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mTOR与JNK信号通路在人结肠癌HT-29细胞中的作用及相互关系

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世界华人消化杂志 2011年第26期19卷 2735-2740页

作者：张志永张谢夫郑州大学第一附属医院普通外科河南省郑州市450052

目的:探讨mTOR和JNK信号通路在结肠癌中作用及可能的相互作用关系.方法:免疫方法检测p-mTOR及p-JNK在结肠癌组织和正常结肠组织中的表达情况.体外培养人结肠癌细胞株HT-29细胞,转染mTOR siRNA抑制mTOR表达,使用JNK抑制剂SP600125抑制JN... 详细信息

目的:探讨mTOR和JNK信号通路在结肠癌中作用及可能的相互作用关系.方法:免疫方法检测p-mTOR及p-JNK在结肠癌组织和正常结肠组织中的表达情况.体外培养人结肠癌细胞株HT-29细胞,转染mTOR siRNA抑制mTOR表达,使用JNK抑制剂SP600125抑制JNK表达.Western blot法分别检测抑制mTOR和JNK后HT-29细胞中p-JNK、p-mTOR蛋白的表达.结果:在人结肠癌组织中p-mTOR和p-JNK表达阳性率分别为60%和56%,且两者阳性表达相关性分析存在正相关性(r=0.480,P<0.01).HT-29细胞株中抑制mTOR信号通路后mTOR siRNA转染组和空白对照组、Control siRNA组比较增殖(A值)明显降低,差异具有统计学意义(0.275±0.033,0.460±0.376vs0.479±0.012,均P<0.01),mTOR siRNA转染组凋亡指数明显高于空白对照组和Control siRNA组,差异具有统计学意义(12.330±1.533,1.000±0.147vs1.667±0.577,均P<0.01).抑制JNK信号通路后可见随着SP600125剂量的升高,A值整体变化呈下降趋势,两者呈负相关(r=-0.857,P<0.01),细胞凋亡指数先是迅速上升,而在10μmol/L至100μmol/L则变化不大,各剂量组凋亡指数差别有统计学意义(F=142.67,P<0.01).mTOR siRNA转染抑制mTOR后的p-JNK蛋白表达无差异;SP600125抑制JNK后的p-mTOR表达减少(P<0.01).结论:在结肠癌HT-29细胞中抑制mTOR信号通路及JNK信号通路均有抑制细胞增殖,促进细胞凋亡作用;JNK信号通路对mTOR信号通路存在促进作用.

关键词：结肠癌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 c—Jun

抑制JNK信号通路对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响

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世界华人消化杂志 2011年第17期19卷 1830-1833页

作者：张志永张谢夫郑州大学第一附属医院普通外科河南省郑州市450052

目的:研究抑制JNK信号通路对结肠癌HT-29细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法:将人结肠癌细胞株HT-29分为正常对照组和JNK抑制剂组(用SP600125预处理细胞24h),用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖水平,用脱氧核酸末端转移酶介导的缺... 详细信息

目的:研究抑制JNK信号通路对结肠癌HT-29细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法:将人结肠癌细胞株HT-29分为正常对照组和JNK抑制剂组(用SP600125预处理细胞24h),用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖水平,用脱氧核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)观察细胞凋亡情况.结果:使用SP600125处理后的HT-29细胞,Westernblot法检测p-JNK表达水平.与正常对照组比较p-JNK表达明显降低(0.246±0.044vs1.092±0.060,P<0.01).与正常对照组比较,JNK抑制剂组细胞增殖水平明显下降(0.287±0.008vs0.479±0.012,P<0.01),细胞凋亡指数明显升高(13.000±1.080vs1.000±0.147,P<0.01).结论:抑制JNK信号通路的激活,可以显著降低人结肠癌细胞HT-29的增殖水平,并能诱导其细胞凋亡.

关键词： c-Jun氨基末端酶结肠癌细胞增殖细胞凋亡

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低位直肠癌全直肠系膜切除63例

郑州大学学报（医学版） 2003年第5期38卷 780-781页

作者：张谢夫郑州大学第一附属医院普外科郑州450052

中低位直肠癌占我国直肠癌发病率的80％左右~([1])。传统治疗中，低位直肠癌时常需永久性腹壁造口，患者生活十分不便，且有较高的局部复发率。人们在重视直肠癌根治术后生存率的同时，对保留肛门、术后生活质量改善的要求也越来越高。... 详细信息

