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CATH-B1抑制肠外致病性大肠杆菌诱导小胶质细胞炎性反应的作用研究

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微生物学报 2024年第7期 2381-2393页

作者：许雅婷潘言迪徐刘溢方仁东江莎彭练慈西南大学动物医学院

【目的】探究抗菌肽CATH-B1对肠外致病性大肠杆菌RS218感染诱导小胶质细胞(BV2细胞)炎症反应的影响及作用机制。【方法】使用RS218感染小胶质细胞作为炎症模型，试验分为Mock组、RS218感染组和CATH-B1预处理+RS218感染组。采用Cell Coun... 详细信息

【目的】探究抗菌肽CATH-B1对肠外致病性大肠杆菌RS218感染诱导小胶质细胞(BV2细胞)炎症反应的影响及作用机制。【方法】使用RS218感染小胶质细胞作为炎症模型，试验分为Mock组、RS218感染组和CATH-B1预处理+RS218感染组。采用Cell Counting Kit-8 (CCK8)试剂盒检测细胞活力，通过菌落计数法检测CATH-B1对细菌生长的影响和细菌的黏附入侵，酶联免疫吸附测定法检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor α,TNF-α)含量，实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,RT-PCR)检测IL-1β和IL-6 m RNA表达水平，蛋白质印迹分析(Western blotting)法检测细胞中转录因子蛋白家族核因子κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB) P65和P-P65、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK) ERK和P-ERK的蛋白表达水平。【结果】CATH-B1显著降低了RS218诱导的促炎细胞因子IL-1β、IL-6和IL-12的水平，同时显著抑制IL-1β和IL-6 m RNA表达，尽管CATH-B1对细菌的黏附入侵无显著影响，但CATH-B1能够显著抑制P65和ERK磷酸化蛋白的表达。【结论】CATH-B1通过抑制NF-κB和MAPK信号通路的活化来发挥抑制炎症作用，为阐明抗菌肽抗神经炎症机制提供了重要依据。

关键词： CATH-B1 肠外致病性大肠杆菌小胶质细胞炎症 NF-κB/MAPK信号通路

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宿主防御肽抗病毒感染机制研究进展

微生物学报 2023年第4期63卷 1305-1317页

作者：万超彭练慈叶超西南大学动物医学院、动物健康与动物性食品安全国际合作联合实验室重庆400715 草食动物科学重庆市重点实验室重庆400715

宿主防御肽是一类广泛存在于脊椎动物的小分子多肽,具有广谱的抗菌活性以及抗炎、细胞趋化、促进血管生成和修复损伤等免疫调节功能。以往的研究多集中在宿主防御肽抗细菌和真菌感染的研究上。近年来大量研究发现,宿主防御肽也具有广泛... 详细信息

宿主防御肽是一类广泛存在于脊椎动物的小分子多肽,具有广谱的抗菌活性以及抗炎、细胞趋化、促进血管生成和修复损伤等免疫调节功能。以往的研究多集中在宿主防御肽抗细菌和真菌感染的研究上。近年来大量研究发现,宿主防御肽也具有广泛的抗病毒活性,在临床各类病毒病的预防和治疗上具有潜在的应用前景。本文围绕宿主防御肽直接杀伤病毒、调节病毒感染过程和参与宿主抗病毒天然免疫调节这3个方面的作用机制进行综述,为宿主防御肽抗病毒相关研究和相关抗病毒生物药物的研发提供参考和借鉴。

关键词：宿主防御肽病毒机制

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细菌溶血磷脂的生物合成及生物学功能

微生物学报 2023年第12期63卷 4482-4501页

作者：曹雪峰彭练慈方仁东西南大学动物医学院动物健康与动物性食品安全国际联合实验室重庆400715 草食动物科学重庆市重点实验室重庆400715

溶血磷脂(lysophospholipids,LPLs)是细胞膜中的一类脂质代谢中间产物,主要由磷脂分子被水解后生成。LPL的生物学功能与其前体磷脂有明显的区别。在真核细胞中,LPL是一种参与多种胞内生物信号调控的重要活性分子,但在细菌中,LPL的生物... 详细信息

