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刚地弓形虫棒状体蛋白2家族作为疫苗候选分子的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第3期33卷 222-227页

作者：李润花张铁娥殷国荣太原师范学院生物系太原030031 中铁十二局总医院检验科太原030053 山西医科大学医学寄生虫学研究所太原030001

刚地弓形虫棒状体蛋白2家族(ROP2 family)是由弓形虫棒状体分泌的一类蛋白质,对弓形虫侵入宿主细胞及发挥细胞毒力起重要作用。ROP2家族成员包括ROP2、ROP4、ROP5、ROP8、ROP13、ROP16、ROP17和ROP18。近年来的研究发现,ROP2家族成员作... 详细信息

刚地弓形虫棒状体蛋白2家族(ROP2 family)是由弓形虫棒状体分泌的一类蛋白质,对弓形虫侵入宿主细胞及发挥细胞毒力起重要作用。ROP2家族成员包括ROP2、ROP4、ROP5、ROP8、ROP13、ROP16、ROP17和ROP18。近年来的研究发现,ROP2家族成员作为疫苗候选分子,可诱导宿主产生保护性免疫。本文综述了ROP2家族主要成员作为DNA疫苗或蛋白疫苗的研究进展。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白2家族 DNA疫苗蛋白疫苗

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日本大学图书馆选书体系及其启示

江苏图书馆学报 2002年第1期 49-50页

作者：张铁娥山西大学图书馆 030006

文章以日本立教大学图书馆为例，从采访流程、采访方针、采访责任、选书系统等方面进行分析，并从中得到有益的启示。

关键词：采访方针采访责任选书系统日本大学图书馆采访流程

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日本大学图书馆选书体系及其启示

图书馆学、信息科学、资料工作 2002年第5期 49-50页

作者：张铁娥

文章以日本立教大学图书馆为例，从采访流程、采访方针、采访责任、选书系统等方面进行分析，并从中得到有益的启示。

关键词：采访方针采访责任选书系统日本

来源：人大复印报刊资料评论

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脂肪肝的辨证施膳经验

云南中医中药杂志 2000年第2期21卷 30-31页

作者：张铁娥江苏省南京市中医院!210001

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中日大学图书馆选书体系比较研究

图书馆学研究 2002年第2期 17-18页

作者：张铁娥山西大学图书馆

文章以中国山西大学图书馆和日本立教大学图书馆为例，从采访模式、采访方针、采访责任与选书系统等方面进行比较分析，并提出中国大学图书馆选书体系发展与完善的策略。

关键词：选收体系比较研究高校图书馆中国日本图书采访采访模式采访方针采访责任

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谈谈我馆日文图书目录的排检法

晋图学刊 1998年第2期 42-43页

作者：张铁娥山西大学图书馆

介绍了山西大学图书馆日文图书目录书名目录与分类目录的排检方法

关键词：日文图书图书目录排检法

80年代以来日本关于公共图书馆实施社会教育与终身教育职能的政策沿革

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现代情报 2002年第6期22卷 35-36页

作者：张铁娥山西大学太原030006

文章介绍了 80年代以来。

关键词：日本公共图书馆社会教育终身教育政策 20世纪80年代发展方向

刚地弓形虫棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体的构建、表达及其激酶活性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2014年第1期32卷 29-33页

作者：王海龙殷丽天张铁娥关丽孟晓丽刘红丽殷国荣山西医科大学医学寄生虫学研究所太原030001 山西医科大学生理学系太原030001 山西医科大学细胞生物学与遗传学教研室太原030001

目的构建刚地弓形虫RH株棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体,对表达产物进行激酶活性的检测和功能分析。方法根据刚地弓形虫ROP17蛋白编码基因(GenBank登录号为AM075203.1)设计引物,以弓形虫RH株速殖子总RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因片段... 详细信息

