列分析发现Thu E不存在信号肽及跨膜结构域,最有可能定位于细胞质。通过GFP标记检测到Thu E蛋白在不存在Thu T蛋白的情况下荧光呈现较为分散、亮度较弱的状态,而Thu E蛋白在Thu T蛋白存在的情况下则荧光分布较为集中,且与Thu T蛋白的定位很相似,表明Thu E蛋白依赖于Thu T蛋白定位于细胞膜附近。根据目前得到的结果,我们提出了苏云金素成熟与分泌的模型,磷酸激酶Thu E与膜蛋白Thu T相互作用使Thu E定位于细胞膜上的Thu T附近,从而前体物C磷酸化为成熟的苏云金素后迅速将苏云金素分泌至细胞外。苏云金素的分泌是将磷酸化与转运相偶联的新型转运方式。另外,我们还对苏云金芽胞杆菌产生的细菌素进行初步的研究。细菌素是一类由细菌产生的,核糖体合成的多肽,对其它细菌有活性,且产生菌有特异性的免疫机制来保护自身免受毒害。其高活性、低毒、易于遗传操作等特点使其在食品、医药等行业表现出良好应用前景。通过大量分析Bt菌株基因组,预测到多个不同类型的新颖的细菌素合成基因簇,本研究对其中某些合成基因簇的合成功能展开研究。*** I负责*** T01001对细菌素thuricin 4A-4的免疫。通过生物信息学分析,在*** T01001菌株中找到了一个新型的羊毛硫类细菌素合成基因簇thuricin 4A。基因thi I比对的相似度很低,它编码一个含有5个跨膜结构域的膜蛋白,推测与T01001对细菌素thuricin 4A-4的免疫相关。我们对thi I基因进行异源表达,异源表达菌

关键词：苏云金芽胞杆菌苏云金素相互作用分泌细菌素异源表达

融合型视觉隐喻句法结构对概念表征的影响研究

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融合型视觉隐喻句法结构对概念表征的影响研究

作者：徐子雅大连理工大学

学位级别：硕士

全球化视野下图像已然成为传播信息的重要载体。近年来,为了提高广告的趣味性、增强广告的记忆性、改善品牌态度,越来越多的视觉隐喻被运用到广告之中。目前该领域的研究大多关注于广告视觉隐喻的认知效果,相关研究表明视觉隐喻的理解... 详细信息

全球化视野下图像已然成为传播信息的重要载体。近年来,为了提高广告的趣味性、增强广告的记忆性、改善品牌态度,越来越多的视觉隐喻被运用到广告之中。目前该领域的研究大多关注于广告视觉隐喻的认知效果,相关研究表明视觉隐喻的理解是一个多模态的过程,然而视觉隐喻的具体认知加工形式,特别是结合语言学的跨学科视角下的视觉隐喻概念表征研究,仍有待验证。已有研究发现句法结构“A是B”、“A像B”和“A和B”都可以作为融合型视觉隐喻的言语表征。本研究基于比较和范畴化混合模型以及视觉隐喻理解交互模型,探究在广告语境中,哪种汉语句法结构(言语表征)能最有效地反映融合型视觉隐喻的概念表征,即能够最有效地表达广告语境中的融合型视觉隐喻概念,并在其概念加工中达到最优认知效果。本研究由两个实验构成。实验一采取线上问卷调查的形式,旨在研究哪一种句法结构(言语表征)能够最有效表达广告语境中的融合型视觉隐喻。结果表明,相比于“A是B”和“A和B”,“A像B”作为广告语境中的融合型视觉隐喻的言语表征的效果最好,其合适度最高。实验二采取行为实验的形式,旨在探究哪一种句法结构(言语表征)能够在概念加工中产生最优认知效果。通过对比参与者在“A是B”、“A像B”和“A和B”条件下的反应时及正确率,发现参与者更倾向于使用“A像B”这一句法结构去加工广告语境中的融合型视觉隐喻,并且加工时间最短。该结果表明,“A像B”能够在融合型视觉隐喻的概念加工中达到最优认知效果。综上,本研究发现尽管三种句法结构都可以表征广告语境中的融合型视觉隐喻,但其在表达和概念加工融合型视觉隐喻时具有不同效果。由于相似性比较效应、转换性效应、知觉相似性效应,句法结构“A像B”能最有效地反映广告语境中融合型视觉隐喻的概念表征。本研究为视觉隐喻在言语层面的分类提供了新的视角,拓展了视觉隐喻实证研究;并为使用言语表征的视觉隐喻相关实验研究提供参考。此外,研究结果可以为广告设计提供建议,即在广告中运用融合型视觉隐喻时可以使用明喻表达“A像B”去促进对广告真正内涵的理解。

