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用于评价动物社交偏好程度的新方法

世界中医药 2024年第1期19卷 94-99页

作者：伍永鸿奠雅雯张天睿欧文静黄喜燕张明倩崔爽梁五林张硕峰北京中医药大学中药学院北京102488

目的:利用一种改进的三箱社交装置评价动物的社交偏好程度,并探索该方法的可行性。方法:采用注意力缺陷多动障碍(ADHD)大鼠作为社交障碍模型动物,以同源大鼠(WKY)大鼠和Wistar大鼠作为对照组,模型组采用治疗ADHD的临床常用中成药小儿黄... 详细信息

目的:利用一种改进的三箱社交装置评价动物的社交偏好程度,并探索该方法的可行性。方法:采用注意力缺陷多动障碍(ADHD)大鼠作为社交障碍模型动物,以同源大鼠(WKY)大鼠和Wistar大鼠作为对照组,模型组采用治疗ADHD的临床常用中成药小儿黄龙颗粒(1.88 g/kg、3.75 g/kg)灌胃给药16 d。利用改进的三箱社交箱,以待测鼠在陌生鼠侧密切交流区的时间、频次、路程及相关比例作为行为学指标,检测该方法对社交行为评价的可行性。结果:与Wistar大鼠组比较,模型组大鼠与WKY组大鼠在密切交流区域及有陌生鼠侧区域的时间显著减少(P<0.01),其他指标如频次、路程及比例也均有不同程度减少,小儿黄龙颗粒两剂量均能增加模型大鼠上述各指标数值。结论:该方法能准确捕捉动物的社交行为特征,实现对动物社交偏好程度的全面、客观评价。

关键词：社交偏好三箱社交装置注意力缺陷多动障碍小儿黄龙颗粒自发性高血压大鼠空间结构区域划分行为学

急慢性溃疡性结肠炎小鼠模型的建立与比较研究

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广东药科大学学报 2024年第1期40卷 95-100页

作者：刘闯李依林左泽平田颖颖赵新月吕英楠徐意张硕峰王志斌北京中医药大学中药学院北京102401 北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂北京100071

目的考察葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠慢性溃疡性结肠炎模型与噁唑酮(OXZ)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎模型小鼠生理病理变化,为溃疡性结肠炎治疗药物开发研究中动物模型的选择提供依据。方法通过连续7周交替饮用含1%DSS饮用水以及动物正常... 详细信息

目的考察葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠慢性溃疡性结肠炎模型与噁唑酮(OXZ)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎模型小鼠生理病理变化,为溃疡性结肠炎治疗药物开发研究中动物模型的选择提供依据。方法通过连续7周交替饮用含1%DSS饮用水以及动物正常饮水诱导C57BL/6N小鼠慢性溃疡性结肠炎;OXZ腹部涂抹致敏后,用40%乙醇溶解灌肠诱导Balb/c小鼠急性溃疡性结肠炎。模型建立后,通过疾病活动指数(DAI)评分、脏器指数、血液学检查、结肠组织HE染色、ELISA法检测TNF-α、INF-γ以及IL-10表达水平评价造模效果并对两种模型进行比较研究。结果经DSS及OXZ诱导的小鼠结肠炎(UC)模型中,模型组小鼠均出现体质量下降、稀便以及便血等UC临床症状,DAI评分显著升高(P<0.01),与对照组相比,模型小鼠胸腺指数显著减低(P<0.01)、脾脏指数显著升高(P<0.01)、结肠长度明显缩短(P<0.01)。血液学检查以及相关炎症因子检测结果均可见模型组小鼠发生炎症反应;组织病理学检查可见模型组小鼠结肠出现溃疡、炎性细胞浸润等病理特征。结论两种方法均可以诱导溃疡性结肠炎,但小鼠的生理状态与结肠病理变化有所不同,在实际实验中应根据研究目的以及药物治疗特点选择合适的模型开展实验。