溶血磷脂(lysophospholipids,LPLs)是细胞膜中的一类脂质代谢中间产物,主要由磷脂分子被水解后生成。LPL的生物学功能与其前体磷脂有明显的区别。在真核细胞中,LPL是一种参与多种胞内生物信号调控的重要活性分子,但在细菌中,LPL的生物学功能还未被充分揭示。LPL通常是细菌细胞膜中的次要组分,在环境压力条件下其含量可显著升高。除了参与细胞膜磷脂代谢,LPL被认为在细菌环境适应性及致病性中发挥重要作用。其在细胞膜中的累积可以显著提高细菌在环境压力下的存活及增殖效率,同时还是细菌感染过程中重要的信号分子。近期有研究表明,LPL可能是细菌新发现的潜在毒力因子。本文因此将结合最新研究数据,对不同种类LPL的从头合成通路以及LPL在细菌抵御环境压力和细菌-宿主互作等方面所发挥的生物学功能进行综述,为对细菌致病机制和防治细菌感染的相关研究提供新的思路和参考借鉴。

关键词：溶血磷脂细菌致病机制防治

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金黄色葡萄球菌病防治研究进展

微生物学报 2023年第12期63卷 4441-4450页

作者：田洪亮徐刘溢彭练慈朱燕西南大学动物医学院重庆400715 重庆市畜牧技术推广总站重庆401121

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)被认为是最常见的食源性致病菌之一,引起人畜的感染性疾病,导致皮肤、软组织和血液感染,引发脓毒症和中毒性休克综合征。随着抗生素的滥用,金黄色葡萄球菌的耐药性逐渐增强,导致耐甲氧西林金... 详细信息

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)被认为是最常见的食源性致病菌之一,引起人畜的感染性疾病,导致皮肤、软组织和血液感染,引发脓毒症和中毒性休克综合征。随着抗生素的滥用,金黄色葡萄球菌的耐药性逐渐增强,导致耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的出现,并且在全球范围内散播,严重危害公共卫生安全。目前亟需有效控制SA感染的新疗法,因此本文对金黄色葡萄球菌防治技术的研究进展进行综述,并对其防治前景进行了分析,以期对金黄色葡萄球菌尤其是MRSA的控制提供理论指导。

关键词：金黄色葡萄球菌感染防治

鸡源Cathelicidins家族抗菌肽研究进展

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中国兽医学报 2022年第5期42卷 1084-1089页

作者：彭练慈芦懿田洪亮陈红伟叶超方仁东西南大学动物医学院重庆北碚400715

Cathelicidins(CATHs)是一类具有抗感染和免疫调节等活性的多功能抗菌肽,广泛分布于不同动物体内,在宿主抵御病原时入侵发挥极其重要的作用。近年来,鸡源CATHs活性及应用的研究得到迅速发展,其广谱抗菌活性及独特的杀菌机制使其不易产... 详细信息

Cathelicidins(CATHs)是一类具有抗感染和免疫调节等活性的多功能抗菌肽,广泛分布于不同动物体内,在宿主抵御病原时入侵发挥极其重要的作用。近年来,鸡源CATHs活性及应用的研究得到迅速发展,其广谱抗菌活性及独特的杀菌机制使其不易产生耐药性,具有成为新一代抗菌和免疫调节药物的潜力。现对鸡源CATHs的结构与活性的关系、分布与表达、抗微生物活性、免疫调节活性等方面的研究进展进行综述,并对其应用前景进行了分析。

关键词：鸡源Cathelicidins 结构与活性分布与表达抗微生物活性免疫调节活性

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生物被膜:益生菌肠道定植的新策略

生物工程学报 2022年第8期38卷 2821-2839页

作者：廖才江李会王士源熊静梅翠刘丹何玉张彭练慈宋振辉陈红伟西南大学动物医学院重庆402460 西南大学医学研究院免疫学研究中心重庆402460 国家生猪技术创新中心重庆402460

益生菌可改善机体微生态平衡,在促进营养吸收、控制肠道感染和调节免疫功能等方面具有特殊的功效,但存在胃肠道环境难定植、口服生物利用度低等问题。生物被膜是多个细菌黏附于非生物或生物表面,分泌胞外聚合物(extracellular polymeric... 详细信息

益生菌可改善机体微生态平衡,在促进营养吸收、控制肠道感染和调节免疫功能等方面具有特殊的功效,但存在胃肠道环境难定植、口服生物利用度低等问题。生物被膜是多个细菌黏附于非生物或生物表面,分泌胞外聚合物(extracellular polymeric substances),并将自身包裹其中形成的一种有组织的细菌集团,包含胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)、蛋白质、胞外DNA(extracellular deoxyribonucleic acid,eDNA)和脂质等多种组成成分,是一个具有三维立体空间结构的聚集体。被膜状态的益生菌较浮游菌在抗逆性、对抗病原菌和调节免疫功能等方面具有明显优势,这些特点为新型益生菌的开发提供了新的研究思路。本文阐述了被膜状态益生菌的优势,重点介绍了促进益生菌生物被膜形成的活性物及其形成机制,简述了益生菌生物被膜的安全性问题。当前,益生菌生物被膜的研究尚处于起步阶段,希望本文能为该领域未来的研究提供参考。

关键词：益生菌生物被膜定植双组分系统群体感应

抗无乳链球菌中药的筛选及盐酸小檗碱抗无乳链球菌作用机理的初步研究

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抗无乳链球菌中药的筛选及盐酸小檗碱抗无乳链球菌作用机理的初步...