中低位直肠癌占我国直肠癌发病率的80％左右~([1])。传统治疗中，低位直肠癌时常需永久性腹壁造口，患者生活十分不便，且有较高的局部复发率。人们在重视直肠癌根治术后生存率的同时，对保留肛门、术后生活质量改善的要求也越来越高。作者应用双吻合器对低位直肠癌行全直肠系膜切除术(total mesorectal excision，TME)，降低局部复发率，提高保肛率，改善患者的生活质量，报道如下。

关键词：直肠癌局部复发全直肠系膜切除术生活质量

RKIP在胃癌组织中的低表达及对其侵袭力的影响

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世界华人消化杂志 2013年第34期21卷 3863-3869页

作者：卢昭辉张谢夫刘洪翔赵爽郑州大学第一附属医院胃肠外科河南省郑州市450052 郑州市第九人民医院检验科河南省郑州市450053

目的:检测Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)在胃癌(gastric cancer,GC)中的表达,分析其与GC生物学行为的关系,并探讨RKIP对GC侵袭能力的影响.方法:应用RT-PCR方法检测74例GC组织及其相应癌旁正常组织中RKIP mRNA的... 详细信息

目的:检测Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)在胃癌(gastric cancer,GC)中的表达,分析其与GC生物学行为的关系,并探讨RKIP对GC侵袭能力的影响.方法:应用RT-PCR方法检测74例GC组织及其相应癌旁正常组织中RKIP mRNA的表达,并分析胃癌组织中RKIP mRNA的表达与各临床病理学特点之间的关系;Western blot检测GC组织及其癌旁正常组织中RKIP蛋白的表达变化.采用脂质体转染方法将正义、反义R K I P表达质粒及其相应空白载体分别转染SGC-7901细胞,建立相应的稳定转染细胞系,并用Western blot检测转染效果.应用Transwell细胞迁移实验研究分析RKIP表达水平改变对GC细胞体外侵袭能力的影响.结果:RT-PCR结果显示,RKIP mRNA在GC组织中的表达量相对值明显低于在癌旁组织中的表达相对值(0.12±0.02 vs 0.48±0.04,t=6.562,P<0.01).在GC组织中,RKIP mRNA的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(均P<0.05).RKIP蛋白在GC组织中表达明显低于癌旁正常组织(0.08±0.02vs 0.41±0.04,t=7.068,P<0.01).Transwell细胞迁移实验显示,上调RKIP表达能抑制SGC-7901细胞的侵袭能力,而下调RKIP表达能增强SGC-7901细胞的侵袭能力.结论:RKIP的低表达与胃癌的恶性程度及侵袭性关系密切,揭示RKIP可能是一个潜在预防胃癌转移的治疗靶点.

关键词：胃癌 Raf激酶抑制蛋白侵袭转移

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在人结肠癌中的表达及其对HT-29细胞增殖凋亡的影响

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中华医学杂志 2011年第41期91卷 2899-2902页

作者：张志永张谢夫郑州大学第一附属医院普通外科 450052

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因在人结肠癌组织中的表达及其对HT-29细胞增殖与凋亡的影响。方法免疫组织化学方法检测磷酸化mTOR（p-mTOR），在郑州大学第一附属医院普通外科2009年10月至2010年6月50例结肠癌组织和50例正... 详细信息

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因在人结肠癌组织中的表达及其对HT-29细胞增殖与凋亡的影响。方法免疫组织化学方法检测磷酸化mTOR（p-mTOR），在郑州大学第一附属医院普通外科2009年10月至2010年6月50例结肠癌组织和50例正常结肠组织中的表达情况。体外合成mTOR小干扰RNA（siRNA），转染人结肠癌HT-29细胞为实验组，同时设空白对照组（不转染）及无义对照组（转染无义siRNA），Western印迹法检测各组HT-29细胞的mTOR蛋白表达；四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖；原位末端标记法检测细胞凋亡。结果结肠癌组织中p-mTOR的表达高于对照组[60％（30例）比14％（7例），P〈0．05]，mTOR的表达和淋巴结转移、肿瘤的分化程度相关（r=0．311、0．427，均P〈0．05）。实验组HT-29细胞mTOR的表达和细胞增殖均低于空白对照组和无义对照组（0．39±0．25比1．18±0．05、1．46±0．09，0．275±0．033比0．460±0．028、0．450±0．037，均P〈0．05）；细胞凋亡指数则均高于空白对照组和无义对照组（12．33±1．53比0．33±0．31、1．67±0．58，均P〈0．05）。结论在结肠癌组织中存在mTOR高表达，mTORsiRNA对HT-29细胞mTOR基因的表达有抑制作用，能抑制HT-29细胞的增殖并促进其凋亡。

