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高产蛋白酶白色芽孢杆菌复合诱变的研究

高产蛋白酶白色芽孢杆菌复合诱变的研究

作者：鄢烽南昌大学

学位级别：硕士

蛋白酶是当前我国三大工业酶之一。随着我国经济发展,蛋白酶的需求随之增长,对微生物产的蛋白酶需求急剧增加。目前,我国微生物生产蛋白酶存在高产蛋白酶菌株少、蛋白酶产率低等问题。针对以上问题,本研究以农田土壤为样品,从中分离筛... 详细信息

蛋白酶是当前我国三大工业酶之一。随着我国经济发展,蛋白酶的需求随之增长,对微生物产的蛋白酶需求急剧增加。目前,我国微生物生产蛋白酶存在高产蛋白酶菌株少、蛋白酶产率低等问题。针对以上问题,本研究以农田土壤为样品,从中分离筛选出一株产蛋白酶菌株,经鉴定为白色芽孢杆菌,命名为Bacillus albus NCU001。以其为出发菌株,采用等离子束-亚硝酸钠复合诱变的方法进行改造,获得一株高产蛋白酶的突变菌株NCU001 B5,并优化了其摇瓶培养最佳发酵及产酶条件,拓宽了我国工业蛋白酶的生产途径。研究的主要结果如下:（1）产蛋白酶菌株分离筛选。以农田土壤为样品,采用平板初筛和酪蛋白培养基复筛的方法分离筛选出一株产蛋白酶细菌,其透明圈（水解圈）直径H与菌落直径C的比值（H/C）为2.6,蛋白酶酶活为36.87 U/m L。经形态、生理生化以及分子生物学鉴定该菌株为白色芽孢杆菌,命名为Bacillus albus NCU001。（2）高产蛋白酶菌株选育。以自筛产蛋白酶菌株NCU001为出发菌株,考察等离子体-亚硝酸钠复合诱变效果,将等离子体诱变、亚硝酸钠诱变作为对照。等离子体-亚硝酸钠复合诱变的最佳条件为等离子体功率800 W、处理时间为40 s、亚硝酸钠浓度0.075 mol/L、亚硝酸钠处理温度30℃、亚硝酸钠处理时间11 min,结果为致死率82%、正突变率75%;突变菌株蛋白酶酶活为160.34U/m L,其产酶能力相较于出发菌株提高了3.3倍,故筛选得到高产蛋白酶菌株一株,命名为Bacillus albus NCU001 B5。蛋白酶基因比对结果表明:在白色芽孢杆菌NCU001 B5中发现新的蛋白酶基因npr B＿2和apr X,表明菌株发生突变,从而提升产酶能力。以上结果说明等离子束-亚硝酸钠复合诱变选育高产蛋白酶白色芽孢杆菌NCU001 B5菌株是可行的。（3）蛋白酶酶学特性。对白色芽孢杆菌NCU001 B5蛋白酶的酶学特性研究,结果显示:其蛋白酶属于中性蛋白酶,最适温度为35℃、最适p H为7.0;铜离子、钾离子、钙离子存在的条件下酶活提高了10%、12%和15%,而锌离子、镁离子对酶活性有抑制作用;蛋白酶的活性与反应体系中盐浓度呈现出负相关的关系;蛋白酶的米氏常数（Km）为1.53 mg/m L,最大反应速率(Vmax)为136.05μg/（min·m L）。（4）发酵产蛋白酶工艺优化。考察了氮源的种类（花生粕、豆粕、蛋白胨、牛肉膏和硫酸铵）、氮源的浓度（0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%和3%）、碳源的种类（可溶性淀粉、葡萄糖、玉米粉、麦芽糖和乳糖）、碳源的浓度（0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%和3%）、初始p H（5.2、6.2、7.2、8.2和9.2）、生长因子浓度（0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%和1.2%）、温度（22℃、27℃、32℃、37℃、42℃和47℃）、摇床转速（140 rpm、160 rpm、180 rpm、200 rpm和220 rpm）、接种量（1.0%、2.0%、3.0%、4.0%和5.0%）对白色芽孢杆菌NCU001 B5发酵产蛋白酶的影响,根据单因素及响应面分析得到最佳条件。结果表明:白色芽孢杆菌NCU001 B5蛋白酶的最佳发酵工艺为2.0%花生粕、1.5%玉米粉、0.6%麸皮、初始p H7.2、温度为37℃、摇床转速200 rpm和接种量3%。优化后的突变菌株NCU001 B5蛋白酶的活力高达381.60 U/m L,较优化前提高了约1.38倍。

