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作者：张社彬广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是院内常见的机会致病菌,其上百种毒力因子受群体感应(quorum sensing,QS)系统调控。非编码小RNA(small non-coding RNA,sRNA)在细菌许多生理活动中起着关键的调控作用,其中包括对毒力的调控... 详细信息

目的:铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是院内常见的机会致病菌,其上百种毒力因子受群体感应(quorum sensing,QS)系统调控。非编码小RNA(small non-coding RNA,sRNA)在细菌许多生理活动中起着关键的调控作用,其中包括对毒力的调控。近年来,QS相关sRNA(QS regulatory sRNA,Qrr)引起了人们的关注,然而两者之间相互调控的具体机制尚未阐明,关于Qrrs的功能报道也较少。基于此,本研究首先通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)发现铜绿假单胞菌PAO1 amiEBCRS操纵子中的sRNAAmiL(PA3366.1)是一个新的Qrr;然后对amiL基因的敲除和过表达菌株进行毒力表型实验,探索AmiL对PAO1毒力的影响;最后通过荧光报告系统及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)等方法,明确AmiL发挥调节作用的机制。本研究旨在发现新型的QS-sRNA信号调节通路,探索铜绿假单胞菌调控毒力和sRNA发挥生理功能的调节机制,为临床建立以sRNA为靶点的抗铜绿假单胞菌感染问题新策略提供依据。方法:1、发掘Qrr并探究其转录调控机制。(1)RNA-Seq筛选Qrr:采用PAO1构建QS激活模型和QS系统基因lasI或rhlI敲除模型,进行RNA-Seq并筛选转录水平发生明显变化的sRNA AmiL作为研究对象,最后通过qRT-PCR进行确证。(2)探究QS系统对AmiL表达的调控机制:添加外源QS信号分子酰化高丝氨酸内酯(N-acylated homoserine lactones,AHLs),检测QS对AmiL表达水平变化的影响。经PRODORIC启动子预测软件,分析QS信号分子受体在AmiL启动子区域的潜在靶点,进一步过表达信号分子受体后检测AmiL表达水平,以此探究QS系统调控AmiL转录水平的作用与机制。2、探究AmiL功能及其与下游基因的调控关系。(1)采用PAO1构建amiL敲除株及过表达株:使用蔗糖自杀质粒pGSM构建amiL敲除株(ΔAmiL),使用pROP200质粒构建awiL过表达株(AmiL+),并在PAO1野生株上构建含空载pROP200菌株(EV),最后使用qRT-PCR检测菌株构建是否成功。同时检测生长曲线,观察改变AmiL表达量对PAO1生长有无影响。(2)探究AmiL对PAO1毒力的影响:使用EV株、ΔAmiL株和AmiL+株检测铜绿假单胞菌关键毒力表型的变化,如绿脓素、鼠李糖脂、动力、溶血能力等。(3)进行sRNA靶标验证实验:使用IntaRNA软件分析AmiL潜在的靶基因,并构建pUCP30T-mRNA-gfp荧光报告系统,检测AmiL对预测靶基因是否存在调控作用。(4)探究AmiL对QS系统的调节机制:由于AmiL影响QS调控的毒力表型,因此使用qRT-PCR检测EV株、?AmiL株和AmiL+株中QS基因lasI和rhlI的表达变化。最后,通过菌株CV026探索AmiL对PAO1产C4-HSL的影响,以确定AmiL对QS系统的调控关系。结果:(1)RNA-Seq 与 qRT-PCR 发现 sRNA AmiL 受 QS 系统负调控。(2)PRODORIC预测到amiL启动子区域有rhl系统受体RhlR的潜在靶点,对PAO1添加外源C4-HSL和过表达RhlR后AmiL水平下降,而添加外源3-oxo-C12-HSL和过表达LasR后AmiL水平变化不明显,证明rhl系统抑制AmiL转录。(3)成功构建PAO1 amiL敲除株与过表达株,生长曲线显示实验菌株间生长无明显差异。(4)毒力表型实验显示,AmiL抑制PAO1的绿脓素、弹性蛋白酶、生物膜的产生和降低细菌溶血能力,但促进鼠李糖脂的合成并增强集群运动,不影响溶菌酶活性、外毒素A产生和游泳运动。(5)经荧光报告系统验证,AmiL能特异性靶向绿脓素基因phzC并抑制荧光蛋白表达,表明AmiL能通过直接结合phzC而抑制绿脓素产生。(6)qRT-PCR结果显示,AmiL在PAO1生长早期负调控lasI的表达,而在中后期主要促进rhlI的表达;另外使用CV026作为指示菌株,发现AmiL能促进PAO1产生C4-HSL,表明AmiL正向调控rhl系统的功能。结论:本研究揭示了一条新的Qrr AmiL,受rhl系统负调控,并能通过直接靶向phzC和调控QS系统,参与调控多种QS系统相关毒力表型,这可能是铜绿假单胞菌PAO1通过QS系统和sRNA进行自身调节以适应环境的重要通路。我们的研究结果展示了一种新型的QS-sRNA调控网络,为丰富QS系统的调节机制和帮助临床控制铜绿假单胞菌感染提供依据。

