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家蚕副肌球蛋白/小副肌球蛋白基因的克隆及进化分析

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安徽农业科学 2009年第18期37卷 8377-8379页

作者：徐升胜李兵许西奎沈卫德苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123 苏州大学蚕桑研究所江苏苏州215123

[目的]克隆家蚕副肌球蛋白/小副肌球蛋白基因,分析该基因与运动性状的关系。[方法]利用PCR扩增和RACE技术获得了家蚕(Bombyxmori)副肌球蛋白的全长cDNA和小副肌球蛋白的部分cDNA;经检索家蚕wgs(基因组散弹序列)数据,获得了家蚕副肌球蛋... 详细信息

[目的]克隆家蚕副肌球蛋白/小副肌球蛋白基因,分析该基因与运动性状的关系。[方法]利用PCR扩增和RACE技术获得了家蚕(Bombyxmori)副肌球蛋白的全长cDNA和小副肌球蛋白的部分cDNA;经检索家蚕wgs(基因组散弹序列)数据,获得了家蚕副肌球蛋白/小副肌球蛋白的基因组序列,并确定其基因组结构。[结果]家蚕PM/mPM基因由17个外显子和16个内含子组成,通过基因内部选择性启动子的使用,该基因组序列同时编码副肌球蛋白和小副肌球蛋白,小副肌球蛋白和副肌球蛋白共用最后6个外显子。家蚕副肌球蛋白与其他无脊椎动物副肌球蛋白的聚类分析表明,家蚕和野桑蚕有最近的亲缘关系,在昆虫纲中与黑腹果蝇关系最远。[结论]家蚕和野桑蚕副肌球蛋白的氨基酸序列间不存在可引起飞行缺陷的点突变,推测家蚕和野桑蚕飞行能力差异存在其他调控机制。

关键词：家蚕肌肉副肌球蛋白/小副肌球蛋白基因克隆聚类分析

黄独赤霉素受体基因DbGID1s克隆及生物信息学分析

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南方农业学报 2021年第8期52卷 2053-2060页

作者：唐文芳徐升胜龙雯虹云南农业大学园林园艺学院昆明650201

【目的】克隆黄独赤霉素受体(GID1)基因DbGID1s,并对其进行生物学信息分析,为深入探究DbGID1s蛋白在黄独生长发育中的作用机制提供理论参考。【方法】采用RT-PCR技术克隆DbGID1s基因,利用生物信息学软件对其理化性质、结构域、磷酸化位... 详细信息

【目的】克隆黄独赤霉素受体(GID1)基因DbGID1s,并对其进行生物学信息分析,为深入探究DbGID1s蛋白在黄独生长发育中的作用机制提供理论参考。【方法】采用RT-PCR技术克隆DbGID1s基因,利用生物信息学软件对其理化性质、结构域、磷酸化位点及系统发育进化进行预测分析。【结果】克隆获得4个DbGID1s基因序列,命名为DbGID1A、DbGID1B1、Db GID1B2和DbGID1C,GenBank登录号为MT648372、MT648374、MT648375和MT648373,长度分别为862、1273、1081和1164 bp,编码292、340、289和360个氨基酸残基。4个DbGID1s蛋白的分子量为32079.17~40301.83 Da,理论等电点(pI)为6.05~8.62,为不稳定的外在膜亲水性蛋白,不存在信号肽序列,其磷酸化位点主要以丝氨酸(Ser,S)为主,且4个蛋白的磷酸位点均有重合位点和突变位点,不仅具有α/β折叠水解酶超级家族羧酸脂肪酶水解活性区域,还具有激素脂肪酶(HSL)的保守结构域(HGG和GXSXG)和催化联合位点(S、D和H)。DbGID1s蛋白与其他植物GID1蛋白序列具有较高的氨基酸序列相似性,其中与山药的相似性达90%以上。【结论】DbGID1s基因具有多种植物GID1基因的基本特征,其编码的蛋白具有GID1蛋白典型的结构域,其可能参与赤霉素(GA)信号转导,调节黄独的生长发育。

关键词：黄独赤霉素受体(GID1) 基因克隆生物信息学分析

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园艺专业英语教学困境及改善建议——基于N大学园艺专业学生的调查

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高教学刊 2022年第17期8卷 189-192页

作者：龙雯虹徐升胜云南农业大学园林园艺学院云南昆明650201

通过问卷调查了解学生对园艺专业英语课程、教材、教学内容、教学方式的认识、要求,以及学习收获等教学相关信息。调查结果表明,绝大部分学生认为有必要开设此课程,但学习兴趣不高;学生认为选用的教材难,但接受;专业英语词汇的掌握对专... 详细信息

