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NK细胞培养体系的优化及对T47D细胞杀伤力的比较

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NK细胞培养体系的优化及对T47D细胞杀伤力的比较

作者：张金莉遵义医学院

学位级别：硕士

目的:优化NK细胞培养体系,提高NK细胞在体外培养的效率,检测不同培养体系NK细胞对乳腺癌细胞T47D体外杀伤效果。本文为NK细胞在肿瘤过继细胞免疫治疗的临床应用提供了理论与实践依据。方法:采集健康人静脉全血,分离出外周血单个核细胞,... 详细信息

目的:优化NK细胞培养体系,提高NK细胞在体外培养的效率,检测不同培养体系NK细胞对乳腺癌细胞T47D体外杀伤效果。本文为NK细胞在肿瘤过继细胞免疫治疗的临床应用提供了理论与实践依据。方法:采集健康人静脉全血,分离出外周血单个核细胞,通过添加不同的细胞因子与添加ErbB2抗体的培养体系进行NK细胞培养,实验分为NK1组(培养基中含IL-2)、NK2组(培养基中含IL-2,IL-15和IL-21)、和NK3组(ErbB2抗体包被后培养基中含IL-2)三组。分别将培养第0天、7天和第14天的NK细胞进行流式分析检测CD3、CD4、CD8和CD56分子表型,检测不同培养时期NK细胞的比率。将培养14天后的三组培养体系的NK细胞分别以效靶比5:1、10:1、20:1分别和T47D细胞共同培养,用CCK-8法进行体外肿瘤细胞杀伤实验。结果:第7天时流式结果显示:NK3组与NK1及NK2组细胞相比,NK细胞比率开始有显著升高(P0.05);第14天时三组细胞相比,NK3组中NK细胞比率与NK1及NK2相比升高,有显著性差异(P<0.05)。经离心收集NK细胞并调整细胞浓度,分别以效靶比5:1、10:1、20:1与T47D共培养24小时后,以CCK-8法检测细胞存活率,NK3组NK细胞对T47D的细胞的杀伤活性最高,与NK1及NK2组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论:经不同的方案诱导培养NK细胞,结果显示添加了ErbB2抗体的培养组,NK细胞的比率显著高于其它培养体系培养的细胞;并且添加了ErbB2抗体诱导培养体系培养出的NK细胞对乳腺癌细胞T47D的体外杀伤效果显著优于其它各组。

关键词： NK细胞 ErbB2 T47D 肿瘤免疫治疗

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岩溶灌浆效果检测中的弹性波CT技术

岩溶灌浆效果检测中的弹性波CT技术

作者：张金莉吉林大学

学位级别：硕士

随着我国工程建设的发展,越来越多的大中型建筑物在不良地质区兴建,尤其是在岩溶发育地区,基岩顶面、溶洞及溶蚀裂缝发育形态非常复杂。目前常规的工程地质钻探由于勘察钻孔数量有限,且是“一孔之见”,难于反映地下不良地质体分布及其... 详细信息

随着我国工程建设的发展,越来越多的大中型建筑物在不良地质区兴建,尤其是在岩溶发育地区,基岩顶面、溶洞及溶蚀裂缝发育形态非常复杂。目前常规的工程地质钻探由于勘察钻孔数量有限,且是“一孔之见”,难于反映地下不良地质体分布及其形态。而弹性波CT方法效率高、操作简单、准确有效,克服了常规工程钻探之不足。本文系统讨论了弹性波CT基本原理、重建算法和射线追踪方法。选用联合迭代法(SIRT),借助数学模型,重点研究了迭代次数、介质速度以及射线密度等对成像结果的影响。最后结合一工程实例,具体介绍了其工作方法、数据采集系统、观测系统及其对测试成果进行分析解释。由此可以看出在岩溶发育地区兴建的大、中型重要建筑的设计、施工阶段,采用常规工程钻探、地面物探与弹性波CT成像相结合的勘察方法,可避免重复勘察,消除工程安全隐患,从而降低整个工程造价。因此弹性波CT成像技术在岩土工程勘察中具有广阔的应用前景。

关键词：弹性波层析成像射线追踪离散图像重建岩溶

大数据环境下国有企业数字化审计应用研究 ——以G电力公司为例

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大数据环境下国有企业数字化审计应用研究 ...