关键词：白色芽孢杆菌等离子束-亚硝酸钠复合诱变蛋白酶基因发酵工艺

新时代党建节目的守正创新与融合传播——昆明广播电视台党建节目矩阵评析

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中国广播电视学刊 2024年第7期 22-26页

作者：徐伟姚蕾昆明市融媒体中心

党建节目作为党的新闻舆论工作的重要组成部分,承担特殊的使命任务,是反映全面从严治党的重要阵地,是教育引导联系服务党员的重要平台,是沟通党和人民群众的重要桥梁。本文立足当前党建节目现状,以昆明广播电视台实践为例,介绍在习近平... 详细信息

党建节目作为党的新闻舆论工作的重要组成部分,承担特殊的使命任务,是反映全面从严治党的重要阵地,是教育引导联系服务党员的重要平台,是沟通党和人民群众的重要桥梁。本文立足当前党建节目现状,以昆明广播电视台实践为例,介绍在习近平新时代中国特色社会主义思想指导下,党建节目矩阵建设发展成果。从一域节目探讨在媒体深度融合发展和受众获取信息方式转变的时代背景下,面对新形势新任务新要求,党建节目存在的突出问题,提出办好办活办强党建节目的意见建议,以期为强国建设、民族复兴伟业贡献力量。

关键词：党建节目传播矩阵发展困境融合创新

基于虚拟同步发电机技术的功频响应优化策略研究

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基于虚拟同步发电机技术的功频响应优化策略研究

作者：王铭烽东北电力大学

学位级别：硕士

随着分布式能源的快速发展以及大量并网,逆变器在电网中的占比也随之增高,由此造成的大电网惯量和阻尼缺失以及电网稳定性问题已不容忽视。国内外学者提出了虚拟同步发电机(VSG)控制,通过算法控制使得逆变器具有和同步发电机(SG)相同的... 详细信息

随着分布式能源的快速发展以及大量并网,逆变器在电网中的占比也随之增高,由此造成的大电网惯量和阻尼缺失以及电网稳定性问题已不容忽视。国内外学者提出了虚拟同步发电机(VSG)控制,通过算法控制使得逆变器具有和同步发电机(SG)相同的惯量阻尼以及调频调压特性,以此来提高系统的稳定性。本文中的研究以VSG控制下的逆变器为研究对象,对其控制原理进行一系列的深入讨论研究,并在其基础上进行控制方面的改进,用以优化VSG的功频响应。具体研究内容如下:(1)分析同步发电机电气部分和机械部分的实现原理和数学模型,类比VSG控制和同步发电机特性的异同点,探讨了传统VSG控制如何通过有功-频率环和无功-电压环对同步发电机的相应特性进行模拟。建立了VSG控制的仿真模型,基于仿真模型研究VSG在孤岛模式和并网模式下的运行情况,为后续研究提供理论基础。(2)讨论同步发电机和VSG控制两个角度下转动惯量和阻尼系数的物理意义。建立了VSG控制的小信号模型,研究惯量阻尼参数对VSG控制暂态过程以及稳定性的影响,并揭示其规律。分析系统在暂态不同阶段所处的状态及参数最优变化趋势,讨论参数自适应控制的可行性和优越性。根据参数调节机理设计了参数自适应算法,该算法通过优化有功-频率环中的惯量和阻尼参数实现了系统输出功频响应的优化和稳定运行。(3)考虑到参数协同自适应控制虽然能够优化频率响应,但有其限制,且无法对系统的二次调频作出贡献。基于此,将模型预测控制(MPC)与参数协同自适应控制相结合,设计了一种改进MPC-VSG控制算法。首先阐述了MPC控制的基本原理和控制结构,并将其理论应用于VSG控制中,综合考虑其调频能力和调节成本,设计了相应的目标函数以及权重调整系数。随后引入参数协同自适应控制,在MPC控制的基础上对惯量和阻尼系数进行优化,并分析了系统的稳定性。采用本文所设计的控制策略能够在优化系统功频响应的同时辅助柴油发电机进行二次调频,提高系统的稳定性。(4)由于改进MPC-VSG控制对计算量的需求较高,会增大设备的计算压力。基于此,将模糊控制与不确定性扰动估计器(UDE)相结合设计了一种算法。首先阐述了模糊控制和UDE的基本原理,并建立了UDE在LTI-SISO系统中的控制器,比对该控制与PID控制的追踪效果,并进行仿真验证。随后将模糊控制与UDE原理相结合并应用于VSG中,一方面通过模糊控制在不同的暂态阶段优化惯量和阻尼参数,另一方面通过UDE原理从系统角度抑制功频振荡,提升系统鲁棒性。采用该控制策略能够在降低计算量的同时显著改善系统的动态性能。