关键词：溃疡性结肠动物模型葡聚糖硫酸钠噁唑酮

儿童注意缺陷多动障碍病证结合动物模型的构建

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北京中医药大学学报 2023年

作者：伍永鸿田骄欧文静郭玫竹黄喜燕张硕峰北京中医药大学中药学院

目的构建儿童注意缺陷多动障碍（attention deficit hyperactivity disorder，ADHD）阴虚阳亢证的病证结合动物模型，以促进ADHD的新药研发。方法采用幼龄自发性高血压(SHR)大鼠作为ADHD模型大鼠，将32只SHR大鼠按体质量随机分为SHR... 详细信息

目的构建儿童注意缺陷多动障碍（attention deficit hyperactivity disorder，ADHD）阴虚阳亢证的病证结合动物模型，以促进ADHD的新药研发。方法采用幼龄自发性高血压(SHR)大鼠作为ADHD模型大鼠，将32只SHR大鼠按体质量随机分为SHR组、模型组、小儿黄龙颗粒低剂量组（1.88 g/kg）、小儿黄龙颗粒高剂量组（3.75 g/kg）组，另设WKY组、Wistar组，每组8只。模型组及小儿黄龙颗粒高、低剂量组大鼠每日皮下注射左旋甲状腺素钠（300 μg/kg），其余各组皮下注射生理盐水，连续14 d；从第11天开始，小儿黄龙颗粒高、低剂量组大鼠灌胃相应药物，其余各组灌胃生理盐水，连续21 d。观察各组大鼠的饮食量、饮水量、粪便量、尿量、心率、呼吸频率，以及舌像红色向量（R）、绿色向量（G）、蓝色向量（B）的具体值，作为阴虚阳亢证的评价指标；观察各组大鼠的自主活动程度、社交偏好程度、注意定势转移能力、易激惹程度，作为ADHD行为学评价指标，并对模型进行诊断与评价。结果与模型组比较，其余各组大鼠心率降低（P＜0.05），SHR组及小儿黄龙颗粒高剂量组大鼠呼吸频率降低（P＜0.05，P＜0.01），WKY组及小儿黄龙颗粒高剂量组大鼠舌象G、B值下降（P＜0.05）。自主活动程度显示，除中心区域停留时间外，模型组其余各指标均高于WKY组（P＜0.05），中心区域路程高于SHR组（P＜0.05）；社交偏好程度显示，模型组较Wistar组比较在陌生鼠侧时间及陌生鼠侧的时间比均减少（P＜0.01）；注意定势转移能力显示，小儿黄龙颗粒低剂量组较模型组在EDS反向学习阶段错误率降低（P＜0.05）；激惹实验显示，模型组攻击行为总次数较WKY组增加（P＜0.05）。结论通过采用幼龄SHR大鼠皮下注射左旋甲状腺素钠的方式，能够得到较为稳定、可靠的ADHD阴虚阳亢证的病证结合动物模型。

关键词：注意缺陷多动障碍阴虚阳亢证病证结合动物模型左旋甲状腺素钠

儿童注意缺陷多动障碍阴虚阳亢证病证结合动物模型的构建

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北京中医药大学学报 2023年第5期46卷 657-664页

作者：伍永鸿田骄欧文静郭玫竹黄喜燕张硕峰北京中医药大学中药学院北京102488

目的构建儿童注意缺陷多动障碍阴虚阳亢证的病证结合动物模型,以促进治疗注意缺陷多动障碍的新药研发。方法采用幼龄自发性高血压大鼠(SHR)作为注意缺陷多动障碍模型,将32只SHR按体质量随机分为SHR组、模型组、小儿黄龙颗粒低剂量组(1.8... 详细信息

