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DKK1对非小细胞肺癌增殖和转移影响的研究

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DKK1对非小细胞肺癌增殖和转移影响的研究

作者：张鑫桐北京市结核病胸部肿瘤研究所

学位级别：硕士

研究背景与目的作为全球常见的恶性肿瘤之一,肺癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势。从病理组织类型上可以将肺癌分为非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)和小细胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC),非小细胞肺癌又可以分... 详细信息

研究背景与目的作为全球常见的恶性肿瘤之一,肺癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势。从病理组织类型上可以将肺癌分为非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)和小细胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC),非小细胞肺癌又可以分为腺癌、鳞癌、大细胞癌等多种亚型,约80%的肺癌病例为NSCLC。NSCLC的高死亡率与其易发生转移的特性密切相关,其中超过一半的病例在确诊时已经发生了转移。因此,深入探索NSCLC的增殖和转移能力及其相关分子机制,对临床早期诊断以及病情的监控和治疗等都具有积极的作用。随着研究的深入,众多影响肺癌发生和发展的因素成为关注的重点,Dickkopf-1(DKK1)就是其中之一。在脊椎动物中DKK基因家族包括DKKl、DKK2、DKK3及DKK4四个成员,都属于外分泌型的糖蛋白,DKK1作为Wnt信号通路的拮抗分子,一直都受到广泛的关注。相关研究发现,DKK1在不同肿瘤中的表达量及其生物学功能有很大差异:一方面能够抑制结肠癌和绒毛膜癌细胞的侵袭和迁移能力;另一方面却能够促进食管癌细胞的增殖和侵袭能力。已有研究证实DKK1在多种癌症的发生、发展中发挥重要的作用,但它在肺癌中的作用及其机制却不甚明了。本课题旨在研究DKK1对肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力的影响,继而分析其作用机制,探讨DKK1对肺癌诊断、预防及治疗的价值。方法应用Western-blot方法检测H1299、A549、95C、801D四种NSCLC细胞系中DKK1蛋白的表达水平。使用DKK1 shRNA重组慢病毒载体感染H1299、95C细胞系,来建立DKK1低表达的细胞模型H1299-DKK1-KD、95C-DKK1-KD。以无意义序列重组慢病毒载体感染的H1299、95C细胞系作为阴性对照H1299-NC、95C-NC,正常H1299、95C细胞系作为空白对照。通过Western-blot检测已构建的细胞模型中DKK1的表达,验证构建效果。细胞增殖实验,单克隆集落形成实验验证DKK1对nsclc细胞增殖能力的影响。通过transwell实验观察dkk1对nsclc细胞迁移和侵袭能力的影响。采用western-blot检测构建成功的细胞模型中增殖相关蛋白β-链蛋白(β-catenin)、细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellularregulatedproteinkinases1/2,erk1/2)、p-erk1/2及emt相关蛋白snail等蛋白的表达水平,探讨dkk1对nsclc细胞增殖、侵袭及迁移能力影响的分子机制。结果***-blot结果表明,dkk1蛋白在h1299、95c中表达水平较高,在a549、801d中表达较低。2.利用荧光显微镜观察,经重组慢病毒感染的h1299、95c细胞中gfp阳性率大于85%,且western-blot结果显示dkk1在两种细胞中蛋白表达水平较空白对照组显著下降。经无义序列重组慢病毒载体感染的两种细胞系中dkk1的表达量与空白对照相比无变化。证明已成功构建了dkk1低表达的h1299-dkk1-kd、95c-dkk1-kd细胞模型及阴性对照h1299-nc、95c-nc细胞模型。3.利用高内涵分析平台研究下调dkk1表达对h1299细胞增殖能力的影响。h1299-dkk1-kd组相比较于h1299及h1299-nc组细胞增殖能力明显减低。单克隆集落形成实验结果显示,h1299-dkk1-kd组集落数相对于h1299、h1299-nc两组下降60%,接触受到抑制。这些结果提示下调dkk1可显著抑制h1299细胞的增殖能力。4.不铺胶transwell实验结果显示,h1299-dkk1-kd和95c-dkk1-kd组每视野过膜细胞数为45.00±8.72和104.67±6.02,远远低于阴性对照组h1299-nc(148.00±13.75)、9c-nc(235.67±28.68)和空白对照组h1299(147.67±9.07)、95c(235.00±23.06),提示下调dkk1的表达水平可抑制nsclc细胞的迁移能力。铺胶transwell实验结果显示,h1299-dkk1-kd和95c-dkk1-kd组每视野过膜细胞数为46.33±11.50和71.33±6.81,低于空白对照组h1299(255.33±13.58)、95c(293.00±13.07)和阴性对照组h1299-nc(258.00±19.00)、9c-nc(302.67±23.16),结果提示下调dkk1的表达水平能够抑制nsclc细胞的侵袭能力。***-blot结果显示,磷酸化的Erk1/2蛋白在H1299-DKK1-KD组中的表达水平明显低于对照组,H129