关键词：铜绿假单胞菌非编码小RNA 群体感应系统 AmiL 毒力因子

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铜绿假单胞菌群体感应系统及相关sRNA的研究进展

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微生物学免疫学进展 2022年第3期50卷 64-69页

作者：张社彬陈茶广州中医药大学第二附属医院检验医学部广东广州510006

群体感应(quorum sensing,QS)系统是一种微生物利用信号分子实现细胞间交流并调控群体基因表达变化的调节系统,其中铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)QS系统能参与调控各种毒力因子、生物膜和耐药功能,对其感染入侵宿主起重要调... 详细信息

群体感应(quorum sensing,QS)系统是一种微生物利用信号分子实现细胞间交流并调控群体基因表达变化的调节系统,其中铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)QS系统能参与调控各种毒力因子、生物膜和耐药功能,对其感染入侵宿主起重要调控作用。非编码小RNA(small non-coding RNA,sRNA)是细菌仅参与调控而不编码蛋白质的RNA,目前已发现多条sRNA参与QS系统的调节通路,表现为受QS系统调控或调控QS系统相关功能,对PA的生命活动起重要作用,因此对QS系统相关sRNA的研究十分有意义。现就PA QS系统的组成、生物学功能,及其相关sRNA的研究进展等方面作一阐述,为进一步研究QS系统相关sRNA提供有益的帮助。

关键词：铜绿假单胞菌群体感应系统非编码小RNA

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碳青霉烯酶抑制剂检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的效能

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中华医院感染学杂志 2023年第14期33卷 2081-2085页

作者：蔡依玫张社彬张轩代奥刘健平龙一飞刘玥广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院检验医学部广东广州510006 广州中医药大学基础医学院广东广州510006 广州中医药大学第一附属医院检验医学部广东广州510405

目的评估迪尔碳青霉烯酶抑制剂检测碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)产不同基因型碳青霉烯酶的效能。方法收集2018-2020年广东省中医院临床分离的73株非重复CRE。采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯灭活试验... 详细信息

目的评估迪尔碳青霉烯酶抑制剂检测碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)产不同基因型碳青霉烯酶的效能。方法收集2018-2020年广东省中医院临床分离的73株非重复CRE。采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯灭活试验(eCIM)以及碳青霉烯酶抑制剂检测碳青霉烯酶,采用聚合酶链式反应(PCR)检测10种常见β-内酰胺酶基因。以PCR为金标法,评估两种表型试验的临床效能。结果mCIM试验阳性54株,产丝氨酸碳青霉烯酶20株,产金属β-内酰胺酶34株,符合率为98.63%(72/73)。碳青霉烯酶抑制剂检出56株产碳青霉烯酶,产A类酶22株,产B类酶34株。1株产OXA-181的摩根摩根菌为假阴性,2株不产碳青霉烯酶、高产头孢菌素酶DHA的CRE为假阳性。碳青霉烯酶抑制剂灵敏度和特异度分别为98.18%(54/55)和88.89%(16/18),符合率为95.89%(70/73)。结论mCIM联合eCIM无法区分A类和D类丝氨酸碳青霉烯酶。碳青霉烯酶抑制剂符合率较mCIM联合eCIM试验稍低,能有效鉴别A类和B类酶,但在D类酶和高产AmpC酶的CRE检测上仍存在不足。碳青霉烯酶抑制剂与mCIM/eCIM联合能更全面地实现碳青霉烯酶分型,精准指导临床合理用药。

