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应用微切割技术对非小细胞肺癌3p杂合性缺失的研究

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应用微切割技术对非小细胞肺癌3p杂合性缺失的研究

作者：彭全洲暨南大学

学位级别：硕士

目的：建立稳定的石蜡切片微切割-PCR-SSLP银染技术以应用于对存档组织蜡块的回顾性分子生物学研究，探讨3p杂合性缺失与肺癌发生发展关系的相关性，为肺癌的分子病理学诊断提供细胞遗传学、分子遗传学依据。方法：实验分两部分。第一... 详细信息

目的：建立稳定的石蜡切片微切割-PCR-SSLP银染技术以应用于对存档组织蜡块的回顾性分子生物学研究，探讨3p杂合性缺失与肺癌发生发展关系的相关性，为肺癌的分子病理学诊断提供细胞遗传学、分子遗传学依据。方法：实验分两部分。第一部分：通过检测DNA提取方法、组织蜡块存档时间以及目的片断长度对PCR结果的影响，建立稳定的石蜡切片微切割-PCR技术;第二部分：采用第一部分建立的石蜡切片微切割-PCR技术，对53例肺癌标本、17例肺良性病变、10例肺鳞癌的54个正常支气管粘膜上皮、轻度异常上皮、不典型增生上皮和原位癌标本以及53例无肿瘤侵犯淋巴结标本进行3p上10个微卫星位点的PCR-SSLP-银染检测。结果：1、粗提DNA方法是微切割-PCR技术首选的DNA提取方法;2、扩增110bpDNA片段，蜡块存档时间应少于13年，扩增268bpDNA片段，蜡块存档时间应少于11年;3、目的片段长度小于536bp时能得到满意扩增;4、染色体3p等位基因缺失在肺癌中普遍存在(98.1％)且主要为多个位点缺失，53例肺癌标本中的LOH检出率分别为：3p25(57.5％)、3p22-p24.3(65.4％)、3p21-p23(58.3％)、3p21.3(76.5％)、3p14.2(66.0％)和3p12(66.7％)。大部分肺癌标本(98.1％)至少有一个位点出现LOH;5、正常支气管粘膜上皮和轻度异常上皮细胞中也可检测到3p位点的LOH，分别为62.5％和63.2％。将正常粘膜组和轻度异常上皮组合并，与不典型增生、原位癌组比较，发现后者LOH发生率明显高于前者(P=0.01);6、比较肺癌原发灶LOH与临床病理因素的关系，发现NSCLC患者中鳞癌LOH发生率明显高于腺癌，差别具有统计学意义;鳞癌与腺鳞癌和大细胞癌比较，在3p22-p24.3(P=0.029)和3p14.2(P=0.016)位点的LOH的差别具有统计学意义，鳞癌LOH发生率高于腺鳞癌和大细胞癌;同样，腺癌在3p12位点的LOH发生率高于腺鳞癌和大细胞癌(P=0.033)。随着肿瘤分化程度的降低，LOH发生率呈现逐渐升高的趋势。3p LOH发生率与TNM分期、性别无明显关系(P＞0.05)，但在3p21-p23位点Ⅰ～Ⅱ期NSCLC的LOH发生率明显低于Ⅲ期(P=0.045)，在3p21-p23位点女性的LOH发生率要高于男性(P=0.027);7、有肺癌家族史者的LOH发生率在检测的各个3p位点均明显高于无家族史者。结论：1、建立了稳定的石蜡切片微切割-PCR技术，进行肿瘤组织精确定位切割和微卫星不稳定、杂合性缺失等的检测;2、3p杂合性缺失是非小细胞肺癌的常发事件且常为多个位点缺失。在肺癌患者的癌前病变组织中也可检测到3p位点等位基因杂合性缺失。肺癌组织中3p21.3区域等位基因杂合性缺失的发生频率最高，在肺癌发生发展中起重要作用;3、肺鳞癌组织发生3p等位基因杂合性缺失的频率最高。随着病变程度的增加，癌前病变支气管上皮3p位点杂合性缺失的发生频率随之升高。肺癌患者的TNM分期和性别与3p位点杂合性缺失无相关性;4、有肺癌家族史者更宜出现3p位点等位基因杂合性缺失。

关键词：非小细胞肺癌遗传学 3号染色体短臂杂合性缺失诊断

腹膜后副神经节瘤致异位ACTH综合征一例报告并文献复习

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中国医师杂志 2022年第10期24卷 1498-1503页

作者：乐颖张莹吴炎刘岩峰彭全洲陈立波胡园园张庆梅深圳市人民医院(暨南大学第二临床医学院南方科技大学第一附属医院)内分泌科深圳518020 深圳市人民医院(暨南大学第二临床医学院南方科技大学第一附属医院)泌尿外科深圳518020 深圳市人民医院(暨南大学第二临床医学院南方科技大学第一附属医院)病理科深圳518020 华中科技大学协和深圳医院内分泌科深圳518052