作者：张金莉哈尔滨商业大学

学位级别：硕士

“十四五”时期,随着大数据、云计算、区块链、人工智能、移动端等新技术的加速发展,经济社会数字化开始进入全面转型期,数字化时代给企业发展带来了新机遇和新挑战。为顺应数字经济变革的新趋势,推动内部审计行业进行数字化变革,国有... 详细信息

“十四五”时期,随着大数据、云计算、区块链、人工智能、移动端等新技术的加速发展,经济社会数字化开始进入全面转型期,数字化时代给企业发展带来了新机遇和新挑战。为顺应数字经济变革的新趋势,推动内部审计行业进行数字化变革,国有企业内部审计应基于大数据、人工智能、区块链等数字科技,推动国有企业内部审计系统的数字化升级,鼓励审计技术人员积极探索审计全流程的数字化和智能化。但同时,内部审计数字化转型也存在发展不均衡,数字化审计理论研究不够深入,数据共享覆盖面不够广泛等问题。在此研究背景下,本文主要以流程再造论、系统分析论和信息管理理论为指导,参考国内外发展文献,对数字化审计应用进行了理论分析,然后以G电力公司为案例,从G电力公司的基本情况入手,对其数字化审计框架构建及主要流程进行阐述分析,结合G电力公司数字化审计应用现状,分析总结出企业目前在数字化审计方面的不足之处,如在数字化审计理论方面,缺乏较为完整的理论支撑;数字化审计功能方面,数字化审计数据获取效率及数据质量需要提高;在数据管理分析阶段,数字化审计过程使用数据挖掘技术、可视化工具不够深入,审计模型较为单一;数字化审计实践中,审计人力资源不足等。因此本文以G电力公司为例提出一些优化完善数字化审计的相关建议:应完善国有企业数字化审计理论;促进大数据技术及智能自动化审计工具的应用;强化数字化审计系统的维护;提升数字化审计人员的能力和综合素质等。希望能对G电力公司以及其他国有企业有所帮助,结合实际情况,有序开展数字化信息建设,积极推动审计数字化转型,构建符合新时代要求的国有企业数字化审计体系。

关键词：内部审计大数据技术数字化审计

甲基硒酸启动氧化应激损伤抑制胶质瘤生长的机制研究

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甲基硒酸启动氧化应激损伤抑制胶质瘤生长的机制研究

作者：张金莉青岛大学

学位级别：硕士

目的评价甲基硒酸(Methylseleninic acid,Me Se)对脑胶质瘤细胞生长的抑制作用,并探究其作用机制。方法体外培养人胶质瘤细胞株U251和U87细胞,2.5-40μM的Me Se处理细胞72h,MTT方法检测U251和U87细胞活性,评估甲基硒酸对U251和U87细胞... 详细信息

目的评价甲基硒酸(Methylseleninic acid,Me Se)对脑胶质瘤细胞生长的抑制作用,并探究其作用机制。方法体外培养人胶质瘤细胞株U251和U87细胞,2.5-40μM的Me Se处理细胞72h,MTT方法检测U251和U87细胞活性,评估甲基硒酸对U251和U87细胞活性的影响,相差显微镜观察胶质瘤细胞形貌的改变;碘化丙啶(PI)单染,流式细胞仪检测胶质瘤U251细胞周期改变和细胞凋亡情况;以caspase特异的荧光底物检测Me Se处理后caspase-3,caspase-8和caspase-9激活情况;DCFH-DA和DHE荧光探针检测细胞总活性氧自由基(ROS)和超氧阴离子产生;Western blotting方法检测凋亡和DNA损伤相关蛋白的表达;体内构建裸鼠荷瘤模型,检测小鼠体重和肿瘤质量,钼靶成像检测肿瘤体积,HE染色,免疫组化,免疫荧光检测肿瘤组织血管生成、细胞增殖、凋亡等指标。结果MTT结果表明:Me Se体外可剂量依赖性的抑制U251和U87细胞的生长,其中U251细胞更敏感;细胞形貌观察结果显示:U251细胞经Me Se处理表现为细胞皱缩,细胞数目减少,有明显凋亡小体的形成。流式细胞检测结果表明:Me Se体外可剂量依赖性的诱导U251细胞凋亡,表现为Sub-G1峰的升高;Caspases活性检测结果表明:Me Se体外可剂量依赖性的激活U251细胞caspase-3,caspase-8和caspase-9的表达;western blotting结果表明:Me Se体外可剂量依赖性的激活active-caspase-3,active-caspase-8和active-caspase-9的表达;免疫荧光检测显示:Me Se体外时间依赖性的诱导了ROS和超氧阴离子的产生,进而引起了DNA损伤,表现为Ser428-ATR,Ser1981-ATM,Ser15-p53和Ser139-HA磷酸化表达增加;然而,ROS的抑制剂谷胱甘肽(GSH)的加入,有效的清除了ROS,减弱了caspase的激活和DNA损伤,最终抑制了Me Se对U251细胞的杀伤。动物实验结果表明:Me Se体内时间依赖性的抑制了胶质瘤的体积,对小鼠体重无显著影响;钼靶结果表明:Me Se体内有效抑制了肿瘤的生长;体内western blotting结果表明:Me Se体内激活了active-caspase-3和Ser15-p53,Ser139-HA磷酸化,表明Me Se体内诱导了胶质瘤细胞凋亡和DNA损伤;HE染色和Ki67染色结果证实:Me Se体内有效抑制了胶质瘤细胞增殖;TUNEL染色结果证实:Me Se体内诱导了胶质瘤细胞凋亡;CD34染色结果表明:Me Se体内有效抑制了胶质瘤血管新生。结论Me Se可通过激活ROS依赖性的DNA损伤,在体内外诱导胶质瘤细胞凋亡,进而有效抑制胶质瘤细胞的生长,是潜在的胶质瘤化疗剂。