关键词：融合型视觉隐喻概念表征句法结构言语表征

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论情感因素对学习个体的学习态度的影响

下一代 2019年第10期 89-91页

作者：徐子雅济南市槐荫区公园里幼儿园

幼儿阶段0～3岁是智力发展的最为迅速的时期。实验教育学派的法国代表人物比纳和西蒙则发展了智力测验,通过测验推断和确定学生的智力水平。美国心理学家普拉切克提出的情绪三维模式,反映了情绪在强度上的变化以及彼此之间的对立性质。... 详细信息

幼儿阶段0～3岁是智力发展的最为迅速的时期。实验教育学派的法国代表人物比纳和西蒙则发展了智力测验,通过测验推断和确定学生的智力水平。美国心理学家普拉切克提出的情绪三维模式,反映了情绪在强度上的变化以及彼此之间的对立性质。因此我们一定要认识到情感因素在学习个体智力发展过程中的作用,认识到情感因素对学习个体学习态度的影响,并

关键词：情感因素情绪状态动机作用学习态度

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电网公司招标采购管理优化路径研究

中国产经 2023年第8期 111-113页

作者：徐子雅国网湖北营销服务中心(计量中心)

作为电网公司购入物资的主要方式,招标采购的重要性有目共睹。事实证明,只有对招标采购进行科学管理,才能使该项工作发挥出应有作用。本文从电网公司的视角出发,分析了招标采购管理相关工作的开展情况,介绍了电网公司采购物资的方式与特... 详细信息

作为电网公司购入物资的主要方式,招标采购的重要性有目共睹。事实证明,只有对招标采购进行科学管理,才能使该项工作发挥出应有作用。本文从电网公司的视角出发,分析了招标采购管理相关工作的开展情况,介绍了电网公司采购物资的方式与特点,探讨了招标采购管理现状及存在问题的成因,并围绕优化路径展开讨论,指出要想使管理工作取得预期成效,不仅要明确工作目标及原则,还应建立健全相关制度,并对管理手段进行优化。希望能给人以启发,为日后相关工作的高效开展提供借鉴。

关键词：电网公司管理优化招标采购

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黑黑的我,真好

中学生阅读(初中版) 2013年第5期 42-43页

作者：徐子雅广东东莞市黄江中学初二(二)班

我从床上跳下来,匆匆套上运动服,抱起篮球就往外冲。妈妈从厨房里闪身出来拦住我:"你给我站住!"我在门口一个急停:"又怎么啦?""我花那么多钱给你买的护肤品,说不用就不用了?"我讪笑着继续往外走:"哦,说这个啊……其实,原来的我也很好呀... 详细信息

我从床上跳下来,匆匆套上运动服,抱起篮球就往外冲。妈妈从厨房里闪身出来拦住我:"你给我站住!"我在门口一个急停:"又怎么啦?""我花那么多钱给你买的护肤品,说不用就不用了?"我讪笑着继续往外走:"哦,说这个啊……其实,原来的我也很好呀。虽然黑,可是不丑啊,关键是健康嘛……"话没说完,人已经到了

