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五重PCR检测转基因大豆及其食用油脂的研究

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五重PCR检测转基因大豆及其食用油脂的研究

作者：张秀丰河北农业大学

学位级别：硕士

随着转基因产品商品化，转基因植物、动物、微生物加工而成的转基因食品在传统食品市场中的份额在不断加大，转基因食品已经不知不觉的走进了人们的餐桌，进入了食物链。然而，转基因食品中含有新的遗传物质，即外源DNA以及由外源基因... 详细信息

随着转基因产品商品化，转基因植物、动物、微生物加工而成的转基因食品在传统食品市场中的份额在不断加大，转基因食品已经不知不觉的走进了人们的餐桌，进入了食物链。然而，转基因食品中含有新的遗传物质，即外源DNA以及由外源基因编码的新蛋白，而传统食品是不存在这些情况的，并且传统食品是经过人类几千年的食用证明是安全的，因此转基因食品的安全性是摆在人类面前的重大难题;由于转基因食品的安全性在较短的时间内无法确定，因此，目前各国对转基因食品都采用标签制度进行管理，所以急需建立一套能够对转基因食品进行准确、快速检测的方法。根据已经商品化的转基因大豆种类，确定了以35S启动子(Cauliflowermosaicvirus 35S，CaMV3 5S)、Nos终止子(Nopalinesynthase，Nos)、NPTⅡ、CP4-EPSPS四种外源基因和大豆内源基因(Lectin)为检测的目的片段，建立了五重PCR反应体系，并采用改进的方法提取DNA，进行PCR扩增，实现了四个外源基因的特异性同步检测，检测了已知转基因大豆、市售大豆和转基因食用油脂，确定了检出限为0.1％。五重PCR反应体系最终确定为：总反应体系为58.5μL。其中包括0.5μL(5U／μL)Taq，5μL 10×PCR buffer，4μL dNTPs混合物，6μL Mg，Lectin正向和反向引物各为2μL，CaMV正向和反向引物各为1.9μL，NPTⅡ正向和反向引物各为1.91μL，CP4-EPSPS正向和反向引物各为2μL，NOS正向和反向引物各为1.7μL，模版4μL，ddHO 201μL。五重PCR反应体系扩增条件：94℃预变性5min，在按94℃40s→57℃30s→72℃30s进行35个循环，最后72℃延伸6min。PCR反应产物在2％的琼脂糖凝胶中进行电泳，凝胶成像系统观察结果。对PCR扩增产物进行了DNA测序，CaMV35S、NOS、NPTⅡ、CP4-EPSPS、Lectin的PCR扩增产物DNA序列与文献报道的靶基因序列的同源性分别为：100％、95％、99％、100％、99％，从而证实PCR扩增产物确为目的扩增产物。通过本论文的研究表明，五重PCR是一种可行有效的转基因大豆及豆制品检测方法，具有广阔的应用前景。

关键词：转基因大豆油脂 DNA提取多重PCR 检测

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裘皮制品中甲醛检测测量不确定度评定

皮革科学与工程 2013年第5期23卷 51-54,59页

作者：张秀丰翟硕莉勾金玉河北省衡水出入境检验检疫局河北衡水053000 河北省衡水市衡水学院生命科学系河北衡水053000

为了确保检测结果的准确性和实验的重复性,依据JJG1059-1999《测量不确定度评定与表示》,采用GB/T19941-2005《皮革和毛皮化学试验甲醛含量的测定分光光度法》对裘皮制品中的甲醛进行定量检测,本研究详细分析了该检测方法在检测过程中... 详细信息

为了确保检测结果的准确性和实验的重复性,依据JJG1059-1999《测量不确定度评定与表示》,采用GB/T19941-2005《皮革和毛皮化学试验甲醛含量的测定分光光度法》对裘皮制品中的甲醛进行定量检测,本研究详细分析了该检测方法在检测过程中的各个环节影响检测结果的分量,并对所涉及的分量进行了评定,最终得出结论:裘皮制品中甲醛检测测量不确定度评定主要来源于标准储备液不确定度和曲线拟合过程中系列配制所产生的不确定度。