作者：彭练慈四川农业大学

学位级别：硕士

无乳链球菌是奶牛乳房炎的致病菌之一,患有乳房炎的奶牛会影响牛奶的产量和品质,目前奶牛乳房炎的主要治疗手段是使用抗生素疗法,但抗生素易使细菌产生耐药性,影响治疗效果。中草药具有不易产生耐药性、高效低毒、低残留的优势。因此本... 详细信息

无乳链球菌是奶牛乳房炎的致病菌之一,患有乳房炎的奶牛会影响牛奶的产量和品质,目前奶牛乳房炎的主要治疗手段是使用抗生素疗法,但抗生素易使细菌产生耐药性,影响治疗效果。中草药具有不易产生耐药性、高效低毒、低残留的优势。因此本研究对20味中药的有效成分进行提取,筛选出抗无乳链球菌最优的中药,对其单味中药进行提取工艺的优化,在最佳提取工艺条件下,研究黄连提取物对引致奶牛乳房炎的主要致病菌的体外抑菌活性,然后以抑菌效果最优的中药有效成分的单体物质为研究对象,进行抗无乳链球菌的抑菌机理的初步研究。主要研究内容如下：1抗无乳链球菌中药的筛选：采用乙醇回流法和超声波法提取20味中药的有效成分,测定黄连等20味中药提取物对无乳链球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)。20味中药提取物的体外抗菌活性结果表明：黄连、虎杖、地榆和黄芩4味中药提取物的MIC值和MBC值范围为78mg/mL～15.625mg/mL;蒲公英、乌梅、茵陈、秦皮、艾叶和紫花地丁6味中药提取物的MIC值范围为3125mg/mL～62.5mg/mL, MBC值范围为62.5mg/mL～125mg/mL;黄柏、鱼腥草和白头翁3味中药提取物的MIC值和MBC值均为125mg/mL;苦参、金银花、穿心莲、杜仲、连翘、夏枯草和何首乌7味中药提取物的MIC值和MBC值范围为25 0mg/mL～500mg/mL。结论：筛选出黄连提取物对无乳链球菌具有最好的体外抑菌效果。2黄连抗无乳链球菌的最优提取工艺及体外抑菌活性研究：采用正交设计,以浸膏得率及对无乳链球菌的最低抑菌浓度(MIC)值和最低杀菌浓度(MBC)为指标,对黄连提取工艺条件进行优选研究,在黄连的最佳提取工艺条件下,测定黄连提取物对奶牛乳房炎的主要致病菌即无乳链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC值和MBC值。最佳提取工艺结果表明,黄连的最佳提取工艺为料液比1：8,80%乙醇浓度回流提取2次,每次1.5h。黄连体外抑菌活性实验结果表明,黄连提取物对无乳链球菌的MIC值和MBC值均为39mg/mL,对大肠杆菌的MIC值和MBC值分别为62.5mg/mL和125mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC值和MBC值均为3125mg/mL。结论：在最佳提取工艺下的黄连提取物抑菌效果提高,且对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑菌作用。3盐酸小檗碱对无乳链球菌形态结构及乳酸脱氢酶活性的影响：利用平板稀释法绘制出盐酸小檗碱对无乳链球菌的抑菌曲线,通过透射电子显微镜观察盐酸小檗碱对无乳链球菌超微结构的影响,测定乳酸脱氢酶(LDH)活力研究盐酸小檗碱对无乳链球菌酶活性的影响。抑菌曲线结果表明,在MIC浓度下,盐酸小檗碱能够抑制细菌的生长;在2MIC浓度下,盐酸小檗碱能在4h内将细菌全部杀死。透射电镜结果表明,正常组无乳链球菌细胞结构清晰完整,从内到外可见层次分明的核区,细胞膜和细胞壁。在盐酸小檗碱的作用下,细胞形状变得不规则,细胞膜、细胞壁逐渐溶解,膜壁界限变得模糊,细胞质严重外流,核区不清晰,细胞质解体内出现空腔。测定酶活力实验结果表明,经过药物作用后,乳酸脱氢酶活力下降。结论：盐酸小檗碱对无乳链球菌的抑菌曲线呈现了浓度时间的相关性。盐酸小檗碱对无乳链球菌的结构有较强的破坏作用,随着时间的延长破坏加剧,且可以降低乳酸脱氢酶的活性。4盐酸小檗碱对无乳链球菌蛋白质和DNA的影响：通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)核酸荧光染色法研究盐酸小檗碱对无乳链球菌蛋白质和DNA的影响。SDS-PAGE结果表明,正常无乳链球菌蛋白谱带多且清晰,而经药物作用后,蛋白谱带变浅,有的谱带甚至消失;DAPI染色实验结果表明,正常无乳链球菌DNA荧光强度较强,且荧光点较多,经过药物作用后DNA荧光强度明显减弱。结论：盐酸小檗碱可以影响蛋白质和DNA的合成。