关键词：碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌 mCIM联合eCIM试验碳青霉烯酶抑制剂碳青霉烯酶抑制剂增强试验丝氨酸碳青霉烯酶金属β-内酰胺酶

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铜绿假单胞菌群体感应相关sRNA的筛选及突变株的构建

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医学研究生学报 2020年第4期33卷 348-355页

作者：李虹霖鲁洋刘宇阳张社彬蔡依玫曾建明黄彬陈茶广州中医药大学第二临床医学院广州510006 广州中医药大学第二附属医院检验医学部广州510006 中山大学附属第一医院检验医学部广州510080

目的群体感应与调控小RNA(small regulatory RNA,sRNA)在铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)许多信号传导级联反应中起关键调节作用。文中旨在探讨sRNA是否参与P.aeruginosa的群体感应表达调控系统,筛选群体感应系统相关sRNA,构建sRNA过表达与... 详细信息

目的群体感应与调控小RNA(small regulatory RNA,sRNA)在铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)许多信号传导级联反应中起关键调节作用。文中旨在探讨sRNA是否参与P.aeruginosa的群体感应表达调控系统,筛选群体感应系统相关sRNA,构建sRNA过表达与敲除株。方法利用基因转录组测序及qPCR筛选群体感应系统相关sRNA;利用PCR扩增目的基因,使用无缝连接试剂盒将线性化载体与目的片段连接,分别将pROp200-sRNA和pGSM-ΔsRNA的连接反应液转化入E.coliDH5α和SM10λπ感受态细胞中,通过PCR鉴定重组载体;将过表达质粒pROp200-sRNA转化入铜绿假单胞菌野生株PAO1,获得PAO1-sRNA过表达株;通过接合反应将pGSM-ΔsRNA转移至PAO1,获得PAO1ΔsRNA敲除株。对处于对数生长期的PAO1野生株、PAO1-sRNA过表达株、PAO1ΔsRNA敲除株及PAO1ΔsRNA/sRNA过表达株提取RNA,逆转录,验证sRNA基因过表达株及敲除株。绘制各菌株生长曲线,检测绿脓素的浓度。结果成功利用转录组测序及qPCR筛选出群体感应相关sRNA P26、P5316.1、P30、P34、AmiL。pROp200经过EcoRI酶切后,质粒由超螺旋结构变为线性结构;pGSM-MR经SacI、XbaI双酶切后,产生长度分别为1898bp和7509bp的片段。PAO1-sRNA过表达株的sRNA基因表达量均较PAO1野生株显著上调(P<0.05);PAO1ΔsRNA敲除株的sRNA基因表达量较PAO1野生株均明显降低(P<0.05);PAO1ΔsRNA/sRNA过表达株的sRNA基因表达量较PAO1ΔsRNA敲除株均明显升高(P<0.05)。绿脓素检测显示,PAO1-sRNA过表达株AmiL绿脓素浓度低于PAO1野生株[(1.73±0.03)μg/mL vs(2.83±0.09)μg/mL,P<0.05],PAO1ΔsRNA/sRNA过表达株AmiL绿脓素浓度较PAO1ΔsRNA敲除株降低(P<0.05),P30绿脓素浓度较PAO1ΔsRNA敲除株升高(P<0.05)。结论PAO1-sRNA过表达株与PAO1ΔsRNA敲除株构建成功,可用于研究sRNA与群体感应系统间的调控关系,并进一步功能研究。

关键词：铜绿假单胞菌群体感应系统 sRNA 筛选过表达敲除

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理解中国特色产业政策体制——围绕中介性制度的政治经济学考察

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开放时代 2024年第1期 174-191,M0008,M0009页