目的构建刚地弓形虫RH株棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体,对表达产物进行激酶活性的检测和功能分析。方法根据刚地弓形虫ROP17蛋白编码基因(GenBank登录号为AM075203.1)设计引物,以弓形虫RH株速殖子总RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因片段,克隆至真核表达载体p3×Flag-CMV-14,构建重组质粒p3×Flag-CMV-14/TgROP17。经菌液PCR、双酶切和测序鉴定正确后,用脂质体法转染至人胚肾细胞(HEK293T),RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分析表达产物;Western blotting检测其激酶活性;流式细胞术分析ROP17对转染宿主细胞凋亡的影响。结果 RT-PCR结果显示,从RH株弓形虫速殖子中扩增出约1 850 bp的基因片段。菌落PCR、双酶切和测序结果显示,重组质粒p3×Flag-CMV-14/TgROP17构建成功且序列正确。RT-PCR和Western blotting结果显示,在转染p3×Flag-CMV-14/TgROP17的细胞中有TgROP17的表达,基因片段大小为1 850bp,蛋白质相对分子质量(Mr)约为70 000,而转染空质粒组未见表达。Western blotting结果显示,ROP17可以磷酸化c-Jun蛋白;流式细胞术结果显示,ROP17抑制喜树碱(CPT)诱导的细胞凋亡,6 h和12 h的抑制率分别为20.6%和24.1%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了真核表达载体p3×Flag-CMV-14/TgROP17,其表达产物具有激酶活性且能够抑制细胞凋亡。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白17 真核表达丝氨酸苏氨酸激酶细胞凋亡

TgAMA1和TgRON2抗原表位合成肽鼻内免疫抗小鼠弓形虫病的作用

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中国病原生物学杂志 2020年第2期15卷 189-194,206页

作者：钱学成张铁娥孟晓丽刘红丽山西医科大学寄生虫学教研室山西太原030001 大同市第二人民医院影像科中铁集团第十二局中心医院检验科

目的观察含弓形虫顶膜抗原1(TgAMA1)和棒状体颈部蛋白2(TgRON2)T、B细胞抗原表位的多肽鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫病免疫保护作用。方法化学方法合成含有经生物信息学预测的TgAMA1和TgRON2T细胞和B细胞表位多肽。5周龄BALB/c小鼠48只... 详细信息

目的观察含弓形虫顶膜抗原1(TgAMA1)和棒状体颈部蛋白2(TgRON2)T、B细胞抗原表位的多肽鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫病免疫保护作用。方法化学方法合成含有经生物信息学预测的TgAMA1和TgRON2T细胞和B细胞表位多肽。5周龄BALB/c小鼠48只随机分为AMA1组、RON2组、A1+R2组和对照组(n=12),分别用AMA1 30μg、RON2 30μg或(A1+R2)各15μg鼻内免疫,对照组用20μl生理盐水滴鼻,共免疫3次,间隔2周。末次免疫后2周,采用ELISA法检测血清抗体水平;处死小鼠,取鼻、膀胱和肠道洗液,ELISA法检测SIgA水平;无菌取脾,制备脾细胞悬液,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测淋巴细胞培养上清细胞因子水平;取肝、脑组织,计数速殖子虫荷,以评价免疫诱导的黏膜及系统免疫应答和抗弓形虫感染保护作用。结果用AMA1和RON2多肽免疫小鼠可诱导产生高水平的特异性抗体反应和淋巴增殖反应。肽免疫小鼠血清特异性IgA、总IgG、IgG1和IgG2a水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01),其中A1+R2组最高。小鼠脾淋巴细胞刺激指数(SI)显示,AMA1组(1.171±0.116)、RON2组(1.362±0.110)和A1+R2组(1.941±0.162)高于PBS组(0.743±0.081)(P<0.05或P<0.01),A1+R2组亦高于单肽组(P<0.05)。肽免疫小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-2和IL-4水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。肽免疫诱导了小鼠高水平的黏膜免疫应答,肽免疫小鼠鼻腔、膀胱和小肠冲洗液SIgA水平均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。肽免疫小鼠获得部分抗弓形虫感染保护作用,与对照组比较,肽免疫小鼠肝和脑中速殖子负荷显著降低,减虫率分别为A1+R2组55.79%和55.68%、AMA1组52.36%和46.46%、RON2组40.02%和47.33%(P<0.05或P<0.01)。结论含有T和B细胞表位的AMA1和RON2肽是一种有效的抗弓形虫病候选抗原,鼻内免疫小鼠可诱导强烈的黏膜和系统免疫应答,两种抗原表位肽联合使用的免疫效应比单用AMA1或RON2更强,抗弓形虫病作用更显著。

关键词：刚地弓形虫抗原表位顶膜抗原1 棒状体颈部蛋白2 肽疫苗鼻内免疫