关键词：结肠肿瘤 RNA干扰 HT29细胞 mTOR

ER81在GISTs中的表达与临床病理因素及CD117、ki-67的相关性

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世界华人消化杂志 2012年第7期20卷 601-604页

作者：谢天张谢夫郭大鹏翟二涛郑州大学第一附属医院胃肠外科河南省郑州市450000

目的:研究胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GISTs)组织中ER81蛋白的表达与临床病理因素的相关性.方法:采用免疫组织化学检测17例正常胃黏膜下层组织、80例GISTs组织中ER81的表达,分析ER81表达与患者年龄、NIH危险度、CD11... 详细信息

目的:研究胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GISTs)组织中ER81蛋白的表达与临床病理因素的相关性.方法:采用免疫组织化学检测17例正常胃黏膜下层组织、80例GISTs组织中ER81的表达,分析ER81表达与患者年龄、NIH危险度、CD117、ki-67的关系.结果:ER81正常胃组织、GISTs中的表达率分别为11.7%,75%,差异具有统计学意义,且ER81的表达与性别、年龄无关,但与NIH危险度分级相关(P<0.05).其中ER81的表达与NIH危险度分级呈正相关.且ER81的表达CD117在GISTs患者人群中的表达无统计学差异(P<0.05),与ki-67的表达在NHI危险度的各个分期的表达无统计学差异(P<0.05).结论:ER81的表达与GISTs的发生及危险度相关;ER81的表达水平还与CD117、ki-67的表达相关.ER81有望成为GISTs分子病理诊断的新指标.

关键词： ER81 胃肠道间质瘤 CD117 ki-67 NIH危险度分级

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抑癌基因CHD5在胃癌中的表达及临床意义

世界华人消化杂志 2012年第34期20卷 3317-3322页

作者：游焜张谢夫赵春临刘涛郭大鹏郑州大学第一附属医院胃肠外科河南省郑州市450052

目的:探讨染色体质域解螺旋酶DNA结合蛋白5(chromodomain helicase DNA-binding protein5,CHD5)mRNA和蛋白的表达与胃癌发生、发展的关系.方法:采用RT-PCR和免疫组织化学方法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法,streptavidin-perosidase法),检测63例胃癌组织及相应癌旁组织(距癌5cm)中CHD5 mRNA和蛋白的表达情况,并分析胃癌组织中CHD5 mRNA和蛋白的表达与临床病理特征之间的关系.结果:CHD5 mRNA在63例胃癌组织中的表达量相对值明显低于在癌旁组织中的表达相对值(0.06±0.04vs0.34±0.06,t=59.204,P<0.01).在胃癌组织中,CHD5 mRNA的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(均P<0.05).CHD5基因的蛋白在胃癌组织和相应癌旁组织中的表达阳性率分别为36.5%和71.4%.在胃癌组织中CHD5蛋白的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(均P<0.05).结论:CHD5基因的低表达与胃癌的恶性程度及侵袭性关系密切,提示其可能是胃癌发生、发展过程中的一个重要的抑癌基因.

关键词：染色体质域解螺旋酶DNA结合蛋白5 胃癌逆转录聚合酶链反应免疫组织化学sP法

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疝环填充式腹股沟疝113例修补体会

郑州大学学报（医学版） 2003年第3期38卷 435-436页

作者：张谢夫吕建锋郑州大学第一附属医院普外科郑州450052

1996年以来作者采用疝环填充式修补术对113例腹股沟疝进行修补，并与同期进行的136例常规疝修补术进行对比，报道如下。

关键词：腹股沟疝修补疝环填充式并发症

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胃癌术前螺旋CT分期的临床意义

中华普通外科杂志 2003年第8期18卷 503-504页

作者：张谢夫吕建锋郑州大学第一附属医院普外科 450052

对进展期胃癌在术前进行较为准确的分期有助于制定合理的治疗方案，虽然上消化道气钡双重造影、CT、螺旋CT等能用于术前分期评估，但都有一定的局限性。作者采取人工气腹法SCT(induced pneumoperitoneum in spiral CT, SCTPP)对进展期... 详细信息

对进展期胃癌在术前进行较为准确的分期有助于制定合理的治疗方案，虽然上消化道气钡双重造影、CT、螺旋CT等能用于术前分期评估，但都有一定的局限性。作者采取人工气腹法SCT(induced pneumoperitoneum in spiral CT, SCTPP)对进展期胃癌进行分期，并与术后病理结果进行对比，研究利用SCTPP技术提高术前分期准确性的可能性。

关键词：胃癌术前螺旋CT 分期诊断