作者：孟捷张梓彬复旦大学经济学院福建省人民政府发展研究中心

产业政策的制定和实施是社会主义市场经济中国家经济治理的重要内容,在贯彻社会主义生产目的,克服市场失灵和促进经济高质量发展等方面发挥了至关重要的作用。产业政策体系与特定的制度形式相结合,形成了产业政策体制。在社会主义初级... 详细信息

产业政策的制定和实施是社会主义市场经济中国家经济治理的重要内容,在贯彻社会主义生产目的,克服市场失灵和促进经济高质量发展等方面发挥了至关重要的作用。产业政策体系与特定的制度形式相结合,形成了产业政策体制。在社会主义初级阶段根本领导制度和基本经济制度的基础上,形成了本文所称的中介性制度,它们具体地界定了中国特色产业政策体制的风貌。本文考察了四种中介性制度:建构性市场、政府内竞争、地方政府间竞争和中国特色社会主义资本市场。这些制度是相互联系的,其中建构性市场居于核心的位置,它是基本经济制度在战略性基础性部门的具体实现形态。对这一中介性制度体系的考察有助于我们理解,中国特色产业政策体制何以可能发展为一种以充分发挥市场的决定性作用为前提的新型举国体制。

关键词：产业政策建构性市场政府内竞争地方政府间竞争中国特色社会主义资本市场

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新时代推进民族地区乡村全面振兴的创新路径——基于国家通用语言文字赋能的视角

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西北农林科技大学学报（社会科学版） 2024年第3期24卷 11-20页

作者：杨显东张捐社西北农林科技大学马克思主义学院陕西杨凌712100

推广国家通用语言文字是推动民族地区乡村全面振兴的重要抓手和关键环节。国家通用语言文字所具有的社会属性、经济属性、文化属性和生态属性决定了其能够在乡村振兴伟大工程中发挥效能、施展作为。以此为理论依据,国家通用语言文字赋... 详细信息

推广国家通用语言文字是推动民族地区乡村全面振兴的重要抓手和关键环节。国家通用语言文字所具有的社会属性、经济属性、文化属性和生态属性决定了其能够在乡村振兴伟大工程中发挥效能、施展作为。以此为理论依据,国家通用语言文字赋能民族地区乡村振兴的多维价值主要体现为:国家通用语言文字的产业效益、人力资本效益、文化效益、生态效益和治理效益有助于推动民族地区乡村产业、人才、文化、生态和组织振兴。在具体实践中,应在做好相关顶层设计的基础上,聚焦现实推广过程中存在的发展不平衡不充分问题,以国家通用语言文字与乡村产业发展、社会治理和文化繁荣的有机结合为工作切口,依托高校智库作用的发挥和在校大学生社会实践活动的参与,凝心聚力推动国家通用语言文字赋能乡村振兴工作落地见效,为民族地区乡村全面振兴贡献强大语言之力。

关键词：民族地区乡村振兴国家通用语言文字

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异构平台要素协同理论方法研究

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电子学报 2024年第4期52卷 1219-1229页

作者：张修社胡小全易凯王小军中国电子科技集团公司第二十研究所陕西西安710068

要素协同是协同作战发展的必经之路,杀伤链的动态重构是其典型特征.本文针对平台协同难以满足复杂作战任务需求的问题,提出了异构平台要素协同的解决思路和理论方法.首先分析了要素协同关系复杂性、协同能力不确定性两个难点问题;其次... 详细信息

要素协同是协同作战发展的必经之路,杀伤链的动态重构是其典型特征.本文针对平台协同难以满足复杂作战任务需求的问题,提出了异构平台要素协同的解决思路和理论方法.首先分析了要素协同关系复杂性、协同能力不确定性两个难点问题;其次基于反馈机制的可重构架构对复杂作战网络进行建模,提出了杀伤链算子的要素动态重构、协同序参量的效能定量评估方法;最后基于仿真场景实现杀伤链的动态构建与重构,可指导要素协同的算法设计与工程实践.