关键词：胶质瘤甲基硒酸细胞凋亡 ROS DNA损伤

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XSS漏洞检测与挖掘技术研究

XSS漏洞检测与挖掘技术研究

作者：张金莉北京邮电大学

学位级别：硕士

互联网的兴起把Web应用服务推向了巅峰,也导致了各种Web网站攻击事件的频频发生,Web安全面临着严峻的危机。各种Web应用安全事件严重影响了 Web应用的发展,其中跨站脚本攻击尤为严重。跨站脚本攻击在受害者的浏览器上执行恶意脚本代码,... 详细信息

互联网的兴起把Web应用服务推向了巅峰,也导致了各种Web网站攻击事件的频频发生,Web安全面临着严峻的危机。各种Web应用安全事件严重影响了 Web应用的发展,其中跨站脚本攻击尤为严重。跨站脚本攻击在受害者的浏览器上执行恶意脚本代码,从而劫持用户会话,窃取用户Cookies等机密信息,造成严重的危害,因此对跨站脚本漏洞进行深入研究是必要的。本文通过对XSS漏洞产生原理和漏洞特征的深入分析,提出了基于注入点挖掘的分类攻击检测算法与攻击向量生成算法相结合的XSS漏洞检测与挖掘模型,在该模型基础上设计并实现XSS漏洞检测与挖掘系统,在一定程度上提高了 XSS漏洞检测的效率。本文的主要研究内容及成果如下:(1)针对XSS漏洞安全问题,设计了 XSS漏洞检测与挖掘的模型。对该模型的总体设计进行研究,并对各模块进行详细地阐述。(2)研究XSS漏洞检测与挖掘的算法。提出了 XSS漏洞注入点挖掘算法,XSS漏洞分类攻击检测的算法,以及攻击向量动态生成算法,并将算法应用到XSS漏洞检测与挖掘系统中,提高了系统漏洞检测效率。(3)设计并实现了 XSS漏洞检测与挖掘系统。对系统的总体架构进行设计并对两个主要模块XSS网络爬虫模块和XSS漏洞检测模块进行详细设计,给出具体的实现方案。(4)对XSS漏洞检测与挖掘系统进行功能和性能方面的评测。评测结果表明该系统在功能和性能方面较其他XSS检测工具具有一定程度的提升。本文主要研究了 XSS漏洞检测与挖掘技术,实现了 XSS漏洞检测与挖掘系统,并对该系统的实现进行评测,达到了对XSS漏洞高效检测的目标。

关键词：跨站脚本攻击漏洞检测网络爬虫攻击向量

经皮二尖瓣球囊成形术治疗重度二尖瓣狭窄的体会

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临床心血管病杂志 1999年第4期15卷 185-186页

作者：贾绍斌沙勇陈树兰张金莉廖明兰宁夏医学院附属医院心导管室银川750004

经皮腔内二尖瓣球囊成形术(PBMV)治疗二尖瓣狭窄(MS)疗效肯定,与外科闭式分离术效果相同,因而已广泛用于临床.我院自1990年4月至1998年4月应用PBMV治疗135例MS,其中41例为重度.除1例手术失败外,其余全部成功,疗效满意.现予总结,旨在探... 详细信息

经皮腔内二尖瓣球囊成形术(PBMV)治疗二尖瓣狭窄(MS)疗效肯定,与外科闭式分离术效果相同,因而已广泛用于临床.我院自1990年4月至1998年4月应用PBMV治疗135例MS,其中41例为重度.除1例手术失败外,其余全部成功,疗效满意.现予总结,旨在探讨进一步提高PBMV治疗重度MS成功率和防止并发症的方法.