关键词： DKK1 非小细胞肺癌 β-链蛋白

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冷冻烤鳗安全生产关键技术研究与应用

冷冻烤鳗安全生产关键技术研究与应用

作者：张鑫桐福建农林大学

学位级别：硕士

鳗鱼是一种营养丰富的水产品。鳗鱼制品也是世界各地人民喜欢的美食之一。冷冻烤鳗指以活鳗鲡为原料,经剖杀,去除内脏、骨头和修整处理后,通过蒸煮、烧烤、急速冻结,包装后在-18℃以下低温储运的单体制品。冷冻烤鳗是我国主要出口创汇... 详细信息

鳗鱼是一种营养丰富的水产品。鳗鱼制品也是世界各地人民喜欢的美食之一。冷冻烤鳗指以活鳗鲡为原料,经剖杀,去除内脏、骨头和修整处理后,通过蒸煮、烧烤、急速冻结,包装后在-18℃以下低温储运的单体制品。冷冻烤鳗是我国主要出口创汇的产品之一,对冷冻烤鳗的安全生产技术的研究有利于中国经济发展大局,有利于福建省冷冻烤鳗产业升级,有利于企业做大做强。本课题通过查阅资料,现场参观养殖场和加工厂,向一线的生产管理人员交流,了解鳗鱼养殖业和冷冻烤鳗加工产业的现状,分析该产业的发展优势和制约因素。本课题主要研究冷冻烤鳗的安全生产控制技术。冷冻烤鳗的生产从养殖开始,历经选料、加工、贮运,直至交付给客户结束。这一过程使用各种安全控制方法,消除冷冻烤鳗的显著食品安全危害,最少使其降低到客户的可接受水平。在查阅资料,现场参观养殖场和加工厂,向一线的生产管理人员了解后,结合冷冻烤鳗加工企业的实际情况,在良好水产养殖规范、良好操作规范、卫生标准操作规范等规范的基础上,运用危害分析与关键控制点原理,经过多个步骤,建立一套科学的,适合指导冷冻烤鳗生产的,完整的食品安全生产预防控制体系。论文的最终目的是为我省的冷冻烤鳗加工行业建立和实施全程质量控制体系提供参考,指导其安全生产,可以有效降低冷冻烤鳗加工行业的风险,使冷冻烤鳗加工行业持续健康发展。

关键词：冷冻烤鳗食品安全控制技术危害分析与关键控制点良好农业规范良好操作规范卫生标准操作规范

“STEAM”教学理念在小学语文教学中的运用

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阅读 2021年第87期 14-16页

作者：张鑫桐江苏省连云港市赣马中心小学

"STEAM"教育理念强调运用各学科优势,打通各学科之间的壁垒,各学科优势融合且相互作用,达到教育最优化。本文分析了在小学语文教学中如何渗透"STEAM"教育理念,以及基于STEAM教育理念下,通过新型教育模式,激发学生语文学习的积极性,开展... 详细信息

