检索结果-南通市图书馆

作者：徐圣涛汕头大学

学位级别：硕士

噬菌体T7 RNA聚合酶结构简单,是分子量仅为100 kD的单亚基酶,而且是目前已知的转录活性最高RNA聚合酶。另外,T7噬菌体启动子属于组成型的强启动子,具有严格的启动子特异性,不会与宿主细胞的基因转录相互干扰。所以,基于T7 RNA聚合酶及... 详细信息

噬菌体T7 RNA聚合酶结构简单,是分子量仅为100 kD的单亚基酶,而且是目前已知的转录活性最高RNA聚合酶。另外,T7噬菌体启动子属于组成型的强启动子,具有严格的启动子特异性,不会与宿主细胞的基因转录相互干扰。所以,基于T7 RNA聚合酶及其启动子的偶联表达系统,不但在体外RNA合成及大肠杆菌外源蛋白合成中得到了广泛应用,还同样地被应用于真核细胞,提高目的基因的表达水平。但是,T7 RNA聚合酶自身的表达往往依赖重组痘苗病毒载体,导致产物中含有没有去除的痘苗病毒。在本课题中,利用基本的分子生物学元件,如CMV启动子、T7启动子、和内部核糖体进入位点(IRES)等,我们组装了一个T7 RNA聚合酶的正反馈表达系统。为验证这个正反馈系统,我们构建了由T7启动子调控的报告基因,绿色荧光蛋白和荧光素酶的表达质粒。通过实时定量PCR方法、共聚焦显微镜、细胞流式技术和双荧光素酶活力检测,我们将验证T7 RNA聚合酶正反馈回路在真核细胞的表达。此外,在另一项研究中,我们构建了T7启动子调控的慢病毒载体,并将检验T7 RNA聚合酶正反馈表达回路对慢病毒载体滴度的影响。研究内容和研究方法 1.首先,构建一个能在真核细胞表达T7RNA聚合酶(T7RNP)的载体质粒。我们是以pEGFP-N1载体为基础构建这个质粒的。首先通过PCR克隆T7RNP基因,将其连接到pGM-T载体上,在测序验证序列正确的基础上,我们通过单酶切的方式将其连接到pEGFP-N1的CMV启动子的后面,然后通过酶切验证连接进去的T7RNP的方向,挑取正确的克隆。这样就构建一个能被真核细胞识别,并启动T7RNP表达的载体质粒。我们将这个质粒命名为pCMV—T7RNP。 2.通过构建T7RNP与EGFP融合蛋白来验证T7RNP在真核细胞内的翻译与定位。我们先用KpnI和SmaI酶切构建好的pCMV—T7RNP质粒,目的是切去T7RNP基因的终止子序列,然后重新连接这个载体,实现T7RNP与EGFP蛋白阅读框的正确连接。这样就构建了一个能表达T7RNP和EGFP融合蛋白的新质粒(pCMV—T7RNP/EGFP),用该质粒来转染细胞,观察荧光的出现与位置。 3.定量检测T7RNP的转录水平。我们用pCMV—T7RNP载体转染293FT细胞,利用T7RNP的特异性引物与探针,通过实时定量RT-PCR的方法检测T7RNP的表达,以确定一般情况下核内转录T7RNP的水平,并通过多组实验筛选一个合适的转染时间和转染剂量。 4.构建由T7启动子调控的T7RNP表达质粒。为此,我们以pET28a载体为基础,在多克隆位点通过单酶切的方式插入一个T7RNP基因(pT7—T7RNP),验证插入的方向是否正确,取正确的克隆,然后在T7启动子和T7RNP之间插入内部核糖体进入位点(IRES)序列,这样就构建了一个由T7启动子控制的T7RNP真核表达载体。我们将此质粒命名为pT7—IRES—T7RNP. 5.检测正反馈回路中T7RNP的转录水平。我们将pCMV—T7RNP或分别与pT7—T7RNP及pT7—IRES—T7RNP质粒共同转染293FT细胞,通过实时定量RT-PCR的方法检测T7RNP的表达。正反馈的实现依赖于IRES的存在,因此,质粒pT7—T7RNP可用来验证正反馈回路组装成功与否。 6.利用绿色荧光蛋白EGFP为报告基因来测量正反馈回路中EGFP的蛋白水平。以pGL3-Basic载体为基础,我们首先构建由CMV启动子和T7启动子调控的EGFP质粒,分别命名为pCMVGFP和pT7RESGFP。将这些质粒分别与正反馈的T7RNP质粒共转染293FT细胞。利用细胞流式仪及激光共聚焦定量检测EGFP的表达。 7.利用荧光素酶Luc为报告基因来检测正反馈回路中荧光素酶的活力水平。以pGL3-Basic载体为基础,我们首先构建由CMV启动子和T7启动子调控的Luc质粒,分别命名为pCMVuc和pT7RESuc。将这些质粒分别与正反馈的T7RNP质粒共转染293FT细胞。利用双荧光素酶法定量检测荧光素酶的活力。 8.我们还将验证T7RNP正反馈系统能否提高慢病毒的滴度。我们首先构建由T7启动子调控的慢病毒转移质粒、包装质粒、和包膜质粒,分别命名为pT7entiGFP、pT7RESag/Pol、和pT7RESSVG。将这些质粒与T7RNP正反馈系统共同转染293FT细胞,检测慢病毒的RNA滴度、DNA滴度、和转染滴度。对照慢病毒系统命名为pRSVentiGFP。研究结果: 1.通过PCR克隆了T7RNP基因,并且将此基因连接到了pGM-T载体,测序结果表明我们克隆的T7RNP基因的碱基没有突变产生。 2.通过HindⅢ的单酶切反应,我们将含有T7RNP基因的片段连接到了pEGFP-N1载体,