通过问卷调查了解学生对园艺专业英语课程、教材、教学内容、教学方式的认识、要求,以及学习收获等教学相关信息。调查结果表明,绝大部分学生认为有必要开设此课程,但学习兴趣不高;学生认为选用的教材难,但接受;专业英语词汇的掌握对专业英语学习有帮助,但学生提前接触英语专业词汇的机会少;要求提高英语阅读能力的学生比例最高,要求提高写作和口头表达能力的比例较高,但课程结束时后两种能力得到提高的学生比例较低;对于课堂教学内容,多数学生希望以阅读为主,写作、听力和语言表达的训练为辅;对于阅读理解的教学方式,接受课堂上先让学生阅读再听老师讲解的学生比例较高。在分析调查结果的基础上,作者提出教学改善建议,为今后提高教学效果奠定基础。

关键词：园艺专业专业英语教学问题教学困境

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桑叶提取物对小鼠血糖的影响及有效成分测定

蚕业科学 2005年第4期31卷 418-421页

作者：罗存敏施新琴徐升胜崔为正吴小锋山东农业大学林学院泰安271018 浙江大学动物科学学院杭州310029

探讨了桑叶提取物(mu lberry leaves extract,MLE)对小鼠血糖的影响,并测定了MLE中1-脱氧野尻霉素(DNJ)、黄酮、多酚和多糖等4种成分的含量。结果表明,MLE有抑制糖尿病模型小鼠血糖升高的作用。不同桑品种的MLE降血糖效果和有效成分含... 详细信息

探讨了桑叶提取物(mu lberry leaves extract,MLE)对小鼠血糖的影响,并测定了MLE中1-脱氧野尻霉素(DNJ)、黄酮、多酚和多糖等4种成分的含量。结果表明,MLE有抑制糖尿病模型小鼠血糖升高的作用。不同桑品种的MLE降血糖效果和有效成分含量存在很大差异,在供试的5个桑品种中,以陕桑305最佳;桑叶的叶位以上位嫩叶优于中下部叶。MLE的降血糖效果与DNJ的含量有密切关系。

关键词：桑叶提取物降血糖作用桑品种 1-脱氧野尻霉素

野桑蚕肌球蛋白轻链2基因(MLC2)的克隆和序列分析

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蚕业科学 2009年第1期35卷 71-77页

作者：许西奎徐升胜李兵许雅香沈卫德苏州大学蚕桑研究所苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123

利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了野桑蚕间接飞行肌(in-direct flight muscle,IFM)的肌球蛋白轻链2(myosin light chain2,MLC2)基因(GenBank登录号:EU332913),其cDNA序列全长979 bp,包括63 bp的5′端非翻译区序列(5′-UTR)、603 bp的开放读码框(ORF)、终止密码子TAA和310bp的3′端非翻译区序列(3′-UTR)。克隆该基因的内含子序列并分析基因结构表明,该基因包括3个外显子和2个内含子,编码201个氨基酸,预测蛋白质分子质量约22.0 kD,等电点4.67。用在线软件SMART分析显示,野桑蚕MLC2蛋白有2个Ca2+结合基序(EFh)结构域,可以结合Ca2+,属于肌钙蛋白C超家族成员,并且含有保守的可以磷酸化的氨基酸残基,有可能具有磷酸化过程,参与肌动球蛋白ATPase活性的调节。

关键词：野桑蚕肌球蛋白轻链2基因序列分析 Ca2+结合基序磷酸化

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家蚕flightin基因的克隆

中国蚕业 2009年第1期30卷 13-16页

作者：徐升胜许西奎李兵沈卫德苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123 苏州大学蚕桑研究所江苏苏州215123

Flightin蛋白对于粗肌丝的组装和性能有着重要的作用。为调查家蚕的粗肌丝结构,通过PCR和RACE技术,我们在家蚕中获得了家蚕flightin基因的全长cDNA序列,并通过对家蚕wgs数据库的检索,获得了蚕flightin基因的结构,家蚕flightin基因由4个... 详细信息

Flightin蛋白对于粗肌丝的组装和性能有着重要的作用。为调查家蚕的粗肌丝结构,通过PCR和RACE技术,我们在家蚕中获得了家蚕flightin基因的全长cDNA序列,并通过对家蚕wgs数据库的检索,获得了蚕flightin基因的结构,家蚕flightin基因由4个外显子和3个内含子组成。家蚕flightin基因的cDNA全长为661bp,编码158个氨基酸残基。家蚕flightin蛋白与黑腹果蝇flightin蛋白的氨基酸同源性为29.67%,但存在保守区域。

关键词：家蚕肌肉粗肌丝 flightin 肌球蛋白结合蛋白

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一株放线菌对丝素纤维的降解作用

蚕业科学 2007年第2期33卷 241-245页

作者：徐升胜张桂征王冰刘训理崔为正山东农业大学林学院泰安271018

探讨了一株从土壤中分离到的放线菌(C3菌株)对丝素纤维的降解特性。结果表明,C3菌株在28～37℃范围内对蚕丝纤维均具有较强的降解活性;培养基中的碳源能抑制C3菌株的降解活性,而氮源基本无影响,即在缺乏碳源和氮源或单独缺乏碳源的培养... 详细信息