关键词：要素协同跨域作战动态重构体系建模杀伤链算子序参量

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一种钛合金圆弧铣刀的设计及切削性能研究

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机械设计与制造 2024年

作者：张善晶李增彬刘道明郑州大学机械与动力工程学院新乡职业技术学院机械制造系

针对钛合金加工难度问题，研究了一种新型大曲率刃的圆弧铣刀的设计及切削性能。首先采用微分几何方法建立了圆弧铣刀轮廓曲面的几何模型和螺旋切削刃线的数学模型，引入砂轮坐标与工件坐标的转换矩阵，推导了凸轮前表面磨削时砂轮轨迹... 详细信息

针对钛合金加工难度问题，研究了一种新型大曲率刃的圆弧铣刀的设计及切削性能。首先采用微分几何方法建立了圆弧铣刀轮廓曲面的几何模型和螺旋切削刃线的数学模型，引入砂轮坐标与工件坐标的转换矩阵，推导了凸轮前表面磨削时砂轮轨迹方程，并通过对自行设计的圆弧铣刀进行了精度测试。最后通过圆弧铣刀和球头铣刀对TC4钛合金进行侧铣削试验对比研究，得到了两种情况下的铣削力、磨损形貌和加工表面质量的变化规律。结果表明与球头铣刀相比，圆弧铣刀能有效降低主铣削力，提高铣削的稳定性，具有磨损速度慢的特性。

关键词：圆弧铣刀钛合金TC4 铣刀的设计切削性能表面质量

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董事高管背景与公司竞争战略发展——企业数字化转型的调节效应

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科学管理研究 2024年第3期42卷 89-96页

作者：张质彬张涵熊爱华山东工商学院经济学院山东烟台264005 山东社会科学院经济研究所山东济南250014 山东财经大学工商管理学院山东济南250014

公司竞争战略是提高自身竞争优势的重要动力。研究具有高管背景的董事对公司竞争战略发展的影响,并选取2010-2021沪深A股上市公司样本数据进行实证检验。研究发现,董事的高管背景明显强化了公司竞争战略,促进了公司成本领先战略和差异... 详细信息

公司竞争战略是提高自身竞争优势的重要动力。研究具有高管背景的董事对公司竞争战略发展的影响,并选取2010-2021沪深A股上市公司样本数据进行实证检验。研究发现,董事的高管背景明显强化了公司竞争战略,促进了公司成本领先战略和差异化战略的发展;进一步地,从企业生命周期角度出发,在公司成长期和衰退期阶段,相比成本领先战略,董事的高管背景明显重视公司的差异化战略;而成熟期阶段,董事的高管背景对成本领先战略和差异化战略均有正向影响。研究有助于深入理解董事的高管背景与公司竞争战略之间的关系,重视“高管经历”董事在我国公司经营过程中的重要作用,也可以为公司治理领域下董事会治理提供理论和实践价值。

关键词：公司竞争战略董事高管背景

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颈部按摩机器人设计及优化研究

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机械设计与制造 2024年

作者：吴锋锋张社红徐艳宁萌湖州市中心医院江南大学机械工程学院

针对当前颈椎按摩的需求，基于中医按摩理论设计了一种颈部按摩机器人。首先基于仿生学进行机器人构型与尺度设计，使用Solidworks建立三维模型。为提高机器人的按摩性能，使用DH参数建立机器人的正、逆运动学模型，并通过数值算例验证... 详细信息

针对当前颈椎按摩的需求，基于中医按摩理论设计了一种颈部按摩机器人。首先基于仿生学进行机器人构型与尺度设计，使用Solidworks建立三维模型。为提高机器人的按摩性能，使用DH参数建立机器人的正、逆运动学模型，并通过数值算例验证理论模型的准确性。其次建立机器人在捏拿及滚揉两种模式下的工作空间多目标函数，使用改进蚁群算法对机器人的连杆长度和轨迹方程进行优化，以增大按摩机器人的颈部按摩范围，提高不同人群对机器人不同按摩力度的适应性。最后通过原理样机的制作和实验平台的搭建对理论模型进行验证，并通过志愿者在一定时间按摩后的主观感受评价证明了机器人设计的合理性。

关键词：颈部按摩机器人运动学参数优化实验研究

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