关键词：慢病毒 T7RNP 正反馈实时定量PCR 合成生物学

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应用于配电网不平衡补偿STATCOM的拓扑分析与控制策略研究

应用于配电网不平衡补偿STATCOM的拓扑分析与控制策略研究

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作者：徐圣涛安徽大学

学位级别：硕士

随着社会的进步,现代科学技术水平和工业水平都越来越高,这都对电网电能质量有着愈发严苛的要求。目前,静止同步补偿器（static synchronous compensator,STATCOM）凭借着自身的优异性能,在无功补偿,不平衡治理,谐波抑制等电能质量治理... 详细信息

随着社会的进步,现代科学技术水平和工业水平都越来越高,这都对电网电能质量有着愈发严苛的要求。目前,静止同步补偿器（static synchronous compensator,STATCOM）凭借着自身的优异性能,在无功补偿,不平衡治理,谐波抑制等电能质量治理领域得到了广泛应用。本文针对STATCOM对三相不平衡的补偿进行了相关研究。针对不同STATCOM拓扑,它们的补偿特性、使用场景以及控制策略也各不相同,需要对其进行对比和分析,从而能够针对不同的应用场景需求（待补偿的电流大小不同;待补偿负载的不平衡度不同;器件的耐压值,耐流值不同;直流侧电压不同等）选择最优的STATCOM拓扑对目标进行三相不平衡的补偿。本文的主要工作框架可简述如下所示:首先是对针对STATCOM在补偿三相不平衡时出现的相间不平衡问题,介绍了一种新的级联STATCOM拓扑,该新拓扑在三相级联的功率单元之外,还并联了一个直流侧共电容器,可称之为从逆变器,三相级联桥臂可借此互相交换有功功率,从而消除相间不平衡;本文认为,该拓扑的不平衡补偿范围主要受到了其从逆变器电压输出能力的限制,并列出了相关理由,分析出了影响其不平衡补偿范围的关联变量;由于该拓扑含有从逆变器,因此需要合理的分配主,从逆变器的电压输出关系,由此提出了主,从协调控制策略。接着研究了传统的星接/角接链式STATCOM的不平衡补偿相关问题。以星接STATCOM为例,本文提出采用相量法,利用输出电压与补偿电流相垂直的几何关系,可方便快捷地求出待注入的零序电压,避免传统方法的计算复杂度;由于零序电压的注入会增加补偿装置的待输出电压,引起过调制,文章就以此为切入点,设立了星接STATCOM的不平衡补偿范围标准,并就此展开了相关讨论;直流侧电压的控制也是分为三层,与带直流侧共电容器的新拓扑不同的是,星接STATCOM的相间平衡控制主要由零序电压注入法完成。然后本文还讨论了MMC-STATCOM的不平衡补偿能力。文章指出了电流裕度与其不平衡补偿能力密切相关,并就此讨论了MMC-STATCOM的不平衡补偿范围;指出了其环流的直流分量可用于相间平衡控制,二倍频分量则予以消除;与前面所述的几种拓扑一样,MMC-STATCOM的电流控制也采用准PR控制策略,该策略能快速稳定地跟踪交流量。通过对以上各STATCOM拓扑的详细介绍,接下来就可对他们进行分析对比,罗列其各自的优缺点,通过比较,指出不同三相不平衡应用场景的最优化选择。最后,文章针对前文所论述的几种STATCOM,除了在相应部分搭建了simulink仿真模型进行仿真验证外,还着手搭建了相应的实验装置,详细地介绍了相应的软硬件设计思路和设计成果,最后还进行了RT-LAB实时仿真。

