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PM2.5暴露通过NF-κB信号通路致雄性大鼠生殖功能障碍

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实用医学杂志 2022年第7期38卷 836-840,847页

作者：邱娴娴安妮妮江克华彭金普赵银银孙发贵州医科大学贵阳550004 贵州医科大学附属人民医院贵阳550002

目的本文旨在探讨PM2.5致雄性大鼠生殖功能障碍的可能机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为3组:生理盐水对照组、PM2.5低浓度(PM 4.3 mg/mL)暴露组和PM2.5高浓度(PM 12.9 mg/mL)暴露组,每组10只。每隔2天经气管滴注法PM2.5混悬液(剂量:... 详细信息

目的本文旨在探讨PM2.5致雄性大鼠生殖功能障碍的可能机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为3组:生理盐水对照组、PM2.5低浓度(PM 4.3 mg/mL)暴露组和PM2.5高浓度(PM 12.9 mg/mL)暴露组,每组10只。每隔2天经气管滴注法PM2.5混悬液(剂量:1 mL/kg),连续暴露4周后观察大鼠生长状态并取材,计算睾丸系数并观察睾丸组织细胞形态学变化,检测血清睾酮含量、NF-κB炎症信号通路相关蛋白表达情况。结果与对照组相比,实验组睾丸重量及睾丸系数减低。光镜下观察,实验组大鼠睾丸组织曲细精管管壁变薄,各级生精细胞排列松散紊乱,管腔中成熟精子数量减少。与对照组相比,实验组血清睾酮水平显著下降(P <0.05)。Q-PCR法结果表明,实验组炎性因子IL-6、TNF-αmRNA表达量较对照组升高,差异有统计学意义(P <0.05);Western blot法结果显示与对照组相比,NF-κB信号通路相关蛋白IKK(IκB激酶)、NF-κB、p-NF-κB p65、p-IκB-α表达显著上调,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 PM2.5可能通过诱导NF-κB炎症信号通路,上调IL-6、TNF-α的表达,从而导致雄性大鼠生殖功能障碍。

关键词： PM2.5 NF-κB 生殖功能障碍不育症大鼠雄性

miR-135a-5p对氟他胺致隐睾小鼠胰岛素样因子3及睾酮表达的影响

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安徽医科大学学报 2023年第10期58卷 1662-1665页

作者：杨远贵安妮妮陈辉何国庆占雄吴谋东汪丹王蔚彭金普贵州省人民医院小儿外科贵阳550002

目的探讨miR-135a-5p对氟他胺导致的隐睾症小鼠睾丸组织中胰岛素样因子3(INSL3)和睾酮表达水平的影响。方法构建氟他胺致隐睾小鼠模型,将实验分为正常对照组、氟他胺组、氟他胺+miR-135a-5p敲降组及氟他胺+miR-135a-5p过表达组。用RT-q... 详细信息

目的探讨miR-135a-5p对氟他胺导致的隐睾症小鼠睾丸组织中胰岛素样因子3(INSL3)和睾酮表达水平的影响。方法构建氟他胺致隐睾小鼠模型,将实验分为正常对照组、氟他胺组、氟他胺+miR-135a-5p敲降组及氟他胺+miR-135a-5p过表达组。用RT-qPCR法检测小鼠睾丸组织中miR-135a-5p和INSL3 mRNA的表达水平;用Western blot检测INSL3蛋白的表达水平;用ELISA法检测睾酮的表达水平。结果氟他胺致隐睾小鼠睾丸组织中miR-135a-5p、INSL3 mRNA和蛋白以及睾酮的表达水平均显著下调(P<0.05)。敲降miR-135a-5p可下调隐睾睾丸组织中INSL3 mRNA和蛋白以及睾酮的表达水平(P<0.01),而过表达miR-135a-5p则具有相反的结果。结论miR-135a-5p在氟他胺致隐睾小鼠睾丸组织中低表达,过表达miR-135a-5p可恢复INSL3和睾酮的表达水平。

关键词：隐睾症氟他胺 miR-135a-5p 胰岛素样因子3 睾酮

气膀胱腹腔镜Cohen术治疗小儿膀胱输尿管连接部畸形的疗效

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中华实用儿科临床杂志 2017年第19期32卷 1503-1505页

作者：吴谋东占雄毕允力彭金普安妮妮贵州省人民医院小儿外科贵阳550002 复旦大学附属儿科医院小儿泌尿外科上海201102

目的探讨气膀胱腹腔镜行膀胱内横向黏膜下推进抗反流输尿管膀胱再植术（Cohen术）治疗先天性膀胱输尿管连接部畸形的疗效。方法收集2014年2月至2016年8月贵州省人民医院收治的12例先天性膀胱输尿管连接部畸形患儿临床资料。年龄1岁2个月... 详细信息