关键词：打篮球

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提升电力营销项目管理水平的策略分析

中国产经 2023年第22期 145-147页

作者：曾文姬徐子雅国网湖北省电力有限公司营销服务中心(湖北省电力负荷管理中心、计量中心、资金集约中心)

随着社会经济的发展,给电力公司的飞速发展带来了一些机遇,同时也带来前所未有的挑战。电力公司为了满足我国不同行业领域的用电需求,推出一系列营销项目,但是在管理过程中仍旧存在问题,导致电力公司难以获得预期的经济效益。基于此,本... 详细信息

随着社会经济的发展,给电力公司的飞速发展带来了一些机遇,同时也带来前所未有的挑战。电力公司为了满足我国不同行业领域的用电需求,推出一系列营销项目,但是在管理过程中仍旧存在问题,导致电力公司难以获得预期的经济效益。基于此,本文站在电力公司的角度,重点分析了电力公司管理营销项目水平的提升策略。

关键词：电力营销营销项目管理水平

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智能电网背景下电力营销信息化

中国集体经济 2023年第6期 59-62页

作者：徐子雅曾文姬国网湖北省电力有限公司营销服务中心(计量中心)

随着当前计算机技术与信息化技术的进一步发展,电力营销工作的手段同样也更加多元。文章以智能电网的特点与发展要求作为切入点,论述了电力营销信息化的重要意义,介绍了当前电力营销工作存在的问题,并针对这些问题提出了相应的解决与优... 详细信息

随着当前计算机技术与信息化技术的进一步发展,电力营销工作的手段同样也更加多元。文章以智能电网的特点与发展要求作为切入点,论述了电力营销信息化的重要意义,介绍了当前电力营销工作存在的问题,并针对这些问题提出了相应的解决与优化的措施和流程,供电力从业人员参考。

关键词：智能电网电力营销信息化发展

电力企业职工(模范导师)创新工作室创建的实践与思考

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水电与新能源 2020年第5期34卷 43-45页

作者：王彬孙勇徐子雅湖北能源集团股份有限公司湖北武汉430077 湖北清江水电开发有限责任公司湖北宜昌443000 国网湖北电力有限公司计量中心湖北武汉430077

以湖北能源集团电力企业职工创新工作室为载体,就如何有效开展工作室的创新工作,进行了一系列积极有益的分析和探索,在激发职工创新意识,强化技能人才队伍建设,培育专业型工匠人才等方面发挥了较好作用,并提出了一些有益的思考与建议。

关键词：产业工人队伍建设职工(模范导师)创新工作室创建实践与思考

The Effect of Verbal Anchoring on the Processing of Advertising Pictorial Metaphors

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Chinese Journal of Applied Linguistics 2021年第1期44卷 68-89,127页

作者： Shuo CAO Xuanyi ZHAO Ziya XU School of Foreign Languages Dalian University of Technology Department of English Shanxi Agricultural University

Although investigating metaphors in advertising is gaining in popularity, there are still certain unresolved arguments, such as the interaction between elements of different modalities. This study,composed of three behavioral experiments, aims to identify how verbal anchoring(literal anchoring, metaphor anchoring and unrelated anchoring) influences the processing of pictorial metaphors in advertising, by observing the cognitive and affective indicators, advertising comprehension and advertising likeability. The results showed 1) that metaphors in pictorial modality were recognized more quickly than those in verbal modality, 2) that verbal anchoring facilitated participants ’ comprehending and appreciating of pictorial metaphors and 3) that literally-anchored metaphors with a moderate level of novelty yielded the most favorable cognitive responses. The study not only enriches the existing theoretical framework of multimodal metaphors in advertising, but also proposes an optimal match between pictorial metaphors and verbal elements, for advertisers and manufacturers to design effective multimodal advertisements.

关键词： pictorial metaphor verbal anchoring multimodality advertisement comprehension advertisement likeability