关键词：静止同步补偿器不平衡补偿直流侧电压控制补偿范围

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可拓语义和FKANO下阳新布贴现代家具设计

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林业工程学报 2024年第4期9卷 176-184页

作者：李敏陈文凤李兰徐圣涛湖北工业大学工业设计学院武汉430068

针对文创产品文化内涵性和功能实用性难以平衡的现象,提出可拓语义和模糊KANO模型(FKANO)结合的方法,以实现文化内涵性与实用性相兼顾的设计初衷。以阳新布贴为对象,首先,根据可拓语义分析,通过文化层次理论系统地提炼词汇语义,再运用... 详细信息

针对文创产品文化内涵性和功能实用性难以平衡的现象,提出可拓语义和模糊KANO模型(FKANO)结合的方法,以实现文化内涵性与实用性相兼顾的设计初衷。以阳新布贴为对象,首先,根据可拓语义分析,通过文化层次理论系统地提炼词汇语义,再运用图解思维转化词汇语义,对图解语义进行评估,以计算可拓区间并构建可拓图解编码库;其次,以躺椅设计为例,通过FKANO模型分析躺椅的用户需求,明确设计要素和文化要素后,依据可拓图解编码库进行详细设计;最后,通过层次分析法(AHP)和逼近理想解排序法(TOPSIS),对产生的3个设计方案进行遴选,并设计系列家具。将可拓语义分析和FKANO模型相结合,从用户需求方向出发科学开展文创家具设计,更好地满足人们对于文化共鸣和实用性的期望,也为文化的提取和应用提供理论借鉴。

关键词：可拓语义模糊KANO模型阳新布贴家具设计层次分析法(AHP) 逼近理想解排序法(TOPSIS)

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拮抗实验和RADP对鸡腿菇栽培菌株亲缘关系的研究

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安徽农业科学 2006年第16期34卷 3903-3904页

作者：王磊蔡德华宿红艳张丽徐圣涛鲁东大学生命科学学院山东烟台264025

分别利用RAPD和拮抗试验对4种鸡腿菇主要栽培菌株的亲缘关系进行分析。结果表明,两种方法所得的结论一致,由此证明拮抗试验和RAPD分析在鸡腿菇亲缘关系鉴定中真实可靠。

关键词：鸡腿菇拮抗试验 RAPD 聚类分析

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浅析县域商业银行加强信贷资产质量管控的路径

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现代金融 2018年第8期 49-51页

作者：徐圣涛吴卓仪韩莉农业银行靖江市支行

信贷业务作为商业银行传统的资产业务,是商业银行的主要收入来源和风险所在,其质量高低直接影响商业银行的经营效益和长期发展。本文从农业银行县域支行的角度,从信贷结构优化、内部管理提升、不良资产处置三个方面浅析如何提高信贷资... 详细信息

信贷业务作为商业银行传统的资产业务,是商业银行的主要收入来源和风险所在,其质量高低直接影响商业银行的经营效益和长期发展。本文从农业银行县域支行的角度,从信贷结构优化、内部管理提升、不良资产处置三个方面浅析如何提高信贷资产质量管控的力度,实现资产业务的又好又快发展。

关键词：信贷资产质量商业银行县域支行管控路径信贷结构优化不良资产处置又好又快发展

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高唐县引黄灌溉节水工作探讨

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山东水利 2000年第5期 44-45页

作者：赵振洲徐圣涛高唐县水务局高唐县灌排工程管理处

引黄节水要从完善工程设施、加强灌溉管理、应用先进技术三方面来抓,但目前工程设施和灌溉管理仍是节水工作的重点,节水潜力很大,且先进技术的实施也有一个完善工程、加强管理的问题,应下大力把现状工程条件下的用水管理工作抓实抓好。