关键词：裘皮制品甲醛标准不确定度扩展不确定度

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超声波辅助水提苦菜中黄酮类物质的工艺

食品研究与开发 2014年第24期35卷 63-65页

作者：翟硕莉张秀丰衡水学院生命科学系河北衡水053000 衡水出入境检验检疫局河北衡水053000

采用超声波辅助提取技术,以蒸馏水为提取剂,采用正交试验法提取苦菜中黄酮类物质,得到最佳提取工艺条件为:料液比为1∶50(g/m L),超声时间40 min,超声温度为70℃,超声功率为500 W。影响提取得率的各因素大小顺序为:料液比>超声时间>超... 详细信息

采用超声波辅助提取技术,以蒸馏水为提取剂,采用正交试验法提取苦菜中黄酮类物质,得到最佳提取工艺条件为:料液比为1∶50(g/m L),超声时间40 min,超声温度为70℃,超声功率为500 W。影响提取得率的各因素大小顺序为:料液比>超声时间>超声温度>超声功率。

关键词：苦菜超声波水黄酮类物质

全自动石墨加热消解-石墨炉原子吸收法测定麦苗粉中铅含量的不确定度评定

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食品安全质量检测学报 2021年第4期12卷 1502-1507页

作者：翟硕莉张秀丰孙世卫河北省衡水市衡水学院生命科学系衡水053000 衡水海关衡水053000

目的评定全自动石墨加热消解-石墨炉原子吸收法测定麦苗粉中铅含量的不确定度。方法麦苗粉样品经全自动石墨加热消解后,石墨炉原子吸收法测定,外标法定量,根据建立的数据模型对每个不确定度分量进行评定,最终得出对合成不确定度的贡献... 详细信息

目的评定全自动石墨加热消解-石墨炉原子吸收法测定麦苗粉中铅含量的不确定度。方法麦苗粉样品经全自动石墨加热消解后,石墨炉原子吸收法测定,外标法定量,根据建立的数据模型对每个不确定度分量进行评定,最终得出对合成不确定度的贡献度。结果置信概率为95%,取包含因子k=2,湿法消解-石墨炉原子吸收法测定麦苗粉中铅含量结果报告为X=(0.17±0.01)mg/kg。结论该方法测量铅不确定度的主要因素是曲线拟合的不确定度。

关键词：石墨加热消解石墨炉原子吸收法铅不确定度

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转基因食品现状及其安全性

科技风 2011年第18期 266-267页

作者：张秀丰翟硕莉衡水出入境检验检疫局河北衡水053000 衡水学院河北衡水053000

食品安全是一个重大的世界性的公共卫生问题,但随着全世界人口不断增长、而耕地面积不断下降,转基因作物以其高产、抗虫、抗病等优良性能的出现,是社会和科学技术发展的必然产物,但其安全性到目前为止,尚无定论,本文通过介绍转基因食品... 详细信息

食品安全是一个重大的世界性的公共卫生问题,但随着全世界人口不断增长、而耕地面积不断下降,转基因作物以其高产、抗虫、抗病等优良性能的出现,是社会和科学技术发展的必然产物,但其安全性到目前为止,尚无定论,本文通过介绍转基因食品的基本特点、检测方法和一些国际国内的不同观点,使人们能更全面的了解转基因食品.科学的去对待转基因食品,给予其最大的支持,使它真正的给我们的生活带来方便和好处,使它的价值真正的体现,以便我们更好的利用好科学技术服务于人类。

关键词：转基因食品现状安全性

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HACCP在奶酪生产中的应用

衡水学院学报 2011年第4期13卷 110-112页

作者：翟硕莉张秀丰衡水学院生命科学学院河北衡水053000 衡水出入境检验检疫局河北衡水053000

阐述了HACCP在奶酪生产中的应用,通过对奶酪生产过程进行危害分析(HA),介绍了奶酪生产中常见的质量问题,确定关键控制点(CCP),并制定了关键限值、监控体系的HACCP计划,以期为HACCP体系在奶酪中的应用提供理论依据.