目的探讨气膀胱腹腔镜行膀胱内横向黏膜下推进抗反流输尿管膀胱再植术（Cohen术）治疗先天性膀胱输尿管连接部畸形的疗效。方法收集2014年2月至2016年8月贵州省人民医院收治的12例先天性膀胱输尿管连接部畸形患儿临床资料。年龄1岁2个月至11岁，平均年龄5．26岁；男8例，女4例。左侧输尿管末端狭窄6例，右侧输尿管末端狭窄1例，左侧输尿管末端囊肿并重复输尿管开口异位l例，右侧重复肾畸形伴输尿管末端囊肿1例，右侧原发性膀胱输尿管反流伴左侧输尿管末端狭窄1例，双侧原发性膀胱输尿管反流2例，其中1例伴右侧输尿管末端囊肿。所有患儿均留置导尿管及双J管，不行膀胱造瘘，均在气膀胱腹腔镜下行Cohen输尿管再植术，术后1—3个月拔除双J管，B超随访输尿管及肾积水程度变化，尿常规了解有无尿路感染，静脉尿路造影（IVU）检查吻合有无狭窄，排尿性膀胱尿道造影（MCU）检查有无反流。结果12例手术过程均顺利，未中转开放手术。手术时间100～330min，平均207min。12例术后均痊愈出院。随访3～10个月，无尿路感染及吻合口狭窄发生，术后肾积水及输尿管扩张程度较前减轻。2例在随访早期出现轻度反流，经保守治疗后好转，无再次手术病例。结论气膀胱腹腔镜Cohen术治疗小儿膀胱输尿管连接部畸形效果确切，值得临床应用。

关键词：气膀胱腹腔镜再植先天畸形

汽车尾气来源PM2.5颗粒物长期暴露导致SD雄鼠生殖功能损害

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中华男科学杂志 2016年第2期22卷 104-109页

作者：严超曹希宁沈炼桔刘东尧彭金普陈进军周玥龙春兰林涛何大维李旭良魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿科学重庆市重点实验室儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆400014

目的：建立Sprague Dawley（SD）大鼠空气细颗粒物（PM2.5）长期暴露模型,研究PM2.5长期暴露对SD大鼠生殖功能的损伤及其机制。方法：45只SD大鼠（80~94 g,28日龄）随机分配成3组：生理盐水对照组,低剂量组[2μg/（100 g·d）],高剂量组... 详细信息

目的：建立Sprague Dawley（SD）大鼠空气细颗粒物（PM2.5）长期暴露模型,研究PM2.5长期暴露对SD大鼠生殖功能的损伤及其机制。方法：45只SD大鼠（80~94 g,28日龄）随机分配成3组：生理盐水对照组,低剂量组[2μg/（100 g·d）],高剂量组[16μg/（100 g·d）]。每天分别给予0.9%的生理盐水或PM2.5颗粒,连续暴露60 d,最后一次暴露24 h后各实验组选取10只与正常雌鼠合笼,统计雌鼠受孕率,剩余实验鼠取材,进行精子计数和畸形率测定、睾丸组织病理学检测以及睾丸组织Connexin43蛋白表达检测。结果：与对照组雌鼠受孕率（100%）相比,PM2.5暴露组正常雌鼠受孕率（高剂量组50%,低剂量组70%）明显降低,精子数量和质量明显下降,生精小管结构紊乱,管腔精子数减少,部分次级精母细胞脱落至管腔。睾丸组织中Connexin43蛋白表达下降,血睾屏障破坏。结论：汽车尾气来源PM2.5长期暴露影响SD大鼠生殖功能。

关键词：空气细颗粒物大鼠汽车尾气生殖功能

气膀胱Cohen术与腹腔镜膀胱外输尿管再植术治疗输尿管末端梗阻的疗效比较

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中华小儿外科杂志 2020年第2期41卷 118-122页

作者：吴谋东彭金普周辉霞占雄杨远贵汪丹安妮妮贵州省人民医院小儿外科贵阳550002 解放军总医院第七医学中心小儿泌尿外科北京100700

目的评价气膀胱Cohen术与腹腔镜膀胱外输尿管再植术治疗小儿膀胱输尿管连接部梗阻的临床效果。方法收集2014年2月至2019年8月本院收治的31例单侧先天性膀胱输尿管连接部梗阻患儿资料,按手术方式分为腹腔镜气膀胱Cohen再植组(17例)和腹... 详细信息