关键词：引贡灌溉节水措施灌溉管理

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银行业加强互联网金融创新探析

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现代金融 2018年第12期 25-27页

作者：徐圣涛顾云红施淼农业银行靖江市支行

互联网金融是指依托于互联网技术,继承了传统商业银行的一系列业务和产品,借助互联网这一巨大的推广平台提供银行、证券、保险等多种金融服务,实现资金供需匹配、支付结算和信用媒介等功能的新型金融业态。本文分析了互联网金融对传统... 详细信息

互联网金融是指依托于互联网技术,继承了传统商业银行的一系列业务和产品,借助互联网这一巨大的推广平台提供银行、证券、保险等多种金融服务,实现资金供需匹配、支付结算和信用媒介等功能的新型金融业态。本文分析了互联网金融对传统银行业的影响,提出银行业应加强互联网金融创新的对策。

关键词：互联网技术传统银行业金融创新传统商业银行金融服务资金供需支付结算证券

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不平衡工况下星形级联SVG的补偿分析

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电力电子技术 2021年第3期55卷 21-25页

作者：徐圣涛张茂松陶骏王群京安徽大学电气工程与自动化学院安徽合肥230601 安徽大学工业节电与电能质量控制协同创新中心安徽合肥230601 教育部电能质量工程研究中心(安徽大学) 安徽合肥230601

星形级联静止无功发生器(SVG)在补偿不平衡负载时,通常采用零序电压注入法来维持直流侧相间平衡,由于相间平衡的前提是SVG输出电压需与输出电流相垂直,故其相量内积为零,则可通过待定系数法简单直接地求出所需的零序电压;在此基础上可... 详细信息

星形级联静止无功发生器(SVG)在补偿不平衡负载时,通常采用零序电压注入法来维持直流侧相间平衡,由于相间平衡的前提是SVG输出电压需与输出电流相垂直,故其相量内积为零,则可通过待定系数法简单直接地求出所需的零序电压;在此基础上可以进一步确认星接SVG的不平衡补偿范围,SVG直流侧电压的大小对不平衡补偿范围有着重要意义;准PR控制能有效进行电流跟踪,在此提出了新型直流侧电压分层控制策略,它可有效减少负序分量对补偿性能的影响。所提策略在相关仿真和实验中得到了充分验证。

关键词：静止无功发生器不平衡工况零序电压补偿范围

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危机背景下的信贷创新

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现代金融 2009年第8期 36-页

作者：徐圣涛吴卓仪农业银行靖江市支行

由美国次贷危机触发的全球化金融危机给我国经济带来了强烈的冲击,尽管目前经济形势依然严峻,但对国内银行来说仍然存在较大的机遇,国家4万亿的投资给银行带来了多元化的经营需求,为"保增长、扩内需、调结构"创造了良好环境,也为银行的... 详细信息

由美国次贷危机触发的全球化金融危机给我国经济带来了强烈的冲击,尽管目前经济形势依然严峻,但对国内银行来说仍然存在较大的机遇,国家4万亿的投资给银行带来了多元化的经营需求,为"保增长、扩内需、调结构"创造了良好环境,也为银行的发展开辟了广阔空间。

关键词：信贷风险银行金融机构信贷人员消费贷款消费信贷信贷投入信贷服务担保方式

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我国“高空抛坠物”侵权规则适用的三段证成——兼论《民法典》第1254条适用的司法范式

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海南大学学报（人文社会科学版） 2025年第1期43卷 142-150页

作者：郑志涛海南大学法学院海南海口570228

通过检视现行立法规范和实务适用逻辑,针对司法范式缺陷与适用困境,结合民法解释学,在大前提、小前提和结论三段结构中论证“高空抛坠物”侵权责任的法律适用,有助于提升司法裁判的可预期性。“小前提”系侵权案件事实,“大前提”系《... 详细信息

通过检视现行立法规范和实务适用逻辑,针对司法范式缺陷与适用困境,结合民法解释学,在大前提、小前提和结论三段结构中论证“高空抛坠物”侵权责任的法律适用,有助于提升司法裁判的可预期性。“小前提”系侵权案件事实,“大前提”系《民法典》第1254条之规定,“法律解释”系“大前提”和“小前提”之连结。将法律解释置于“大前提”和“小前提”之间,并推导“结论”的三段论证,有助正本溯源,统一类案之间法律适用。首先,由法律解释确定某法律规范是否适用;其次,通过法律解释规范“大前提”对“小前提”的理解和适用;最后,形成稳定的司法范式得出符合预期的“结论”。

关键词：高空抛坠物侵权责任公平责任

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