关键词：二尖瓣狭窄球囊成形术 PBMV

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射频导管消融术前后血清心肌肌钙蛋白T及部分心肌酶含量的研究(摘要)

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中国循环杂志 1999年第S1期14卷 119-120页

作者：沙勇陈树兰贾绍斌张金莉白向荣宁夏医学院附属医院心内科!750001

Objective :To study the relationship between changes of serum cardiac troponin T (cTnT) , creatine kinase (CK) and its MB ( CK MB) , aspartate aminotransferase ( AST) levels and myocardial injury in patients with permanent superaventricular tachycardia ( PSVT) undergoing radiofrequency catheter ablation ( RFCA)- Methods :The levels of above mentioned enzymes (substances) were measured before ,im mediately after ablation and every 6 hoursthereafterfor 24 hours to detect myocardial injury in 40 patients with PSVTand 25 age matched normal subjects- Results :The levels of all the substances of the RFCA patients escalated im mediately after ablation and reached the peak by 6 h , and then gradually decreased from 12 h ,returned to normal by 24 h with the exception of CK- Compared with the levels of the patients before ablation and those ofthe controls ,the excalating was significant- The analysis oflinear correlation showed thatthe levels of serium cTnTpositively correlated with the number of ablation sites ( r = 0-81 , p 0-05)- Conclusion :It was concluded that RFCAfor PSVTpatients indeed caused some miner myocardial injury ,the measurement of cTnT might be usefulto detect myocardial injury in ablation patients with PSVT-

关键词：射频导管消融术心肌肌钙蛋白心肌酶血清摘要

经皮球囊二尖瓣成形术前后的血流动力学和心功能对比研究

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临床心血管病杂志 1993年第2期9卷 76-78页

作者：赵淑清张德利沙勇张金莉廖明兰宁夏医学院附属医院心内科邮政编码750004 宁夏医学院心血管病研究所心导管室

本文对比研究75例MS患者行PBMV治疗前、后的血流动力学和心功能的变化。结果显示,术后血流动力学参数和各项心功能指标均有显著改善。表明PBMV是一项非开胸治疗MS的有效方法。

关键词：二尖瓣狭窄心功能二尖瓣成形术

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平板运动试验与冠状动脉造影对冠心病危险分层的意义

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中国临床康复 2003年第15期7卷 2176-2177页

作者：徐方芳沙勇马瑞琴张金莉宁夏医学院附属医院心内科宁夏回族自治区银川市750004

目的评估平板运动试验在心肌缺血诊断、危险分层方面的价值和意义。方法对均进行平板运动试验及冠状动脉造影两项检查的52例患者进行观察和分析,对平板试验阳性者28例、平板试验阴性者24例与各自的冠状动脉造影对比,评判平板运动试验对... 详细信息

目的评估平板运动试验在心肌缺血诊断、危险分层方面的价值和意义。方法对均进行平板运动试验及冠状动脉造影两项检查的52例患者进行观察和分析,对平板试验阳性者28例、平板试验阴性者24例与各自的冠状动脉造影对比,评判平板运动试验对胸痛、胸闷等不同症状患者心肌缺血程度初步估测,进行危险评估。结果活动平板运动试验检测心肌缺血的灵敏度为96%,特异性88%,预测阳性值为89%,ST段的下移形态、程度及导联数是评估的重要指标。对冠状动脉造影中血管狭窄85%以上、平板运动试验阳性的18例中的8例(强阳性)行PTCA术,其余10例用药物治疗,疗效满意。结论活动平板运动试验对缺血性心脏病的诊断价值是可以肯定的,对冠心病进行危险分层及选择治疗、评估预后有重要意义。

关键词：平板运动试验冠状动脉造影冠心病危险分层胸痛胸闷心肌缺血

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