目的总结副神经节瘤引起异位促肾上腺皮质激素(ACTH)综合征(EAS)的临床特点及治疗方法。方法回顾性分析1例腹膜后副神经节瘤引起EAS患者的临床资料,并复习国内外相关文献。结果本例患者,女,53岁,因"发现高血压15年,乏力3个月,头晕、头痛... 详细信息

目的总结副神经节瘤引起异位促肾上腺皮质激素(ACTH)综合征(EAS)的临床特点及治疗方法。方法回顾性分析1例腹膜后副神经节瘤引起EAS患者的临床资料,并复习国内外相关文献。结果本例患者,女,53岁,因"发现高血压15年,乏力3个月,头晕、头痛1个月"入院。生化提示低钾血症,血、尿皮质醇明显升高,同步ACTH不被抑制,24 h尿香草杏仁酸(VMA)及血浆游离甲氧基肾上腺素类物质(MNs)升高,腹部CT提示腹膜后腹主动脉旁包块。行左侧腹膜后占位切除术,免疫组化:Syn(+),CgA(+),ACTH(局灶+)。回顾分析16篇文献报道中的22例及本例患者资料,发现大部分异位分泌ACTH的副神经节瘤可有典型的库欣综合征临床表现,且少有典型副神经节瘤临床表现,且大部分病例未按照副神经节瘤进行术前准备。结论异位分泌ACTH的副神经节瘤非常罕见,建议术前对EAS患者常规检测儿茶酚胺、MNs及24 h尿VMA等指标,以期提高术前诊断率,手术切除是最佳治疗方案,需同时按照副神经节瘤和库欣综合征进行术前准备,并建议所有患者完善嗜铬细胞瘤/副神经节瘤相关基因检测,术后终身随访。

关键词： ACTH综合征,异位副神经节瘤库欣综合征

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微囊型脑膜瘤的临床与病理研究

广东医学 2017年第24期38卷 3754-3757页

作者：胡继良王浩陈佳彭全洲吕文陈东暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院神经外科广东深圳518020 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院病理科广东深圳518020

目的探讨微囊型脑膜瘤的临床影像特点、病理特点,研究其特征。方法回顾分析经病理证实的6例微囊型脑膜瘤的临床表现、影像特征和病理特点。结果微囊型脑膜瘤的好发部位和常见脑膜瘤无差别,CT呈现低密度病灶,水肿明显,易和胶质瘤、转移... 详细信息

目的探讨微囊型脑膜瘤的临床影像特点、病理特点,研究其特征。方法回顾分析经病理证实的6例微囊型脑膜瘤的临床表现、影像特征和病理特点。结果微囊型脑膜瘤的好发部位和常见脑膜瘤无差别,CT呈现低密度病灶,水肿明显,易和胶质瘤、转移瘤混淆。MRI表现为T1WI低信号,T2WI高信号,强化明显,界限相对清晰,多由脑血管和硬膜血管供血,瘤周多水肿明显。病理以肿瘤细胞旋涡状,排列疏松,瘤细胞突起相互交织构成微囊为特征,囊腔充满囊液,细胞核分裂象少见,EMA、vimentin和PR阳性,GFAP阴性,Ki-67<5%。结论微囊型脑膜瘤发病率低,有特征性,手术首选,预后良好,需要严密观察随访。

关键词：微囊型脑膜瘤临床表现病理

射频消融法选择性减胎术后短期流产的临床特点分析

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中华妇产科杂志 2020年第9期55卷 636-639页

作者：胡芷洋周俊石苇左敏彭全洲林琳华折瑞莲深圳市人民医院产科 518020 深圳市人民医院病理科 518020

目的通过总结射频消融法(RFA)选择性减胎术后短期(2周内)流产的临床特点。方法回顾性分析2015年9月至2020年1月在深圳市人民医院接受RFA选择性减胎术后短期流产的单绒毛膜双羊膜囊(MCDA)双胎妊娠病例的临床经过、实验室检查及病理检查... 详细信息

目的通过总结射频消融法(RFA)选择性减胎术后短期(2周内)流产的临床特点。方法回顾性分析2015年9月至2020年1月在深圳市人民医院接受RFA选择性减胎术后短期流产的单绒毛膜双羊膜囊(MCDA)双胎妊娠病例的临床经过、实验室检查及病理检查结果。结果共有30例MCDA双胎孕妇接受了RFA选择性减胎术,有5例发生减胎术后短期流产;保留胎存活率为83%(25/30)。流产时保留胎均心率正常,羊水清亮无异味;除1例为术后当天流产外,其余4例流产距离RFA减胎术超过7 d;流产前孕妇血常规WBC不高、均低于15×109/L;除了2例发热以外,其余3例中性粒细胞比例、降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)水平均无明显升高;仅1例血培养粪肠球菌阳性(+);4例取经阴道流出的羊水进行培养,其中2例解脲支原体(+)、2例无菌生长;胎膜病理检查表现有局灶性中性粒细胞浸润、严重程度以减除胎为中心渐变的中性粒细胞浸润、羊膜坏死但无中性粒细胞浸润等。结论RFA选择性减胎术后短期流产的临床表现、实验室检查和病理改变与典型的绒毛膜羊膜炎不同,提示可能有不同的流产发生机制。