目的构建儿童注意缺陷多动障碍阴虚阳亢证的病证结合动物模型,以促进治疗注意缺陷多动障碍的新药研发。方法采用幼龄自发性高血压大鼠(SHR)作为注意缺陷多动障碍模型,将32只SHR按体质量随机分为SHR组、模型组、小儿黄龙颗粒低剂量组(1.88 g/kg)、小儿黄龙颗粒高剂量组(3.75 g/kg)组,另设正常高血压(WKY)组、Wistar组,每组8只。模型组及小儿黄龙颗粒高、低剂量组大鼠每日皮下注射左旋甲状腺素钠(0.3μg/g),其余各组大鼠皮下注射生理盐水,连续14 d;从第11天开始,小儿黄龙颗粒高、低剂量组大鼠灌胃相应药物,其余各组灌胃等量生理盐水,连续21 d。观察各组大鼠的饮食量、饮水量、便量、尿量、心率、呼吸频率,以及舌象红色向量(R)、绿色向量(G)、蓝色向量(B)的具体值,上述指标作为阴虚阳亢证的评价指标;观察各组大鼠的自主活动程度、社交偏好程度、注意定势转移能力、易激惹程度,上述指标作为注意缺陷多动障碍行为学评价指标。结果与模型组比较,其余各组大鼠心率降低(P<0.05),SHR组及小儿黄龙颗粒高剂量组大鼠呼吸频率降低(P<0.05,P<0.01),WKY组及小儿黄龙颗粒高剂量组大鼠舌象G、B值下降(P<0.05)。自主活动测试显示,除中心区域停留时间外,模型组其余各指标均高于WKY组(P<0.05),中心区域路程高于SHR组(P<0.05);社交偏好实验显示,模型组与Wistar组比较在陌生鼠侧时间及陌生鼠侧的时间比均减少(P<0.01);注意定势转移测试显示,小儿黄龙颗粒低剂量组较模型组在外维度转换反向学习阶段错误率降低(P<0.05);激惹实验显示,模型组攻击行为总次数较WKY组增加(P<0.05)。结论采用幼龄SHR皮下注射左旋甲状腺素钠的方式,能够得到稳定、可靠的注意缺陷多动障碍阴虚阳亢证的病证结合动物模型。

关键词：注意缺陷多动障碍阴虚阳亢证病证结合动物模型左旋甲状腺素钠

重楼皂苷Ⅶ对肝癌的体内抗肿瘤作用及机制研究

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中药新药与临床药理 2022年第1期33卷 7-13页

作者：张超黄喜燕李祥李庆睿张栋李汶芮张翼张硕峰北京中医药大学北京100102 北京市门头沟区医院/首都医科大学门头沟教学医院北京102300 航天中心医院北京100049 长春中医药大学吉林长春130117 吉林农业大学吉林长春130117

目的观察重楼皂苷Ⅶ(PolyphyllinⅦ,PP7)对斑马鱼HepG2移植瘤和小鼠H;肝癌移植瘤的体内抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用CM-Di I荧光标记的人肝癌Hep G2细胞显微注入斑马鱼卵黄囊内和将小鼠H;肝癌细胞悬液接种到小鼠的右腋... 详细信息

目的观察重楼皂苷Ⅶ(PolyphyllinⅦ,PP7)对斑马鱼HepG2移植瘤和小鼠H;肝癌移植瘤的体内抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用CM-Di I荧光标记的人肝癌Hep G2细胞显微注入斑马鱼卵黄囊内和将小鼠H;肝癌细胞悬液接种到小鼠的右腋窝皮下,建立斑马鱼和小鼠肝癌移植瘤模型。采用不同浓度的PP7(0.06、0.13、0.25、0.50、0.75μmol·L;)处理斑马鱼胚胎;将荷瘤小鼠分为模型组、氟尿嘧啶(5-Fu,25 mg·kg^(-1))组及PP7低、中、高剂量组(0.5、1、2 mg·kg^(-1))。测定给药后斑马鱼移植瘤荧光强度、面积,以及小鼠瘤体质量、体积;统计荷瘤小鼠生命延长率;采用HE染色法对肿瘤组织进行病理形态学观察;采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测微血管密度(CD31)以及肿瘤细胞增殖(PCNA、Ki67)情况。结果与模型组比较,PP7不同浓度均能够显著降低斑马鱼移植瘤荧光强度和面积(P<0.01);PP7低、中、高剂量均能明显降低小鼠瘤体质量和体积(P<0.05,P<0.01),促进移植瘤细胞凋亡(P<0.05,P<0.01),下调肿瘤组织中CD31、PCNA、Ki67的表达(P<0.05,P<0.01),并且能明显延长荷瘤小鼠生存时间(P<0.05,P<0.01)。结论 PP7具有明显的体内抗肝癌作用,可能与其促进肿瘤细胞凋亡、降低微血管密度以及抑制肿瘤细胞增殖有关。