"STEAM"教育理念强调运用各学科优势,打通各学科之间的壁垒,各学科优势融合且相互作用,达到教育最优化。本文分析了在小学语文教学中如何渗透"STEAM"教育理念,以及基于STEAM教育理念下,通过新型教育模式,激发学生语文学习的积极性,开展研究性学习,提高动手和创新能力,提升语文综合素养。

关键词： STEAM 教学理念小学语文教学

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高中英语教学中教学评价的优化措施

中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2023年第6期 190-193页

作者：张鑫桐北华大学吉林吉林130000

《普通高中英语课程标准2017年版2020年修订》指出:要处理好教、学、评的关系,达到以评促教、以评促学的目的。评价是英语课程设计的重要组成部分。科学的教学评价体系是实现课程目标的重要保障。教学评一体化在高中英语教学中的作用重... 详细信息

《普通高中英语课程标准2017年版2020年修订》指出:要处理好教、学、评的关系,达到以评促教、以评促学的目的。评价是英语课程设计的重要组成部分。科学的教学评价体系是实现课程目标的重要保障。教学评一体化在高中英语教学中的作用重大,不仅是提高教学效率与教学质量的好方法,也是贯彻落实新课标的重要举措。因此文章将探讨教学评价的现状并针对现状提出相应的改进措施。

关键词：高中英语教学评价教学评一体化

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冷冻烤鳗卫生标准操作规范技术研究

农村科学实验 2017年第1期 72-74页

作者：张鑫桐福州市产品质量检验所

鳗鱼是一种营养丰富的水产品。鳗鱼制品也是世界各地人民喜欢的美食之一。冷冻烤鳗指以活鳗鲡为原料,经剖杀,去除内脏、骨头和修整处理后,通过蒸煮、烧烤、急速冻结,包装后在-18℃以下低温储运的单体制品。冷冻烤鳗是我国主要出口创汇的产品之一,对冷冻烤鳗的安全生产技术的研究有利于中国经济发展大局,有利于冷冻烤鳗产业升级,有利于企业做大做强。本文通过查阅资料,现场参观加工厂,和一线的生产管理人员交流,了解冷冻烤鳗加工产业的现状后,编写出针对冷冻烤鳗行业的卫生标准操作规范。为冷冻烤鳗加工行业建立和实施全程质量控制体系提供参考,指导其安全生产,可以有效降低冷冻烤鳗加工行业的风险,使冷冻烤鳗加工行业持续健康发展。

关键词：冷冻烤鳗食品安全控制技术卫生标准操作规范

微波消解-电感耦合等离子体质谱法同时测定小麦粉中的铅和镉

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农业工程 2014年第1期4卷 66-68页

作者：张鑫桐福州市产品质量检验所福州350028

研究用微波消解仪处理小麦粉后,用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)同时检测小麦粉中铅和镉2种重金属元素的方法。结果表明,使用这种方法检测,铅和镉的检出限分别为0.14和0.12μgkg,回收率为90.2%~99.6%,相对标准偏差为1.8%~2.5%。这... 详细信息

研究用微波消解仪处理小麦粉后,用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)同时检测小麦粉中铅和镉2种重金属元素的方法。结果表明,使用这种方法检测,铅和镉的检出限分别为0.14和0.12μgkg,回收率为90.2%~99.6%,相对标准偏差为1.8%~2.5%。这种检测方法相比于其他检测方法检出限低,检测时间短,数据更加稳定,可以应用于对小麦粉样品的检测。