关键词：中性粒细胞浸润选择性减胎术绒毛膜羊膜炎无菌生长解脲支原体双胎妊娠深圳市人民医院心率正常

肝内和肝外胆管癌中Napsin-A和TTF-1的表达

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临床与实验病理学杂志 2015年第8期31卷 916-918页

作者：王新根周有俭徐胜美彭全洲广东省深圳市第四人民医院病理科深圳518000 广东省深圳市人民医院病理科深圳518000

目的探讨Napsin-A和TTF-1在肝内和肝外胆管癌中的表达。方法收集肝内和肝外胆管癌30例,同时选取非肿瘤性胆囊及肝内胆管增生组织15例作为对照组,采用免疫组化En Vision法检测Napsin-A和TTF-1的表达。结果 7例胆管癌表达Napsin-A,均呈灶... 详细信息

目的探讨Napsin-A和TTF-1在肝内和肝外胆管癌中的表达。方法收集肝内和肝外胆管癌30例,同时选取非肿瘤性胆囊及肝内胆管增生组织15例作为对照组,采用免疫组化En Vision法检测Napsin-A和TTF-1的表达。结果 7例胆管癌表达Napsin-A,均呈灶状阳性,TTF-1均阴性。结论Napsin-A可在胆管癌中表达,与肺腺癌鉴别诊断时应结合临床病史及其它抗体以避免潜在的诊断陷阱。

关键词：胆管肿瘤 Napsin-A TTF-1 免疫组织化学

基于全肿瘤ADC图纹理特征诊断脑胶质瘤分级

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中国医学影像技术 2019年第7期35卷 976-980页

作者：梅东东罗燕龚静山彭全洲成志强暨南大学附属第二临床医学院深圳市人民医院放射科广东深圳518020 暨南大学附属第二临床医学院深圳市人民医院病理科广东深圳518020

目的探讨基于全肿瘤ADC图的纹理特征鉴别高级别胶质瘤(HGG)与低级别胶质瘤(LGG)的价值。方法收集66例经病理证实的脑胶质瘤患者,HGG 41例和LGG 25例。基于术前ADC图,提取107个全肿瘤纹理特征,比较HGG与LGG患者107个纹理特征和临床特征... 详细信息

目的探讨基于全肿瘤ADC图的纹理特征鉴别高级别胶质瘤(HGG)与低级别胶质瘤(LGG)的价值。方法收集66例经病理证实的脑胶质瘤患者,HGG 41例和LGG 25例。基于术前ADC图,提取107个全肿瘤纹理特征,比较HGG与LGG患者107个纹理特征和临床特征的差异;将差异有统计学意义的变量纳入 Logistic 回归分析模型,筛选出HGG的独立危险因素,并绘制ROC曲线,评价其诊断HGG的效能。结果单因素分析显示LGG与HGG患者性别、年龄和3个纹理特征(表面体积比、总能量和区域熵)差异有统计学意义。 Logistic 回归分析显示年龄(P=0.002,优势比=1.090)和区域熵(P=0.003,优势比=2.984)为HGG的独立危险因素。联合年龄和区域熵诊断HGG的ROC曲线下面积为0.844,敏感度为75.6%,特异度为88.0%。结论基于全肿瘤ADC图纹理特征有助于判断脑胶质瘤级别,联合临床特征诊断效能较高。

关键词：神经胶质瘤表观扩散系数放射组学磁共振成像

脑胶质瘤MRI特征与IDH基因表型的相关性

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中国医学影像学杂志 2019年第9期27卷 641-645,648页

作者：梅东东罗燕彭全洲成志强龚静山深圳市人民医院(暨南大学附属第二临床医学院)放射科广东深圳518020 深圳市人民医院(暨南大学附属第二临床医学院)病理科广东深圳518020

目的探讨脑胶质瘤MRI特征与异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因表型之间的相关性。资料与方法回顾性分析37例经病理证实,且术前行MRI检查的脑胶质瘤患者的临床资料,采用荧光PCR-毛细管电泳测序法检测肿瘤IDH1/2的突变状态;比较IDH野生型及突变型... 详细信息