关键词：重楼皂苷Ⅶ 肝癌抗肿瘤细胞凋亡斑马鱼小鼠

天山雪莲对老年脂质代谢异常(气虚血瘀型)小鼠的改善作用及机制研究

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中草药 2022年第17期53卷 5433-5444页

作者：贺润铖黄芷棋冯倩倩宁一博孙建宁张硕峰董世芬北京中医药大学中药学院中药药理系北京102488

目的结合体内外实验研究天山雪莲Saussureae Involucratae Herba对老年脂质代谢异常(气虚血瘀型)小鼠的影响与作用机制。方法采用高脂喂食配合力竭游泳建立拟临床老年脂质代谢异常(气虚血瘀型)小鼠模型,设置对照组、模型组、罗格列酮... 详细信息

目的结合体内外实验研究天山雪莲Saussureae Involucratae Herba对老年脂质代谢异常(气虚血瘀型)小鼠的影响与作用机制。方法采用高脂喂食配合力竭游泳建立拟临床老年脂质代谢异常(气虚血瘀型)小鼠模型,设置对照组、模型组、罗格列酮组及天山雪莲低、中、高剂量(0.3、0.9、1.8 g/kg)组,各给药组连续给药5周。检测各组小鼠葡萄糖耐量、血脂等指标;HE染色检测脂肪组织形态;定量反转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,q RTPCR)法检测脂肪组织解偶联蛋白-1(uncoupling protein 1,Ucp1)、DNA聚合酶γ1(DNA polymerase γ1,Polg1)基因表达;免疫组化法检测脂肪组织UCP1的蛋白表达。体外实验进一步研究作用机制,将棕色脂肪细胞分为对照组、罗格列酮组及天山雪莲低、中、高剂量(0.025、0.05、0.1 mg/mL)组。q RT-PCR法检测棕色脂肪细胞中Ucp1、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(peroxisome proliferator activated receptor γ coacti-vator-1α,Pgc-1α)、核呼吸因子1(nuclear respiratory factor1,Nrf1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,Pparγ)、PR结构域蛋白16(positive regulatory domain-containing 16,Prdm16)、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,Tfam)、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,Glut 4)的基因表达;免疫荧光法和Mito Tracker染色检测棕色脂肪细胞Ucp1蛋白表达水平及线粒体数量。结果与对照组比较,模型小鼠表现对抗性减弱、舌质出现紫瘀等气虚血瘀的表征,空腹血糖、曲线下面积(area under curve,AUC)、腹股沟白色脂肪组织(inguinal white adipose tissue,i WAT)指数及总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量显著升高(P<0.01),棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)指数显著降低(P<0.01),BAT和iWAT白色化特征明显且Ucp1阳性细胞表达显著减少(P<0.01)。与模型组对比,天山雪莲给药组小鼠血脂指标、糖代谢指标、iWAT指数显著改善(P<0.01),BAT指数显著升高(P<0.05),iWAT和BAT形态棕色化特征明显,BAT中Polg1、Ucp1等基因表达水平显著升高(P<0.05、0.01),脂肪组织中Ucp1蛋白表达水平显著升高(P<0.05、0.01)。体外实验中,与对照组相比,天山雪莲干预后棕色脂肪细胞Prdm16、Pparγ、Glut 4、Tfam基因表达水平及线粒体数量和Ucp1蛋白表达显著升高(P<0.05、0.01)。结论天山雪莲通过调控脂肪可塑性,促进白色脂肪棕色化以及棕色脂肪活化,进而提高线粒体功能改善老年小鼠气虚血瘀型脂质代谢异常。

关键词：天山雪莲气虚血瘀证脂质代谢异常脂肪可塑性线粒体

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城市剩余污泥调理工艺及其机理研究

城市剩余污泥调理工艺及其机理研究

作者：张硕峰广东工业大学

学位级别：硕士

近年来,随着经济的快速发展,城市污水处理厂的处理量和处理率逐年提高,污水的处理过程中产生了大量的剩余活性污泥,城市剩余污泥的处理与处置已成为全球关注的环境问题。活性污泥的主要特性是含水率高（（通常＞99.5%））,处理的关键在... 详细信息