关键词：电感耦合等离子体质谱仪铅镉

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改土材料复配对风沙土质量的影响研究

干旱区资源与环境 2023年第6期37卷 175-182页

作者：甄文慧陈士超左合君赵杏花王斯静王举张鑫桐内蒙古农业大学沙漠治理学院呼和浩特010011 内蒙古自治区风沙物理与防沙治沙工程重点实验室呼和浩特010011

为探讨最利于风沙土质量提升和酸枣生长发育的配施组合,以毛乌素沙地风沙土为研究对象,采用盆栽试验与大田试验相结合的研究方法,依据L16(45)正交试验设计方案,将蚯蚓粪肥、保水剂、复合肥及灌溉量进行复配,研究分析了不同配施处理对风... 详细信息

为探讨最利于风沙土质量提升和酸枣生长发育的配施组合,以毛乌素沙地风沙土为研究对象,采用盆栽试验与大田试验相结合的研究方法,依据L16(45)正交试验设计方案,将蚯蚓粪肥、保水剂、复合肥及灌溉量进行复配,研究分析了不同配施处理对风沙土土壤质量和酸枣生长发育的影响。结果表明:1)蚯蚓粪肥、保水剂、复合肥和灌溉量配施较T1(CK)均能不同程度地提高土壤养分含量,以T3(Q1B3F3S3)和T10(Q3B2F4S3)对土壤养分的提升作用最为显著,即0kg/hm^(2)蚯蚓粪肥、150kg/hm^(2)保水剂、600kg/hm^(2)复合肥、最大田间持水量的90%灌溉量配施和15000kg/hm^(2)蚯蚓粪肥、75kg/hm^(2)保水剂、900kg/hm^(2)复合肥、最大田间持水量的90%灌溉量配施。2)改土材料复配条件下,酸枣生长速率、光合与土壤养分的变化具有紧密相关的联系。通过布设相同设计方案的大田与盆栽试验,综合土壤质量评价结果与酸枣生长发育情况发现,对土壤改良表现最优的为T11处理,即15000kg/hm^(2)蚯蚓粪肥、150kg/hm^(2)保水剂和最大田间持水量的80%灌溉量配施。

关键词：风沙土蚯蚓粪肥保水剂复合肥灌溉量

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定椰汁中的二氧化钛

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农村科学实验 2019年第2期 83-83,89页

作者：张鑫桐黄小真林磊福州市产品质量检验所

研究用微波消解仪处理食品后,用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测食品中二氧化钛的方法。结果表明,使用这种方法检测,方法检出限为0.475μg/kg,回收率为89.3%~91.4%,和标准方法作出的结果偏差在5%以内.这种检测方法相比于标准检测方... 详细信息

研究用微波消解仪处理食品后,用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测食品中二氧化钛的方法。结果表明,使用这种方法检测,方法检出限为0.475μg/kg,回收率为89.3%~91.4%,和标准方法作出的结果偏差在5%以内.这种检测方法相比于标准检测方法检出限低,检测时间短,数据更加稳定,可以实际应用。

关键词：电感耦合等离子体质谱仪二氧化钛

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肿瘤基因信使RNA可变剪接及其应用

国际肿瘤学杂志 2014年第9期41卷 648-651页

作者：张鑫桐岳文涛首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所细胞生物学实验室 101149

可变剪接作为基因的一种修饰方式，是真核细胞表达调控过程的重要因素。它使同一蛋白质编码基因能够产生多种转录本，极大地扩展了遗传信息的应用。在人类肿瘤细胞中前体信使RN A的可变剪接扮演着重要角色，一些重要基因通过可变剪接产... 详细信息

可变剪接作为基因的一种修饰方式，是真核细胞表达调控过程的重要因素。它使同一蛋白质编码基因能够产生多种转录本，极大地扩展了遗传信息的应用。在人类肿瘤细胞中前体信使RN A的可变剪接扮演着重要角色，一些重要基因通过可变剪接产生不同于正常细胞中的剪接异构体。这些肿瘤特异性剪接异构体的存在导致了肿瘤的发生、发展。深入探索肿瘤相关基因的可变剪接对肿瘤的诊断、治疗具有重要意义。

关键词：肿瘤 RNA,信使可变剪接