探讨了一株从土壤中分离到的放线菌(C3菌株)对丝素纤维的降解特性。结果表明,C3菌株在28～37℃范围内对蚕丝纤维均具有较强的降解活性;培养基中的碳源能抑制C3菌株的降解活性,而氮源基本无影响,即在缺乏碳源和氮源或单独缺乏碳源的培养基中降解活性增强。在以丝素粉作为唯一碳源和氮源的色氨酸培养基中,C3菌株在28℃下培养6 d左右降解速度最大,并延续至第12天左右。电镜观察表明,培养基中接种C3菌株14 d时,菌丝体已经大量繁殖,丝素纤维出现降解凹陷,部分丝素纤维出现断裂;培养42 d时,丝素纤维已完全降解。

关键词：丝素纤维放线菌 C3菌株生物降解

山药赤霉素受体基因DoGID1A的克隆及表达分析

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农业生物技术学报 2019年第11期27卷 1933-1941页

作者：龙雯虹孟金贵徐升胜张雪梅段延碧杨荣萍云南农业大学园林园艺学院云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学农科教学实验中心

赤霉素受体(gibberellin insentive dwarf 1, GID1)是赤霉素(gibberellin, GA)信号转导途径的重要元件,直接影响着赤霉素对植物的作用效果。以山药(Dioscorea opposita)品种’牛尾山药’珠芽的表皮为料材,采用反转录PCR (reverse transc... 详细信息

赤霉素受体(gibberellin insentive dwarf 1, GID1)是赤霉素(gibberellin, GA)信号转导途径的重要元件,直接影响着赤霉素对植物的作用效果。以山药(Dioscorea opposita)品种’牛尾山药’珠芽的表皮为料材,采用反转录PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA ends, RACE)技术克隆山药的赤霉素受体基因GID1的cDNA全长,用qRTPCR检测山药GID1基因在山药珠芽采后不同时期的表达量,及其对多效唑处理的响应。结果显示,克隆得到的山药赤霉素受体基因GID1的c DNA全长1 123 bp,开放阅读框996 bp,编码331个氨基酸,命名为DoGID1A (GenBank No. MK268684)。生物信息学分析显示,DoGID1A蛋白质分子量为3.72×104 D,理论等电点为8.25,为不稳定蛋白,此蛋白无跨膜结构和信号肽,有典型的自水解酶(abhydrolase)活性区域(93～304 aa)。蛋白质同源性分析表明,DoGID1A蛋白与小果野芭蕉(Musa acuminata)等13种植物的GID1蛋白整体同源性达73.56%,有多个高度保守的区域,具有与DELLA和GA结合的活性区域。系统进化分析显示,山药和水稻(Oryza sativa)的GID1蛋白与其他植物进化关系远,这两种植物的GID1蛋白各自为一类,其他植物则是单子叶植物聚于一类,双子叶植物聚于另一类。qRT-PCR分析显示,山药珠芽发芽期DoGID1A表达量升高,多效唑处理使该基因表达量上调。预测该基因与山药珠芽休眠解除及发芽有关,本研究结果为进一步研究该基因的表达规律和功能提供了基础资料。

关键词：山药赤霉素受体GID1 基因克隆基因表达

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6种杀菌剂对桑树轮纹病菌的室内毒力测定

西部林业科学 2014年第6期43卷 135-138页

作者：章一鸣张泽吴庭观徐升胜何永宏安福智湖州职业技术学院建筑工程分院浙江湖州313000 云南农业大学园林园艺学院云南昆明650201 云南农业大学植物保护学院云南昆明650201 昆明市烟草公司寻甸分公司云南昆明655200

在室内培养条件下,采用菌丝生长速率法测定了6种杀菌剂对桑膝节霉的抑制效果。结果显示,6种杀菌剂对桑树轮纹病病原菌桑膝节霉的菌丝生长均有不同程度的抑制作用,其中50%多菌灵、75%百菌清、10%苯醚甲环唑、250 g/L丙环唑、450 g/L咪酰... 详细信息

在室内培养条件下,采用菌丝生长速率法测定了6种杀菌剂对桑膝节霉的抑制效果。结果显示,6种杀菌剂对桑树轮纹病病原菌桑膝节霉的菌丝生长均有不同程度的抑制作用,其中50%多菌灵、75%百菌清、10%苯醚甲环唑、250 g/L丙环唑、450 g/L咪酰胺和70%甲基硫菌灵的EC50分别为2.45 mg/L、2.51 mg/L、1.68mg/L、1.31 mg/L、0.46 mg/L和7.99 mg/L。测试药剂中,供试桑树轮纹病菌对450 g/L咪酰胺最为敏感,250g/L丙环唑次之。450 g/L咪酰胺和250 g/L丙环唑皆可作为防治桑树轮纹病的最佳药剂,用于田间试验。

关键词：杀菌剂生长速率法毒力测定桑膝节霉