目的探讨脑胶质瘤MRI特征与异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因表型之间的相关性。资料与方法回顾性分析37例经病理证实,且术前行MRI检查的脑胶质瘤患者的临床资料,采用荧光PCR-毛细管电泳测序法检测肿瘤IDH1/2的突变状态;比较IDH野生型及突变型胶质瘤之间的MRI特征。结果37例胶质瘤患者中,18例(48.6%)为IDH基因突变型,其中14例(77.8%)为低级别胶质瘤、4例(22.2%)为高级别胶质瘤;19例(51.4%)IDH为野生型,其中6例(31.6%)为低级别胶质瘤、13例(68.4%)为高级别胶质瘤。高、低级别脑胶质瘤的IDH突变状态差异有统计学意义(P0.05)。结论MRI特征与脑胶质瘤IDH基因表型有关,影像学特征可成为评价IDH基因表型的标志。

关键词：脑肿瘤神经胶质瘤磁共振成像异柠檬酸脱氢酶表型

上调miR-143表达对CasKi人宫颈鳞癌细胞系增殖与凋亡的影响

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临床与实验病理学杂志 2010年第2期26卷 223-227页

作者：王晓玫高利昆成志强彭全洲胡锦涛许静徐洲稳暨南大学第二临床医学院(深圳市人民医院)病理科深圳518020

目的探讨miR-143对CasKi宫颈鳞癌细胞增殖与凋亡活性影响。方法应用荧光定量RT-PCR法检测miR-143在人宫颈鳞癌组织中表达水平,以及miR-143在CasKi细胞株中表达水平与变化;人工合成miR-143模拟体转染CasKi宫颈鳞癌细胞系,采用流式细胞技... 详细信息

目的探讨miR-143对CasKi宫颈鳞癌细胞增殖与凋亡活性影响。方法应用荧光定量RT-PCR法检测miR-143在人宫颈鳞癌组织中表达水平,以及miR-143在CasKi细胞株中表达水平与变化;人工合成miR-143模拟体转染CasKi宫颈鳞癌细胞系,采用流式细胞技术、MTT等实验方法探讨上调miR-143表达对CasKi癌细胞增殖活性与凋亡影响。结果宫颈鳞癌组织与宫颈鳞癌细胞株CasKi中miR-143表达水平较正常宫颈组织明显下调,其中2例鳞癌组织未能检测出miR-143表达。miR-143 mimics转染组miR-143表达显著高于空白对照组;MTT检测结果表明miR-143 mimics转染组中细胞增殖抑制明显,且抑制效应自转染48 h开始显现。细胞周期检测结果显示miR-143 mimics转染组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,组间差异有统计学意义(P<0.05)。荧光TUNEL检测结果亦显示miR-143 mimics转染组细胞凋亡率增加(9.45±2.31)%,高于阴性对照组(4.03±1.35)%与空白对照组(3.85±1.61)%,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-143表达可抑制宫颈鳞癌细胞增殖活性,影响宫颈鳞癌细胞周期和诱导宫颈鳞癌细胞凋亡。

关键词：宫颈肿瘤鳞状细胞癌 miR-143 CasKi细胞细胞增殖凋亡

高、低级别卵巢浆液性癌Livin与Ki67的表达特征及意义

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中国现代医学杂志 2015年第20期25卷 68-72页

作者：左敏彭全洲刘汉勇高利昆深圳市人民医院病理科广东深圳518020

目的探讨高、低级别浆液性卵巢癌中Livin与Ki67的表达特征和临床意义。方法依照两级分级系统,选取16例低级别和43例高级别浆液性癌,采用免疫组织化学SP法检测Livin与Ki67蛋白的表达。结果Livin蛋白表达与卵巢浆液性癌国际妇产科联盟(FI... 详细信息

目的探讨高、低级别浆液性卵巢癌中Livin与Ki67的表达特征和临床意义。方法依照两级分级系统,选取16例低级别和43例高级别浆液性癌,采用免疫组织化学SP法检测Livin与Ki67蛋白的表达。结果Livin蛋白表达与卵巢浆液性癌国际妇产科联盟(FIGO)分期及淋巴结转移无相关性(χ2=0.022和0.020,P>0.05),Ki67蛋白表达与FIGO分期和淋巴结转移相关(χ2=10.524和9.671,P<0.05)。低级别组Livin高表达高于高级别组(χ2=8.580,P<0.05),低级别组Ki67高表达低于高级别组(χ2=15.252,P<0.05)。高、低级别浆液性癌组织中Livin与Ki67表达呈负相关(P<0.05)。结论 Livin蛋白在低级别卵巢浆液性癌组织中表达上调,提示其可能在肿瘤细胞异常增殖中起重要作用,其凋亡机制在低级别癌发生、发展中可能起主导作用。

关键词：卵巢浆液性癌 Livin Ki67 免疫组织化学