目的评价气膀胱Cohen术与腹腔镜膀胱外输尿管再植术治疗小儿膀胱输尿管连接部梗阻的临床效果。方法收集2014年2月至2019年8月本院收治的31例单侧先天性膀胱输尿管连接部梗阻患儿资料,按手术方式分为腹腔镜气膀胱Cohen再植组(17例)和腹腔镜膀胱外输尿管再植组(14例)。比较两组手术时间、术后静脉使用抗生素时间、术后血尿时间、留置尿管时间、术后住院时间及住院费用。结果气膀胱Cohen再植组与腹腔镜下膀胱外再植组手术时间分别为(194±46)min、(152±52)min,术后住院时间分别为(8.1±1.1)d、(6.4±1.2)d,术后血尿时间分别为(3.2±0.7)d、(1.5±1.1)d,差异均具有统计学意义。术后抗生素使用时间分别为(5.6±1.1)d、(5.2±1.2)d,留置尿管时间分别为(6.3±1.3)d、(5.5±1.2)d,住院总费用分别为(23357.2±4638.5)元、(21194±3518.2)元,差异均不具有统计学意义。两组均无中转开放手术,随访3~12个月,获访病例临床症状均缓解,术后气膀胱Cohen再植组获随访13例,复查超声提示10例输尿管恢复正常,输尿管积水消失,1例发生术后尿路感染,1例输尿管轻度扩张,2例有输尿管Ⅱ°反流。腹腔镜膀胱外再植组获随访11例,复查超声提示10侧输尿管恢复正常,输尿管积水消失;1例输尿管轻度扩张,未见输尿管反流。结论两种手术方式治疗小儿膀胱输尿管连接部梗阻临床疗效均确切,腹腔镜膀胱外输尿管再植术较气膀胱腹腔镜输尿管再植术术中用时少、膀胱创伤小、术后恢复更快,为安全有效的手术方式。

关键词：膀胱腹腔镜输尿管再植

视黄酸通过miR-210促进隐睾生精细胞增殖分化

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中国生育健康杂志 2022年第5期33卷 439-443页

作者：陆峰安妮妮陈辉何国庆占雄吴谋东汪丹王蔚彭金普贵州省人民医院小儿外科贵阳550002

目的探讨视黄酸(RA)通过miR-210对隐睾生精细胞增殖分化的影响。方法使用氟他胺诱导隐睾小鼠模型,实验分为:正常对照组、氟他胺组、RA治疗组、miR-210敲降组、miR-210过表达组以及miR-210过表达+RA治疗组,每组各10只。使用RT-qPCR检测... 详细信息

目的探讨视黄酸(RA)通过miR-210对隐睾生精细胞增殖分化的影响。方法使用氟他胺诱导隐睾小鼠模型,实验分为:正常对照组、氟他胺组、RA治疗组、miR-210敲降组、miR-210过表达组以及miR-210过表达+RA治疗组,每组各10只。使用RT-qPCR检测miR-210、C-kit和PLZF mRNA的表达水平。使用Western blot检测C-kit和PLZF的表达水平。结果 RA可显著上调隐睾组织中C-kit、PLZF mRNA和蛋白的表达水平,下调miR-210的表达水平。敲降miR-210可上调隐睾组织中C-kit、PLZF mRNA和蛋白表达水平,而过表达miR-210则具有相反的结果;同时,过表达miR-210+RA治疗可恢复过表达miR-210对C-kit和PLZF表达的抑制作用。结论 miR-210在隐睾组织中高表达,RA可通过下调miR-210的表达水平促进隐睾生精细胞增殖分化。

关键词：隐睾症生精细胞增殖分化视黄酸 miR-210

超微通道与微通道经皮肾镜取石术治疗小儿肾结石的临床对比研究

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中华小儿外科杂志 2020年第3期41卷 248-251页

作者：占雄汪丹朱建国彭金普吴谋东陆峰何国庆安妮妮贵州省人民医院小儿外科贵阳550002 贵州省人民医院泌尿外科贵阳550002

目的比较超微通道经皮肾镜取石术(super-mini-percutaneous nephrolithotomy,SMP)与微通道经皮肾镜取石术(mini-percutaneous nephrolithotomy,MPCNL)在小儿肾结石治疗方面的安全性和疗效。方法回顾性分析2014年3月至2016年7月在超声引导下行SMP和MPCNL治疗40例肾结石患儿的临床资料。按手术方法不同将患儿分为SMP组(18例)和MPCNL组(22例)。SMP组男14例,女4例;年龄(7.9±4.4)岁;结石大小(15.41±5.63)mm。MPCNL组男14例,女8例;年龄(8.62±3.41)岁;结石大小(16.77±3.59)mm。对两组手术时间、一期结石清除率、术后并发症等参数进行统计学分析,对比分析两种术式的特点。结果SMP组建立经皮肾通道时间为(10.75±2.70)min,较MPCNL组(19.68±6.95)min短,且两组比较,差异有统计学意义(P=0.016)。SMP组与MPCNL组的一期结石清除率分别为83.33%(15/18)和81.81%(18/22),手术时间分别为(83.33±46.72)min和(101.36±38.91)min,术后血红蛋白损失量分别为(7.59±7.51)g/L和(7.75±8.77)g/L,组间比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。两组均无术中输血病例。术后SMP组出现ClavienⅠ级并发症1例(5.55%),MPCNL组5例(22.72%),均为术后发热,均经积极抗感染治疗后好转;两组均无ClavienⅡ、Ⅲ级并发症发生。所有患儿术后B型超声随访1~2年,两组均无肾积水、肾萎缩病例。结论SMP与MPCNL对于儿童肾结石都是安全、有效的微创碎石方法。但SMP与MPCNL相比,通道更小,镜体纤细,更适合婴幼儿或盏颈狭小、下盏结石的患儿。