关键词：虚拟同步发电机自适应控制模型预测控制模糊控制不确定性和扰动估计功频响应优化

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多模态融合的巡检机器人感知与规划

多模态融合的巡检机器人感知与规划

作者：郭烈烽天津理工大学

学位级别：硕士

后人类视角下《克拉拉与太阳》中的科技伦理观研究

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后人类视角下《克拉拉与太阳》中的科技伦理观研究

作者：马海烽桂林理工大学

学位级别：硕士

产业数据仓建设中的政府职能研究 ——以Z省为例

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产业数据仓建设中的政府职能研究 ——以Z省为例

作者：傅豪烽北京化工大学

学位级别：硕士

数字经济大背景下,中国政府定义数字经济发展为国家发展的重要战略。为响应国家“十四五”战略,推动产业数字化深层转型,Z省致力于整合公共基础数据、生产要素数据和供应链数据,构建一个汇聚政府、企业、产业和行业互联的产业数据仓。... 详细信息

数字经济大背景下,中国政府定义数字经济发展为国家发展的重要战略。为响应国家“十四五”战略,推动产业数字化深层转型,Z省致力于整合公共基础数据、生产要素数据和供应链数据,构建一个汇聚政府、企业、产业和行业互联的产业数据仓。产业数据仓的建设不仅涉及技术层面的挑战,更关键的是政府在其中所扮演的角色及其职能的有效发挥。本文以引导型政府职能理论和政府干预理论为分析框架,利用案例分析法,采取Z省产业数据仓为研究对象,并通过文献研究法和访谈法从各级数仓建设主体收集一手资料。经过对包括省级产业数据仓、市县级产业数据仓、行业数据仓和企业数据仓在内的各级产业数据仓的研究,分析省市县各级政府在其中的职能表现,提炼其中政府职能发挥的共性部分,将Z省产业数据仓建设过程中政府职能概括为“统筹与规划、协调与指导和监督与管理”三个维度。结合访谈内容和实践经验,分析产业数据仓建设中的政府职能问题,发现政府项目统筹规划尚不充分不合理,具体表现为“宏观总体规划凸显,具体项目规划不受重视;招标流程滞后,技术选型审慎性不足”;政府协调与指导职能未充分体现,具体表现为“省级政策宣讲不到位,市县及行业理解片面化;市县级政府职能缺位,数仓建设主体间沟通反馈受阻”;政府监督与管理存在不全面不规范的问题,具体表现为“日常监管缺失;考评体系不合理”。对以上问题进行原因分析,总结原因为:传统行政理念的阻碍;沟通反馈机制的不完善以及监管机制的不系统。最后,探究政府职能的可优化路径,提出了“深化行政理念转变”、“完善沟通反馈机制”、“健全政府监管机制”三个可能有效的优化策略,为完善产业数据仓建设中的政府职能发挥提供方向。展望未来,数字经济发展势不可挡,推动现代产业体系发展,打造制造强国,建立联通各产业行业的数据平台,这对于政府来说是极大的挑战,对政府职能的发挥和优化提出极高的要求。在这场旷日持久的战斗中,唯有政府职能的不断优化,引导各个产业链上下游的共同发力,才能推动产业的发展。