关键词： HACCP 奶酪质量

富硒乳酸菌发酵葡萄汁工艺条件及功能性成分研究

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农业与技术 2023年第20期43卷 16-19页

作者：翟硕莉王岩张秀丰衡水学院生命科学系河北衡水053000 石家庄海关技术中心河北石家庄050000

以pH值和感官评价为标准,优化乳酸菌发酵山楂汁工艺,测定葡萄汁发酵前后及贮藏过程中理化指标、功能性成分和抗氧化活性的变化。结果表明,最佳发酵条件为料水比2∶1,加糖量7%,接种量3%,发酵时间12h,发酵温度36℃。发酵后的山楂汁与发酵... 详细信息

以pH值和感官评价为标准,优化乳酸菌发酵山楂汁工艺,测定葡萄汁发酵前后及贮藏过程中理化指标、功能性成分和抗氧化活性的变化。结果表明,最佳发酵条件为料水比2∶1,加糖量7%,接种量3%,发酵时间12h,发酵温度36℃。发酵后的山楂汁与发酵前比较,其pH值、可溶性固形物均下降,总酚含量、总酮含量、抗氧化能力、硒含量均上升。

关键词：葡萄汁乳酸菌发酵功能性物质

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病毒免疫逃逸防卫机制

中国兽药杂志 2012年第3期46卷 56-60页

作者：崔奕杰付艳梅张秀丰衡水出入境检验检疫局河北衡水053000

从各种各样的病毒免疫逃逸机制中归纳概括出病毒逃避宿主抗感染反应的三个大方面,包括病毒逃避体液免疫系统的识别、病毒抑制细胞免疫应答以及病毒干扰免疫效应功能,以期为研制新的病毒疫苗和抗病毒药物提供参考。在宿主和病毒的长期共... 详细信息

从各种各样的病毒免疫逃逸机制中归纳概括出病毒逃避宿主抗感染反应的三个大方面,包括病毒逃避体液免疫系统的识别、病毒抑制细胞免疫应答以及病毒干扰免疫效应功能,以期为研制新的病毒疫苗和抗病毒药物提供参考。在宿主和病毒的长期共同进化过程中,宿主发展了各种免疫机制以清除病毒,而病毒则进化出各种免疫逃逸机制来躲避宿主的免疫应答。

关键词：病毒免疫逃逸机制

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气相色谱法测定冰激淋中的甜蜜素

中国乳品工业 2015年第1期43卷 47-50页

作者：张志强张秀丰张玉娟崔同邢台出入境检验检疫局河北邢台054000 衡水出入境检验检疫局河北衡水053000 河北农业大学食品科技学院河北保定071001

建立了气相色谱法测定冰激淋中甜蜜素质量分数的分析方法。用亚铁氰化钾、乙酸锌溶液对样品进行蛋白变性沉淀，甜蜜素在酸性、低温环境下与亚硝酸钠发生酯化反应，酯化反应产物经毛细管色谱柱分离，由氢火焰离子化检测器（FID）测定。... 详细信息

建立了气相色谱法测定冰激淋中甜蜜素质量分数的分析方法。用亚铁氰化钾、乙酸锌溶液对样品进行蛋白变性沉淀，甜蜜素在酸性、低温环境下与亚硝酸钠发生酯化反应，酯化反应产物经毛细管色谱柱分离，由氢火焰离子化检测器（FID）测定。重点考察了不同提取方式的提取效率和不同蛋白沉淀剂对加标回收率的影响，在此基础上优化了前处理方法。方法的检出限为2rag／kg（S／N=3）。在加标水平为O．10，0．50和1．00mg／g时的平均添加回收率为93．0％～95．8％，相对标准偏差3．44％～5．16％。酯化反应产物峰面积与甜蜜素质量浓度在0．05～1．00g／L范围内呈良好的线性关系，相关系数砰=0．9996。该方法操作简便快速，灵敏度高，测定结果准确、可靠，适合冰激淋中甜蜜素质量分数的测定。

关键词：气相色谱冰激淋甜蜜素