关键词：肾结石经皮肾镜取石术儿童

维甲酸促进隐睾大鼠睾丸生精功能改善的实验研究

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中华小儿外科杂志 2019年第4期40卷 363-369页

作者：周宇彭金普张德迎周玥龙春兰沈炼桔刘星林涛何大维魏光辉重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科儿童泌尿生殖发育与组织工程重点实验室儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室400014

目的探讨维甲酸改善氟他胺诱导隐睾大鼠生精功能的相关机制,为临床预防隐睾患儿发生不育提供动物实验基础。方法30只雌性SD大鼠合笼成功后采用随机数字表法平均分为:对照组10只,孕期第12~20天皮下注射1 mg/ml的玉米油25 mg·kg^-1·d^-1... 详细信息

目的探讨维甲酸改善氟他胺诱导隐睾大鼠生精功能的相关机制,为临床预防隐睾患儿发生不育提供动物实验基础。方法30只雌性SD大鼠合笼成功后采用随机数字表法平均分为:对照组10只,孕期第12~20天皮下注射1 mg/ml的玉米油25 mg·kg^-1·d^-1;氟他胺诱导隐睾组10只,孕期第12~20天皮下注射玉米油配制的氟他胺25 mg·kg^-1·d^-1;维甲酸干预组10只,在氟他胺诱导隐睾组处理基础上,予子代雄鼠生后1~10 d及28~30 d玉米油配制的维甲酸1 mg·kg^-1·d^-1。于生后30 d及60 d观察子代雄鼠睾丸组织病理、精子数量及质量,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测氧化应激水平蛋白、凋亡水平蛋白及血睾屏障相关连接蛋白水平改变。结果对照组无隐睾发生,睾丸重量为(0.56±0.17) g,体积为(0.44±0.12)cm^3,精子数量为(2.25±0.14)个/ml;睾丸组织各级生精细胞排列整齐,层次清楚,可见较多精子细胞;氧化应激蛋白SOD1、HO-1、Gpx表达量分别为0.92±0.02和0.62±0.06、0.93±0.12,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.67±0.06和0.80±0.04,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-1表达量分别为1.44±0.07和3.84±0.10。氟他胺诱导隐睾组隐睾发生率为62.50%(20/32),睾丸重量为(0.13±0.03) g、体积为(0.07±0.02)cm^3,精子数量为(0.65±0.17)个/ml,上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);睾丸组织各级生精细胞排列紊乱,层次不清,结构破坏;氧化应激蛋白SOD1、HO-1、Gpx表达量分别为1.23±0.07和0.90±0.09、1.70±0.01,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.87±0.01和0.53±0.20,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-1表达量分别为0.51±0.07和1.48±0.25,上述指标与对照组比较,差异亦均有统计学意义(P<0.05)。维甲酸干预组睾丸重量为(0.29±0.11) g、体积为(5.21±0.30)cm^3,精子计数为(1.49±0.31)个/ml,与对照组比较差异无统计学意义,但较氟他胺诱导隐睾组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。维甲酸干预组隐睾发生率为61.76%(21/34),与氟他胺诱导隐睾组比较差异无统计学意义;睾丸组织各级生精细胞排列相对整齐,整体表现更接近于对照组;氧化应激蛋白SOD1、HO-1、Gpx表达量分别为0.94±0.01、0.76±0.02和0.96±0.02,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.68±0.02和0.76±0.06,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-1表达量分别为1.12±0.04和2.07±0.17,与对照组比较,差异无统计学意义,但较氟他胺诱导隐睾组明显降低/升高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氟他胺诱导的隐睾大鼠基础上,予以生后维甲酸干预可通过明显降低隐睾睾丸组织内的氧化应激及凋亡水平,部分修复已受损的血睾屏障,进而使隐睾大鼠生精功能得到部分改善。

关键词：隐睾维甲酸氧化应激凋亡血睾屏障

视黄酸促隐睾大鼠生精功能修复的作用及机制研究

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视黄酸促隐睾大鼠生精功能修复的作用及机制研究