近年来,随着经济的快速发展,城市污水处理厂的处理量和处理率逐年提高,污水的处理过程中产生了大量的剩余活性污泥,城市剩余污泥的处理与处置已成为全球关注的环境问题。活性污泥的主要特性是含水率高（（通常＞99.5%））,处理的关键在于去除其中的水分,以缩小污泥的体积。本试验分别研究了高分子絮凝剂及其联用和表面活性剂及其与高分子絮凝剂联用对污泥脱水性能及其机理的影响,取得了较好的效果。实验研究内容和研究结论如下：（1）分别研究了阳离子聚丙烯酰胺（CPAM）、聚合氯化铝（PAC）及其二者联合调理工艺对污泥脱水性能及其机理的影响,结果表明,它们都有助于改善污泥的脱水性能、沉降速度和滤饼含水率,CPAM最佳配置浓度为0.1%,最佳投加量为80mg/L;PAC最佳配置浓度为4%,最佳投加量为4.5g/L;二者联和调理污泥效果更好,药剂用量较少,且药剂投加顺序对污泥比阻值的影响较大,先加PAC后加CPAM效果较好;上述三种调理方式调理后的滤饼含水率基本维持在80%左右,试验从污泥滤液中胞外聚合物（EPS）含量和调理后污泥粒径大小两个方面研究了PAC和CPAM对污泥调理的作用机理,研究表明,二者对EPS基本无影响,CPAM、PAC调理后污泥粒径不同程度变大,主要利用各自长分子链结构的吸附架桥和自身所带正电荷中和污泥表面负电荷来提高污泥的脱水性能。（2）分别研究了阳离子表面活性剂十四烷基三甲基溴化铵（TTAB）及其与高分子絮凝剂（CPAM、PAC）联合调理工艺对污泥脱水性能及其机理的影响,结果表明表面活性剂有助于改善污泥的脱水性能、沉降速度和滤饼含水率,表面活性剂投加量为0.28g/L时,比阻值为6.57×108s2/g,污泥滤饼含水率降为70.33%;试验从污泥滤液中胞外聚合物（EPS）含量和调理后污泥粒径大小两个方面研究了表面活性剂对污泥调理的机理,研究表明,经表面活性剂调理的污泥粒径变小,滤液中EPS含量增大,其主要是通过破坏污泥结构释放内部结合水和溶出EPS来改善污泥脱水性能。此外,表面活性剂与分别与CPAM、PAC联合调理工艺的结果表明,两种调理剂联合用于污泥调理中,能够发挥各自独特的作用,同时降低污泥含水率和提高污泥沉降性能。

关键词：污泥调理脱水联合作用机理

金丝桃素对脑嗅球损伤大鼠行为学及室管膜和室管膜下细胞增殖的影响

同方学位论文库评论

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中国药科大学学报 2004年第2期35卷 145-149页

作者：司银楚孙建宁谢春娥张硕峰北京中医药大学解剖学教研室北京100029 北京中医药大学药理学教研室北京100029 东方医院北京100029

目的 :研究金丝桃素治疗抑郁症的机理。方法 :采用损毁大鼠脑嗅球作为抑郁症动物模型 ,采用行为学和免疫组织化学方法 ,研究金丝桃素的作用机理。结果 :敞箱实验中 ,金丝桃素可显著降低嗅球损毁大鼠走格数和站立数 ,跳台实验中 ,金丝桃... 详细信息

目的 :研究金丝桃素治疗抑郁症的机理。方法 :采用损毁大鼠脑嗅球作为抑郁症动物模型 ,采用行为学和免疫组织化学方法 ,研究金丝桃素的作用机理。结果 :敞箱实验中 ,金丝桃素可显著降低嗅球损毁大鼠走格数和站立数 ,跳台实验中 ,金丝桃素可显著延长训练的潜伏期和缩短测试期的停留时间 ,免疫组织化学研究发现金丝桃素各剂量组大鼠侧脑室外侧和背外侧角的室管膜及室管膜下细胞明显增生 ,细胞由单层变成了多层 ,向胼胝体迁移 ,并强表达增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)。结论 :金丝桃素通过促进室管膜及室管膜下细胞增殖 ,迁移至嗅球 ,分化为新的神经元。

关键词：金丝桃素行为学室管膜及室管膜下细胞增殖抑郁症

全国中医药行业高等教育“十三五”创新教材药理实验教程

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