关键词：政府职能产业数据仓引导型政府政府干预

面向高光谱遥感图像分类的噪声标签识别与纠正

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面向高光谱遥感图像分类的噪声标签识别与纠正

作者：张桂烽湖南理工学院

学位级别：硕士

miR-147a、SMARCE1、KGFR在宫颈癌中的表达及相关性

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中国老年学杂志 2024年第19期 4636-4641页

作者：郭清烽赖海清于鹏厦门市妇幼保健院妇科

目的分析微小RNA(miR)-147a、SWI/SNF相关基质连锁染色质的肌动蛋白依赖的调节子亚家族e成员(SMARCE)1、角质细胞生长因子受体(KGFR)在宫颈癌中表达及相关性。方法选取宫颈癌患者50例，并留取宫颈癌组织及距离癌组织边缘5 cm的癌旁组... 详细信息

目的分析微小RNA(miR)-147a、SWI/SNF相关基质连锁染色质的肌动蛋白依赖的调节子亚家族e成员(SMARCE)1、角质细胞生长因子受体(KGFR)在宫颈癌中表达及相关性。方法选取宫颈癌患者50例，并留取宫颈癌组织及距离癌组织边缘5 cm的癌旁组织，另外选取非宫颈癌患者50例(因子宫肌腺症或子宫肌瘤而行子宫切除术切除的正常宫颈组织)。采取免疫组化法测定癌旁组织、癌组织标本miR-147a、SMARCE1、KGFR阳性表达率。结果与正常宫颈组织相比，癌旁组织中SMARCE1、KGFR阳性率高，miR-147a阳性率低；与癌旁组织相比，宫颈癌组织中SMARCE1、KGFR阳性率较高，miR-147a阳性率较低，差异有统计学意义(P<0.05)。miR-147a与TNM分期、淋巴结转移、分化程度、浸润情况、间质浸润呈负相关，SMARCE1、KGFR与TNM分期、淋巴结转移、分化程度、浸润情况、间质浸润呈正相关(P<0.05)。将年龄、产次、病理类别等因素控制后，miR-147a、SMARCE1、KGFR与TNM分期、淋巴结转移、分化程度、浸润情况、间质浸润相关(P<0.05)。随访3年，失访2例，48例宫颈癌患者3年生存率为85.42%(41/48)。miR-147a阳性表达患者生存率高于miR-147a阴性表达患者，SMARCE1、KGFR阳性表达患者生存率低于SMARCE1、KGFR阴性表达患者，差异显著(P<0.05)。结论在宫颈癌患者中miR-147a呈低表达，SMARCE1、KGFR呈高表达，且miR-147a、SMARCE1、KGFR表达与宫颈癌患者TNM分期、淋巴结转移、分化程度、浸润情况、间质浸润相关。

关键词：宫颈癌微小RNA-147a 角质细胞生长因子受体

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我国《法律适用法》立法补缺规则的实践省思

当代法学 2024年第1期38卷 147-160页

作者：徐伟功中南财经政法大学法学院

《法律适用法》第2条第2款采取最密切联系原则克服立法的滞后性和不周延性。截至2023年8月31日,我国法院审理涉及第2条第2款涉外民商事案件近300件,其主要分布在东南沿海发达地区。第2条第2款主要适用于法律没有规定或法律规定不周延两... 详细信息

《法律适用法》第2条第2款采取最密切联系原则克服立法的滞后性和不周延性。截至2023年8月31日,我国法院审理涉及第2条第2款涉外民商事案件近300件,其主要分布在东南沿海发达地区。第2条第2款主要适用于法律没有规定或法律规定不周延两种情况,其运用过程中存在无推理、与其他条款混用及错误适用等问题。为了进一步提高第2条第2款司法实践运用水平,立法上应规定意思自治原则进行补充、实践上应明确其适用的具体范围、司法上应采取综合分析方法。

关键词：法律适用法最密切联系原则自由裁量权