关键词：无乳链球菌盐酸小檗碱抑菌活性抑菌机理

夏枯草等14味中药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性

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中国兽医学报 2014年第2期34卷 297-301,306页

作者：代如意李莉殷中琼程安春贾仁勇蔡红李曼康帅彭练慈曲径四川农业大学动物医学院四川雅安625014 四川农业大学预防兽医研究所四川温江611130

采用索氏提取，超声波和水煎煮方法提取夏枯草等14味中药的有效部位，应用二倍试管稀释法分别测定其提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果显示，夏枯草、虎杖、何首乌、连翘、柴胡、穿心莲、地榆7... 详细信息

采用索氏提取，超声波和水煎煮方法提取夏枯草等14味中药的有效部位，应用二倍试管稀释法分别测定其提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果显示，夏枯草、虎杖、何首乌、连翘、柴胡、穿心莲、地榆7味中药有效部位对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强，其MIC为1．953～3lI250g／L，MBC为3．90～31．25g／L；佛手、黄柏2味中药有效部位具有较强的体外抗菌活性，其MIC值为62．5g／L，MBC值为125．0g／L；大青叶、板蓝根、金银花、杜仲、白头翁5味中药有效部位的抗菌活性较差，其MIC值为125．0g／L，MBC值为250．0，≥250．0g／L。不同中药有效部位对金黄色葡萄球菌的抗菌活性有所差异，其中夏枯草、虎杖、何首乌、地榆和佛手有效部位对金黄色葡萄球菌具有较好的抗菌活性。

关键词：夏枯草中药有效部位金黄色葡萄球菌抗菌活性

20味中药提取物对鸭疫里默氏杆菌体外抑菌效果的研究

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中国畜牧兽医 2013年第8期40卷 101-105页

作者：蔡红李莉殷中琼李曼代如意康帅彭练慈曲径胡涛四川农业大学动物医学院四川雅安625014

试验旨在筛选得到对鸭疫里默氏杆菌有良好体外抑菌效果的中药。采用超声波处理、乙醇回流、水浴加热等方法提取杜仲等中药的有效部位,用二倍试管稀释法分别测定其提取物对鸭疫里默氏杆菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitoryconcentration... 详细信息

试验旨在筛选得到对鸭疫里默氏杆菌有良好体外抑菌效果的中药。采用超声波处理、乙醇回流、水浴加热等方法提取杜仲等中药的有效部位,用二倍试管稀释法分别测定其提取物对鸭疫里默氏杆菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitoryconcentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),并通过棋盘法测定中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的联合抑菌效果。结果表明,杜仲等中药提取物对鸭疫里默氏杆菌的MIC值范围为15.60～250.00mg/mL,其中杜仲、大黄、板蓝根、佛手、秦皮和大青叶的MIC值均为15.60mg/mL,而金银花、姜黄、黄芩、黄芪和紫草MIC值均大于125.00mg/mL;通过联合抑菌研究,结果发现杜仲和秦皮联合具有相加作用,白头翁、杜仲和秦皮联合均表现无关作用,秦皮与大黄联合表现相加作用,白头翁与大黄联合表现颉颃作用。提示,杜仲、大黄、板蓝根、佛手、秦皮和大青叶对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌作用较好,而金银花、姜黄、黄芩、黄芪和紫草对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌作用较差,杜仲、秦皮和白头翁可组成一个具有抑制鸭疫里默氏杆菌作用的中药组方。

关键词：中药鸭疫里默氏杆菌体外抑菌

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